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PREPARACIN DE TEJIDOS Y CITOPREPARACIONES

UNIDAD 2: PREVENCIN DE ACCIDENTES EN EL LABORATORIO: NORMAS GENERALES DE SEGURIDAD. Los trabajadores que desarrollan su funcin en un laboratorio de AP/C y salas de autopsias se ven expuestos a una serie de riesgos. RIESGO segn la Real Academia de la Lengua es la contingencia o proximidad de un dao. Segn esto se puede definir el RIESGO PROFESIONAL como la contingencia o proximidad de un dao derivado de la actividad laboral de un sujeto. A. TIPOS DE RIESGOS EN UN LABORATORIO DE AP/C. Y SALAS DE AUTOPSIAS. - Qumicos: Derivados del manejo de sustancias qumicas sin la debida formacin-informacin y sin las adecuadas medidas de proteccin. - Fsicos: Manejo de cargas, objetos de vidrio, cortantes, punzantes, elctricas, radiaciones - Biolgicos: Derivados del manejo de tejidos y restos de cadveres sin las precauciones debidas. 1.- RIESGOS QUMICOS.Segn la peligrosidad en su manipulacin se pueden agrupar en: - Explosivos. - Peligrosos para el medio ambiente - Comburentes. - Carcinognicos. - Inflamables. - Mutagnicos. - Txicos. - Teratognicos. - Corrosivos. - Alergenos. - Irritantes. - Asfixiantes. 1-1.- Factores que modifican la toxicidad de los agentes qumicos: a) Factores que dependen del txico.- Las propiedades fisico-qumicas del txico. - Forma de presentacin. - Vias de absorcin. - Concentracin del txico. b) Factores que dependen del individuo.- Sexo: Como en el caso del benceno, posiblemente por influencia hormonal afecta mas a las mujeres. - Edad: Al disminuir la capacidad para metabolizar los txicos. - Constitucin fsica: - Hbitos alimentarios: El alcohol y el dficit de vitamina B 12 potencia los efectos de los txicos. - Ciertas enfermedades: Caso del dficit de determinadas enzimas. c) Factores que dependen medio ambiente: - Temperaturas elevadas: Aumentan la toxicidad de las sustancias voltiles.

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1-2.- Txicos ms comunes: a) Formaldehdo: Son sustancias inflamables, sus vapores pueden formar concentraciones areas explosivas. Se utiliza en el laboratorio de AP/C y salas de autopsias como fijador de tejidos. - Produce irritaciones en mucosa nasal, ocular y farngea, a concentraciones de 2-3 ppm. A mayor concentracin y tiempo de exposicin puede producir intenso malestar y dolor de garganta y cabeza. - A concentraciones superiores a 5 ppm provoca disminucin de la secrecin mucosa, con tos, opresin torcica y dificultad respiratoria. - De 20-30 ppm provoca irritaciones severas. - De 50-100 ppm: edema pulmonar, neumona y muerte. - Las exposiciones crnicas ocasionan: rinitis, faringitis, laringitis crnica, hipertrofia mucosa y perdida de la sensibilidad olfativa. - Por contacto puede ocasionar irritaciones y eccema alrgico de contacto. - Se han descrito trastornos neuropsiquitricos: somnolencia, perdida de memoria y falta de atencin y concentracin. - Hay autores que manifiestan su poder carcingeno, otros afirman que no existen riesgos teratognicos o embriotxicos. La legislacin espaola permite una concentracin mxima a nivel del ambiente laboral de hasta 5 ppm (6 mg/m3). b) Xileno: Es un buen solvente de la parafina, el blsamo de Canad y el poliestireno. En AP/C se utiliza como aclarante (lquido intermedio entre los alcoholes y la parafina). - Es un narctico: su exposicin prolongada provoca alteraciones de los organos hematopoyticos y del sistema nervioso. - Distress respiratorio agudo y dolor de cabeza, nauseas, perdida del apetito, laxitud y dificultad de coordinacin - La intoxicacin aguda puede provocar: fatiga, vrtigo, sensacin de borrachera, escalofros, disnea y en ocasiones nauseas y vmitos. En casos mas graves puede producir perdida de conciencia. - La exposicin crnica determina: Adinamia generalizada, fatiga excesiva, mareos, cefalalgias, irritabilidad, hipersomnia, perdida de la memoria y pitidos de odos. Los sntomas tpicos son: Sabor dulzn en la boca, nauseas y en ocasiones vmitos, perdida del apetito, gran sensacin de quemazn en los ojos y hemorrgias nasales. En algunos casos se han observado alteraciones funcionales del SNC asociadas con intensa distona vegetativa, alteracin en la sntesis de protenas y disminucin de la actividad inmunolgica.

