6/10/2011

FACULTAD DE INGENIERA AMBIENTAL

DETERMINACIN DE LA CALIDAD DEL AGUA POR SU CONTENIDO BACTERIAL

NOMBRE: Yellsin Vsquez Tafur CDIGO: 20102151B PROFESOR: Jorge Gilberto Tello Cebreros CURSO: Microbiologa Sanitaria 1

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OBJETIVOS

Reconocer la cantidad de bacterias en el agua de distintos lugares. Determinar la calidad del agua debido a la cantidad de microorganismo presentes en ella. Poder determinar los factores que permiten el desarrollo de bacterias en el agua a partir de los resultados obtenidos en el conteo. Aprender a realizar un estudio de la calidad del agua.

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FUNDAMENTO TERICO
AGUA
El agua es esencial para la vida. La cantidad de agua dulce existente en la tierra es limitada, y su calidad est sometida a una presin constante. La conservacin de la calidad del agua dulce es importante para el suministro de agua de bebida, la produccin de alimentos y el uso recreativo. La calidad del agua puede verse comprometida por la presencia de agentes infecciosos, productos qumicos txicos o radiaciones.

DISTRIBUCIN DEL AGUA EN EL PLANETA

El ocano es el origen de la mayor parte de las precipitaciones del planeta (lluvia y nieve), pero la lluvia sobre tierra satisface casi todas las necesidades de agua dulce de las poblaciones, junto con una pequea cantidad, aunque en aumento, de agua proveniente de la desalacin. El estado del rgimen hidrolgico, la calidad de su agua y sus ecosistemas, estn entre los factores que ms contribuyen al bienestar del ser humano.

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CICLO HIDROLGICO DEL AGUA

El agua existe en la Tierra en tres estados: slido (hielo, nieve), lquido y gas (vapor de agua). Ocanos, ros, nubes y lluvia estn en constante cambio: el agua de la superficie se evapora, el agua de las nubes precipita, la lluvia se filtra por la tierra, etc. Sin embargo, la cantidad total de agua en el planeta no cambia. La circulacin y conservacin de agua en la Tierra se llama ciclo hidrolgico, o ciclo del agua. Cuando se form, hace aproximadamente cuatro mil quinientos millones de aos, la Tierra ya tena en su interior vapor de agua. En un principio, era una enorme bola en constante fusin con cientos de volcanes activos en su superficie. El magma, cargado de gases con vapor de agua, emergi a la superficie gracias a las constantes erupciones. Luego la Tierra se enfri, el vapor de agua se condens y cay nuevamente al suelo en forma de lluvia. El ciclo hidrolgico comienza con la evaporacin del agua desde la superficie del ocano. A medida que se eleva, el aire humedecido se enfra y el vapor se transforma en agua: es la condensacin. Las gotas se juntan y forman una nube. Luego, caen por su propio peso: es la precipitacin. Si en la atmsfera hace mucho fro, el agua cae como nieve o granizo. Si es ms clida, caern gotas de lluvia. Una parte del agua que llega a la tierra ser aprovechada por los seres vivos; otra escurrir por el terreno hasta llegar a un ro, un lago o el ocano. A este fenmeno se le conoce como escorrenta. Otro poco del agua se filtrar a travs del suelo, formando capas de agua subterrnea. Este proceso es la percolacin. Ms tarde o ms temprano, toda esta agua volver nuevamente a la atmsfera, debido principalmente a la evaporacin. Al evaporarse, el agua deja atrs todos los elementos que la contaminan o la hacen no apta para beber (sales minerales, qumicos, desechos). Por eso el ciclo del agua nos entrega un elemento puro. Pero hay otro proceso que tambin purifica el agua, y es parte del ciclo: la transpiracin de las plantas. Las races de las plantas absorben el agua, la cual se desplaza hacia arriba a travs de los tallos o troncos, movilizando consigo a los elementos que necesita la planta para nutrirse. Al llegar a las hojas y flores, se evapora hacia el aire en forma de vapor de agua. Este fenmeno es la transpiracin. 4

