ESTUDIANTE:

 Huamán Chávez Albert

DOCENTE:
Dr. Gilberto Gonzales

CICLO: “III” GRUPO: “A”

INTRODUCCION:
Los trabajos de Crick y Watson culminaron en 1953 con la presentación
de la primera evidencia real de que se avizoraba una nueva era en el
desarrollo de la biología como hecho a escala mundial.
Desde entonces hasta nuestros días, se han sumado indiscutibles
resultados que evidencian esta tercera revolución científica de la
humanidad.
Clonación del ADN

 La clonación de ADN es el proceso de hacer múltiples copias idénticas de un

fragmento particular de ADN. En un procedimiento típico de clonación de ADN,
el gen u otro fragmento de ADN de interés
 Se inserta primero en un fragmento circular de ADN llamado plásmido.
 La inserción se realiza con enzimas que "cortan y pegan" ADN y se obtiene
una molécula de ADN recombinante
 El plásmido y el fragmento de gen se unen para producir un plásmido que
contenga el gen.
 Este plásmido que contiene el gen es un ejemplo de ADN recombinante, una
molécula de ADN ensamblada a partir de ADN de múltiples fuentes.
 A continuación, se introduce el plásmido recombinante en bacterias. Se
seleccionan las bacterias que contengan el plásmido y se cultivan. Al
reproducirse, estas replican el plásmido y lo pasan a su descendencia.
Los pasos de la clonación de ADN
 Abrir el plásmido y "pegar" el gen dentro. Este proceso depende de enzimas de
restricción (que cortan el ADN) y de ADN ligasa (que une el ADN).
 Insertar el plásmido en las bacterias. Se usa selección con antibióticos para
identificar las bacterias que incorporaron el plásmido.
 Cultivar bacterias portadoras de plásmido en gran cantidad y usarlas como
"fábricas" para producir la proteína. Recolectar la proteína de las bacterias y
purificarla.
1. Cortar y pegar el ADN
 Una enzima de la restricción es una enzima que reconoce una secuencia
blanco específica y corta el ADN en dos en ese lugar o en un sitio cercano. Al
cortar, muchas enzimas de restricción producen extremos de cadena sencilla
cortos que sobresalen.
 Si dos moléculas tienen extremos sobresalientes que se empatan, pueden
complementar sus bases y unirse.
 Nuestro objetivo al clonar es insertar un gen blanco (el de la insulina humana, por
ejemplo) en un plásmido.
El plásmido, que solo tiene un sitio de corte.
El fragmento del gen blanco, que tiene un sitio de corte cerca de cada extremo.
Empezamos con un plásmido bacteriano circular y un gen blanco. En ambos extremos
del gen blanco hay sitios de restricción, secuencias de ADN reconocidas por una enzima
de restricción particular.
 El plásmido y el gen blanco (por separado) se digieren con la enzima de restricción.
2. Transformación y selección bacteriana
 Mediante el proceso llamado transformación pueden introducirse plásmidos y
otros tipos de ADN en bacterias, como la inofensiva E. coli que se usa en los
laboratorios. Durante la transformación, células bacterianas preparadas
especialmente se someten a un choque (como alta temperatura) que las anima
a incorporar ADN extraño.
 El ADN producido en la ligación (que puede ser una mezcla de plásmidos deseados,
plásmidos de productos secundarios y fragmentos de ADN lineal) se agrega a las
bacterias.
 Típicamente, los plásmidos contienen un gen de resistencia a antibióticos que
permite a las bacterias sobrevivir en presencia de un antibiótico específico. Así, las
bacterias que incorporan el plásmido pueden seleccionarse en placas de medio de
cultivo que contenga el antibiótico.
 3. Producción de proteínas

 Una vez que hemos encontrado una colonia de bacterias con

el plásmido adecuado, podemos hacer crecer un gran cultivo
de bacterias que contengan el plásmido. Luego le damos a
las bacterias una señal química que les ordena producir la
proteína blanco.
 Las bacterias sirven como "fábricas" miniatura que producen
grandes cantidades de proteína.
 Una vez que se ha producido la proteína, las células
bacterianas pueden romperse para liberarla. Hay muchas
otras proteínas y macromoléculas flotando en las bacterias
además de la proteína blanco
Usos de la clonación de ADN
 Productos biofarmacéuticos:La clonación de ADN puede utilizarse para
producir proteínas humanas con aplicaciones biomédicas, como la insulina
mencionada anteriormente
 Terapia génica: La terapia génica intenta proporcionar una copia normal
del gen a las células del cuerpo del paciente
 Análisis genético: Los biólogos suelen usar la clonación de ADN para
crear versiones recombinantes artificiales de genes que les ayudan a
entender cómo funcionan los genes normales de un organismo.
ASPECTO ETICO
 Dolly a primera vista, parece ser una oveja común y corriente. Sin embargo,
su origen a despertado un debate tanto en lo científico, político como en lo
ético, sobre la base que está práctica científica pone en juego la dignidad de
la persona humana.
 La duplicación de seres humanos es éticamente criticada debido a que no se
respeta el sentido de la sexualidad humana y de una gran característica que
nos diferencia de los demás seres: que somos únicos e irrepetibles.
 En el ámbito genético, las especies evolucionan en forma constante y
permanente, de manera que las generaciones sucesivas aprovechan las
variaciones pretéritas, adaptándolas a sus nuevas necesidades, para luego
trasmitirlas genéticamente a la generación siguiente y sucesivamente.
 En la clonación de seres humanos se prescinde de gametos, es decir,
provenientes de cada una de las células masculinas y femeninas cuya unión
durante la fecundación da origen al huevo o a una nueva vida.