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Las mujeres pueden sufrir alteraciones en los ciclos menstruales, alteraciones durante el embarazo (amenaza de aborto, hemorragias durante el parto) y esterilidad. Alteraciones hematolgicas. Anmias, poiquilocitosis, anisocitosis, leucopenia, linfocitosis relativa y ocasionalmente intensa trombocitopenia. En orina: proteinuria, hematuria, presencia de urobilina y urobilingeno.

c) cido pcrico: se utiliza como fijador sobre todo en piel. Tambin se utiliza como reactivo en varias tcnicas. Tiene sabor amargo. Su ingestin provoca gastroenteritis aguda, hepatitis txica, nefritis, hematuria e ictericia. 1-3.- Medidas preventivas.a) Generales: a-1.- Sobre el foco de emisin: -Sustitucin del producto o, en su defecto disminuir la concentracin en las frmulas. -Mantenimiento y limpieza escrupulosos. a-2.- Medidas de control ambiental: -Aislamiento del foco. -Sistema de ventilacin adecuado. -Equipos de proteccin personal. -Evaluacin ambiental a-3.- Control del personal. -Reconocimiento previo y peridico. -Informacin y entrenamiento en la manipulacin del producto. b) Particulares: b-1.- Formaldehdo: -Si se derrame diluirlo con suficiente agua. -En concentraciones muy altas, emplear aparatos con suministro de aire autnomo. -Ante incendio emplear extintores de CO2 o tetracloruro de carbono. -Etiquetado correcto, almacenar solo pequeas cantidades, en lugar fresco y bien ventilado, alejado de llamas o riesgo de incendio. -Control biolgico: determinacin de cido frmico en orina (N 10 mg/l). b-2.- Xileno: -Ducha despus de cada jornada laboral. -No lavarse las manos con el solvente. -Utilizar cremas barrera. -Gestantes y lactantes no deben trabajar en contacto con este agente. b-3.- Ac. Pcrico y derivados: -Etiquetado correcto, almacenar solo pequeas cantidades, en lugar fresco y bien ventilado, alejado de llamas o riesgo de incendio. -Higiene personal estricta.

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-Utilizar cremas barreras y limpiadoras. -Determinacin de ac. pcrico en orina. -Precaucin ante enfermedades cutneas. 1-4.- Recomendaciones generales: a) Hbitos: Han de observarse las siguientes precauciones: a-1.- Personales: -Mantener en todo momento las batas y vestidos abrochados. -No abandonar objetos personales en mesas de trabajo o poyatas. -No ingerir alimentos, ni fumar, ni beber en el laboratorio. -No guardar alimentos ni bebidas en los frigorficos del laboratorio. -Lavarse las manos antes de abandonar el laboratorio, -No llevar pulseras, colgantes o mangas anchas. a-2.- De trabajo: -No llevar productos en los bolsillos de las batas. -Si tenemos que oler un producto, hacerlo con cuidado. -No tocar con las manos ni probar los productos qumicos. -No efectuar pipeteos con la boca. -No trabajar separado de la mesa o poyata. -Para encender los mecheros utilizar encendedores piezoelctricos largos. -Asegurarse que el material est lo suficientemente fro antes de tocarlos con las manos. -Al terminar el trabajo, asegurarse que todo est apagado y desenchufado, y todo el material recogido y en su sitio. -Emplear y almacenar las sustancias inflamables en pequeas cantidades. -Colocar los productos peligrosos en la parte inferior de las estanteras. b) Identificacin: Es aconsejable: -Comprobar el adecuado etiquetaje de recipientes y botellas. -Etiquetar adecuadamente las soluciones preparadas en el laboratorio. -No utilizar envases para otros productos sin quitar la etiqueta original. -No sobreponer etiquetas. c) Trasvase: Debe tenerse en cuenta: -Trasvasar siempre pequeas cantidades de lquido. En caso contrario emplear una zona especfica para ello. -Efectuar los trasvases de sustancias inflamables lejos de foco de calor. -Al trasvasar productos txicos, irritantes o corrosivos, emplear las prendas de proteccin adecuadas a los riesgos del producto. -Evitar los vertidos empleando embudos, dosificadores o sifones. d) Eliminacin de residuos: Hay que tener en cuenta las siguientes recomendaciones: -Neutralizar las soluciones antes de verterlas por el desage con abundante agua. -No guardar botellas vacas destapadas. -No tirar productos, ni telas o papeles impregnados en las papeleras. -No acumular residuos de ningn tipo. -Solicitar la retirada de productos inflamables.

