Espectroscopía

ultravioleta-visible (UV-
Vis): El espectro
electromagnético
Profesor: Golfer Muedas Taipe
golfermt95@hotmail.com
¿Cómo identificamos a
los compuestos
orgánicos?

¿Como se asigna una

estructura a un
compuesto orgánico?
 Métodos
clásicos
 No requieren de
instrumentos electrónicos
 No hay interacción con ondas
electromagnéticas (energía)
 Requieren mayor tiempo de análisis
 Emplean mayor cantidad de muestra
 Método gravimétrico
 Método volumétrico
 Punto de fusión, ebullición
 Indicie de refracción
 Pruebas se solubilidad
 Pruebas de grupo funcional
 Análisis por combustión
Métodos
espectroscópicos
 Emplean instrumentos electrónicos
 Interacción con ondas
 Son rápidas
electromagnéticas (energía)
 Tienen gran efectividad en
pequeñas cantidades (mg, g)
 Espectrometría de masas (EM)
 Espectroscopía de Resonancia
Magnética Nuclear (RMN)
 Espectroscopía de Infrarrojo (IR)
 Espectroscopía de Ultravioleta (UV)
Espectroscopía ≠ Espectrometría
El espectro electromagnético y las transiciones UV-Vis
 El espectro electromagnético
Recordando,
Dada la amplitud de líneas y frecuencias espectrales que contiene,
el espectro electromagnético, el espectro que resulta de la interacción
materia-energía radiante, puede ser muy complejo y abarcar amplias
zonas: Vis-Uv, IR, Microondas…etc.

Características de la radiación electromagnética

Energía fotón =

Cuando l incrementa, disminuye la energía y frecuencia del fotón

 Ondas Electromagnéticas
Son las producidas por la vibración de un campo eléctrico y
magnético. Viajan en el vacío a la velocidad de la luz (3 x 108 m/s)
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 Características de las ondas
electromagnéticas

: longitud de onda (distancia

entre dos puntos iguales de ondas
• • sucesivas o longitud de un ciclo)
A: amplitud (distancia vertical de la
línea media a la cresta de la onda o
al valle de la onda)
: frecuencia (número de ondas o
cantidad de ciclos que pasan por un
punto particular en un segundo)

c = ln λ en m  en Hz (s-1)
l es inversamente
Intensidad proporcional a
proporcional a n
Amplitud
c = 3,00 x 10 m/s
8
 ondas
1  3
minuto
A
• • • •

ondas
2  6
minuto

A
• • • • • • •
 Teoría Cuántica de Planck (1900)
• Propuso que la energía se libera o absorbe en cantidades
fijas pequeñas (cuanto) en forma de radiación
electromagnética
E=h
Frecuencia de la radiación electromagnética

Constante de Planck, h = 6,63 x 10–34 J s

Energía

• La energía de una onda electromagnética siempre se emite

en múltiplos enteros de h :
h, 2 h, 3 h, 4 h, ....nunca en valores fraccionarios, por
ejemplo 1,6 h
• La energía es directamente proporcional a la frecuencia.
 Efecto Fotoeléctrico y Fotones
• Albert Einstein (1905) hizo uso de la teoría cuántica de Planck para
explicar el efecto fotoeléctrico. La energía radiante que incide la
superficie metálica lisa, esta cuantizada y a cada paquete lo llamó
FOTÓN, el cual se comporta como una pequeña partícula.

Efotón = h 

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 Ejemplo
Un láser emite luz con una frecuencia de 4,69 x 1014 Hz.
a) Calcule la energía de un fotón de la radiación de este láser

E  hv  E  (6,63 1034 J .s )(4,69 1014 s 1 )

E  3,11 1019 J

b) El láser emite una pulsación de energía que contiene 5 x

1017 fotones de esta radiación. Calcule la energía total de
esa pulsación

  19
J
E fotón 19
 3,11  10 J  Etotal  
3,11 10
fotón 
 
 5 1017 fotones

Etotal  0,16 J
c) Si el láser emite 1,3 x 10-2 J de energía durante una
pulsación, ¿cuántos fotones emite durante esa pulsación?

