Ciclo de Krebs

Importancia Fisiolgica
 Mitocondrias: organelos
Organelos del tamao de una
bacteria (1x2um) especia-
lizados en mecanismos oxida- Membrana
tivos y en sntesis de ATP. interna
Una clula eucariota puede Matriz
Membrana
contener hasta 2000 mito- externa
condrias, aproximadamente
25% de su volumen.
Constan de una membrana
externa, una interna y un
espacio intermembranoso.
La membrana interna tiene el
ms alto contenido proteico La membrana externa se puede separar y
que ninguna otra membrana asislar mediante la digitonina, shock
en la clula. osmtico o radiacin ultrasnica seguida
de centrifugacin en gradiente de
densidad.
 Mitocondrias:membranas
Enzimas del
Diferentes tejidos tienen diferen-
te nmero y cantidad de crestas, ATP Metabolismo de
de acuerdo a la oxidacin. sintetasa lpidos

La membrana externa tiene unas

protenas integrales llamadas po-
rinas ,formando poros para el in-
greso de molculas menores de Cadena
10 000 de peso molecular. respiatoria
La membrana interna es imper- Enzimas del Nucletido
meable a la mayora de mol-
Metabolismo quinasas
culas salvo agua, O2 o CO2.
oxidativo
La membrana interna tiene 75% Poro
de protenas como protenas
transportadoras, cadena respi-
ratoria, ATP sintetasa.
Transportador
 Funciones metablicas de la
mitocondria
Piruvato Acil CoA
Urea

Acil CoA
HCO3+
3 CO2 Piruvato NH3
B-oxidacin
Acetil CoA Ciclo de la Urea
3 CO2 A
A
Krebs P P P
H+ P P P

Ca2+ A
NAD P + P P
FAD 2H2O H
+
4e(-)
Ca2+

nH+ nH+ nH+

O2
 Partes de la mitocondria
Membrana externa: Porosa y permeable a iones y pequeas molculas.
Membrana interna: altamente impermeable. Las molculas requieren de
transportadores proteicos. Gracias a sus pliegues aumenta su superficie.
En la membrana hay transportadores proteicos, deshidrogenasas FAD
dependientes, y todas las enzimas de la Fosforilacin Oxidativa.
Espacio intermembranoso contiene dos enzimas fundamentales : la
adenilatoquinasa y la nuclesido difosfato quinasa.

2 ADP ATP AMP

adenilatoquinasa
XTP ADP XDP ATP
muclesidodifosfatoquinasa

Matriz: contiene muchas enzimas, como las del Ciclo de Krebs, la pirvico
deshidrogenasa, la glutamato deshidrogenasa, y las de la b oxidacin.
Ciclo de Krebs y los macronutrientes
CARBOHIDRATOS PROTENAS GRASAS

GLUCOSA AMINOCIDOS CIDOS GRASOS

Acetil CoA

ATP Ciclo CO2

de
Krebs
Ciclo de Krebs:energa
El Ciclo de Krebs es un conjunto de reacciones qumicas
que se efecta en las mitocondrias, para catabolizar los
residuos de Acetil CoA producidos en el metabolismo de
carbohidratos y grasas.
Este Ciclo libera energa que se guarda como ATP y
molculas de CO2 que se eliminan con la respiracin.
Esas funciones se llevan a cabo en todos los tejidos pero
con ms importancia en el hgado.
Es responsable de 2/3 de la produccin calrica del
organismo.
Ciclo de Krebs: principio general

Acetil CoA(C2) CoA

Oxalacetato(C4) Citrato(C6)

CO2 CO2
Ciclo de Krebs: valor calrico
Durante la oxidacin del Acetil CoA se forman
equivalentes reductores como H+ o electrones en la
matriz mitocondrial adyacente a la membrana interna.
As, la transferencia a la cadena respiratoria que est en
la membrana mitocondrial interna se realiza con
facilidad.
Todo el proceso es
aerbico, luego sin
oxgeno se inhibe
total o parcialmente.
 Piruvato
Partes del
AcetilCoA Ciclo de Krebs
A partir de un acetil
Oxalacetato Citrato CoA se producen dos
molculas de CO2.
Malato Isocitrato Se generan cuatro
pares de hidrgenos
Alfa cetoglutarato
que son captados por
Fumarato
3 NAD y 1 FAD.
Adems se produce
Succinato
Succinato CoA una fosforilacin a
nivel del sustrato.
GTP GDO +P
 H
H2O CoA-SH
H-C-CO~SCoA H
H + H--C--COO-
O=C--COO- HO--C--COO-
H--C--COO- H--C--COO-
NADH+H+
H H
Oxalacetato Citrato
NAD
COO- H