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-Considerar las disposiciones legales existentes a nivel local para residuos y desechos. e) Medios de proteccin: Como mnimo deben seguirse las siguientes pautas: -Al manipular polvos de marcada accin biolgica utilizar batas sin bolsillos. -Utilizar gafas de seguridad. -Conocer y ensayar el uso de los equipos extintores. -Utilizar los guantes adecuados para cada tarea. -Conocer la proteccin que nos ofrecen los distintos equipos de proteccin individual de vas respiratorias. -Conocer los productos que disponemos en el botiqun as como su aplicacin. f) Actuacin en caso de incidentes: Comentaremos los diferentes incidentes tpicos: -Vertidos: En caso de vertidos accidentales debe actuarse rpidamente para su absorcin, neutralizacin o eliminacin: . De mercurio: Absorber con azufre, polisulfuro clcico o amalgamantes. Si se ha depositado en ranuras, se puede sellar con una laca fijadora. Tambin si es factible, se puede aspirar empleando una pipeta Pasteur, guardando el metal recogido. . Lquidos inflamables: Absorber con carbn activo o productos especficos. . cidos: Neutralizar con bicarbonato o emplear productos especficos comercializados para su neutralizacin y absorcin. . Bases: Emplear productos especficos comercializados para su neutralizacin y absorcin. .Productos no corrosivos ni inflamables: Absorcin con serrn. -Salpicaduras: . En piel y ojos: Deben lavarse con abundante agua (para ojos utilizar un lavaojos) durante 15-20 minutos. No intentar neutralizar. Acudir al mdico con prontitud. . En batas o vestidos: Debe quitarse rpidamente la ropa, lavndola o colocarse bajo la ducha, segn la magnitud de la impregnacin. Si hay contacto con la piel, acudir al mdico. -Ingestin: . Si es un cido beber solucin de bicarbonato. . Si es una base beber bebidas cidas ( limn). . No provocar el vmito. . Consultar con un servicio de informacin toxicolgica. . Acudir al mdico con la etiqueta del producto. 2.- RIESGOS FSICOS.2-1.- Lesiones de espalda: derivadas del manejo de cargas, fundamentalmente cadveres en salas de autopsias, a veces manualmente sin las debidas precauciones. -Medidas preventivas: Buen diseo de las instalaciones y disponer de los medios adecuados (poleas, camillas telescpicas) para el manejo de cadveres.

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2-2.- Riesgo elctrico: Al trabajar con sierras elctricas, baos de inclusin, dispensador de parafina, y en general todos los aparatos elctricos. -Medidas preventivas: Comprobar que todos los instrumentos tengan doble aislamiento y toma de tierra, verificando el estado de los diferenciales, evitar en lo posible suelos muy hmedos y utilizacin de botas y delantales de goma en las personas que lleven a efecto la autopsia. Si hay demasiada humedad la instalacin debe ser estanca. No enchufar varios aparatos a un mismo enchufe. No manejar aparatos elctricos con las manos mojadas. 2-3.- Heridas cortantes y punzantes: Al realizar la diseccin de cadveres, uso de material de vidrio y sobre todo al manejar los microtomos. -Medidas preventivas: .Desechar el material que presente el mas mnimo defecto en recipientes especiales, nunca en papeleras. .Revisar con atencin la mesa de trabajo cuando se hallan utilizado portaobjetos o cubreobjetos. .No forzar la separacin de material de vidrio que haya quedado uno dentro del otro. .No forzar directamente con las manos los cierres de botellas o frascos, las llaves de paso, conectoresque se hayan obturado. .Colocar la vidriera en las estanteras de manera segura y ordenada. .No coger con las manos mojadas objetos de vidrio y menos si son de peso. 3.- RIESGOS BIOLGICOS.3-1.- Entidades clnicas mas frecuentes: - Tuberculosis. - Estreptococo hemoltico. - Hepatitis B. - SIDA. - Fiebres hemorrgicas virales. - Enfermedad de CREUTZFELD-JAKOB. 3-2.- Medidas preventivas: - Generales: .Formacin-Informacin: conocimiento por parte de todos los profesionales implicados de los riesgos que entraa la realizacin de una autopsia, mecanismos de transmisin de las posibles enfermedades infecciosas que les puede afectar y medidas de control y proteccin. .Conocer la historia clnica del cadver objeto de la autopsia. .Rotacin en los puestos de trabajo. .Empleo de prendas de proteccin. - Especficas: .Tuberculosis: Consiste en la educacin del personal en el manejo de productos contaminados, medidas de esterilizacin en salas de autopsias, y en el riguroso cumplimiento de las normas y protocolos preventivos de desinfeccin, limpieza y esterilizacin del material.