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LA SALUD EN EL DESARROLLO DE LOS RECURSOS HDRICOS

Una importante fraccin de la carga de enfermedades relacionadas con el agua (principalmente las transmitidas por vectores relacionados con el agua) se atribuye a la manera como se desarrollan y manejan los recursos hdricos. En muchas partes del mundo, los impactos adversos a la salud originados por la contaminacin del agua, la construccin de represas, las obras de irrigacin y el control de inundaciones ser la causa de una carga significativa de enfermedad. ENFERMEDADES RELACIONADAS CON EL AGUA El agua, el saneamiento y la higiene tienen consecuencias importantes sobre la salud y la enfermedad. Las enfermedades relacionadas con el uso de agua incluyen aquellas causadas por microorganismos y sustancias qumicas presentes en el agua potable; enfermedades como la esquistosomiasis, que tiene parte de su ciclo de vida en el agua; la malaria, cuyos vectores estn relacionados con el agua; el ahogamiento y otros daos, y enfermedades como la legionelosis transmitida por aerosoles que contienen microorganismos. El agua tambin contribuye a la salud, por ejemplo, a travs de la higiene. Las siguientes son las ms importantes enfermedades relacionadas con el agua: EL USO DE AGUAS RESIDUALES La escasez cada vez mayor de las aguas dulces debido al crecimiento demogrfico, a la urbanizacin y, probablemente, a los cambios climticos, ha dado lugar al uso creciente de aguas residuales para la agricultura, la acuicultura, la recarga de aguas subterrneas y otras reas. En algunos casos, las aguas residuales son el nico recurso hdrico de las comunidades pobres que subsisten por medio de la agricultura. Si bien el uso de aguas residuales en la agricultura puede aportar beneficios (incluidos los beneficios de salud como una mejor 5

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nutricin y provisin de alimentos para muchas viviendas), su uso no controlado generalmente est relacionado con impactos significativos sobre la salud humana. Estos impactos en la salud se pueden minimizar cuando se implementan buenas prcticas de manejo. Las guas para el uso seguro de aguas residuales en la agricultura deben encontrar el balance justo entre la maximizacin de los beneficios de salud pblica y las ventajas de usar recursos escasos. Es necesario que las Guas sean lo suficientemente flexibles para poder adaptarlas a las condiciones locales, sociales, econmicas y ambientales. Adems, se deben implementar paralelamente con otras intervenciones de salud como la promocin de la higiene, los servicios de agua potable y saneamiento adecuados y otras medidas de atencin primaria de la salud. MICROBIOLOGA DEL AGUA El tipo de microorganismo encontrado en un ambiente acutico viene determinado por las condiciones fsicas y qumicas que prevalecen en ese ambiente. Estas condiciones ambientales varan de un extremo a otro dependiendo de la temperatura, luz, pH y nutrientes. Temperatura: La temperatura de la superficie est comprendida entre los 0 C de los polos y los 40 C del ecuador. En las profundidades la temperatura ronda los 5 C. Luz: La mayor parte de las formas de vida acutica dependen, directa o indirectamente, de los productos metablicos de los organismos fotosintticos. Los principales organismos fotosintticos de los ambientes acuticos son las algas y cianobacterias. Su crecimiento est restringido a las capas altas de las aguas (0-50 m y en condiciones ptimas de claridad hasta 125 m). pH: Los microorganismos acuticos crecen mejor a pH: 6,5 - 8,5. El pH del agua de mar va de 7,5 a 8,5. Los lagos y ros presentan un gran rango de pH dependiendo de las condiciones ambientales locales (pH: 1,0 - 11,5). Nutrientes: La cantidad y tipo de nutrientes presentes en un ambiente acutico influye significativamente en el crecimiento microbiano. Los nitratos y fosfatos son constituyentes inorgnicos comunes que promueven el crecimiento de las algas. Cantidades excesivas de ellos causan un crecimiento excesivo de las algas de tal manera que se reduce la cantidad de oxgeno en el agua provocando asfixia en otras formas de vida acutica. Microorganismos en el agua que pueden causar enfermedades En el agua de mar, en las lagunas, los ros y, en general, en todos los cuerpos de agua existen millones de microorganismos que habitan en ellos de manera normal. Sin embargo, algunas especies como las bacterias, los virus, los protozoarios y las lombrices llegan a ser perjudiciales a la salud, como las que contienen las aguas negras no tratadas. En el caso de llevarse a cabo descargas de aguas negras directamente al mar o a otros cuerpos de agua, stos pueden resultar contaminados de manera importante y, de no tomar precauciones, los baistas pueden correr un riesgo.