 3,11  10 19
J
E fotón  3,11  10 J  Etotal  
19
 Nfotones 
 fotón 
 3 ,11  10 19
J
 1,3  10 J  
2
 N   N  4,2  1016 fotones
 fotón 

d) Si un fotón de energía emite 3,11 x 10-19 J, ¿cuánta energía

proporcionará un mol de tales fotones?

 3,11  10 19 J  6,02  10 23 fotones 

    1,87  105 J / mol
 fotón  mol 
 Contribución de Bohr a la Teoría
Atómica Moderna
Bohr describe al átomo de hidrógeno:

RH El electrón solo circula

En   2 en órbitas definidas
n por su nivel de energía

+
RH = cte. Ryberg
= 2,18x10–18J
n= 1 n = estado o nivel de energía
= 1, 2, 3, ...
n= 2
En = Energía del nivel n
n= 3
 Contribución…..

Energía n
Mientras menor sea el número
RH
En   2 de n:
n • El electrón circulará más
n=4
cerca del núcleo
n=3
• El átomo necesitará menos
energía para mantener esa
n=2
circulación
• El átomo será más estable

n=1 Cuando n=1, es decir en su

menor estado de energía, se le
llama estado basal o
fundamental.
 Contribución…..

Energía n
Cada vez que el electrón
RH
En   pase de un nivel a otro,
n2 emitirá o absorberá una
n=4 cantidad de energía:
fotón.
n=3

n=2
c
E fotón  h  h

n=1
 Contribución…..

n n
h

n=4 n=4
h
n=3 n=3

n=2 n=2

n=1 n=1

Luego de absorber un Luego de emitir un

fotón, el átomo se fotón, el átomo se
excita, y el electrón sube excita, y el electrón baja
de nivel (E positivo) de nivel (E negativa)
 Contribución…..

Estos saltos o cambios de estado se denominan transiciones

electrónicas.
La variación de energía será: E  E E n final ninicial

La energía del fotón intercambiado será:

c
E fotón  h  h  E  En final  Eninicial


 1 1 
E fotón  RH   2  2 
 n final n inicial 
Tipos de interacción de la radiación electromagnética

Absorción: la luz se absorbe por un átomo, ión o molécula que

adquiere un estado superior de energía.
Emisión: se libera energía de un átomo, ión o molécula que
adquiere un estado inferior de energía.
 Absorción de la radiación electromagnética

M + h n = M*

PROCESO POR EL CUAL UNA ESPECIE EN UN MEDIO TRANSPARENTE,

CAPTA SELECTIVAMENTE CIERTAS FRECUENCIAS DE LA RADIACIÓN

La ABSORCIÓN de luz por una sustancia tiene lugar cuando

la luz posee la energía precisa para provocar los cambios
precisos. Estos cambios (siempre discretos), pueden ser:

• Electrónicos (átomos y (o) moléculas)

• Vibracionales (sólo moléculas)
• Rotacionales ( sólo moléculas)
 Espectroscopia de absorción
Absorción Atómica Absorción Molecular

En la absorción por moléculas, entran

El espectro está constituido por
líneas, debido al gran nº de
transacciones posibles, que
incluyen la de los subniveles
electrónicos dentro de cada nivel
en juego transacciones de tipo vibracional,
rotacional entre subniveles electrónicos.
El resultado final se traduce en un espectro
de bandas.
 Transiciones energéticas

n
l22
E
energía

uv
visible
l
n11
E
n
l33
E
n
l44
E
IRM
IR
O

hc
E=hn =
estado estado estado l
electrónico vibracional rotacional
 Tipos de espectros

A A

l l
ESPECTRO DE LÍNEAS ESPECTRO CONTINUO
 Espectroscopía de absorción molecular
Transacciones Interacciones
electrónicas
de enlace

Espectro
Variando la longitud de onda dentro de cada zona del espectro electromagnético
se puede obtener el espectro de absorción de una sustancia en cada región.

