Universidad Nacional Mayor de San Marcos

(Universidad del Per, Decana de Amrica)

Facultad de Medicina San Fernando

BIOQUIMICA
Va de las Pentosas Fosfato. Regulacin. Importancia. Deficiencia de la Glucosa 6 Fosfato deshidrogenasa

Raquel Or Sifuentes
ROrS 1

COMPETENCIAS

Diferencie entre la etapa oxidativa y no oxidativa, importancia. Mencione el mecanismo de regulacin. Describa las alteraciones bioqumicas ocasionadas por la deficiencia de la Glucosa 6 fosfato deshidrogenasa en eritrocitos

ROrS

VIA DE LAS PENTOSAS HEXOSAS MONOFOSFATO - VIA DEL FOSFOGLUCONATO

Ruta importante que predomina en tejidos donde se realiza Sntesis

Reductivas.
Hgado, Glndula Mamara en actividad, Tejido Adiposo, Corteza Adrenal, Gnadas, Tiroides y Eritrocito. Forma tres metabolitos importantes: NADPH + H+ : Sntesis Reductivas que ocurren en el Citoplasma.

Ribosa 5P

Precursor de la Sntesis de Nucletidos.

Biosntesis de tres aminocidos: Fenilalanina Tirosina Triptfano
ROrS 3

Eritrosa 4P :

PORCENTAJE DE LA OXIDACION DE LA GLUCOSA

Tejido Msculo Esqueltico Hgado Tejido Adiposo Tiroides, Gnadas Corteza Adrenal Eritrocito Cerebro

Gliclisis
100 50 30

Va de las Pentosas
0 50 70

20
20 85-90 90 25

80
80 10-15 10 85

Pulmn

ROrS

ROrS

ROrS

I ETAPA OXIDATIVA
Glucosa 6 P + 2 NADP+ + H2O Ribulosa 5 P + CO2 + 2 NADPH + 2 H+

NADP+

NADPH + H+

Glucosa 6 P Deshidrogenasa

D-Glucosa 6 Fosfato

D-6-Fosfoglucono-d-lactona

La Glucosa 6 Fosfato Deshidrogenasa cataliza la oxidacin de la D-Glucosa 6-Fosfato para dar el ster cclico d 6-Fosfoglucopiranosa-1,5 lactona
ROrS 7

I ETAPA OXIDATIVA

H2O

H+

Lactonasa
D-6-Fosfoglucono-d-lactona D-6-Fosfogluconato

La Gluconolactonasa cataliza la hidrlisis del grupo lactona de la

6-Fosfoglucopiranosa 1,5-lactona para producir D-6-Fosfogluconato

ROrS

I ETAPA OXIDATIVA

NADP+

NADPH + H+ CO2

6-Fosfogluconato Deshidrogenasa
D-6-Fosfogluconato D-Ribulosa-5-Fosfato

La 6-Fosfogluconato Deshidrogenasa cataliza la descarboxilacin oxidativa del D-6-Fosfogluconato, produciendo D-Ribulosa-5-Fosfato. En esta reaccin se forma una segunda molcula de NADPH.

ROrS

ROrS

10

II ETAPA NO OXIDATIVA

Ribulosa 5-Fosfato Isomerasa

D-Ribulosa-5-Fosfato

D-Ribosa-5-Fosfato

Interconversin de la D-Ribulosa 5-Fosfato y la D-Ribosa 5-Fosfato por

la Ribulosa-5-Fosfato Isomerasa

ROrS

11

II ETAPA NO OXIDATIVA

Fosfopentosa Epimerasa

D-Ribulosa-5-Fosfato

D-Xilulosa-5-Fosfato

Transformacin de la D-Ribulosa 5-Fosfato en D-Xilulosa 5-Fosfato por accin de la enzima Fosfopentosa Epimerasa

ROrS

12

II ETAPA NO OXIDATIVA
Ribosa 5 P + 2 Xilulosa 5 P 2 Fructosa 6 P + Gliceraldehido 3 P

Transcetolasa
D-Xilulosa-5-Fosfato

D-Gliceraldehdo-3-Fosfato

Mg++ Mn++ TPP

D-Ribosa-5-Fosfato

D-Sedoheptulosa-7-Fosfato

Reaccin catalizada por la Transcetolasa, enzima que transfiere un fragmento de C2 desde D-Xilulosa-5-Fosfato a la D-Ribosa-5-Fosfato, con lo que genera D-Gliceraldehdo-3-Fosfato y D-Sedoheptulosa-7-Fosfato ROrS
13