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Microorganismos que se encuentran en aguas negras y provocan enfermedades Microorganismos Bacterias Algunas enfermedades y sntomas Gastroenteritis (incluye diarrea y dolores abdominales), salmonelosis (intoxicacin por alimentos), clera, otitis, conjuntivitis, enfermedades respiratorias, de la piel, etctera. Fiebre, resfros, gastroenteritis, diarrea, infecciones respiratorias, hepatitis. Gastroenteritis, criptosporidiosis y giardiasis (incluye diarrea y calambres abdominales), disentera. Perturbaciones digestivas, vmito, inquietud, tos, dolor en la caja torcica, fiebre y diarrea.

Virus

Protozoarios

Lombrices

Uno de los indicadores ms utilizados en el mundo para evaluar la calidad del agua es la medicin de microorganismos, generalmente bacterias de origen fecal. La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) recomienda realizar un registro peridico de este grupo de bacterias. En nuestro pas se estn llevando a cabo diversos estudios de monitoreo con fines de manejo y control de los contaminantes. Ac alguna bacterias que se pueden encontrar en aguas superficiales, y las enfermedades que causan.
Bacteria Aeromonas Campylobacter jejuni Enfermedad/infeccin Enteritis Campilobacteriosis Sntomas Diarrea muy lquida, con sangre y moco Gripe, diarres, dolor de cabeza y estmago, fiebre, calambres y nuseas Diarrea acuosa, dolores de cabeza, fiebre, uremia homiltica, daos hepticos Nuseas, dolores de estmago y diarrea acuosa, a veces fiebre, dolores de cabeza y vmitos Fiebre Mareos, calambres intestinales, vmitos, diarrea y a veces fiebre leve Dolores de estmago, diarrea y fiebre, a veces vmitos Fuerte diarrea

Escherichia coli

Plesiomonas shigelloides

Infecciones del tracto urinario, meningitis neonatal, enfermedades intestinales Plesiomonas-infeccin

Salmonella typhi Salmonella sp.

Fiebre tifoidea Salmonelosis

Streptococcus Vibrio El Tor (agua dulce)

Enfermedad (gastro) intestinal Clera (forma leve)

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ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA

La finalidad que tiene el anlisis microbiolgico del agua es determinar la cantidad de microorganismos que sta contiene e investigar la presencia de representantes patgenos para el hombre y los animales, ya que la potabilidad bacteriolgica del agua est determinada por la carga bacteriana y la diversidad de grmenes presentes. Para ello, se hacen dos tipos de anlisis: ANLISIS CUANTITATIVO Tiene por objeto determinar el contenido microbiano de una muestra de agua por unidad de volumen (ml cc). Toma de la muestra: La muestra de agua que se tome, debe ser representativa y lo ms uniforme posible.