HO-C--H H--C--COO-
H--C--H H--C--COO-

Malato COO- OH--C--COO-

Isocitrato H
H2 Fumarasa
O COO-
Ciclo de Krebs NAD+
C--H CO2
H--C Fumarato
H
COO- NADH+H+
H--C--COO-
FADH2 COO- H--C--H
H cetoglutarato
H--C--H O=C--COO-
FAD
H--C--H H--C--COO-
H--C--H NAD+
COO- CO2
Succinato O=C~SCoA
NADH+H+
GTP Succinil CoA
GDP+Pi
 Ciclo de Krebs: etapas 1 y 2
1.- Condensacin inicial del Acetil CoA con el Oxalacetato con
liberacin de energa del enlace tioester por accin de la citrato
sintetasa.

AcetilCoA Oxalacetato H 2O Citrato CoA

2.- Conversin de citrato en isocitrato. Se forma transito-
riamente cis aconitato. La realiza la enzima aconitasa.

Citrato Cis aconitato Isocitrato

H2O H2O
 Ciclo de Krebs: etapas 3 y 4
3.- Dehidrogenacin del isocitrato, formando oxalsuccinato. Existen tres
isoenzimas: la NAD especfica de las mitocondrias, y las NADP espec-
ficas de mitocondrias y citosol. La NAD especfica se acopla a la cadena
respiratoria.
Isocitrato NAD oxalsuccinato cetoglutarato CO2 NADH H
unido a la enzima

Esta reaccin requiere Mg++ y genera 3ATP por Mol de acetilo

4.- El alfa ceto glutarato pasa por una decarboxilacin oxidativa seme-
jante a la del piruvato. Requiere los mismos cofactores y vitaminas tales
como, difosfato de tiamina, c.lipoico, NAD,FAD y CoA. La enzima es
la cetoglutarato dehidrogenasa y forma Succinil CoA.

cetoglutarato NAD CoA SuccinilCo A CO2 NADH H

Esta reaccin genera 3ATP por Mol de acetilo.

Ciclo de Krebs: etapas 5 y 6
5.- La succinil CoA se convierte en succinato por accin de una
tioquinasa. En esta reaccin la energa liberada por la unin con la
CoA permite la sntesis de una mol de ATP. A nivel del sustrato.

succinilCo A Pi ADP succinato ATP CoA

6.- El succinato es metabolizado por una deshidrogenasa, unida a la

superficie interna de la membrana mitocondrial. En la nica
deshidrogenasa que transfiere hidrgeno al FAD sin pasar por el NAD.
Genera fumarato.

succinato FAD Fumarato FADH 2

Esta reaccin slo genera 2 ATP en la cadena respiratoria.

 Ciclo de Krebs: etapas 7 y 8

7.- La fumarasa cataliza la incorporacin de una mol de agua para

formar malato.Se elimina la doble ligadura anterior.

fumarato H 2O malato
8.- El malato es convertido a oxalacetato por una deshidrogenasa en
presencia de NAD.

malato NAD oxalacetato NADH H

Esta reaccin genera 3ATP por mol de acetilo, en la cadena respi-
ratoria y proporciona el oxalacetato necesario para reiniciar el ciclo
con una molcula ms de acetil CoA.
Ciclo de Krebs : balance calrico

