Universidad Nacional de Trujillo

Facultad de Farmacia y Bioquímica- Dpto. Bioquímica

Cátedra de Bioquímica y Análisis clínicos
Asignatura Análisis Clínicos

Microbiología. Generalidades. Concepto de patógeno, infección y tipos.

Metodología para los cultivos comunes. Tipos de cultivos en microbiología
clínica: hemocultivo, urocultivo, coprocultivo, Secreciones urogenitales,
tracto respiratorio, piel y heridas. Antibiograma.

Docente:
Dra. Anabel González Siccha

Trujillo, 09 de Abril de 2019

 MICROBIOLOGÍA
• La microbiología es la ciencia encargada del estudio de los microorganismos,
seres vivos pequeños también conocidos como microbios.
• Son considerados microbios todos los seres vivos microscópicos, estos
pueden estar constituidos por: una sola célula, pequeños agregados celulares,
eucariotas (hongos y protistas); procariotas (bacterias o virus).
• Los hombres y algunos animales dependen de las bacterias que habitan en
sus intestinos para realizar la digestión y síntesis de algunas vitaminas como
son la K y algunas del complejo B.
• Los microorganismos también tienen aplicaciones industriales ya que se
utilizan en la síntesis de productos químicos como son acetona, ácidos
orgánicos, enzimas, alcohol y muchos medicamentos.
• Son microorganismos patógenos: bacterias, virus y hongos, dejando a otros
microorganismos para la parasitología y otras ramas de la biología.
 DISCIPLINAS RELACIONADAS
 Bacteriología: Estudio de los procariontes (bacterias, árqueas).
 Virología: Estudio de los virus.
 Micología: Estudio de los hongos.
 Parasitología: Estudio de los parásitos, sobre todo de tipo animal o
protozoario.
 Protistología: Estudio de los protistas.
 Micropaleontología: Estudio de los microfósiles.
 Palinología: Estudio del polen y las esporas.
 Ficología: También llamada Algología. Estudio de las algas y microalgas.
 Protozoología: Estudio de los protozoos.
 Definición:
• Un agente patógeno • Es la invasión de un ser vivo • Se denomina patogenidad

Infección

Patogenidad
Patógeno

(del griego pathos, por microorganismos como la capacidad potencial

enfermedad y genein, patógenos. Pero infección no de un microorganismo para
producir una enfermedad y
engendrar) es toda es sinónimo de enfermedad, virulencia como el grado de
entidad biológica( ya que no siempre produce patogenidad (medida como
incluye virus, daños en el huésped. el número de
bacterias, hongos y • Una enfermedad infecciosa microorganismos
protozoos) capaz de se dice que es contagiosa, necesarios para producir la
producir enfermedad o cuando, en sentido más enfermedad).
daño en la biología de estricto, puede ser • Por tanto, el resultado final
un huésped (humano, de una infección, depende:
transmitida de un organismo
animal, vegetal, etc.) • de la virulencia del
a otro por un contacto microorganismo parásito.
sensiblemente considerado directo, es decir,
predispuesto. • Del estado físico y anímico,
por el propiamente cutáneo, alimentación, etc... del
• El mecanismo de la por vía respiratoria o por huésped.
patogenicidad tiene intercambio de fluidos • Son bacterias, virus,
varios factores, algunos corporales (saliva, sangre o protozoos, hongos y
de los cuales son fluidos sexuales). priones
dependientes del
agente patógeno y
otros del huésped.