II ETAPA NO OXIDATIVA

Transaldolasa
D-Fructosa-6-Fosfato D-Sedoheptulosa-7-Fosfato

D-Gliceraldehdo-3-Fosfato

D-Eritrosa-4-Fosfato

La enzima Transaldolasa transfiere un fragmento de C3 de la D-Sedoheptulosa-7Fosfato al D-Gliceraldehdo-3-fosfato, produciendo D-Fructosa-6-Fosfato y DEritrosa- 4 -Fosfato.
ROrS 14

II ETAPA NO OXIDATIVA

Transcetolasa
D-Eritrosa-4-Fosfato

D-Gliceraldehdo-3-Fosfato

TPP

D-Xilulosa-5-Fosfato

D-Fructosa-6-fosfato

La enzima Transcetolasa transfiere un fragmento de C2 de la D-Xilulosa-5Fosfato a la D-Eritrosa-4-Fosfato, producindose D-Gliceraldehdo-3 -Fosfato y D-Fructosa-6-Fosfato.
ROrS 15

SINDROME DE WERNICKE - KORSAKOFF (Neurosiquitrico)

Deficiencia crnica de Tiamina, produce problemas clnicos graves * Alcohlicos crnicos. * Personas mal alimentadas * Es frecuente en Europeos Sufre desorientacin , graves transtornos de memoria y parlisis parcial, y se produce cuando los individuos afectados sufren un dficit moderado de

tiamina.
La Transcetolasa se une a la TPP con una afinidad 10 veces menor que la enzima de personas normales. Las otras enzimas dependientes de TPP son

normales.

ROrS

16

CICLO DE LAS PENTOSAS

Glucosa
NADP NADPH

Glucosa 6P

G6PDH

6P-gluconato
NADP NADPH

6PGDH

Ribulosa 5P + CO2 Xilulosa 5P Fructosa 6P Ribosa 5P

F6P
Gliceraldehdo 3P () G3P
ROrS

17

SNTESIS y REGENERACIN DE GLUTATIN

cido glutmico
g GCS

Cistena
ATP ADP

Glicina
Glutatin Sintetasa G6PD
G6P NADP GSH

g glutamilcistena
ATP

Stress oxidativo

ADP
H2O2

SOD

O2

6PG

NADPH

GSSG

H2O

Glutatin Reductasa

Glutatin Peroxidasa
ROrS 18

CONTROL METABOLICO DE LA VIA

GLUCOSA 6 P DESHIDROGENASA: Presenta dos formas: Dmero (Activa) Monmero (Inactiva) Es Inhibida por NADPH, ATP (Inhibe el mecanismo de reaccin), Acidos Grasos de Cadena Media y Larga, Esteroides. Tiene un mecanismo de retroalimentacin negativo. Activado por NADP e insulina. Km = 60 mM Km NADP = 5 mM

Su actividad aumenta 10 veces a nivel heptico, cuando un individuo pasa de un estado de inanicin a uno en el cual el exceso de carbohidrato de la dieta se convierte en Acidos Grasos.
ROrS 19

CONTROL METABOLICO DE LA VIA

El Control y la regulacin de esta va estn relacionados directamente con las necesidades celulares: * Biosntesis de Lpidos, * Acidos Nucleicos, * Nucletidos y

* Esteroides.
Las necesidades de NADPH, Ribosa 5 P y ATP determina el destino metablico de la Glucosa 6 P.

ROrS

20

Si la necesidad de NADPH y Ribosa 5 P son iguales, Cual de las dos etapas funciona?

Si la necesidad de Ribosa 5 P es mayor que la de NADPH, Cual de las dos etapas funciona?

Si la necesidad de NADPH es mayor que el de Ribosa 5 P, Cual de las dos etapas funciona?

ROrS

21

ROrS

22

ROrS

23

ROrS

24

Eritroblasto
Prdida del ncleo

Reticulocito
Prdida de ARN y mitocondrias

Eritrocito
ROrS 25

Eritrocito
Metabolismo reducido
Ausencia de ncleo y ribosomas Ausencia de sntesis de protenas No se produce renovacin del stock de enzimas Ausencia de mitocondrias

Ausencia de Ciclo de Krebs

Gliclisis anaerobia

Agotamiento progresivo de enzimas que limitan la sobrevida del GR ROrS

26

VIA EMBDEN-MEYERHOF
Glucosa
ATP Mg ADP

Sntesis GSH

HK
Va Pentosas

Glucosa 6P

GPI
ATP Mg ADP

Fructosa 6P

PFK

Fructosa 1-6P

ALD
TPI
DHAP Reduccin
NAD

G3P
Pi

Meta Hb

NADH

G3PDH
27

1,3DPGROrS

VIA EMBDEN MEYERHOF

1,3DPG
ADP

DPGM

pH (-) Shunt Rapoport Luebering

ATP

Mg

PGK DPGP

2,3DPG
pH (+)

