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PRÁCTICA # 1
Grupo Sanguíneo
Tipificación del Rh
Coombs Directo

Ana Sofía Sánchez Gómez 343400

Lizbeth Danelia González Caraveo 755192
Jassiel Hernández López 755613
Alejandra Salcedo González 641276
Paulina Asian Loya 749783
+
PRUEBAS A REALIZAR

1.
1. Determinación de grupo sanguíneo y Rh

2.
2. Prueba de Coombs Directa

• Objetivo de la Práctica:
• Entender el proceso mediante el cual es posible
el tipo de sangre que posee una persona, así
como realizar el proceso de tipificación del Rh.
• Aprender a realizar la prueba de Coombs Directo
y su interpretación.
+
PARA ENTENDER UN POCO…

 La prueba para determinar el grupo sanguíneo de una persona

es un método que nos indica la presencia o ausencia de
antígenos en los glóbulos rojos de dicha persona.
Generalmente se clasifica el tipo de sangre de acuerdo al
Sistema ABO, en donde existen cuatro categorías [A, B, AB, O].
El tipo de sangre va a depender de los tipos que se hayan
heredado de los padres.
+
PARA ENTENDER UN POCO…

 La prueba de Coombs Directo busca anticuerpos que se

adhieran al antigeno D sobre los eritrocitos causando así su
destrucción (hemólisis). El resultado de la prueba dependerá
de si existe aglutinación de eritrocitos debido a una reacción
antígeno-anticuerpo.
+
GRUPO SANGUÍNEO Y TIPIFICACIÓN DEL RH

 ¿Qué se necesita?
Sangre del paciente en tubo lila (EDTA)

Pipeta de Pasteur

Placa con círculos

3 aplicadores de madera

4 tubos de ensayo

Cinta adhesiva y plumón

Solución salina a temperatura ambiente (en Piseta)

Suero anti A, anti B, y anti Rh

• En un tubo de ensayo (ver prueba de Coombs) poner de 3-4 gotas con Pipeta de Pasteur
3
• Sangre que sobra debe ir al tubo lila
• Al mismo tubo se le agrega solución salina temperatura ambiente hasta la mitad y se reuvelve con la
pipeta de arriba abajo para formar solución Rojo Tomate (Pasos 1 y 2 en Prueba de Coombs)
• Poner una gota de sangre en tres círculos de la placa
2
• A un círculo se le agrega una gota suero Anti A, a otro suero Anti B y al último suero Anti Rh (se
mezcla con aplicador)
• Observar si existe aglutinación
1
• Aspirar sangre con Pipeta de Pasteur
¿Cómo se realiza? 
+ GRUPO SANGUÍNEO Y TIPIFICACIÓN DEL RH
• Centrifugar 1 minuto a 1500 rpm 6
• Observar si existe aglutinación y comparar con la placa
• A los tubos se le agrega una gota de suero anti A, anti B y anti Rh según los hayan 5
marcado.
• Con la solución rojo tomate agregas a 3 tubos de ensaye 2 gotas (utilizando la 4
pipeta de Pasteur)
• Recuerda que los tubos deben estar marcados: A, B, Rh y el número de equipo.
¿Cómo se realiza? 
GRUPO SANGUÍNEO Y TIPIFICACIÓN DEL RH
+ GRUPO SANGUÍNEO Y TIPIFICACIÓN DEL RH
+ GRUPO SANGUÍNEO Y TIPIFICACIÓN DEL RH
GRUPO SANGUÍNEO Y TIPIFICACIÓN DEL RH

 ¿Cómo interpretarla?

 Si los glóbulos rojos se aglutinan al mezclarse con:
 Suero anti A  Sangre tipo A



 Suero anti B  Sangre tipo B

 Suero anti A y Anti B  Sangre tipo AB

 Si los glóbulos rojos no se aglutinan:

 Sangre tipo O

 Si los glóbulos rojos se aglutinan al mezclarse con suero anti Rh
entonces la sangre es (+)
GRUPO SANGUÍNEO Y TIPIFICACIÓN DEL RH

• ¿Para qué nos sirve hacer las dos pruebas?