• conjunto de
microorganismos que se
Biota normal
Biota normal
establecen y crecen sobre
las superficies corporales
sin producir daño.
• La biota normal se localiza
principalmente en la piel,
cavidad oral y los tractos
respiratorio, intestinal y
genitourinario. En
condiciones normales,
estos microorganismos no
tienen efectos negativos y
compiten con otras
• bacterias que sí pueden
tener un efecto patógeno,
evitando así su
• proliferación.
Biota
• Debe haber un equilibrio
• En piel y la cavidad oral
entre la flora residente y
Biota patógena
proliferan bacterias gram
transitoria, si se sufre
positivas, levaduras y
alguna alteración en la
estafilococos
microbiota los
• En tracto intestinal son más microorganismos
comunes las bacterias gram
transitorios pueden
negativas, como E. coli. colonizar y por último
• En las mucosas genitales hay producir las temidas
bacterias y hongos enfermedades .
• Flora Normal (o microbiota), • Acné: propionibacterium
no produce enfermedad, se acnés
encuentran en la piel y
• Caries: Streptococcus
membranas mucosas de mutans en la placa dental.
personas normales sanas.
• Candida albicans puede
• Flora Residente que están originar infecciones
relativamente fijos según vaginales ante un
distintos factores. descenso ocasional del
• Flora Transitoria, la que está pH.
formada por microorganismos
patógenos hospedados por días
o más tiempo; ambas floras son
provenientes del ambiente.
 MEDIO DE CULTIVO
• Son medios esenciales para determinar la identidad, cantidad y
patogenicidad de un microorganismo.
• Es un método para la multiplicación de microorganismos, como: bacterias
en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el proceso deseado.
• Un cultivo es empleado como un método fundamental para el estudio de las
bacterias y otros microorganismos que causan enfermedades
• Secreción: es el proceso por el que una célula o un ser vivo vierte al exterior
sustancias de cualquier clase.
• Urocultivo
• Coprocultivo
• Hemocultivo
• Exudados
• Secreción de heridas
 Es la determinación de elementos UROCULTIVO
anormales, observación del sedimento
urinario y cultivos en medios selectivos y
diferenciales
RECOMENDACIONES
El paciente no debe haber recibido antibióticos por
lo menos cinco días antes del examen.
El recolector puede estar como máximo 30’
instalado, mas tiempo, la muestra se considera
contaminada.

METODO
Higiene de zona peri uretral y perineal
Descartar los primeros mililitros de orina
Recolectar chorro medio
Recipiente estéril

Lectura e Interpretación
•Para conocer el número de microorganismos en 1 ml de orina,
se cuentan las colonias y el resultado se multiplica x 100, si se
uso asa de 0,01 ml. (0,001ml x 1000).
•Si el # de colonias sobrepasa el # de 100 000 bacterias/ ml de
orina, al informar no interesa precisar el # exacto de bacterias,
sólo debe informarse” más de 100 000 bact/ml de orina
•En la orina infectada puede encontrarse:
•E. coli, P. aeruginosa, Enterococo, Citrobacter, Klebsiella
•Se acepta un recuento superior de 100,000 bacterias/ ml de
orina, indica infección de las vías urinarias.
 Es cultivo de materia fecal. Es un método COPROCULTIVO
de diagnóstico microbiológico que permite
identificar diferentes organismos causantes
de enfermedades gastrointestinales.
RECOMENDACIONES
No dejar las muestras expuestas al aire en
recipientes sin tapa. No dejar muestras para
examinarlas después de 2 a 3 horas.
No aceptar muestras mezcladas con orina.

METODO
La materia fecal para coprocultivo debe estar
libre de contaminantes como orina o papel
higiénico.
Examen directo al microscopio: PMN
Examen heces diluida

Lectura e Interpretación
• Se puede identificar: helmintos, huevos o larvas de
helmintos, protozoarios , quistes de flagelados y ciliados (
Giardia lamblia, Balantidium coli)
• En estado primario de la enfermedad (salmonella y
shiguella) se encuentran el altas cc en período agudo.
• En heces con moco: Giardia lamblia.
• Los coprocultivos se piden en toda diarrea
desinteriforme, máxime si cursa con respuesta
inflamatoria sistémica o si hay pus o sangre en las heces.
 HEMOCULTIVO
Es cultivo de sangre. Es un método de diagnóstico microbiológico que
permite identificar diferentes organismos causantes de enfermedades en la
sangre.
RECOMENDACIONES
- Sepsis o septicemia bacteriana
-Fiebre de origen desconocido
- Pacientes que ya tienen terapia antimicrobiana, continúan con fiebre y los
cultivos iniciales fueron negativos
METODO
Se extrae sangre del pliegue del codo en forma aséptica
Sembrar 5-10 ml de sangre ( mayor cantidad posible)
El medio de elección se calienta a 37ºC en una estufa de cultivo, y se flamea el tapón para
destruir los microorganismos contaminantes en la superficie.