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.Hepatitis B: Se debe establecer una serie de barreras fsicas (material desechable de un solo uso, batas y guantes), qumicas (glutaraldehido, povidona yodada, cloro), biolgicas (inmunoglobulina y vacunas) y educacionales (correcta prctica en la manipulacin de sangre y dems fluidos biolgicos, as como de fomites). - Medidas preventivas generales..Lavado de manos despus de cada actuacin, segn proceda (jabn de arrastre o jabn antisptico con povidona yodada). .Bata cerrada y guantes al manipular cadveres o tejidos sospechosos y en general al manipular sangre, fluidos biolgicos o tejidos de cualquier paciente. .Manejo cuidadoso de los objetos punzantes o cortantes que puedan estar contaminados. .Evitar hbitos que impliquen contacto oral (morderse las uas, lpices, pipetear con la boca) o produccin de erosiones cutneas (rascarse la cabeza). .Identificacin clara y visible con etiquetas amarillas o con las siglas VHB o el smbolo biohazard, en la historia clnica y en todas las muestras. .Limpieza inmediata de las superficies contaminadas con leja al 1:10. .En caso de inoculacin o exposicin accidental, lavar la zona con agua y jabn y acudir urgentemente a la Unidad de Salud Laboral. - Profilaxis postexposicin accidental..Recoger las caractersticas y circunstancias del accidente en la historia de salud laboral del trabajador. .Se determinar la situacin inmune del trabajador en relacin con la hepatitis b, conservando congelado (-70 C o 20 C) o liofilizado una cantidad suficiente de suero para repetir al menos dos veces dichas pruebas, si fuese necesario. .La profilaxis especfica se har de acuerdo a las normas del CDC: Enfermo Fuente conocida: 1.-HBs Ag + Personal sanitario no Personal sanitario vacunado. vacunado. Una dosis de IHGB Determinacin anti-HBs. (<24 horas) mas Si menos de 10 u por RIA o negativo vacunacin.(1) por ELISA dosis de IHGB mas dosis de recuerdo de la vacuna. Vacunacin (1) Realizar HBs Ag en la fuente (2) si es Realizar Hbs Ag den negativo IGHB mas recuerdo vacuna. la fuente (1) si es negativo IGHB (<7 das)

2.-HBs Ag no determinado. Riesgo alto de ser + (deficientes mentales, drogadictos, homosexuales activos, convivientes portadores de HBV, enfermos de dilisis, enfermos con hepatitis aguda o crnica. Fuente no conocida:

Vacunacin (1)

Nada

(1) Si es antiHBs. La vacuna debe ponerse antes del sptimo da de la exposicin. (2) Si en el personal sanitario no ha habido seroconversin.