Se emplean recipientes esterilizados en horno de aire caliente, o autoclave y protegidos con tapas seguras y recubiertas con papel. Si esto no es posible, se pueden usar botellas perfectamente limpias y mantenidas en bao caliente (hirviendo) durante 10 a 15 minutos, junto con el tapn. Si no se cuenta con esto, se procede a lavar repetidas veces el recipiente con la misma fuente de agua de la muestra, antes de proceder a la toma de muestra definitiva. Si la muestra se va a extraer de un ro, se realiza en contra de la corriente, no de la orilla, sino en el centro del cauce, ya que siempre en la orilla hay restos orgnicos, por lo tanto hay mayor actividad microbiana en esa zona y aparecera en los resultados, pero no reflejara lo que en realidad est sucediendo en el cauce del ro. Si la muestra se va a extraer de una canilla de agua corriente, se abre la canilla por 5 minutos y se deja que salga el agua para que arrastre lo que qued en la caera (limpie). Se cierra el cao, se flamea la boca con un mechero, se abre nuevamente y se llena el frasco. Inmediatamente se tapa el frasco y se lleva al laboratorio o se guarda en heladera hasta su anlisis (6-12 hs.). Una vez obtenida la muestra, se debe realizar el anlisis bacteriolgico lo ms rpido posible. Si no se puede, se coloca la muestra en termos especiales (telgopor con hielo) y se debe tratar de que llegue al laboratorio dentro de las 6 horas de extrada (para aguas sospechosas) y 12 horas (para exmenes rutinarios). Debe mantenerse a una T de 6-10C hasta su anlisis. Todo 8

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esto debe hacerse porque se pueden obtener resultados falseados, debido a la rpida multiplicacin de los microorganismos, sobre todo si la muestra contiene materia orgnica (se seguiran multiplicando y esto no sera representativo). Una vez llegada la muestra al laboratorio, se homogeniza para poder obtener una mayor distribucin, ya que los esporulados se encuentran en el fondo.

Dilucin: Esto depende del material con que se trabaja. Si se sospecha que el agua contiene muchos microorganismos, se hacen las diluciones y recin se siembra. Se puede hacer en tubos de ensayo con 9 cc de agua estril en frascos con 90 cc, agregando 1 cc de la muestra problema y as hacer la dilucin.

Siembra: Se puede sembrar por: a) Inclusin en el medio: Para ello se coloca, con pipeta estril, 1 cc de la muestra en cajas de Petri estril, por otro lado se lican medio agar caldo nutritivo, se vuelca el medio en la caja y se mezcla bien para distribuir el material de siembra. Las colonias al desarrollar, quedarn incluidas en el medio. b) Con esptula de Drigalsky: En una caja de Petri en la que se ha volcado medio agar caldo nutritivo y solidificado, se agrega con pipeta estril 0,1 cc de la muestra y se disemina en superficie.

Incubacin: Es a 37C durante 48 hs., en estufa de cultivo y colocando las cajas invertidas. La T de incubacin es de 37C en este caso, debido a que como lo que se est buscando son grmenes provenientes de aguas cloacales, sa es la T normal de desarrollo (la del cuerpo humano).

Recuento: Se hace el conteo con un lpiz marcador de vidrio, marcando cada colonia formada (suponiendo que cada colonia proviene de un microorganismo). Tambin se pueden usar cmaras cuenta colonias, o dividir la caja en 4 cuadrantes, contar uno y luego multiplicar por cuatro. 9

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Clculo: Se consideran las cajas que tienen entre 30 y 300 colonias; las que estn por arriba o por debajo de estos valores, se descartan, porque inducen a errores.

En el mtodo directo, al nmero total de colonias se lo multiplica por 10, si se sembr 0,1 cc y luego por la dilucin usada, y as nos d el nmero de microorganismos/cc de agua. Interpretacin (Escala de Miquel) 300 colonias / cc 50 colonias / cc < 50 colonias / cc para Aguas superficiales para Aguas profundas para Aguas de consumo

010 microorganismos/cc 10 100 100 - 1000 1000 - 10.000 10000 100.000 Ms de 100.000 ANALISIS CUALITATIVO

