Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Facultad de Estudios Superiores Cuautitln Campo 1

Qumica Farmacutico Bilogo

PRODUCTOS NATURALES

Grupo: 1552 Anteproyecto

Equipo: 4

Hernndez Len Karina Ivette Martnez Ortega Oscar Daniel Meja Gmez Alhel Morales Cruz Joel Rodrguez Guerra Marcos Adolfo

Cuautitln Izcalli a 12 de Septiembre de 2011

Proyecto. Extraccin e identificacin de alcaloides de Peumus boldus =Boldea fragans (Boldo) Objetivo Extraer, cuantificar e identificar los alcaloides que contiene el Boldo (Peumus boldus =Boldea fragans) por el mtodo de Stas-Otto en Soxhlet, para determinar si el rendimiento por ste mtodo es parecido al rendimiento terico reportado en la literatura, as como probar si es el mejor mtodo de extraccin por medio de la identificacin de alcaloides. Introduccin. Los alcaloides son sustancias orgnicas nitrogenadas con carcter bsico y mayoritariamente de origen vegetal. Tienen una estructura generalmente compleja y ejercen acciones fisiolgicas diversas, incluso a dosis muy bajas. Son txicos y capaces de precipitar con ciertos reactivos caractersticos. Caractersticas generales: compuestos orgnicos, se forman a partir de aminocidos, de origen vegetal, sustancias nitrogenadas, contienen nitrgeno heterocclico, estructura compleja, txicos, actividad fisiolgica incluso a dosis muy bajas y precipitan con ciertos reactivos. Hay excepciones a estas caractersticas generales: Existes alcaloides que no se biosintetizan a partir de aminocidos: esteridicos y diterpnicos. No todos los alcaloides son de origen vegetal, tambin hay alcaloides de origen animal y bacteriano. No todos los alcaloides son bases: por ejemplo, la colchicina y las bases xnticas nos son bsicas. No todos los alcaloides tienen nitrgeno heterocclico: tienen nitrgeno no cclico, por ejemplo la efedrina y colchicina. No todos los alcaloides tienen estructura compleja; la conna tiene estructura sencilla. No todos los alcaloides son txicos: no son txicos, por ejemplo, las betalainas.

Origen y distribucin de los alcaloides. En los vegetales, los alcaloides proceden del metabolismo secundario y se forman, generalmente, a partir de aminocidos, aunque hay tambin alcaloides de origen diverso. Los alcaloides no estn presentes en todos los vegetales. Se encuentran, sobre todo, en vegetales superiores. Dentro de las Angiospermas, las Dicotiledneas concentran prcticamente todas las especies que poseen alcaloides. En los vegetales, los alcaloides suelen estar localizados en tejidos perifricos: corteza, races, hojas, frutos y semillas. Las proporciones varan desde ppm para ciertas especies hasta valores que oscilan entre 0.1% y 3.5, pudiendo ser incluso superiores en algunas drogas vegetales o en determinadas razas qumicas.

Papel de los alcaloides en el vegetal. En las plantas, estas sustancias pueden tener diferentes finalidades o funciones: Productos de excrecin de los vegetales. Funcin defensiva contra parsitos o insectos, debido a su carcter txico. Productos de almacn de nitrgeno, ya que son sustancias nitrogenadas.

