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Northern Blot
Western Blot
Dot Blot
Southern Blot
Es esencialmente idntica al
mtodo de southern blot,
salvo que las molculas de
cido nucleico de la muestra,
en este caso son de ARN.
Procedimiento Blots
Procedimiento
1. Extraccin de ADN
2. Digestin enzimtica del ADN
3. Electroforesis en gel de agarosa en ADN, y en gel de
acrilamina para ARN en condiciones
desnaturalizantes en presencia de formaldehdo
Procedimiento
El siguiente paso es la transferencia del ADN a una
membrana de nylon o nitrocelulosa para obtener
una rplica exacta del patrn de bandas de ADN
que hay en el gel.
Procedimiento
La hibridacin se realiza incubando la membrana
con diferentes reactivos en un tubo de hibridacin,
entre ellos la sonda o sondas marcadas
especficamente y diluidas en una solucin de
hibridacin adecuada.
Procedimiento
Southern Blot
Deteccin de reordenamiento de los genes que
codifican para las cadenas ligeras y pesadas de las
inmunoglobulinas, as como tambin la familia de
receptores de clulas T.
Northern Blot
Amplificacin de expresin gentica
La variacin en el tamao de un gen puede adems
indicarnos deleciones o errores en el proceso de
transcripcin.
Alternando la sonda podemos conocer la secuencia e
incluso determinar que regin ha sido delecionada.
Western Blots
Puede usarse para determinar en qu tejidos, o
bajo cules condiciones fisiolgicas se expresa un
gen para producir una protena.
Detecta a unin antgeno-anticuerpo por
actividad enzimtica, fluorescencia.
Referencias