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INSTITUTO SUPERIOR DE ENSEÑANZA

Sede Gualeguaychú – Urquiza 545 –  (3446) 433156


Sede Gualeguay – Mitre 139 -  (3444) 426248
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TÉCNICO AUXILIAR EN MICROBIOLOGÍA,


BACTERIOLOGÍA Y ENFERMEDADES INFECCIOSAS

Módulo 2

Los virus

 No son células
 No son sistemas abiertos dinámicos
 Son estructuras estáticas y muy estables
 Incapaz de cambiar o reponer estructuras por si mismos
 Necesitan de la maquinaria de la célula para replicarse y para sintetizar sus
proteínas
 No tienen metabolismo propio
 No tienen aparato de traducción
 Son mucho más pequeños que las células

Tamaño de los virus y estructura:

a) Partículas de adenovirus (tamaño 100 nm de diámetro)

b) Tamaño de una partícula de virus y comparación con bacterias y células animales

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Clasificación de los organismos:

Se clasificaron primero como animales o plantas pero luego aparecieron los


microorganismos.

Se descubrió luego que todos los organismos vivos se podían dividir en dos tipos celulares
distintos (procariotes y eucariotes) con base en diferencias fundamentales en la estructura
celular.

Todos los animales y plantas son eucariotes, como lo son tres grupos importantes de
microorganismos: algas, hongos y protozoos.

Relación evolutiva entre organismos:

Relación estructural no necesariamente implica relación evolutiva. Hoy en día se utiliza un


método que compara la estructura del RNA ribosomal como una medida de las relaciones
filogenéticas o evolutivas.

De estos estudios surgen tres linages celulares evolutivamente distintos, dos de los cuales
son procariotes en estructura y uno es eucariote.

A estos grupos se les dio el nombre de Bacteria, Archaea y Eukarya. Todos estos grupos
se piensa que vienen de un ancestro común o “ancestro universal”.

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Los procariotas comprenden las Bacteria y las Archaea. Bacteria y Archaea comparten
estructura celular, pero se diferencian mucho por su historia evolutiva o filogenia.

Por estudios de evolución molecular en procariotas, específicamente las relaciones


filogenéticas deducidas luego de comparar las secuencias de macromoléculas esenciales,
en especial los RNAs ribosómicos, se llegó a la conclusión que Archaea y Bacteria no están
relacionadas evolutivamente.

Más aún, las especies de Archaea están más relacionadas con los eucariotas que con las
especies del dominio Bacteria.

Este hecho ha sido ratificado por estudios comparativos realizados con otras
macromoléculas de especies de los tres dominios.

Por lo tanto, la diversificación evolutiva, a partir del ancestro común fue en dos direcciones,
hacia Bacteria y hacia otra cosa que finalmente se diversificó dando origen a los dominios
Archaea y Eukarya.

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Árbol filogenético de la vida construido a partir de la comparación de las secuencias del RNA ribosómico.

El árbol está formado por tres dominios de organismos: Bacteria y Archaea, que presentas
células procarióticas, y Eukarya (células eucarióticas).

El grupo en rosa son macro organismos, el resto de los organismos son microorganismos.

Como todas las células de los animales y plantas son eucarióticas, se deduce que los
microorganismos eucarióticos fueron los precursores de los organismos pluricelulares.

Secuenciación del gen de RNA ribosómico y filogenia

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a) Se rompen las células;

b) Se aísla el gen que codifica el RNA ribosómico y se amplifica el número de copias por la
técnica de PCR (reacción en cadena de la polimerasa);

c) El gen es secuenciado;

d) Las secuencias obtenidas se alinean por computadora; Un programa informático realiza


comparaciones por pares y genera un árbol;

(e) Que refleja las diferencias en la secuencia del RNA ribosómico del organismo analizado.
Si en el análisis se usa una muestra natural, los genes del RNA ribosómico aislados de los
diferentes organismos de una muestra deben ser clonados antes de ser amplificados y
secuenciados.

Micrografías electrónicas de secciones de células pertenecientes a cada uno de los tres


dominios de organismos: a) Bacteria, b) Archaea y c) Eukarya.

Los microbiólogos usan el sistema de nomenclatura binomial desarrollado por Linneo para
plantas y animales.