Estructura qumica. Los alcaloides son un grupo muy heterogneo de compuestos, con estructuras muy variadas y generalmente complejas. Todos contienen C, H y N. Algunos tiene oxgeno y pocos azufre. El nitrgeno que contienen puede formar parte de un ciclo o no. Aislamiento de los alcaloides. Hay diferentes procedimientos para extraer los alcaloides, pero es conveniente realizar una serie de operaciones previas para favorecer su extraccin. Estas operaciones son la pulverizacin y el desengrasado. La pulverizacin de la droga consiste en disminuir su tamao hacindola pasar por un tamiz muy fino; al pulverizar la droga se rompen las vacuolas que contienen los alcaloides y se aumenta la superficie de contacto entre ella y el disolvente con el que se realizar la extraccin. El desengrasado es una operacin previa que solo se realiza en drogas que tienen elevados contenidos de grasas, ceras, etc. Consiste en eliminar estos compuestos con hexano o ter etlico. Una vez realizadas las operaciones previas necesarias se procede a la extraccin. La extraccin de los alcaloides se puede llevar a cabo con disolventes lquidos (en medio cido o bsico) o mediante destilacin por arrastre de vapor de agua. En definitiva se pueden establecer cuatro mtodos de extraccin: 1. Extraccin con disolvente no polar en medio bsico: mtodo de Stas-Otto. Es un mtodo muy utilizado y consiste en tratar la droga pulverizada con un disolvente orgnico no polar (ter, cloroformo, etc.) en medio bsico. El medio bsico utilizado depende de la basicidad de los alcaloides a extraer. El medio bsico libera los alcaloides que pasan a la forma bsica libre, soluble en el disolvente orgnico no polar. La transferencia de los alcaloides a la solucin orgnica se puede realizar bsicamente por tres mtodos: maceracin, percolacin o Soxhlet. A continuacin se trata la solucin orgnica con agua en un medio cido en exceso (por ejemplo HCl), obtenindose dos fases. El medio cido se vuelve a tratar con un disolvente orgnico no polar en medio bsico (generalmente NH3), se vuelven a obtener dos fases y los alcaloides pasan a la fase orgnica en forma libre. Por evaporacin de esta ltima solucin orgnica se obtiene un residuo que contiene los alcaloides. 2. Extraccin con alcohol en medio cido: Se coloca la droga pulverizada en alcohol o una mezcla hidroalcohlica en medio cido (generalmente cido tartrico), se lleva a ebullicin y se obtiene una solucin alcohlica de los esteroides. Por evaporacin del disolvente, se

obtiene un residuo que contiene los alcaloides en forma de sal y, por tratamiento con ter y amoniaco, se obtienen los alcaloides en solucin etrea en forma bsica (libre). 3. Extraccin con agua en medio cido: Consiste en lavar la droga en agua y en un medio cido para obtener una solucin acuosa que contiene los alcaloides en forma de sal. A continuacin se adicionan metales pesados que forman con los alcaloides estructuras complejas de las cuales se extraen a continuacin los alcaloides. El problema de utilizar la extraccin con agua en medio cido es que hay numerosas sustancias solubles en agua adems de los alcaloides, por lo que en la solucin acuosa cida habr muchas impurezas y ser necesario aplicar una tcnica de purificacin posteriormente. 4. Destilacin por arrastre de vapor de agua: Es una tcnica aplicable solamente a alcaloides voltiles que son, en general, los que no contienen oxgeno. Consiste en realizar una destilacin de la droga en agua. Al evaporarse el agua arrastra los alcaloides. El vapor de agua se condensa y se recoge en una solucin cida para fijar los alcaloides que finalmente estarn en forma de sal. Boldo. Especie: Peumus boldus (= Boldea fragans). Familia: Monimiaceas. Nombre vulgar: Boldo Parte utilizada: las hojas, industrialmente se usa tambin la corteza como fuente para la extraccin de alcaloides. Hbitat: especie originaria de Chile y zonas de Amrica del sur. En Italia y norte de frica se encuentra cultivada. Caractersticas: rbol dioico (pie masculino y pie femenino). Las hojas tienen forma elptica, son gruesas, rgidas y la epidermis superior presenta protuberancias que son glndulas con esencia, por lo que resultan rugosas al tacto. Las flores son blancas y con cinco ptalos. Toda la planta desprende un aroma similar a la menta. Composicin qumica: Aceite esencial: contiene sustancias terpnicas oxigenadas como el 1,8-cineol (4-16%), que tienen una funcin ter, y el ascaridol (16-22%), con una funcin tipo perxido. Alcaloides: se hallan en muy pequea cantidad pero son los principios activos. Son alcaloides del tipo aporfina y el mayoritario es la boldina (30% respecto a los alcaloides totales), que tienen estructura tipo aporfina pero reducida. Otros alcaloides que tambin poseen dicha estructura son la isoboldina, reticulina, laurotetamina, etc. En la corteza la concentracin de alcaloides es superior y puede llegar hasta un 10%, por lo que se usa industrialmente para extraer los alcaloides. Flavonoides: generalmente en forma de hetersidos. Tambin presentan cierta actividad.