Se producen tres molculas de

NADH y una de FADH2 por Generacin de ATP por Ciclo
cada molcula de acetil CoA.
En la membrana mitocondrial Enzim a ATP
interna se recibe estos equiva-
lentes reductores por la cadena Deshidrogenasa isoct rica 3
respiratoria.
Deshidrogenasa del cet oglut arat o 3
Cada paso por la cadena genera
3 ATP a partir del NAD pero a Succinat o t ioquinasa 1
partir de FAD slo 2.
Un enlace de alta energa se Deshidrogenasa del succinat o 2
genera a nivel del sustrato.
Malat o deshidrogenasa 3
En total se forman 12 ATP por
ciclo de Krebs. Tot al 12
Vitaminas en el Ciclo de Krebs
Riboflavina como FAD : cetoglutarato
deshidrogenasa y succinato deshidrogenasa.
Niacina como NAD: isocitrato cetoglutarato
deshidrogenasa y malato deshidrogenasa
hidrogenasa.
Tiamina como difosfato de tiamina: para de-
carboxilacin y cetoglutarato deshidrogenasa.
cido pantotnico como Coenzima A.
Control del ciclo de Krebs
Principal funcin del ciclo de Krebs : produccin de ATP.
Una dieta promedio genera 2000 a 3000 kcal por da.
Si ello provee un 50% de generacin de ATP, se debe pro-
ducir aproximadamente 120 moles de ATP o 65 kg del
mismo.
Como el organismo slo tiene 3 a 4 g de nucletidos (ATP
ADP,AMP ) cada molcula debe ser refosforilada miles
de veces al da.
Si una clula no usa el ATP no habr ADP disponible,
luego el NADH no podr ser reoxidado y la relacin
NADH/NAD se elevar y esto detendr al ciclo de Krebs.
Accin de la relacin NADH/NAD
sobre el ciclo de Krebs
El incremento de NADH inhibe a la:
cetoglutarato deshidogenasa
citrato sintetasa
isocitrato sintetasa
piruvato deshidrogenasa.
Estas enzimas tambin se inhiben por el
producto.
Aprovechamiento de los NADH en
la cadena respiratoria
El NADH producido en el citosol por efecto de la gliclisis
(gliceradehido 3P deshidrogenasa) no puede atravesar la
membrana mitocondrial.
En condiciones anaerbicas se aprovecha en la transforma-
cin de piruvato a lactato.
En condiciones aerbicas se aprovecha por la cadena
respiratoria.
El ingreso a la mitocondria est regido por un mecanismo
llamado de lanzadera de equivalentes reductores.
 Lanzadera del glicerofosfato

NAD Glicerol 3P Glicerol 3P FAD

Glicerol 3P Glicerol 3P
deshidrogenasa deshidrogenasa

FADH
NADH Dihidroxiacetona P Dihidroxiacetona P
Lanzadera del malato (1)
El proceso de transaminacin en el citosol genera
gran cantidad de oxalacetato que se transforma en
una va de ingreso para ms NADH.
Sin embargo la membrana mitocondrial es imper-
meable al oxalacetato por lo que el transporte lo
hace bajo la forma de malato. Es este el que lleva
los equivalentes reductores al interior.
Dos transaminasas transforman al oxalacetato en
cetoglutarato para permitir su paso de membrana.
Lanzadera del malato (2)
NAD Malato Malato NAD

Malato deshidrogenasa Malato deshidrogenasa

oxalacetato oxalacetato NADH

NADH
Transaminasa Transaminasa

Alfa KG Alfa KG

Glutamato Asprtico Asprtico Glutamato

H H
Metabolismo del Piruvato
 Metabolismo del piruvato

El piruvato ocupa una posicin central y fundamental entre los me-

tabolismos de carbohidratos, grasas y protenas, a travs de su vin-
culacin con lactato, alanina, acetil CoA y oxalacetato.
Glucosa Aminocidos

Lactato PIRUVATO Alanina

Acetil CoA Oxalacetato

CO2+H2O Ac.grasos Acetona Krebs Gluconeognesis

 Piruvato deshidrogenasa
La piruvato deshidrogenasa une la Gliclisis con el Ciclo
de Krebs, mediante el procedimiento de Decarboxilacin
Oxidativa, en el cual el grupo carboxilo del piruvato es
liberado como CO2 y los dos carbonos remanentes forman
acetil CoA.

3 PDH
CHLa CO COOH
es un complejo
CoA SHmultienzimtico
NAD CH 3 CO S CoA
formado por CO NADH yH
tres2 enzimas
cinco coenzimas.
De las coenzimas, dos de ellas CoA y NAD (dinucleotido de
nicotinamida adenina), se asocian al sustrato, mientras que las otras
TPP (pirofosfato de tiamina) , c.lipoico y FAD(dinucleotido flavina
adenina) se asocian al complejo.
El complejo tiene adems una quinasa y una fosfatasa que activan
y desactivan a la PDH.
 Complejo PDH

La Decarboxilacin es iniciada por E1 en presencia de

TPP, luego E2 en presencia de c.lipoico oxida al
compuesto y lo prepara para unirse a la CoA. El
c.lipoico es reoxidado por el FAD y E3
 Enzimas y coenzimas de la
Decarboxilacin Oxidativa.
Enzimas Coenzimas Participacin
E1-Piruvato dehidrogenasa TPP Decarboxilacin
E2-dihidrolipoil transacetilasa Ac.lipoico Oxidacin-Transferencia de acilo
E3-dihidrolipoil deshidrogenasa CoA-SH Regeneracin de cido lipoico
Piruvato DH quinasa FAD Fosforilacin e inactivacin de E1
Piruvato DH fosfatasa NAD Defosforilacin y activacin de E1

AcetilCoA-NADH-ATP
(+)
quinasa
Regulacin de la
actividad de la PDH PDH PDH P
Fosfatasa
Insulina(+)
 Otros destinos del piruvato
Transformacin de piruvato en lactato, con reoxidacin
del NADH a NAD (LDH).