3PG
Degradacin Nucletidos y Vas de rescate

PGM
2PG
PEP
ADP

ENOL

ATP

Mg

PK
LDH
ROrS

PIRUVATO

LACTATO
28

NADH

NAD

Glucosa Hexocinasa

ATP
ADP

Isomerasa Fructosa 6 P

Glucosa 6 P

Glucosa 6 P Deshidrogenasa 6 Fosfogluconato

2 NADPH + H+

2 NADP+

CO2
Triosas fosfato 1,3 Bifosfoglicerato 3 Fosfoglicerato Piruvato Lactato
ROrS

Ribulosa 5 P Mutasa 2,3 Bifosfoglicerato (4-5 mM) 15% del contenido aninico del eritrocito

Hgado, Va Sangunea
29

UTILIZACION CELULAR GLUCOSA

Gluclisis

Glucosa-6-P

Glucognesis
Biosntesis Acidos Grasos Esteroides Sist. Oxidorreductor Glutatin-SH Destoxificacin
Aminocidos Aromticos: Phe, Tyr, Trp

2 NADP+
Nucletidos Acidos Nucleicos NAD FAD CoA

2NADPH + H+ Ribosa 5-P

Fructosa 6-P

Gliceraldehdo 3-P

Eritrosa-4-P

Glucosa-6-P Gluclisis Triacilgliceroles

ROrS

Gluconeognesis

La regulacin y el control de la va oxidativa directa de la glucosa guardan relacin con los requerimientos celulares de sntesis de lpidos, cidos nucleicos, nucletidos y esteroides 30

VIABILIDAD Y METABOLISMO DE LOS ERITROCITOS

* Tiene un promedio de vida de 120 - 135 das. * Su capacidad metablica es limitada. * Pierde ncleo, mitocondrias y ribosomas. * No es capaz de sintetizar RNA, DNA, protenas de divisin celular, ni de realizar el metabolismo oxidativo. * Utiliza la glucosa como fuente de energa.

1. Gliclisis Anaerbica: Lactato (90-95%) ATP (1-1.5 mM) 2,3 Bifosfoglicerato (4-5 mM) 2. Va de las Pentosas: NADPH + H+ (10-15%) GSH

ROrS

31

Funciones del ciclo en los Eritrocitos

Produccin de intermediarios de la gliclisis anaerobia
1. Inicia y mantiene la gliclisis 2. Sntesis de GSH 3. Activacin de ribosa -5P (PRPP) 4. Mantenimiento de integridad y plasticidad de la membrana 5. Mantenimiento de bomba cationes ATPasa dep

ATP

2,3 DPG Modulacin de la curva de disociacin de oxiHb

1. Interviene en la reduccin de piruvato a lactato 2. Reduccin de MetaHb
ROrS 32

NADH

Aplicacin Clnica
DEFICIENCIA DE LA GLUCOSA 6 FOSFATO DEHIDROGENASA

Una persona acude al mdico por presentar palidez anormal, ictericia, fiebre, cansancio y orina oscura. Consumi antimalricos das antes del viaje (20mg/da) y a las 48 horas present los primeros sntomas.

ROrS

33

DEFICIENCIA DE LA GLUCOSA 6 FOSFATO DEHIDROGENASA

Se realiza pruebas hematolgicas de laboratorio y se observa 1.- Hto bajo. 2.- reticulocitos elevados. 3.- Bilirrubina elevada. 4.- una anemia hemoltica.

ROrS

34

Por qu se produce destruccin de los glbulos rojos? Que rol cumple la enzima Glucosa 6 fosfato deshidrogensa en los eritrocitos? El consumo de drogas antimalricos pudo desencadenar esta anemia?.

ROrS

35

DEFICIENCIA DE GLUCOSA 6 FOSFATO DESHIDROGENASA

* Existe alrededor de 200 millones de personas afectadas. * Es frecuente en la poblacin negra de USA, parte de Africa Central, Poblacin Juda y Europea. * La principal funcin de la va de las pentosas en los eritrocitos, es la de proveer el aporte necesario de NADPH + H+, el cual forma GSH
ROrS 36

VIA DEL METABOLISMO DE LA GLUCOSA 6 FOSFATO EN EL ERITROCITO

ROrS

37

Deficiencia G6PD Cuerpos de Heinz

ROrS

38

METABOLISMO DE LA GLUCOSA EN EL ERITROCITO

Glucosa GLUTATION REDUCTASA Glucosa 6 P NADPH H+ GSSG

Fructosa 6 P

NADP+ 2 GSH
ATP Bomba Iones H2O2

H2O CATALASA

NAD+
NADH H+

ADP + Pi

Piruvato -. O2 SUPEROXIDO DISMUTASA O2 DAO CELULAR

ROrS 39

Hb (Fe+2) Hb (Fe+3) META Hb REDUCTASA

Rol del NADPH y del glutathion en proteccin celular frente a EROs

Papel del NADPH y glutatin SH en la proteccin de las clulas contra las EROs. GSH protege a la clula mediante la destruccin de perxido de hidrgeno e hidroxilo. La regeneracin de GSH requiere del NADPH producido por la G6P deshidrogenasa.