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A la serie de organismos relacionados se le da un nombre o “género” dentro de este género


se separan las distintas “especies” u organismos de diferente tipo.

Por ej. Escherichia coli, Brucella abortus, Brucella melitensis, Brucella suis, Agrobacterium
tumefaciens, Agrobacterium rhizogenes, Bacillus anthracis, Bacillus subtilis, Sinorhizobium
meliloti, etc.

En general, los nombres derivan del latín o griego latinizado que describen alguna
propiedad típica de la especie y se escriben en letras itálicas o cursivas. Por ej. Se han
descripto más de 100 especies diferentes del género Bacillus, tales como Bacillus (B.)
subtilis, B. cereus y B. tearothermophilus.

Estos nombres específicos significan “fino”, “ceroso” y “amante del calor”. En general
describen las características morfológicas, fisiológicas o ecológicas importantes de c/u.

Los microorganismos y sus ambientes naturales

Población: grupo de células relacionadas.

Hábitat: ambiente natural en el que vive una población.

Ecología: estudio de los organismos en sus ambientes naturales.

Comunidades: conjuntos de poblaciones que viven juntas en un mismo hábitat. Ecosistema:


es el conjunto de los organismos y de los componentes físicos y químicos del medio.

Los MOs también interaccionan con el medio ambiente de su hábitat y pueden modificarlo.

La comunidad en un hábitat determinado está definida en gran parte por las características
físicas y químicas de ese medio.

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Estas características pueden cambiar con el tiempo debido al metabolismo propio de los
organismos.

Los MOs son parte importante de los ecosistemas.

Con el tiempo un ecosistema microbiano puede cambiar gradualmente, tanto desde el punto
de vista físico como químico.

El oxígeno es un buen ejemplo.

El O 2 es un nutriente vital para algunos MOs mientras que es venenoso para otros.

La actividad de MOs aeróbicos al consumir en algunos casos el oxígeno puede cambiar el


hábitat a condiciones anóxicas y permitir de este modo el desarrollo de otros organismos
anaeróbicos que no lo podían hacer en un primer momento.

Hábitat de los microorganismos

Pueden encontrarse microorganismos vivos en una gran diversidad de hábitats, desde lo


más frío de lagunas saladas, en las aguas residuales de las regiones polares, hasta el agua
casi en ebullición de manantiales de aguas termales.
La superficie de las estructuras de los vegetales, como por ejemplo la de las hojas, la de
las flores, la de los frutos y, de modo especial, la de las raíces; así como la superficie externa
y el intestino de los animales, poseen una abundante microflora de bacterias, levaduras y
hongos filamentosos.

Microorganismos existentes en la atmosfera


Para algunos microorganismos, tal vez uno de los medios más hostiles sea la atmósfera.
Suspendido en el aire, el minúsculo propágulo microbiano puede ser sometido a
desecación, a los efectos perjudiciales de la energía radiante del sol y a la actividad química
del oxígeno. Algunos microorganismos mueren muy rápidamente cuando se hayan
suspendidos en el aire y aunque no son capaces de crecer y multiplicarse en la atmósfera,
los que sobreviven usan la turbulencia del aire como medio de dispersión.
 Bacterias transmitidas por el aire. Las bacterias se dispersan sobre las partículas de
polvo movidas por agentes físicos, sobre las diminutas gotitas de agua generadas por

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proceso que conduce a la formación de un aerosol y sobre las diminutas descamaciones


de la piel eliminadas continuamente por los animales o el hombre. Los mecanismos más
notorios de generación de aerosoles son la tos y el estornudo.
 Hongos transmitidos por el aire. Las esporas de algunos hongos se transmiten por el
aire del mismo modo que lo hacen las partículas de polvo seco por el viento. Las esporas
de Penicillium y de Aspergillus pueden llegan a todas partes de esta manera pasiva.

Microorganismos del suelo


El suelo es un reservorio de microorganismos. Asimismo, es un medio muy competitivo en
el que los parámetros físico-químicos pueden cambiar muy rápidamente. En respuesta a
esto, algunas bacterias y hongos del suelo producen estructuras resistentes, como son las
esporas de Bacillus y de Clostridium, capaces de soportar la desecación y una amplia
escala de fluctuaciones de la temperatura.

