Nombres:

Nicols Jimnez, Gabriel Monje, Pamela Ossandn, Ral Salazar

Docente:
Carrera:

Marianela Arvalo
Tecnologa Medica

Objetivos

yo

Identificar protenas de fase aguda mas

utilizadas. Conocer: Sus fundamentos tericos. Tcnicas de laboratorio. Valores de referencia.

Introduccin

yo

Los marcadores biolgicos constituyen una alternativa atractiva y potencialmente interesante para realizar diagnstico de infeccin, inflamacin o dao tisular y para monitorizar la evolucin y la respuesta al tratamiento. As, los marcadores se han estudiado para: Realizar el diagnstico de infeccin. Evaluar la gravedad de la infeccin. Predecir la evolucin de la infeccin.

Protena C Reactiva

raul

Descubierta en 1930 Aparece muy tempranamente en la infeccin Aumenta en diversas situaciones tales como:

-Infecciones bacterianas -Traumatismos -Patologas inflamatorias agudas -Artritis reumatoidea Protena de fase aguda

Protena C Reactiva
Estructura Es pentamrica 5 subunidades de 23 kDa

raul

El gen que la codifica se localiza en el

cromosoma 1.

Protena C Reactiva
Sntesis y funcin
Producida por las clulas del hgado. Respuesta a las citocinas: IL6, IL-1. Se une a estructuras de la superficie bacteriana.

raul

Acta como opsonina y activa el complemento.

Protena C Reactiva
Clnica
tisular.

pame

Seguimiento y control de procesos infecciosos o de dao

Provee informacin sobre el estado inflamatorio de un

paciente.
Frente al estmulo inflamatorio los valores de PCR aumentan

en las primeras 4 a 6 horas alcanzando un mximo a las 3650 horas.

Para determinar su concentracin se requiere de una

muestra de suero.
Hay varios mtodos analticos para determinar la PCR.

Protena C Reactiva
Mtodos para determinar PCR:

nico

Turbidimetra y Nefelometra

-Prueba fotomtrica-turbidimetrca para la determinacin cuantitativa de protena Creactiva (PCR) -Determinacin cuantitativa de Protena C-Reactiva; PCR-Turbiltex Tcnica de aglutinacin -Prueba rpida de aglutinacin en ltex, para la determinacin cualitativa y semicuantitativa de la protena C-reactiva; Humatex PCR

Protena C Reactiva

nico

TURBIDIMETRA Y NEFELOMETRA Sensibles y cuantifican la reaccin En la nefelometra, los complejos dispersan la luz de un rayo incidente a una longitud de onda apropiada. En turbidimetra, la formacin de complejos obstruye el paso de luz. Si la concentracin del anticuerpo permanece constante, la cantidad de complejo formado depende directamente de la concentracin del antgeno desconocido en la mezcla de reaccin. Los test de nefelometra y turbidimetra tienen buena precisin.

Protena C Reactiva

nico

TURBIDIMETRA Y NEFELOMETRA
Determinacin cuantitativa de Protena C-Reactiva; PCRTurbiltex: -Las partculas de ltex recubiertas con anticuerpos antiPCR humana, son aglutinadas por PCR presente en la muestra del paciente. -El proceso de aglutinacin provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentracin de PCR de la muestra.

Prueba foto-turbidimetrca para la determinacin cuantitativa de PCR: -La PCR en muestras de pacientes reacciona con los Ac anti-PCR en presencia de un buffer acelerador. -El complejo inmune formado causa turbidez en la mezcla de reaccin la cual es directamente proporcional a la concentracin de PCR y se mide por turbidimetra. .

Protena C Reactiva
TCNICA DE AGLUTINACIN

nico

Interaccin entre un anticuerpo y una

partcula antignica.
Anticuerpo es conocido como aglutinina y el

antgeno como el aglutingeno.

Aglutinacin en ltex.

Protena C Reactiva

nico

TCNICA DE AGLUTINACIN Prueba Humatex PCR Cualitativa Cuantitativa

RESULTADO Positivo Negativo

Marcada y visible aglutinacin de las partculas de ltex en el rea de la lmina.

Ausencia de aglutinacin de las partculas de ltex en el rea de la lmina.

Determinacin cuantitativa

Se lee el ttulo en la ltima dilucin que presente una aglutinacin visible.

Protena C Reactiva
Valores de Referencia:

raul

hasta Recin nacidos hasta 3 das

[mg/dL]

[mg/L]

1.5

15

Nios desde el cuarto da

1 Adultos 0.5 10 5

Protena C Reactiva
Utilidad diagnstica de la PCR:

pame

Indicador precoz de inflamacin Su disminucin indica buena respuesta al tratamiento antibitico.

Se usa como prueba rpida ante la presuncin de infeccin bacteriana (PCR alta) o contra infeccin vrica (PCR baja).
Es til en deteccin de infecciones ocultas, particularmente, en pacientes luego de una operacin. Sugiere presencia de enfermedades crnicas (artritis reumatoidea, ). Diagnstico y monitoreo de infecciones cuando las pruebas son muy lentas y/o imposibles. Rpida identificacin de infecciones en pacientes de alto riesgo, neonatos, inmunosuprimidos y transplantes de mdula sea.