Extremadamente pura Muy Pura Pura Mediocre Impura Muy Impura

Corresponde a la verificacin de bacterias patgenas en la muestra de agua a analizar. Las enfermedades son producidas por microorganismos contenidos en las deyecciones humanas y se adquieren mediante el consumo de aguas contaminadas con materia fecal o aguas cloacales. El examen cualitativo se reduce por su rapidez y comodidad a la bsqueda de identificacin del coli-bacilo, que si bien no es patgeno, es un indicador de contaminacin por los microorganismos que estn asociados a l. Las bacterias del grupo coliformes; son bacilos, Gram (-), no esporulados, fermentan la lactosa con formacin de cido y gas. Escherichia coli es el representante que se encuentra en el intestino del hombre y animales de sangre caliente. Otro es Aerobacter aergenes que se encuentra en el suelo, aire y granos. Toma de muestra: Del mismo modo que para el anlisis cuantitativo. Prueba presuntiva: Permite suponer o no, la presencia de microorganismos correspondientes al grupo coliaergenes.

Para ello se utilizan tubos de ensayos con medio de caldo lactosado con campana de Durhan. En un tubo de ensayo con 20 cc de medio, se agrega 10 cc de la muestra y se incuba a 37C, durante 24 hs.

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Si a las 24 hs. hay formacin de gas, la prueba es positiva (+), por lo que se contina con la siguiente prueba. Si a las 24 hs. no hay formacin de gas, se lo deja otras 24 hs. y si ac tampoco se form gas, la prueba es negativa (-). Si hay formacin de gas a las 48 hs., se considera dudosa, por lo tanto se sigue con el anlisis o se repite la prueba presuntiva. Prueba Confirmativa: En esta prueba se siembra a partir de los tubos que dieron (+) en la prueba anterior. Se puede hacer en medios lquidos slidos.

En medios lquidos: Se siembra en tubos con caldo bilis verde brillante, que es un medio especfico para coliformes. Se incuba a 37C - 24hs. y si hay formacin de gas, prueba confirmativa (+). En medios slidos: Se utiliza medio eosina azul de metileno. Se siembra en estras y se incuba a 37C - 24 hs. Puede haber formacin de colonias tpicas o atpicas. Las colonias tpicas (coliformes) Escherichia coli: colonias con centro oscuro con un brillo metlico caracterstico verdoso, debido a la reaccin entre la eosina y el azul de metileno. Aerobacter aergenes: presenta colonias con centro pardo sin brillo metlico. Otro medio es el Agar Endo: Que es el caldo lactosado + fucsina decolorada con sulfito. Se siembra, se incuba a 37C - 24 hs. y se observa si se regener el color rosa de la fucsina y las colonias aparecen rosadas y de aspecto dorado. Esto se debe a que el sulfito forma un compuesto de adicin con el colorante; al desarrollar el microorganismo, se forman compuestos que toman al sulfito y liberan al colorante (se separa) y reaparece el color rosa. El brillo dorado se debe a la precipitacin del colorante libre por los cidos orgnicos (cido lctico) producido por Escherichia coli. Prueba Final: Consiste en tomar de una colonia de la prueba anterior (de medio slido) y pasar a un tubo de ensayo que contiene caldo lactosado con Campana de Durhan. Se incuba a 37C - 24 hs. Si hay formacin de gas y si haciendo una coloracin de Gram, son Gram (-), la prueba completa (+): presencia de coliformes en el agua. Pruebas Diferenciales: Debido a la semejanza morfolgica y fisiolgica entre Escherichia coli y Aerobacter aergenes y ambos pertenecen al subgrupo coliformes y desde el punto de vista sanitario tiene mucha importancia su diferenciacin. Para ello, se recurre a las Pruebas IMViC