Microorganismos del agua


Tanto el agua dulce como el agua de mar contienen muchas especies de microorganismos
adaptadas a estos hábitats. Las bacterias que se aíslan en las aguas de los océanos
abiertos con frecuencia tienen una necesidad fisiológica de sal, crecen mejor a las
temperaturas relativamente bajas de los océanos y en el aspecto nutritivo están adaptadas
a la concentración relativamente baja de los compuestos orgánicos y nitrogenados
existentes en las citadas aguas.
Las bacterias marinas se suelen definir como organismos psicrófilos que para su
crecimiento óptimo necesitan cloruro sódico.
La superficie del pescado capturado en las aguas frías del mar abierto tendrá una flora
bacteriana que refleja su medio y de aquí que contendrá predominantemente especies
psicrófilas y psicrótrofas.
Cerca de las costas, los mares están afectados por aportes de microorganismos terrestres
y de microorganismos procedentes de las aguas dulces y por las actividades del hombre.
El mar se ha convertido en un vertedero normal de las aguas residuales y demás productos
de desecho a causa de la actividad humana.

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Algunos mariscos se alimentan filtrando las partículas procedentes de agua de mar. Si estas
aguas han sido contaminadas con aguas residuales, siempre existe el riesgo de que en
ellas existan organismos procedentes de individuos infectados.
El agua dulce también puede actuar como vehículo de bacterias, de protozoos y de virus
causantes de enfermedades por medio de su contaminación con efluentes de aguas
residuales que contengan materia fecal humana.

Microorganismos de las plantas


Los mohos especializados, las levaduras y las bacterias que viven como comensales
inofensivos sobre la superficie de las plantas jóvenes sanas, no suelen representar
problema alguno en la alteración de los alimentos vegetales después de la recolección,
pero, a medida que la planta madura, tanto la flora bacteriana como la fúngica cambian. El
número de bacterias pectinolíticas aumenta a medida que el tejido vegetal madura y un
gran número de especies de mohos son capaces de colonizar el material vegetal que
envejece.

Microorganismos de origen animal


 Piel. Las superficies externas de las personas y de los animales están expuestas al aire,
al suelo y al agua y de aquí que siempre exista la posibilidad de contaminación tanto de
los alimentos y del material que contacta con los alimentos como de las superficies que
contienen estos microorganismos ambientales, por contacto directo con la superficie de
los animales. Sin embargo, para la mayoría de los microorganismos, la superficie de la
piel no es un sitio favorable ya que suele estar seca y tiene un pH bajo debido a la
presencia de ácidos orgánicos secretados por algunos de los poros de la piel. Este
medio desfavorable garantiza que la mayoría de los microorganismos que llegan a la
piel no se multipliquen y con frecuencia mueran muy rápidamente. Estos organismos
son solo “temporales”.
La flora normal de la piel está dominada por bacterias gram positivas de los géneros
Staphylococcus, Corynebacterium y Propionibacterium.
 Fosas nasales y garganta. Las fosas nasales y la garganta son colonizadas por un
grupo diferente de microorganismos inofensivos, si bien, pueden causar enfermedad. El
Staphylococcus aureus es vehiculado en las mucosas de las fosas nasales por un
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porcentaje importante de la población humana y algunas cepas de esta especie pueden


producir una intoxicación alimentaria.

Ejemplos de comunidades microbianas

a) Micrografía de una comunidad bacteriana que se desarrolla en las profundidades de un


lago pequeño. Se muestran células de varios tamaños.

b) Comunidad microbiana en una muestra de sedimentos de aguas residuales. La muestra


se tiñó con una serie de colorantes, cada uno de ellos tiñe un grupo bacteriano diferente

La importancia de la vida microbiana:

-Número total de células microbianas en la Tierra (procariotas) es aproximadamente 5x1030


células.

-Cantidad total de C presente aproximadamente igual al de todas las plantas de la tierra


(biomasa).

Contenido de N y P, 10 veces mayor que la de toda la biomasa vegetal.

Implica que las células procarióticas constituyen la mayor porción de biomasa sobre la
Tierra y es la reserva de nutrientes esenciales para la vida.