CH 3 CO COOH NADH H CH 3 CHOH COOH NAD

Transaminacin del piruvato a alanina (ALT).

Piruvato Glutamato alanina cetoglutarato

Carboxilacin de piruvato a oxalacetato, paso inicial de

la neoglucognesis.
 Va de las Pentosas
Metabolismo de Fructosa
Metabolismo de Galactosa
Control de la Glicemia
Gluconeognesis
Va de la pentosa fosfato

No es una va esencialmente energtica.

Tiene dos funciones importantes: generar NADPH para la
sntesis de cidos grasos y de esteroles. Adems provee
ribosa para sntesis de nucletidos.
Genera tres molculas de CO2 y 3 pentosas las cuales pro-
ducen dos hexosas y una triosa. Dos triosas pueden regene-
rar una hexosa que se metaboliza por la va glicoltica.
Es una va citoslica , usa NADP como receptor de H y
tiene dos fases: oxidativa y no oxidativa
 Va de pentosas : metabolismo

deshidrog deshidrog 3CO2

3Glucosa 6P 3 6P-Gluconato

NADP NADPH+H NADP NADPH+H +

3-Epimerasa Cetoisomerasa 3 Ribulosa 5P

Ribosa 5P
Xilulosa 5P
Transcetolasas - TPP Transcetolasas
Gliceraldehido3P Sedoheptulosa.7P
Transaldolasa
Fructosa 6P Glicerald. 3P + Glucosa 6P
Eritrosa 4P

Glucosa 6P
Va de las pentosas: caractersticas

La va es activa en hgado, tejido adiposo, suprarrenal, tiroides,

eritrocitos, testculos y glndulas mamarias durante la lactancia.
Su actividad es baja en el msculo..
En todos los tejidos se necesita ribosa, luego el msculo puede
producirla por va inversa de la pentosas a partir de fructosa 6P.
El NADPH permite reducir el glutation. Este ltimo remueve el
H2O2 de los eritrocitos aumentando su vida.

NADPH2 GS-SG 2H2O

NADP 2GSH H2 O2
Fructosa

Las dietas abundantes en sacarosa incrementan los niveles de

fructosa.
La sacarosa se metaboliza ms rpidamente que la glucosa por
no requerir a la fosfofructoquinasa de control.
Favorece entonces la sntesis de c. grasos y estimula la secre-
cin de insulina.
La fructoquinasa es independiente del ayuno y la insulina por lo
que la fructosa si se aprovecha en la diabetes.
La afinidad (Km) de la fructoquinasa heptica es alta, es decir
tiene una Km baja.
Fructosa : metabolismo

D-Sorbitol
NAD
Sorbitol Deshidrog

NADH
FRUCTOSA

Fructoquinasa ATP
Dihidroxiacetona P
Fructosa 1P
Triosa fosfato
isomerasa Aldolasa
ATP
Gliceraldehido 3P Gliceraldehido
Trioquinasa
Galactosa : metabolismo

Proviene de la hidrlisis de la lactosa. El hgado la convierte en

glucosa
No es esencial, la glucosa se transforma en galactosa

Galactosa
ATP Glucgeno
Galactoquinasa

ADP Galactosa 1P
UDPGlc
Uridin transferasa
Epimerasa
Glucosa 1P UDPGal
 Glicemia

La glucosa sangunea vara entre 40 y 140 mg/dl durante el

da, dependiendo del balance entre ingresos (alimentos) y
gasto por trabajo (fsico o el del propio del organismo).
Cuando se valora tras 8 horas nocturnas de ayuno vara entre
60 y 110 mg/dl.
Los procedimientos de medida son corrientemente
enzimticos (glucosa oxidasa).
Glicemia : su relacin
Gliclisis
C.Krebs
V.pentosas