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DESINFECCIN DEL AGUA

La desinfeccin del agua se encarga de destruir, o al menos desactivar, los microorganismos dainos presentes en el agua. Se realiza por medios fsicos o qumicos. Los siguientes factores influyen en la desinfeccin del agua: 1) La naturaleza y nmero de los organismos a ser destruidos. 2) El tipo y concentracin del desinfectante usado. 3) La temperatura del agua que ser desinfectada: cuanto mayor sea la temperatura, ms rpida es la desinfeccin. 4) El tiempo de contacto; el efecto de desinfeccin es ms completo cuando los desinfectantes permanecen ms tiempo en contacto con el agua. 5) La naturaleza del agua que se quiere desinfectar; por ejemplo, si contiene materia de naturaleza coloidal y orgnica, el proceso de desinfeccin generalmente se dificulta. 6) El pH (acidez/alcalinidad) del agua. 7) Mezcla; una buena mezcla asegura la adecuada dispersin del desinfectante en el agua. Se han utilizado con xito varias alternativas para purificar el agua a pequea escala y que se pueden aplicar en el hogar; varias de ellas son accesibles, mientras que otras son muy costosas. Es muy recomendable conocer estos mtodos sencillos y prcticos, pues de su aplicacin depende que se eviten enfermedades. Mtodos fsicos Hervir el agua es una prctica segura y tradicional que destruye microorganism os patgenos como virus, bacterias y amibas, as como quistes, huevecillos y otros. Se requiere un

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recipiente y fuego permanente que produzca ebullicin en el agua por al menos tres minutos y mximo cinco. Si bien es efectivo como tratamiento casero, no es un mtodo factible para abastecimientos pblicos de agua. Despus de que se enfra, se recomienda airearla (traspasarla de un recipiente a otro para que retome partculas de aire y su sabor mejore) y dejarla reposar para que las sales o sedimentos se queden en el fondo del recipiente y luego se puedan retirar. Hervir el agua tiene la desventaja de que no proporciona proteccin contra la recontaminacin. Otro mtodo fsico que desafortunadamente no se puede llevar a cabo en el hogar es la desinfeccin por radiacin de luz ultravioleta. Sirve para desinfectar aguas claras, pero su efectividad se reduce significativamente cuando el agua es turbia o contiene componentes como nitrato, sulfato y hierro en su forma ferrosa. Este mtodo de desinfeccin no produce residuo alguno que proteja el agua de una nueva contaminacin. La luz ultravioleta se ha empleado para desinfectar en varios pases desarrollados, pero muy rara vez se aplica en pases en desarrollo. Mtodos qumicos

Son rpidos y efectivos para eliminar microorganismo s patgenos presentes en el agua. En las concentraciones que se requieren para desinfeccin, son fcilmente solubles en agua, y son capaces de proveer una accin residual. No aportan sabor, olor o color al agua. No son txicos para la vida humana ni animal. Son de fcil manejo, transporte, aplicacin y control. Por lo general estn disponibles a un costo moderado.

Las sustancias qumicas que se han usado exitosamente para desinfeccin son: cloro, compuestos de cloro y yodo dosificados en forma adecuada, ozono y otros oxidantes, como permanganato de potasio y perxido de hidrgeno. Cada uno de estos tiene sus ventajas y limitaciones. Por lo general, la cloracin es el mtodo ms seguro y econmico de desinfeccin. Comenz a realizarse a principios del siglo XX y ha sido quiz el evento tecnolgico ms importante en la historia del tratamiento del agua. Los materiales que se requieren estn ampliamente disponibles y constituyen un proceso relativamente fcil. Debido a que contiene desinfectante residual, el agua clorada puede transferirse de un envase a otro sin riesgo de recontaminacin. 13