• Así podemos comparar resultados y ver qué método
es de nuestro mayor agrado
• ¿Cuáles son unos de los usos que tienen estas
pruebas?
• Nos ayudan a saber qué tipo de sangre se requiere
para una transfusión o un transplante
• En el caso de embarazadas nos ayudan para saber si
es necesario sensibilizar a la madre para evitar una
enfermedad hemolítica del recién nacido.
+
COOMBS DIRECTO

 La prueba de Coombs directa se utiliza para detectar anticuerpos

anti-D que se han unidos a los antigenos D fijado a la superficie de
los glóbulos rojos.

 La presencia de estos anticuerpos media la destruccion de los

glóbulos rojos afectados.

 Esta prueba algunas veces se lleva a cabo para diagnosticar la causa

de anemia o ictericia.

 La pureba de Coombs indirecto utliza suero en lugar de sangre.

+ COOMBS DIRECTO
 ¿Qué se necesita?

Sangre
Sangre en
en la
la que
que se
se realizará
realizará la
la prueba
prueba

Antiséptico,
Antiséptico, banda
banda elástica,
elástica, aguja,
aguja, algodón
algodón

Tubo
Tubo lila
lila (EDTA)
(EDTA)

Pipeta
Pipeta de
de Pasteur
Pasteur

Solución
Solución salina
salina temperatura
temperatura ambiente
ambiente (piseta)
(piseta) yy aa 37°
37°

2
2 tubos
tubos de
de ensaye
ensaye

Cinta
Cinta adhesiva,
adhesiva, plumón
plumón

Centrífuga
Centrífuga

Suero
Suero de
de Coombs
Coombs
 3
• Al otro tubo de ensaye (marcado como CD # equipo) agregar 4 gotas de solución rojo tomate
• Agregar a este mismo tubo Solución Salina Caliente (37°C)
• Al tubo de ensaye se le agrega solución salina a temperatura ambiente hasta la mitad (esto se realiza
con la Piseta) 2
• Revolver con Pipeta de arriba abajo para obtener la solución Rojo Tomate
• Ver paso 3 de la prueba de grupo sanguíneo. Solo realizar UNA solución rojo tomate para ambas
pruebas
• Aspirar sangre con Pipeta de Pasteur del tubo lila (EDTA)
• Colocar de 3-4 gotas con la misma pipeta en un tubo de ensaye (marcado con cinta y que diga 1
Solución Rojo Tomate)
• Ver paso 3 de la prueba de grupo sanguíneo. Solo realizar UNA solución rojo tomate para ambas
pruebas
realizarla?  ¿Cómo
+ COOMBS DIRECTO
 8
• Repetir paso 4 (centrifugar, decantar, y resuspender)
7
• Se realiza el tercer lavado agregando de nuevo solución salina caliente hasta la mitad del tubo
6
• Repetir el paso 4 (centrifugar, decantar y resuspender)
• Agregar solución salina caliente hasta la mitad del tubo de ensayo (Esto es el Segundo Lavado) 5
• Centrifugar 1 minuto a 1500 rpm
4
• Decantar
• Resuspender
¿Cómo realizarla? 
+ COOMBS DIRECTO
+ COOMBS DIRECTO

• Agregar una gota de suero de Cooms

9

• Centrifugar 1 minuto a 1500 rpm

10

• Observar si existe aglutinación o no

11 • Tratar de resuspender

NOTA:
NOTA: Si
Si la
la sangre
sangre nono es
es proporcionada,
proporcionada, eses importante
importante saber
saber cómo
cómo obtenerla.
obtenerla.

 Generalmente
Generalmente la la sangre
sangre se
se obtiene
obtiene de
de una
una vena
vena yy de
de la
la parte
parte interior
interior del
del codo
codo (en
(en niños
niños se
se realiza
realiza con
con una
una lanceta
lanceta en
en
manos
manos sobretodo)
sobretodo)
 Limpiar el
 Limpiar el sitio
sitio con
con un
un antiséptico
antiséptico
 Envolver
 Envolver el
el brazo
brazo con
con la
la banda
banda elástica
elástica
 Introducir
 Introducir aguja
aguja en
en la
la vena
vena yy recoger
recoger la
la sangre
sangre en
en el
el tubo
tubo lila
lila
 Cubrir
 Cubrir el
el sitio
sitio de
de punción.
punción.
+
COOMBS DIRECTO