Protena C Reactiva
Significado Clnico:

yo

-La protena C reactiva es positiva en las siguientes situaciones:

Fiebre reumtica Artritis reumatoide Infarto al miocardio Cncer activo o diseminado Infarto pulmonar Problemas de rechazo de trasplantes Traumatismos Infecciones bacterianas Enfermedad del tejido conectivo Enfermedad intestinal inflamatoria Lupus Tuberculosis

Protena C Reactiva
Interferencias:
AUMENTADA

yo
DISMINUIDA

PREANALTICAS

Trauma, ciruga, neonatos, embarazo, trabajo de parto, trasplante renal, hemodilisis, endotoxinas, ejercicio; fumadores, altitud. En personas de edad avanzada aumenta la frecuencia de niveles positivos elevados.

Alcohol

POR FARMACOS

Estrgenos, anticonceptivos orales (efecto de los estrgenos).

Anticonceptivos orales (efecto de la progesterona), antibiticos, terapia antimicrobiana, antiinflamatorios no esteroidales, pentopril, budesonida, dexametasona, prednisona.

Procalcitonina
Marcador

raul
de la

sensible y especfico respuesta inflamatoria sistmica.

Permite valorar el grado de una infeccin

bacteriana.
Su determinacin esta indicada cuando exista

duda diagnostica sobre la presencia de sepsis o shock sptico.

Procalcitonina
Estructura Precursor polipeptdico de la calcitonina Consta de 116 aminocidos Tiene un peso molecular aproximado de 12.6

Kda El mRNA situado en el cromosoma 11, codifica para la PCT

Procalcitonina

raul

Sntesis Sintetizada en las clulas C de la glndula tiroides y

en clulas neuroendocrinas del pulmn. En situaciones de sepsis se sintetiza en tejidos y rganos como el bazo, hgado, testculos, grasa o cerebro, por lo que sus niveles en sangre se disparan. El principal estmulo para la liberacin de PCT durante una infeccin es la endotoxina bacteriana. En situaciones crticas no asociadas a infeccin, pueden encontrarse concentraciones elevadas de PCT.

Procalcitonina
Cintica

raul

Procalcitonina
Clnica

pame

Uno de los marcadores ms sensible y especfico

Los aumentos de procalcitonina ocurren en

infecciones bacterianas, parasitarias y por hongos con manifestaciones sistmicas.

Habitualmente los niveles de procalcitonina no son detectables.

Procalcitonina

nico

Mtodos para determinar PCT:

Procalcitonina
BRAHMS PCT-Q
Test inmunocromatogrfico para la medicin

semicuantitativa de la PCT Utiliza Ac mc (tracer) de anti-catacalcina de ratn + Ac pc (fase slida) de anticalcitonina de oveja.

Procalcitonina
BRAHMS PCT-Q Modo de empleo:

nico

Abrir el envase individual antes de la realizacin de la prueba. Pipetear 200 l en la cavidad redonda de la placa. Evitar la formacin de burbujas. Incubar durante 30 min. (mx..45 min.) a temperatura ambiente.

Procalcitonina
BRAHMS PCT-Q
Lectura y evaluacin:

nico

Despus de 30 min. Se determina la gama de concentracin de la

PCT de la prueba.
LECTURA
No hay banda visible o solamente banda de test visible Visible solamente la banda de control Bandas de control y de test visible

INTERPRETACIN
No son validos Validos negativos Validos positivos

Procalcitonina
BRAHMS PCT LIA

nico

Ensayo inmunoluminomtrico (ILMA) usado para cuantificar la

concentracin de PCT. Se aplica en exceso dos anticuerpos monoclonales especficos del antgeno que enlazan la PCT (antgena) en dos puntos diferentes. Uno de los anticuerpos est marcado por luminiscencia (el tracer), el otro est fijado a las paredes interiores del tubo (sistema de tubos revestido).

Procalcitonina
BRAHMS PCT LIA Lectura:

nico

La magnitud de la seal de luminiscencia (RLU) es directamente

proporcional a la concentracin de PCT en la prueba respectiva.

Mediante los valores de la seal de luminiscencia de los

estndares es posible elaborar una curva de estndares; ahora es posible cuantificar las concentraciones desconocidas de PCT de los sueros o plasmas de pacientes comparando los valores de test con la curva.

Procalcitonina
Valores de referencia:

yo

MARCADOR

VALOR NORMAL

Procalcitonina

< 0.05 ng/mL

Procalcitonina
Pancreatitis

pame

Utilidad diagnstica de la PCT:

Diagnstico diferencial para inflamacin infecciosa / no infecciosa
Inmunosupresin (SIDA, neoplasia)

Diagnstico diferencial para infeccin bacteriana / no bacteriana

Meningitis

Neumonia

Diagnstico precoz en complicaciones infecciosas

Pacientes quemados

Pacientes traumatizados
Pacientes PostQuirrgicos Pacientes trasplantados

Procalcitonina
Significado Clnico:

yo

Conclusin

pame

Se puede concluir que los marcadores de la inflamacin hoy en da son de mucha ayuda para el diagnstico, pronstico y control de procesos inflamatorios, infecciosos o dao tisular. Aunque la PCR es ms sensible suele ser menos especfica a diferencia de la PCT que es muy sensible y especfica. Finalmente aunque la PCT muestra en general, ms aplicaciones que la PCR, el uso combinado de ambas puede ser ms til que la determinacin aislada de una de ellas.

Muchas gracias !!!!!