Información cualitativa:
Se obtiene comparando el espectro de la muestra con el de un material
de referencia.
Esta información es mas relevante en espectroscopía IR y menor en el
caso de espectroscopía UV-Vis.
Interacción de la muestra con el analito

Espectro
Importante

La longitud de onda y la cantidad de luz que un compuesto

absorbe depende de las estructura y la concentración del
compuesto usado
Ejemplo
Espectro UV del Isopreno

=>
 LEY DE LAMBERT - BEER
potencia del
haz antes de
atravesar el
blanco
L mol-1 cm-1
typically in cm
absortividad
absorbancia concentración
total medida P0 molar de las
a la longitud
AT,l = log =e b c especies
P
de onda l absorbentes
camino
óptico mol L-1

P potencia del
= Transmitancia (T) A = -logT
P0 haz luego
de atravesar
la muestra
Absortividad molar (e)
Depende de:
-Característica del disolvente
-Especie absorbente
-Longitud de onda de trabajo
Propiedad aditiva de la absorbancia
AT, l = åA i
i,l
1,6

1,4

1,2

1,0

0,8
A

0,6

0,4

0,2

0,0
0 200 400 600 800
longitud de onda (nm)
¡esto obliga a seleccionar muy bien la ldel analito!
 Limitaciones de la Ley de Beer
REALES
 Variación de la absortividad debida al disolvente

 Concentración

APARENTES
 Instrumentales: radiación policromática

 Químicas: cambios químicos de las especies

absorbentes por interacción con el disolvente

 Desviación de la Ley de Beer
La mayor parte de las especies cumplen con la ley en un determinado
intervalo de concentraciones. Fuera de él, experimentan desviaciones
positivas o negativas. Esto se observa bien en el calibrado:

absorbancia
respuesta debida
a la autoabsorción
o a la luz escasa que
atraviesa la cubeta
respuesta del blanco,
interferencias o escasa
sensibilidad concentración

Es preciso asegurar
que se está trabajando
en el intervalo lineal!!
 Selección de la longitud de onda de trabajo

banda A banda C
A A
banda A
banda C banda B banda B

l concentración
Se debe de procurar medir las absorbancias en el entorno más próximo
a la l max. de absorción en el espectro (se minimizan errores) y se logran
máximas sensibilidades.
Midiendo lejos de ese punto de máxima absorción: pequeñas variaciones en la
medida se traducen en grandes errores.
Instrumentación para absorción UV-Vis
1. FUENTE DE ENERGÍA RADIANTE
2. SELECTOR DE LONGITUD DE ONDA
3. CUBETAS (Muestra)
4. DETECTOR
5. DISPOSITIVO DE LECTURA

4 5

2
1 3
 Fuentes de energía radiante
En absorción molecular la muestra debe ser irradiada con energía luminosa,
procedente de una fuente. Dependiendo de la zona de trabajo, las propiedades
de la fuente son distintas. Las fuentes deben ser uniformes en intensidad.

lámpara de deuterio (D)

fuente de tungsteno (W)
(UV)
(Vis)

Se usa en VIS e IR próximo Produce radiación en: 160- 380 nm

produce luz en intervalos de 350-2200 nm
Características:
CONTINUA
ESTABLE
INTENSA
intensidad lumínica

lámpara de
lámpara de Tungsteno
Deuterio

300 500 700 900 1100

longitud de onda (nm)
 Espectro visible y colores complementarios
visualización complementario
l (nm) color l (nm) color
380-420 violeta 520 - 550 amarillo-verde
420 - 440 azul-violeta 550 - 580 amarillo
440 - 470 azul 580 - 620 anaranjado
470 - 500 verde-azul 620 - 680 rojo
500 - 520 verde 680 - 780 púrpura
520 - 550 amarillo-verde 380 - 420 violeta
550 - 580 amarillo 420 - 440 azul-violeta
580 - 620 anaranjado 440 - 470 azul
620 - 680 rojo 470 - 500 verde-azul
680 - 780 púrpura 500 - 520 verde
Importante
UNA SOLUCIÓN SE OBSERVA DE COLOR AZUL CUANDO SE ILUMINA CON LUZ POLICROMÁTICA
PORQUE ABSORBE TODOS LOS COLORES EXCEPTO EL AZUL, QUE ES EL COLOR QUE DEJA PASAR
 Selector de longitud de onda
CARACTERÍSTICAS
LONGITUD DE ONDA DE MÁXIMA TRANSMISIÓN
PORCENTAJE DE TRANSMITANCIA EN EL MÁXIMO
ANCHO DE BANDA EFECTIVO