 ¿Cómo interpretarla?
 Con esta prueba se busca detectar anticuerpos adheridos a la superficie de
los glóbulos rojos.
 Lo normal es que no se observe aglutinación (agrupación de células), es
decir que no existan anticuerpos para eritrocitos
 Resultados anormales pueden indicar:
 Anemia hemolítica autoinmunitaria
 Anemia hemolítica inducida por fármacos
 Eritoblastosis fetal
 Sífilis
 Lupus eritematoso sistémico
 Reacción a Transfusión
 Entre otras.
+
PRUEBA DE
COOMBS
INDIRECTA
+
OBJETIVO

s u e r o , d e
e s e n c i a e n n f i ja r
c ta r l a p r e s e p u e d a
De t e l a n t e s q u
r p o s c i r c u t o s.
a n t i c u e s e r i t ro c i
r a n a d e lo
a la m e m b
+
FUNDAMENTO
La
p ru e b a
Coomb de l a a
s indire ntiglobulina
detecc ct a ( i n o p ru e b a
ión e id vitro), de
ligadas e n t i fi c pe rm i t
inmun ac i ó n d e la
ol ó gi c a e globu
La
adición mente linas
d e a lo s h
mismo l reacti ematíe
s ocasi vo anti s.
onará s g l ob u l
u aglut ina a lo
inación s
.
+  Cuando la Prueba de Antiglobulina se
emplea para detectar anticuerpos en el
suero por sensibilización de los
eritrocitos in vitro, se conoce como
prueba indirecta de antiglobulinas o de
Coombs (PCI).

 La prueba indirecta de antiglobulina o

Coombs indirecto pone de manifiesto la
sensibilización de los hematíes que se ha
INTRODUCCIÓN producido in vitro con diversos fines:
pruebas cruzadas pretransfusionales,
investigación de anticuerpos
antieritrocitarios en un suero problema,
determinación del fenotipo eritrocitario
mediante sueros específicos.

 
Detecta los anticuerpos o los componentes del
complemento fijados in vitro a los hematíes
durante un tiempo de incubación en el
laboratorio.
El reactivo antiglobulina que se utiliza
básicamente en todas las aplicaciones indicadas
es un suero poliespecífico que contiene
principalmente anti-IgG y anti-componente
C3d del complemento.
 ¿QUÉ NECESITO?
MATERIAL EQUIPO
• 1.- TUBOS DE ENSAYE • 1.- CENTRIFUGA
• 2.- PIPETA PASTEUR • 2.- INCUBADORA
• 3.- GRADILLA

REACTIVO MUESTRA
• 1.- SUERO DE BIOLOGICA
COOMBS • 1.- SUERO SERICO
• 2.- SOLUCION
SALINA
 TERCER
• En un tubo debidamente rotulado añada dos gotas del suero y PASO
dos gotas de la suspensión y mezcle bien.
SEGUNDO
• Prepare una suspensión al 2-5 % con la mezcla de hematíes O y
en el caso del Coombs cruzado utilice una muestra de la sangre PASO
a transfundir para preparar la suspensión.
• Se tomara una muestra de sangre venosa al paciente y se PRIMER
centrifugara para obtener el paquete globular y el suero de la PASO
sangre.
¿CÓMO LO VOY A HACER?
• Lave tres veces con solución salina escurriendo totalmente QUINTO
el sobrenadante del último lavado. Añada dos gotas de suero PASO
de Coombs poli-específico a cada tubo. Centrifugue
1minuto a 1000 rpm.
• Prepare un tubo control rotulado C+ (control positivo) y CUARTO
añada en él dos gotas de la suspensión de hematíes O y dos PASO
de suero hemoclasificador anti-D y mezcle bien. Incube
ambos tubos en un Baño de María a 37ºC por 30 minutos.
 POSIB
L ES RE
S ULTA
DOS
 Prueba de Coombs (indirecta) Positiva: El
botón de glóbulos rojos no se disuelve.
 
 Prueba de Coombs (indirecta) Negativa:
El botón de glóbulos rojos se disuelve.