Accin: la hoja de boldo es una droga estimulante de la digestin y un estimulante heptico. El colertica (aumenta la produccin de bilis en el hgado). Colagoga (facilita la secrecin de bilis) y eupptica (facilita la digestin porque aumenta la secrecin de jugos gstricos). Presenta tambin un ligero efecto laxante y estimula la diuresis. La accin es debida principalmente a la boldina, pero la presencia de los flavonoides produce un efecto sinrgico. A dosis elevadas presenta efecto espasmdico y en tratamientos prolongados puede resultar txica al producir inflamacin de las mucosas del tracto gastrointestinal, alteraciones hepticas y alteraciones del sistema nervioso central tales como somnolencia, descoordinacin de los movimientos, etc. Indicaciones: se usa en el tratamiento de insuficiencias hepticas y dispepsias (trastornos gastrointestinales) debidas a problemas hepticos. Tambin da buenos resultados para aliviar las molestias digestivas posteriores a la comida que se producen en casos de litiasis biliar (clculos biliares). El boldo no es capaz de disolver los clculos biliares pero evita que aumenten se tamao los ya existentes y que se formen nuevos clculos. Formas de uso: se utiliza en forma de infusiones y extractos fluidos ya sea de la droga entera o asociado a otros colerticos y colagogos como la alcachofa, romero, bilis de buey, o laxantes como la frngula. Se puede administrar boldina incorporada a una formulacin de comprimidos como sedante o hipntico suave. Las hojas desecadas de Peumus boldus Mol., de la familia Monimiaceae, arbusto perenne originario de Chile, constituyen la droga conocida con el nombre de boldo. Se utilizan tambin las cortezas para la extraccin del principio activo, el alcaloide boldina. Las hojas de boldo son de forma elptica, cortamente pecioladas, con los bordes del limbo levemente enrollados. Su cara superior muestra numerosas prominencias apreciables a simple vista, formadas por pelos tectores agrupados formando manojos. El boldo contiene aceite esencial rico en hidrocarburos monoterpnicos: p-cimeno, a-pineno, y monoterpenos oxigenados: ascaridol, cineol o eucaliptol, linalol, etc. Alcaloides isoquinolenicos tipo aporfina (0,25-0,5%): principalmente boldina, acompaado de isoboldina, isocoridina, norisocoridina, etctera. Contiene adems flavonoides, cumarinas y resina. Las hojas de boldo poseen propiedades colerticas, colagogas y diurticas (no se sabe exactamente si es un verdadero diurtico o simplemente un acuartico) debidas principalmente a la boldina. Presenta tambin actividad como estimulante heptico, sedante, demulcente urinario suave y antisptico. Se ha utilizado en clculos biliares, disfunciones hepticas o de la vescula biliar, en cistitis y en colelitiasis. Se han efectuado ensayos en animal de experimentacin que demuestran la actividad colertica y laxante en ratas; un aumento de la secrecin gstrica en perros; efecto protector heptico frente a algn agente hepatotxico en ratn, etc. Otros estudios tambin en animal han mostrado que algunos componentes del boldo relajan el msculo liso y prolongan el trnsito intestinal. En rata se ha observado un efecto hipotensor y depresor de la actividad miocrdica.