La mayor parte de las células procarióticas se encuentra bajo la superficie en los ambientes
oceánicos y terrestres

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El impacto de los microorganismos sobre el hombre.

Hay que conocer cómo trabajan los MOs para diseñar metodologías tendientes a aumentar
los beneficios y disminuir los efectos perjudiciales.

Aunque muchos sólo consideran a los MOs en el contexto de las enfermedades infecciosas,
en realidad sólo unos cuantos causan enfermedades.

Los MOs afectan muchos aspectos de nuestras vidas, además de ser los agentes
etiológicos de enfermedades.

Microorganismos y agricultura:

Nuestros sistemas de agricultura dependen en general de las actividades microbianas como


es el caso de las leguminosas que viven en estrecha asociación con bacterias específicas
que forman estructuras llamadas nódulos en sus raíces donde fijan el N2 atmosférico el
cual es utilizado por las plantas para crecer.

Los microorganismos (MOs) son también esenciales en el proceso digestivo de los


rumiantes, como las vacas y las ovejas.

En el órgano especial llamado rumen las bacterias realizan el proceso digestivo.

Los MOs desempeñan funciones críticas en el reciclado de elementos importantes para la


nutrición vegetal, en particular del carbono, nitrógeno y azufre.

En el suelo y el agua los MOs convierten estos elementos en formas asimilables por las
plantas.

Los MOs también son causantes de enfermedades en plantas y en animales.

Microorganismos y alimentación

Los productos agrícolas o los animales deben llegar a los consumidores con calidad
sanitaria, de allí la importancia de los MOs en la industria alimentaria.

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El deterioro de alimentos por la actividad de los MOs ocasiona enormes pérdidas


económicas. Las industrias de enlatado, congelado y desecado de alimentos tienen por
finalidad evitar esto.

También son importante las enfermedades que pueden ser transmitidas a través de los
alimentos. Algunos alimentos requieren para su preparación la actividad de determinados
MOs.

Este es el caso de los productos lácteos que se manufacturan, como el queso, el yogurt o
la manteca.

Los alimentos de panadería se elaboran usando levaduras al igual que algunas bebidas
alcohólicas.

Microorganismos, energía y medio ambiente

Los MOs desempeñan funciones clave en lo que respecta a la energía. La mayor parte del
gas natural (metano) es un producto bacteriano, derivado de las actividades de las bacterias
metanogénicas.

Los MOs fotótrofos pueden utilizar la luz como fuente de energía para la formación de
biomasa, es decir la energía acumulada en forma de organismos vivos.

La biomasa microbiana y los desechos, como la basura doméstica, los excedentes de


cosechas y los residuos animales, se pueden convertir en “biocombustibles”, como el
metano y el etanol, por las actividades degradativas de los MOs.

Los MOs también pueden ayudar para eliminar la polución originada por las actividades
humanas, un proceso que se denomina biorremediación.

Esta área está en pleno desarrollo en la actualidad.

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Los microorganismos y el futuro

El uso de MOs genéticamente modificados para poder sintetizar productos específicos de


alto valor comercial dio origen a la Biotecnología.

La biotecnología depende en gran medida de la ingeniería genética, una disciplina que trata
de la manipulación artificial de genes y de sus productos.

También se pueden hacer genes completamente artificiales.

Una vez que se tiene el gen por síntesis o por selección a partir de una fuente natural, el
mismo se puede insertar en un MO y se puede expresar allí originando el producto génico
deseado.

Este es el caso de la insulina humana, hormona que se encuentra en cantidades


anormalmente bajas en sujetos con diabetes.

Esta hormona se prepara hoy en día a partir del gen de la insulina humana expresado en
un MO.

Influencia de los microorganismos en las actividades humanas

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Los microorganismos en la agricultura

Los microorganismos tienen un efecto benéfico y uno perjudicial este último debido a que
los microorganismos pueden causar efectos nocivos como ejemplo las enfermedades de
vegetales por microorganismos las cuales tienen consecuencias económicas importantes.
Benéficamente los microorganismos intervienen en los ciclos del N, C y S regulando las
concentraciones de estos elementos en el ambiente, algo indispensable para una zona
productivamente fértil. También intervienen en el tratamiento de aguas al transformar los
elementos mencionados a forma que sean fácilmente tomados por las plantas.
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Muchas de las cosechas que obtenemos son de plantas pertenecientes a las leguminosas
que viven estrechamente asociadas con un tipo de bacteria que forma en sus raíces
estructuras llamadas nódulos donde el nitrógeno molecular se convierte en compuestos
nitrogenados, algo indispensable para que la planta crezca.