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.SIDA: Mas que instituir precauciones especiales con las muestras que se saben contaminadas con VIH, deben seguirse precauciones rutinarias en el laboratorio contra la transmisin de la infeccin por sangre. El riesgo de contagio por parte del personal sanitario es escaso, sin embargo deben seguirse escrupulosamente las normas de higiene relativas a la Hepatitis B mas las siguientes normas recomendadas por el laboratorio de del Instituto Nacional del Cncer de Bethesda para los patlogos: .Aconsejar que personas inmunodeprimidas, con heridas o mujeres embarazadas no manipulen tejidos de enfermos con SIDA. .Impedir el acceso a personas no autorizadas a zonas donde se manipulen tejidos de enfermos de SIDA. .Utilizar gafas de seguridad y mascarilla quirrgica. .Usar vestimenta a poder ser de un solo uso. .Disminuir el riesgo de aerosolacin de polvo de hueso mediante la aplicacin de un aspirador junto a la sierra. .Descontaminar los instrumentos al menos durante 45 minutos a temperatura de al menos 121 C y presiones no inferiores a 300 Kg/m2. .Colocar los cadveres en bolsas resistentes con notas de precaucin tanto en la bolsa como en la tarjeta de identificacin. .No distribuir rganos para transplantes. .Distribuir tejidos de enfermos de SIDA solo a investigadores de SIDA. .Enfermedad de Creutzfeld-Jakob: El virus es resistente a la ebullicin del agua, irradiacin por ultravioleta, alcohol de 70 y vapores de formaldehdo. Se debe emplear para disminuirlo autoclave a 121 C o exposicin durante una hora en una solucin de hipoclorito sdico al 0,5 %. Aunque los tejidos no nerviosos son probablemente menos infecciosos que el cerebro, todos los tejidos de pacientes con ECJ deben considerarse potencialmente peligrosos. NORMAS GENERALES DE SEGURIDAD Conjunto de normas que se establecen en un laboratorio, para ser tenidas en cuenta por todo el personal que trabaje en el; van ha estar determinadas por el tipo de laboratorio. Estas normas se colocarn en lugares visibles. Nosotros podemos acordar las siguientes. 1-Usar siempre batas en el laboratorio, pelo recogido y uas cortas. 2-No fumar ni comer en el laboratorio. 3-No poner bolsos ni ropas sobre las mesas de trabajo, solo el material necesario. 4-Etiquetar siempre los productos, indicando la fecha de realizacin de las disoluciones. 5-Desechar material de vidrio roto en recipientes adecuados. 6-No verter slidos ni sustancias corrosivas o txicas en los fregaderos. 7-No pipetear nunca con la boca. 8-Usar guantes en el manejo de productos supuestamente contaminados. 9-Antes de salir del laboratorio revisar grifos de agua y butano. Comprobar que todo est en orden y limpio y los aparatos desconectados. 10-Lavarse las manos antes de salir del laboratorio. 8 JPFV

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DEFINICION DE REACTIVOS PELIGROSOS; PICTOGRAMA. -Producto corrosivo.-Aquel que por su carcter cido o bsico puede producir quemaduras qumicas o irritaciones drmicas. -Producto inflamable.-Producto combustible, con punto de inflamacin igual o inferior a 55 C. -Producto explosivo.-Aquel, que por aporte de energa trmica o de impacto puede originar una reaccin en cadena con ondas a presin que se propaguen a velocidad superior a 1 m/s. -Producto oxidante.-Aquel,que puede generar una reaccin de oxidacin,al contactar con otro producto o por descomposicin. -Producto txico.- Aquel producto que puede causar lesiones graves o incluso la muerte, por inhalacin, ingestin o contacto con la piel. Debe tenerse en cuenta la concentracin de sustancias txicas en el ambiente de trabajo, de aqu el concepto de TLV: Valor Limite Umbral = (concentracin mxima de una sustancia en la atmsfera de trabajo, por debajo de la cual no existen efectos adversos para el trabajador, para una jornada de 8 horas y una semana laboral de 40 horas). Se expresa como parte de gas o vapor por milln de aire contaminado o en mg/m3 de polvo. -Producto nocivo.- Producto en el que su peligrosidad no queda definida con los criterios anteriores. Todas estas sustancias se distinguen por medio de una serie de smbolos y unas letras es lo que llamamos el Pictograma de sustancias peligrosas. Estos smbolos deben ir en las etiquetas de los reactivos as como las indicaciones de riesgo ( R ) y de seguridad ( S ). Las indicaciones R. son 48, as R 10 indica sustancia inflamable, R 45 indica que puede causar cncer, Tambin pueden ir combinadas R 37/38 indica que irrita las vas respiratorias y la piel. Las indicaciones S. son 53, S 22 indica que no debemos respirar el polvo y S 1 que debe conservarse bajo llave.

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