La mayor parte de las investigaciones publicadas en la literatura cientfica se refieren a la boldina, principal componente de las hojas y cortezas de boldo, habindose llevado a cabo muy pocos trabajos con los extractos de la droga. De estos ltimos destacamos que la administracin de extracto seco de boldo prolonga el tiempo del trnsito orocecal en sujetos normales, lo que podra explicar su empleo. La boldina es un eficaz agente antioxidante y hepatoprotector ya que su toxicidad es muy baja. Se ha comprobado que origina una potente inhibicin de la peroxidacin en microsomas hepticos humanos y carece de efecto sobre la actividad del citocromo P450 humano. Asimismo, se ha demostrado, en preparaciones frnico-diafragma de ratn, que la boldina produce un bloqueo en la trasmisin neuromuscular y este efecto puede ser debido a una interaccin directa con el receptor postsinptico nicotnico. En cualquier caso, parece ser que el efecto del boldo sobre el flujo biliar no se debe slo a los alcaloides sino que existe un efecto sinrgico entre los diversos compuestos activos de la droga. Diversos ensayos de toxicidad tanto in vivo como in vitro parecen indicar que la droga carece de toxicidad. Se emplean en teraputica asociaciones de boldo con otras drogas con actividad laxante como cscara sagrada o ruibarbo, o con colagogos como la alcachofa y amargos como genciana, en problemas de prdida de apetito, digestiones difciles, estreimiento, etc. El boldo ha demostrado su eficacia especialmente en los sntomas relacionados con el estreimiento, por lo que se usa como coadyuvante en dichos casos. El aceite esencial contiene 4-terpineol, principio irritante y diurtico. Contiene tambin ascaridol, compuesto bastante txico que posee propiedades antihelmnticas, lo que explica que antiguamente la droga se empleara con este fin. No se aconseja el empleo del aceite esencial de boldo. La Comisin E alemana indica el boldo en el tratamiento de dispepsias as como en espasmos del tracto gastrointestinal; destaca que el aceite esencial de las hojas contiene ascaridol, txico. Por tanto, a falta de ensayos de toxicidad crnica, se aconseja no administrar durante el embarazo. No debe emplearse en casos de obstruccin biliar o trastornos hepticos graves. En litiasis nicamente bajo prescripcin facultativa. Se emplea por va oral y durante perodos de no ms de cuatro semanas. Parte experimental. La extraccin de los alcaloides se llevar a cabo por el mtodo de Stas-Otto que se describi anteriormente. Procedimeinto:

Se coloc en el cuerpo extractor del aparato Soxhlet 30g de hojas de boldo trituradas con 10% de cal (Ca (OH)2) envueltos en un papel filtro y se agregan 80ml de etanol. En un matraz de fondo plano se colocaron 80ml de etanol. Se ensambla el equipo y se lleva a ebullicin durante aproximadamente 2 horas. El residuo obtenido se filtr y se guard el filtrado. Despus de reposar 1 semana se filtr por segunda ocasin. El residuo solido se sec y pes. Se trat el filtrado con una solucin alcohlica de KOH hasta no observar precipitacin. Se filtr por tercera ocasin el residuo, se sec, pes y se realizaron pruebas de identificacin. Material y reactivos Material Aparato Soxhlet Refrigetante Soporte universal 2 pinzas de 3 dedos con nuez Tubos de ensaye Vasos de precipitados de 100ml Placa de calentamiento Perlas de ebullicin Placa excavada Pipeta graduada de 5 ml Embudo de filtracin Reactivos Etanol Ca(OH)2 Reactivo de Dragendorff Reactivo de Mayers cido silicotngstico cido pcrico KOH en etanol 10%

Resultados Rendimiento Residuo 1: 30g--------100% 0.3g-------1% Residuo 2: 30g--------100% 0.2g-------0.66% Producto final:

30g--------100% 0.6g-------2% Identificacin Reactivo Dragendorff Mayer Hager cido silicotngstico Residuo 1 + + + Producto final + + + -

Conclusiones

Referencias KUKLINSKI, C. (2000). Farmacognosia. Estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural. Ediciones Omega. Barcelona, Espaa. http://www.portalfarma.com/pfarma/taxonomia/general/gp000011.nsf/0/4DE2A2030B26B6F0C1 256A790048D68C/$File/242.pdf