ROrS

40

Efectos de la produccin de ROS

Una serie de frmacos (cloranfenicol, sulfanilamida, primaquina y antipaldicos) producen reacciones redox en la clula, produciendo grandes cantidades de ROS. Los ROS producen oxidacin de los grupos SH de la Hb y peroxidacin de los lpidos de la membrana.

ROrS

41

ROL DE LA GLUCOSA 6 FOSFATO DESHIDROGENASA EN LOS GLOBULOS ROJOS

Glucosa 6 P NADP+ G 6P DH Hb 2 GSH HbO2

Meta Hb

2
G-S-S-G

NADPH + H+ 6 P Gluconato

Hb
O2

Se precipita y forma los Cuerpos de Heinz 1. Reduccin Met Hb (Fe +3) Reductasa. 2. Reduccin de Glutatin Oxidado a Glutatin Reducido por la Glutatin Hb (Fe+2) por la Metahemoglobina

Reductasa.
ROrS 42

DEFICIENCIA DE GLUCOSA 6 FOSFATO DESHIDROGENASA

Existen varios tipos de variantes. Su clasificacin se ha hecho segn el grado de actividad de la enzima, movilidad electrofortica y pH ptimo. TIPO A+ : Sin manifestaciones clnicas, movilidad electrofortica anormal. TIPO A- : Con manifestaciones clnicas, movilidad electrofortica anormal. Actividad de la Glucosa 6 P Deshidrogenasa 10-60%. Negros Americanos (11%). TIPO B- : Actividad de Glucosa 6 P Deshidrogenasa 0-10%. Zona Este Mediterrneo.

ROrS

43

Deficiencia G6PD

ROrS

44

G6PD: frecuencia gnica en negros americanos

Variante A Variante A-

0.11 0.2

ROrS

45

VARIANTES DE LA DEFICIENCIA DE LA GLUCOSA 6 FOSFATO DESHIDROGENASA

ROrS

46

200

AE

G6PD: actividad enzimtica (%)

110 %

100
60 % BA-

60

ROrS

das 120
47

CARACTERISTICAS DE LAS VARIANTES DE LA GLUCOSA 6 FOSFATODESHIDROGENASA

ROrS

48

ROrS

49

ROL GLUTATION REDUCIDO - GSH

* Reduce el H2O2, si aumenta el H2O2 entonces se acorta la vida media del eritrocito. * Mantiene reducido los grupos SH de la Hemoglobina (Hb).

* Protege a la membrana del eritrocito contra oxidantes, evitando la hemlisis.

* Conserva la hemoglobina en forma ferrosa (Fe+2). Personas que presentan deficiencia de esta enzima, muestran oxidaciones de los grupos sulfidrilos de la Hemoglobina, estas se precipitan dentro del eritrocito: Cuerpos de Heinz.
ROrS 50

FUNCIONES DEL NADPH

Sirve como un reductor, en un mecanismo que protege a los eritrocitos contra dao oxidativo. * Es capaz de generar GSH.

* Proteccin contra la toxicidad de los metabolitos derivados del oxgeno.

ROrS 51

IMPORTANCIA DE LA VIA DE LAS PENTOSAS

Esta va tiene una fase oxidativa que es irreversible y genera NADPH y una fase no oxidativa, que es reversible y proporciona precursores de ribosa para la sntesis de nucletidos, incluyendo RNA y DNA. La va completa existe solo en tejidos que requieren NADPH para sntesis reductoras; en tanto que, la fase no oxidativa se encuentra en todas las clulas que requieren ribosa.

La va no genera ATP.
ROrS 52

ROL BIOLOGICO DE LA VIA DE LAS PENTOSAS EN LOS ERITROCITOS

En los eritrocitos, la va tiene la importante funcin de evitar la hemlisis ya que suministra NADPH para mantener al glutatin en el estado reducido. A su vez, el glutatin sirve como sustrato de la glutatin peroxidasa, que es esencial para eliminar a la H2O2, nociva para la clula.

ROrS

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