DISEÑOS
FILTROS DE CORTE
FILTROS DE ABSORCIÓN
FILTROS DE INTERFERENCIA
*MONOCROMADORES DE PRISMA
*MONOCROMADORES DE RED
Selección de longitud de onda con monocromadores

COMPONENTES BÁSICOS

1. RENDIJAS DE ENTRADA Y DE SALIDA

2. ESPEJO COLIMADOR
3. ELEMENTO DISPERSANTE (PRISMA O RED)
4. ESPEJO O LENTE FOCALIZADOR
5. VENTANAS DE ENTRADA Y SALIDA
 MONOCROMADORES

espejo espejo
colimador focalizador

con red de
difracción
l2

l1
rendija de rendija de
entrada elemento salida
dispersante

con prisma l2

l1
lente colimadora lente focalizadora
 Cubetas
Caras normales a la direscción del haz

IR

VIS-UV
Absorción mínima a la longitud de onda de trabajo
1. Vidrio ordinario o sílice (VIS)
2. Sílice fundida o cuarzo (UV)
3. NaCl, NaI, etc (IR)
 Detectores
Al final la luz seleccionada tiene que ser detectada y cuantificada.
*Esto se consigue con el empleo de detectores cuyo cometido es convertir
la respuesta del instrumento en una señal medible.
*Dependiendo del tipo de luz con el que se trabaja existen distintos tipos
de detectores:

variada

variable variado

Termistores
FOTOTUBO
 Requisitos de los detectores
DEBEN RESPONDER A UN AMPLIO RANGO DE
LONGITUDES DE ONDA

DEBEN DAR RESPUESTA RÁPIDA

DEBEN SER SENSIBLES A BAJOS NIVELES DE RADIACIÓN

DEBEN PRODUCIR SEÑAL ELÉCTRICA FACÍLMENTE

AMPLIFICABLE

DEBEN TENER BAJO NIVEL DE RUIDO

LA SEÑAL DEBE SER PROPORCIONAL A LA POTENCIA

RADIANTE
Ejemplo: Fototubos y fotomultiplicadores
Están basados en el efecto fotoeléctrico, en el que la incidencia de un
haz fotónico sobre un metal es capaz de generar energía eléctrica

FOTOTUBOS
FOTOMULTIPLICADORES

Cada dinodo se conecta a

una fuente externa de 90 V
generando en el colector
una avalancha de 106 a 107
electrones por cada fotón
incidente para el caso de un colector
tubo fotomultiplicador de 9
dinodos
 Procesador de señal y lectura
Todo espectrofotómetro ha de disponer de:
1. Sistema de amplificación propia que produzca una señal
medible
2. Un sistema procesador de la señal, que permita eliminar,
promediar datos, proporcionar salida de lectura, dirigir la
salida de la señal..etc
3. Una salida de la señal: digital, registrador..etc.
4. Tener cierta capacidad de procesar números /FTIR
 Tipos de Espectrofotómetros
Monohaz o haz simple
 Espectrofotómetro de doble haz

• Se puede desdoblar el haz a intervalos regulares con la ayuda de un choper

• La mitad de la luz atraviesa la muestra y la otra un “blanco”
• La absorbancia medida tiene en cuenta la razón de absorción
muestra/blanco
y permite corregir las desviaciones en el detector y en la fuente de salida
• La velocidad de cambio del chopper es una limitación a la l que puede
seleccionar el instrumento.
 Aplicaciones analíticas
La espectrofotometría de absorción molecular se puede aplicar tanto
al análisis cualititativo como cuantitativo.

Análisis cualitativo: los espectros de la muestra se han de comparar con

los correspondientes a estándares con el fin de identificar las bandas de
absorción coincidentes. Este tipo de análisis es mas frecuente en UV e IR
para identificar compuestos orgánicos y mas rara vez se utiliza el Vis.

Análisis cuantitativo: está basado en la ley de Beer-Lambert en el intervalo

de concentraciones de cumplimiento de la ley. Se establece la curva de
calibrado usando estándares y la absorbancia de la muestra de concentración
desconocida se remite a la curva ( a veces basta con un solo estándar).