Glucgeno
Glucosa y Glucgeno
INSULINA
(-)
glucgeno
Glucgeno sintetasa
(-) Fosforilasa +
UDP glucosa glucano transferasa
AMPc
(+)
UDPg pirofosforilasa
(+) Glucosa 1-fosfato
GLUCAGON
glucosa
Glucosa 6-P
REGULACION ENZIMATICA DE LA
GLICEMIA

La regulacin de la glicemia la Hexoquinasa

llevan a cabo algunas ENZI- muscular
MAS en el hgado. 100
El hgado es permeable a la
glucosa va el transportador
GLUT2 que tambin lo tienen
las clulas b del pncreas, el in-
testino delgado y el rin . 50 Glucoquinasa
La hexoquinasa se autocon- heptica
trola por la glucosa 6 P pero la
glucoquinasa del hgado no .
La glucoquinasa tiene menos a-
finidad (Km) mayor . Por lo que 0 5 10 15 20 25
slo se activa a alta concentra-
cin de glucosa en sangre .
 Gluconeognesis

Es la sntesis de glucosa a partir de grasas o protenas.

Por principio, gluconeognesis y gliclisis son vas
opuestas en el metabolsmo.
Existen en la gliclisis tres etapas que por su desnivel
energtico deben sobrepasarse mediante procedimientos
alternos.
La gluconeognesis usa cuatro reacciones diferentes para
sobrepasar esas tres etapas.
 Gliclisis y gluconeognesis

Hgado y rin tienen todas las enzimas de

la gluconeognesis, pero 80% se realiza en
Glucosa el hgado.
ATP Pi La 1ra. etapa se realiza en la mitocondria,
Glucosa 6P transformando piruvato en oxalacetato.
Fructosa 6P Las siguientes en el citosol y la ltima en
ATP Pi el retculo endoplasma
Fructosa 1,6 PP Para una mol de glucosa se requiere 4 ATP
y 2 GTP y NADH
2 x Gliceraldehido 3P

1,3 Difosfoglicerato oxalacetato

GTP ATP
ATP
Fosfoenolpi- Piruvato
3 P Glicerato
ruvato
 Lanzadera del malato

La piruvato carboxilasa es una enzima mitocondrial, por lo

tanto el oxalacetato que se forma en la matriz mitocondrial
debe salir al citosol para continuar la gluconeognesis.
La membrana interna mitocondrial es impermeable al oxal-
acetato por lo que debe transformarse en malato para el
cual existe un transportador en la membrana y volverlo a
transformar en oxalacetato afuera.
Dicho mecanismo llamado lanzadera, consiste en una pro-
tena transportadora de malato y dos isoenzimas de malato
deshidrogenasa, una dentro y otra fuera de la mitocondria.
 Lanzadera del malato

MITOCONDRIA CITOSOL
Oxalacetato Oxalacetato
NADH
NADH
Malato Malato
deshidrogenasa deshidrogenasa
NAD
NAD
Malato Malato
 De dnde provienen los precursores
de la gluconeognesis?

Del tejido adiposo, el glicerol

Glucosa
(Glicerol fosfato-DHAP-glu-
amino cosa) de los triglicridos.
PEP cidos
Del tejido muscular y los he-
mates, el cido lctico (ci-
do lctico-piruvato-glucosa).
Oxalacetato Alfa cetoglutarato
De la protena muscular, la ala-
amino nina que se transamina a piru-
cidos
vato.
Fumarato Otros aminocidos, llamados
Succinil
glucogenticos.
CoA amino
cidos
 Enzimas de la gluconeognesis

Piruvato carboxilasa, enzima que transporta al grupo carboxilo,

mediada por la biotina

Piruvato HCO3 ATP Oxalacetato ADP Pi

Biotina

Fosfoenolpiruvato carboxiquinasa: fuera de la mitocondria trans-

forma al oxalacetato en fosfoenolpirvico. Requiere de GTP.

Oxalacetato GTP Fosfoenolpiruvato GDP CO2

Fructosa difosfatasa: enzima citoslica

Fructosa1,6PP H 2O F 6P Pi
 Glucosa 6 fosfatasa

Esta reaccin sobrepasa la catalizada por la hexoquinasa o la

glucoquinasa.
La enzima est localizada en el retculo endoplasma y tiene cinco
subunidades.

G6P Citosol
Pro.Regula
T1 con Ca++ T2 T3
G6Fos.asa

Luz del retculo

G6P Glucosa+Pi endoplasma