Universidad Nacional de San Agustn

Capitulo IV
Microscopia Electrnica
Ing. Juan Manuel Jara G.

Microscopia Electrnica
La microscopa electrnica es una tcnica que requiere instrumentos de alta complejidad y personal altamente especializado. Se utilizan la microscopa electrnica de transmisin o convencional y la de barrido.

Microscopia Electrnica
La microscopa electrnica de barrido y de transmisin es utilizada como una de las tcnicas ms verstiles en el estudio y anlisis de las caractersticas microestructurales de objetos slidos.

Caractersticas de la Microscopia Electrnica

Una de las caractersticas importantes del SEM es que podemos observar las muestras en tres dimensiones. en contraste En cambio el TEM las muestras son observadas en dos dimensiones (Dificilmente se detalla el espesor)

Caractersticas de la Microscopia Electrnica

En el TEM como en el SEM las interacciones de haz de electrones pueden ser divididas en dos clases.

1.-Fenmenos de dispersin elstica

Afectan las trayectorias del haz de electrones dentro del espcimen sin alterar la energa cintica de los electrones. La dispersin elstica es responsable del fenmeno de retrodispersin electrnica que es la responsable de la formacin de algunas tcnicas de observacin en SEM.

2.- Eventos de dispersin inelstica

dan como origen a diferentes tipos de seales como resultado de la prdida de energa o transferencia de energa a los tomos del espcimen que conducen a la generacin de electrones secundarios.

Requisito Fundamental para el funcionamiento de un Microscopio Electrnico

Los dos tipos de microscopa deben trabajar en un sistema de vaco tal que permita el viaje del haz de electrones a travs de la columna. El sistema de vaco en general es similar dependiendo de las necesidades del equipo y las tcnicas a utilizar ser el nivel de vaco requerido.

Interaccin de los electrones con la muestra

Introduccin a las tcnicas de vaco

Para mejorar el medio ambiente donde viajar el haz de electrones es necesario contar con un sistema de vaco. El objetivo es eliminar las molculas indeseables y as mejorar las condiciones de su trayectoria de los electrones hacia la muestra.

Introduccin a las tcnicas de vaco

Este vaci dentro del can permite que la emisin del haz de electrones sea de alta calidad con lo que otorgara una imagen ntida y real.

Bombas de vaco en los microscopios

Los microscopio electrnicos tiene bombas de vaco y se clasifican en dos: 1.-Las que comprimen en una o ms etapas las partculas de gas presente que va a ser succionado, o sea de compresin. 2.-Aquellas que por condensacin o por unin qumica condensan las partculas slidas en las paredes, tambin son llamadas bombas de trampa.

Niveles de vacio
Existe una norma para clasificar los diferentes niveles de vaco, en cualquier sistema, esto se basa en la cantidad de gas residual presente.

Norma de clasificacin de niveles de vaco

Las unidades de medicin del vaco son unidades de presin (P=F/A), o sea, fuerza entre unidad de rea. Las equivalencias entre los sistemas de unidades ms comunes son:

Bomba Rotatoria

Bomba Turbomolecular

Corte de la Bomba Turbomolecular

Bomba Criognica

Bomba Inica

Esquema de vaco

Fuente de Iluminacin
Bsicamente existen dos fenmenos fsicos que son comercialmente utilizados para la formacin de un haz de electrones ya sea para un microscopio de transmisin o de barrido. 1. Por efecto termoinico 2. Por emisin de campo

Por efecto termoinico

El efecto termoinico es cuando por una diferencia de potencial se lleva un filamento a una temperatura tal que el material del filamento desprende electrones creando una nube continua de iones que se colectan y enfocan para formar sucesivamente el haz de electrones.

Por efecto termoinico

Los emisores utilizados para el efecto termoinico pueden ser de dos tipos, filamentos de Tungsteno (W) o cristales de hexaboruro de lantano (LaB6, tambin conocidos como ctodos).

Por emisin de campo

La gran ventaja de utilizar este tipo de fuente de electrones es su monocromaticidad, la cual no puede ser obtenida tan eficientemente con el efecto termoinico.

Detalle de fuentes de Emisin

Lentes para microscopa electrnica

Un microscopio electrnico no utiliza lentes de vidrio como lo es en microscopa de luz. Los electrones fueron enfocados con xito por primera vez con un electromagneto diseado por Busch en 1927. Y en 1931 E.Ruska incorpor este sistema para su primer microscopio electrnico construido junto con Max Knoll.

Lentes para alinear visin

Dispersin electrnica
Dispersin electrnica consiste en la interaccin de los electrones que sirven como prueba y los tomos del espcimen que resultan en un cambio en la trayectoria y/o energa.

Electrones retrodispersos
Son una respuesta a dispersiones elsticas; una fraccin de ellos al incidir en una superficie plana son expulsados a travs de la misma superficie por la que penetraron. La retrodispersin en muestras slidas muestran principalmente el efecto de dispersin mltiple y se cuantifica con la siguiente expresin:

Donde, nB, nmero de electrones del haz incidente. nBSE, nmero de electrones retrodispersos. iB, corriente del haz incidente iBSE, corriente de los electrones retrodispersos que viajan hacia fuera de la muestra.

Microscopio Electrnico de Barrido (SEM)

El Microscopio electrnico de barrido es aquel que utiliza un haz de electrones en lugar de un haz de luz para formar una imagen. Tiene una gran profundidad de campo, la cual permite que se enfoque a la vez una gran parte de la muestra

Partes del microscopio Electronico

Preparacin de muestras
*La preparacin de las muestras es relativamente fcil pues
la mayora de SEMs slo requieren que estas sean conductoras.

*En el microscopio electrnico de barrido la muestra

generalmente es recubierta con una capa de carbn o una capa delgada de un metal como el oro para darle propiedades conductoras a la muestra.

Aplicaciones

Glomrulo renal humano 1200X. Gentileza Dra. Gorodner, Fac. Medicina, UNNE

Aplicaciones

Piel humana en corte, 600X. Gentileza Dra. Gorodner, Fac. Medicina, UNNE

Bacterias creciendo sobre un estoma 4000X

Clulas vegetales con cristales 1700X. Tcnica de falso color