Los microorganismos en la industria de alimentos

Los microorganismos son la principal causa del deterioro en los alimentos. Esto tiene una
gran importancia económica en las industrias alimentarias, en donde tratan de preparar los
alimentos de modo que no sufran deterioro por microorganismos (envasados, congelados,
secos, etc.). Aunque existen productos lácteos como el queso, yogurt y el suero de leche
que durante el proceso de manufactura intervienen actividades microbianas Otro ejemplo
es la levadura que se utiliza para la elaboración de pan o la levadura de las bebidas
alcohólicas saccharomyce cerevisiae.

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La detección de alimentos infectados con microorganismos patógenos o no para los


humanos es de gran utilidad al disminuir la probabilidad de que se disperse y propague.
Para lo que se utilizan métodos basados en el conocimiento sobre los microorganismos.

Los microorganismos, energía y medio ambiente.

Los microorganismos tienen una intervención importante en la obtención de energía por los
humanos. La mayor parte del gas natural (metano) que sirve como combustible primario en
las actividades humanas es un producto hecho por bacterias metanogenicas, junto con el
petróleo el cual también puede ser atacado por microorganismos, tanto en la perforación
como la recuperación y almacenaje del petróleo crudo debe ser en condiciones que
reduzcan al mínimo el daño causado por los microorganismos.

Los microorganismos fototróficos captan energía luminosa y la convierten en la producción


de biomasa. Esta es energía almacenada en organismos vivos. Esta es energía en
organismos vivos. Los desechos orgánicos pueden ser utilizados a nuestro beneficio solo
hay que encontrar la manera de hacerlo.

Los microorganismos en la medicina.

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Hace no mucho tiempo la mayor parte de las muertes se debían a enfermedades


infecciosas, por lo que el control de las enfermedades infecciosas ha sido resultado de un
conocimiento detallado del proceso de cada enfermedad, al aplicar practicas sanitarias al
igual que el uso de agentes anti microbianos gracias a su descubrimiento. Aunque las
enfermedades microbianas constituyen una de las principales causas de muerte en muchos
países en desarrollo, como la malaria, la tuberculosis, el cólera, la enfermedad del sueño o
enfermedades diarreicas severas. Uno de los logros más importantes es la erradicación de
la viruela como enfermedad mortal para una población como lo era antes.

Los microorganismos constituyen aún una amenaza seria para la humanidad, pero se debe
resaltar el hecho de que la mayor parte de los microorganismos no son perjudiciales para
el humano. Por ello pueden beneficiar más de lo que perjudican al tener un conocimiento
de cada uno de ellos. Aunque en lo personal creo que siempre habrá más por descubrir.

Los microorganismos y el futuro.

La biotecnología es una de las principales áreas del uso de microorganismos ya que lo hace
en procesos industriales a gran escala. La biotecnología es la aplicación de procedimientos
genéticos para crear nuevos microorganismos capaces de sintetizar productos específicos
de alto valor comercial. Aunque también se depende de la ingeniería genética la cual se
centra en la manipulación artificial de genes y sus productos.

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Los microorganismos como agentes etiológicos de enfermedades

Se estudió la frecuencia de las diez causas de muerte más usuales en USA en el año 1900
y en el año 2000 (Datos del Centro Nacional de Estadísticas de la salud de USA). En el año
1900 las enfermedades infecciosas eran las principales causas de muerte en USA. Hoy en
día son las minoritarias.

Sin embargo los MOs pueden ser aún un riesgo importante para la supervivencia por ej. en
pacientes inmunodeprimidos o con SIDA. Aún hoy las enfermedades microbianas
constituyen la principal causa de muerte en los países subdesarrollados.

La viruela se erradicó, pero aún continúa la malaria, tuberculosis, cólera, enfermedad del
sueño, síndromes diarreicos severos, etc.).