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En cuanto a las desventajas, cualquier producto que contenga cloro concentrado es potencialmente nocivo para los nios, ya sea por contacto con la piel o por ingestin. De all que el producto, as como la solucin bsica, deban almacenarse fuera del alcance de los nios. En algunas situaciones, lograr la dosificacin apropiada podra presentar problemas: si se aade poco cloro, puede resultar que el agua no sea inocua. Adems, el agua sobredorada tiene un sabor y un olor caractersticos que pueden desagradar a muchas personas. A pesar de sus atractivas propiedades como desinfectante, el yodo tiene serias limitaciones. Se requieren dosis adecuadas (10-15 mg/1) para lograr una desinfeccin satisfactoria. No es efectivo cuando el agua presenta color o est turbia. La elevada volatilidad del yodo en soluciones acuosas es tambin un factor en contra de su uso, excepto si se trata de situaciones de emergencia. El permanganato de potasio es un poderoso agente oxidante y se ha descubierto que es efectivo contra el vibrin del clera, pero no contra otros patgenos. Deja manchas en el contenedor y por eso no es un desinfectante muy satisfactorio para abastecimientos pblicos de agua. El ozono se usa cada vez ms para desinfectar abastecimientos de agua potable en pases industrializados, ya que es efectivo para eliminar compuestos que dan sabor o color objetables al agua. Al igual que los rayos ultravioletas, el ozono normalmente no deja ningn residuo cuantificable que pudiera servir para controlar el proceso. La ausencia de un residuo tambin significa que no hay proteccin contra una nueva contaminacin del agua despus de su desinfeccin. Los elevados costos de instalacin, operacin y la necesidad de un suministro continuo de energa hacen que el uso del ozono no sea una prctica recomendada para pases en desarrollo. Agua limpia = salud La desinfeccin en el hogar no ser eficaz a menos que est apoyada por prcticas que mejoren la salud. La higiene personal es vital. La importancia de lavarse las manos con jabn y agua descontaminada despus de cualquier contacto con las heces y antes de comer es algo que vale recalcar en todo momento, y cualquier persona que manipule alimentos deber tener un cuidado especial. Esto significa lavarse las manos antes de preparar o servir los.ailimentos o de alimentar a los nios, pero tambin despus de manipular alimentos crudos o cualquier otra cosa que pudiera contaminarlas. El agua desinfectada (as como la solucin para desinfectar) deben cubrirse y almacenarse en un lugar oscuro, ya que la luz solar y el aire aceleran el deterioro del cloro. Los envases de almacenamiento deben limpiarse una vez por mes con una solucin de cloro. Si existe la posibilidad de que el agua desinfectada haya sido recontaminada al entrar en contacto con un vaso o utensilio sucio o con una mano sucia, el envase deber desecharse y lavarse minuciosamente.

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El ms ligero contacto con una superficie contaminada puede introducir patgenos en el agua y ocasionar recontaminacin. Por tanto, es importante que el envase de almacenamiento est diseado de forma que evite el contacto entre el agua, las manos y los utensilios. Hay varios desinfectantes comerciales que se utilizan para volmenes pequeos de agua, generalmente para uso individual o domstico. Estos desinfectantes son eficaces contra la mayora de los agentes patgenos transmitidos por el agua a las temperaturas y tiempos de contacto recomendados por los productores. Cuando se utilizan, es muy importante seguir las instrucciones al pie de la letra. La mayora de estos desinfectantes son compuestos de cloro o de yodo. La desinfeccin del agua potable debe ser una estrategia de salud pblica fundamental y si se aplica como es debido, reduce la incidencia de la mayora de las enfermedades que se transmiten por el agua. Un abastecimiento de agua y prcticas de saneamiento seguros, acompaados de campaas de educacin en salud, forman parte importante de las estrategias recomendadas para reducir la incidencia de enfermedades transmitidas por el agua, y constituyen el nico medio permanente de controlar su incidencia.

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PROCEDIMIENTO
MATERIALES

PIPETAS

TUBOS DE ENSAYO

PICETAS CON AGUA DESTILADA

CANASTILLA ALGODN BAGUETAS

GRADILLA

PLACAS PETRI FRASCOS DE VIDRIO

EQUIPO

BALANZA

MECHERO

TRPODE

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PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO

1.- Preparacin del agua peptonada: Segn instrucciones del envase se debe usar la proporcin de 1gr por 1Lt de agua. Se pesa 0.297gr de Peptona universal M66 seguidamente se vierte en un vaso de precipitado con 297ml de agua destilada, movemos con la vaqueta hasta la disolucin. Luego se divide el contenido en 3 frascos y se lleva al autoclave.