Lectura e Interpretación
• Examinar el frasco diariamente durante la primera semana para detectar la aparición de turbidez
en el medio, hemólisis, signos de producción de gas o crecimiento de colonias directamente
encima de la sangre.
• Si los cultivos son negativos deben seguir en observación hasta por 21 días antes de informarse
como negativos.
• Los hemocultivos “visualmente positivos” (turbidez) deben teñirse por el método de Gram y
subcultivarse (resiembra)
HEMOCULTIVO
 Cultivo de secreciones
• El frotis faríngeo es un • La mayor parte de la
• El oído u órgano de la audición
importante test para microbiota transitoria

Secreción vaginal
Secreción Ótica
Tracto respiratorio

diagnosticar y tratar con y del equilibrio puede dividirse

proviene de fuentes
una gran precisión las en tres partes: oído externo,
exógenas, como el ano o
infecciones que causan los oído medio o caja timpánica y
la uretra.
dolores de garganta, oído interno o laberinto
además puede prevenir la • La microbiota residente
• El cultivo debe realizarse en
transmisión de estas consiste de manera
agar glucosado de Sabouraud,
enfermedades de una predominante de
persona a otra. con cloranfenicol o
Lactobacillus spp., con las
• Por ejemplo: gentamicina y sin
especies prevalentes L.
• Coco gram(+) cicloheximida (actidiona), pues
crispatus, L. jensenii, L.
Streptococcus beta- la mayoría de las levaduras y
iners, L. acidophilus y
hemolítico (S. pyogenes). mohos se inhiben en presencia
Lactobacillus gasseri,
(Agar sangre-azida) de este compuesto
microorganismos que se
• Neisseria gonorrhoeae, A. • El género Aspergillus, el más
haemolyticum, C. consideran, en general,
frecuente en otomicosis. como una línea
diphteriae y H. influenzae
(Epiglotitis (Agar • Puede infectar al oído: fundamental de defensa
Chapman) • Pseudomonas sp, contra patógenos
• Enterobacterias: Agar Mc • Staphylococcus aureus potenciales.
Conkey
• Proteus sp
• Levaduras.
•
 Cultivo de secreciones
• Este examen se utiliza • Es el cultivo de diferentes • Líquido cefalorraquídeo
para identificar (LCR).

Líquido cefalorraquídeo
Exudados
Secreción uretral

microorganismos en la secrecreciones como:

uretra que puedan estar • Exudado anal: gonococia • Se obtiene por punción
causando uretritis. La rectal, con medio tipo Stuart- lumbar.
uretra es el conducto que Amies. • Resultados anormales
drena la orina desde la • Un aumento en el conteo
vejiga. • Exudado balano-prepucial:
Candida spp., y de bacterias de leucocitos indica
• N. gonorrhoeae, infección, inflamación o
• C. trachomatis,
anaerobias y aerobias
• (Streptococcus agalactiae). sangrado dentro del
• U. urealyticum, líquido cefalorraquídeo.
• M. genitalium, • Exudado de la glándula de Algunas de las causas
• T. vaginalis, VHS Bartolino : N. gonorrhoeae, C. son:
• Cultivos, ejem: trachomatis, levaduras, etc
• Absceso ,Infección aguda,
• Neiseria (Agar Thayer- • Exudado de úlceras. Encefalitis, Hemorragia,
Martin), • Secreción prostática Esclerosis Múltiple,
• Levadura (Agar-glucosa • Semen etc.
Sabouraud, Agar selectivo Meningitis, ACV
para candida) hemorrágico, Tumor,
• Aneurisma cerebral,
Demencia, Neurosífilis,
Linfoma Meningitis
aséptica sifilítica,
Mielopatía sifilítica etc.
LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO Meningitis bacteriana
 ANTIBIOGRAMA
Definición:
• Es el procedimiento por el cual se determina el grado de resistencia de
una bacteria al antibiótico.
• Consiste en poner en contacto al germen que hemos cultivado con
distintos antibióticos para ver cual de ellos es el que mejor va con el
tratamiento (selección del mejor antibiótico).
• Se cultivan en “discos” los cuales son unos receptáculos circulares con
sustancias que favorecen el crecimiento de los microorganismos, pero
al mismo tiempo contienen cada uno de ellos, un antibiótico conocido.
• En resumen:
•Se hace un antibiograma para ver que microorganismo ha provocado
la enfermedad y como podremos vencerlo.
 ANTIBIOGRAMA
Método:
• Se distribuye sobre una
placa el microorganismo
previamente cultivado, en
forma uniforme y
abundante con una asa de
siembra.
• Colocar los discos sobre
este medio sólido con
pinzas estériles, dejando 2
cm entre cada uno de ellos.
• Llevar a la estufa e incubar a
37ºC durante 12 – 18
horas.
 ANTIBIOGRAMA
Lectura:
•Se observan las zonas de inhibición ( donde no crecen los
microorganismos) alrededor de los discos ( halo claro) que
deben ser medidas con una regla en mm, en la parte exterior y
reversa de la placa
•Una zona de inhibición indicará sensibilidad o resistencia del
antibiótico, según las medidas obtenidas en mm.
•Se utilizan discos para determinados microorganismos, según
sean muestras de: hemocultivo, urocultivo , coprocultivo y/ o
secreciones
Parasitología: Generalidades. Contaminación e Infección. Vías
de transmisión y métodos de identificación. Muestras. Pruebas
de laboratorio Interpretación
 PARASITOLOGÍA
• La parasitología es la ciencia encargada del estudio de los parásitos.
• Las enfermedades parasitarias constituyen un problema de salud pública por
su alta frecuencia en países en vías de desarrollo y por la presencia en países
desarrollados.
• Las parasitosis intestinales son infecciones intestinales que pueden
producirse por la ingestión de quistes de protozoos, huevos o larvas de
gusanos o por la penetración de larvas por vía transcutánea desde el suelo.
• Atendiendo al lugar ocupado en el cuerpo del hospedador, los Existen
distintos tipos de parásitos y en muchos grupos biológicos. Entre estos
están:
• los virus, que son parásitos obligados,
• las bacterias,
• los hongos,
 PARASITISMO
• Un organismo, el parásito, depende como mínimo de un gene o su producto
de la otra especie, definida como el huésped, para su sobrevida.
• Existe dependencia metabólica
• Huésped en general de mayor tamaño
• Parásitos en sentido amplio son los virus, bacterias, protozoarios, hongos,
helmintos y artrópodos
• Tradicionalmente la Parasitología se dedica al estudio de parásitos animales,
micro y macroscópicos: protozoarios, helmintos y artrópodos
Formas de Dependencia Metabólica
en los Parásitos
Dependencia Nutricional
-Los parásitos pueden utilizar los nutrientes del
huésped antes o después de la digestión
-Los tejidos del huésped
-Las secreciones del huésped
Enzimas digestivas
-Algunos parásitos helmintos como las tenias
carecen de tubo digestivo, por lo que sólo pueden
utilizar nutrientes pequeños que han sido
previamente degradados por el sistema digestivo
del huésped
Estímulos para el desarrollo del parásito
-Los parásitos reconocen estímulos del huéspedes
que “disparan” la entrada en su próxima fase de
desarrollo.
Algunos ejemplos: bilis, pCO2, T.
Control de la maduración
Algunas especies de parásitos dependen del huésped para
su proceso de maduración.
Sincronización de las fases reproductivas del huésped y el
parásito con control hormonal.
Ej: Leucocytozoon se multiplica durante la estación de cruza
del pato que coincide con la presencia del vector (mosca).
 Clasificación de los Parásitos

• Según localización en relación al cuerpo del huésped

• Según complejidad de los ciclos biológicos
• Según relación temporal del parasitismo
• Según obligatoriedad del parasitismo
• Según especificidad de huésped
 Tipos de Parásitos Según su
Localización
• Ectoparásitos: viven sobre la superficie del huésped: piel,
pelos, plumas, branquias. Ej: garrapatas, piojos.

• Endoparásitos: viven en el interior del huésped. Son la

gran mayoría. Ocupan tubo digestivo, sistema vascular,
respiratorio, etc.
 Tipos de Parásitos Según sus Ciclos
Biológicos
• Monoxenos: requieren una sola especie para completar
su ciclo. Pueden parasitar varias especies.

• Heteroxenos: requieren de por lo menos 2 especies

diferentes de huéspedes para completar el ciclo
Parásito Monoxeno
Ascaris lumbricoides
Parásito Heteroxeno
Fasciola hepatica
Clasificación de los Hospederos
 Huésped Definitivo: Aloja las formas adultas y/o
sexuadas.

 Huésped Intermediario: Aloja formas larvarias y/o

asexuadas.
 Según del cuerpo del hospedador, existen distintos tipos de
parásitos y en muchos grupos biológicos. Entre estos están:
 los virus, que son parásitos obligados,
 las bacterias,
 los hongos,
Clasificación de los Parásitos Según
Relación Temporal con el Parasitismo
Parásitos temporarios: se acercan a chupar
sangre. Serían depredadores.

Parásitos completos: se alojan en el

huésped y se nutren a expensas de él.
PARÁSITOS
PROTOZOOS PROTOZOOS ARTROPODOS DE HELMINTOS
EXAMEN DE
SANGUINEOS Y INTESTINALES Y IMPORTANCIA INTESTINALES. Y
SANGRE
TISULARES UROGENITALES MÉDICA. TISULARES

Amebas y Parásitos que se

Malaria. Blastocystis Insectos. Nematodos. de detectan en
hominis. sangre son :

Hemoflagelados. Flagelados. Arácnidos. Cestodos. -La malaria.

Toxoplasma
Ciliados. Trematodos. -Tripanosomas
gondii.

Amebas
oportunistas de Coccidios. -Leismaniasis.
vida libre.

Microsporidios.
 PARÁSITOS
 Las técnicas más usadas son : La preparación de la muestra, la
tinción y las extensiones gruesa y fina de la sangre.
 La sangre puede obtenerse por punción del dedo, el lóbulo de la
oreja o de la vena.
 Tinciones
 Tinción de Giemsa , la hemoglobina de los glóbulos rojos se tiñe
de color rojo pálido, y la cromatina de las células y del parasito se
tiñen de color intenso.
 La tinción de Wright puede usarse para frotis finos.
 Referencias Bibliográficas
 PRIETO VALTUEÑA J.M.,YUSTE ARA J.R. (2015). Balcells A.: La Clínica
y el Laboratorio. Interpretación de análisis y Pruebas funcionales. Cuadros
Biológicos de las Enfermedades. 22ª Ed. Editorial Elsevier España.
 RUIZ REYES G. (2017). Fundamentos De Interpretación Clínica De Los
Exámenes De Laboratorio. 3ª Edición.. Editorial Médica Panamericana.
España.
 TIERNEY L., SAINT S., WHOOLEY M. (2013). Manual De Diagnóstico
Clínico Y De Laboratorio. 4ª Edición. Editorial Mc Graw Hill Lange. México.
 VIVES, J AGUILAR, J. (2014). Manual de Técnicas de Laboratorio en
hematología. 4ª Edición. Editorial Elsevier. España
 ORDOÑEZ SMITH. (2014). Guías prácticas para los laboratorios de
bacteriología. Edición 1ª. Editorial Panamericana. España.
 .
Muchas Gracias