2.- preparacin del agar nutritivo:

Segn instrucciones del envase se debe usar la proporcin de 23gr por 1Lt de agua. Se pesa 3.105 gr de caldo nutritivo seguidamente se vierte en un vaso de precipitado con 135 ml de agua destilada, movemos con la vaqueta hasta la disolucin. Luego se calienta el vaso con la solucin en el mechero hasta los 85 C. Luego colocamos 15ml de la solucin en 9 tubos de ensayo respectivamente y los llevamos a la autoclave. 3.- Distribucin de los medios: Distribuir en 9 tubos de ensayo 15ml de agar nutritivo El agua peptonada se coloc en 2 frascos cada uno con 99ml. Aparte se tena un frasco con agua peptonada.

4.-Llevar tubos de prueba con agar al autoclave 5.-Esterilizar los materiales de vidrio: Se esterilizan los materiales de vidrio en el horno a una temperatura de 180C con un tiempo de exposicin de alrededor de 90 minutos.

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PROCEDIMIENTO
1. Preparar placas con medio agar de la muestra de agua obtenida de cada luar especificado despus, sembrando 1.0, 0.1 y 0.01 ml en agar nutritivo.

MUESTRAS OBTENIDAS DE CADA GRUPO Grupo1 Grifo de Bao FIA 20/09/11 Hora: 11:18 Temperatura: 20 C Grupo3 Estanque de Arquitectura 20/09/11 Hora: 11:17 Temperatura: 15.2 C Grupo5 Estanque del pabelln central 20/09/11 Hora: 11:16 Temperatura: 17.5 C

Placas estriles con agar nutritivo

2. A continuacin se incuban las placas invertidas a 20C por 48 horas o a 37C por 24 horas, y se cuentan las bacterias desarrolladas. El nmero colonias de una placa dada, multiplicando, multiplicada por la recproca de la fraccin sembrada da el nmero de bacterias por ml. Solamente las placas que contienen de 30 a 300 colonias deben considerarse satisfactorias para el recuento de bacterias. En caso que ninguna placa est dentro de stos lmites, se contar la placa que se aproxima ms al nmero de 30 300.

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RESULTADOS
Estos son los resultados de las placas de cada grupo: muestra Grupo 1 Grifo bao FIA Grupo 3 Estanque de arquitectura Grupo 5 Estanque pabelln central 1ml 15 10^-1 5 10^-2 1 UFC/ml observaciones Conteo a partir de dimetro > 1mm Conteo a partir de dimetro > 1mm -

146

34

78

15

GRUPO 1:

1ml

10^-2ml

10^-1ml

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GRUPO 5:

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CONCLUSIONES
A mayor concentracin de muestra el crecimiento de colonias fue mayor en todas las muestras, lo cual demuestra que la dilucin disminuye la cantidad de microorganismos en el agua. En la primera dilucin se observ que la mayor cantidad de microorganismos fue del estanque de arquitectura, aunque no se puede asegurar eso ya que a mayores diluciones las proporciones cambian. Esto nos indica que el experimento no se hizo con el mayor cuidado. Por eso sera conveniente obtener ms muestras. Aunque el agua del cao de la FIA es potable se observa crecimiento de microorganismos. El agua del pabelln central es cambiada cada cierto tiempo, a diferencia del estanque del estanque de arquitectura. Debido a eso la cantidad de microorganismos en el estanque de arquitectura es mayor que en el del pabelln central. Una sola muestra insuficiente para determinar la calidad del agua. Con varias muestras y observando el desarrollo de muestra a travs de la historia del estanque se puede dar una conclusin segura acerca del estado del agua.

RECOMENDACIONES
Siempre hay que esperar a que el agar solidifique antes de agregar las muestras a la placa petri. Se debe elegir un lmite del tamao de las colonias para que el conteo sea ms satisfactorio. Como se puede ver se eligieron colonias con ms de 1mm de dimetro. Es conveniente obtener varias muestras para comparar el resultado y sacar el valor ms probable.

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6 de octubre de 2011

BIBLIOGRAFA

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