Viruela. Virus; malaria. Plasmodium (parasito); tuberculosis. Mycobacterium tuberculosis


(bacteria); cólera. Vibrio cholerae (bacteria); enfermedad del sueño. Trypanosoma brucei
(protozooario).

Frecuencia de las 10 causas más importantes de muertes en los EEUU

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Raíces históricas de la Microbiología

Se sospechaba que había criaturas demasiado pequeñas para ser percibidas a simple vista.

El desarrollo del microscopio permitió verlas. -1664 Robert Hooke describió los cuerpos
fructíferos de mohos. -1684 Antonie van Leeuwenhoek diseñó un microscopio de lente
simple y fue capaz de ver microorganismos tan pequeños como los procariotas. Lo
comunicó en la Royal Society of London.

En las figuras siguientes se muestran el microscopio utilizado por Robert Hooke, el


microscopio diseñado por Leeuwenhoek y dibujos de algunos organismos observados por
ambos.

Fotografía de una copia del microscopio de Leeuwenhoek

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Replica en bronce del microscopio de Leeuwenhoek. Se muestra también como se sostiene el mismo.

Dibujos de van Leeuwenhoek de bacterias publicados en 1684 a las que llamó


“animálculos”. Podemos reconocer varios tipos morfológicos de bacterias comunes. A, C, F
y G formas bacilares; E formas esféricas o cocos; H grupos de cocos.

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Recién en el siglo XIX se contó con una amplia distribución de microscopios mejorados.

La microbiología como ciencia se desarrolló a fines del siglo XIX con el desarrollo del
microscopio y de técnicas básicas de laboratorio para el estudio de microorganismos.

-Microscopios mejorados

-Distintas técnicas de tinción de microorganismos

-Esterilización

-Cultivos de enriquecimiento o cultivos selectivos

-Medios sólidos con gel o agar

-Cajas de Petri
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-Tapones de algodón

El botánico Ferdinand Cohn (1828-1898) fundó la bacteriología (el estudio de las bacterias).

Descubrió las endosporas estudiando el género Bacillus.

Cohn describió el ciclo de vida completo de Bacillus.

Descubrió que por ebullición solo morían las células vegetativas.

Cohn aportó las bases experimentales para un esquema de clasificación de bacterias y


fundó una revista científica importante.

Ideó métodos simples para evitar la contaminación de medios de cultivo estériles, como el
uso de matraces y algodón para cerrar los tubos.

Estos métodos fueron utilizados posteriormente por Koch permitiéndole aislar y caracterizar
varias bacterias causantes de enfermedades.

Pasteur y el fin de la generación espontánea:

 Pasteur demostró primero que existen en el aire estructuras muy similares a las
encontradas en las sustancias putrefactas.
 Concluyó que los microorganismos se originan a partir de MOs presentes en el aire.
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 Postuló que dichas células en suspensión se depositaban constantemente sobre


todos los objetos.
 Si esto era correcto, entonces no debería estropearse un alimento tratado de tal
modo que todos los organismos que lo contaminaran fueran destruidos.
 Pasteur empleó calor para eliminar los contaminantes.
 Tomó un matraz de vidrio con los nutrientes, lo selló, lo calentó a ebullición y observó
que nunca se descomponía el medio de cultivo.

Los defensores de la generación espontánea criticaron el experimento argumentando que


hacía falta aire fresco y que el aire caliente se modificaba. Pasteur entonces modificó el
experimento utilizando un matraz de vidrio de cuello de cisne.

Experimento de Pasteur con matraces de cuello de cisne

Esterilización del contenido del matraz.

Si el matraz se mantiene en posición vertical no hay crecimiento microbiano.

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Si los microorganismos atrapados en el cuello alcanzan el líquido estéril, crecen


rápidamente.

Los principios de Pasteur se utilizaron en el envasado y conservación de alimentos.

Pasteur desarrolló vacunas para enfermedades como el carbunco, el cólera aviar y la rabia
(1880-1890). Carbunco (Antrax), Bacillus anthracis; cólera aviar, bacilo; rabia, virus).

Koch y la teoría microbiana de las enfermedades infecciosas. Siglo XIX:

Se sospechaba que los MOs podrían ser los responsables de enfermedades, pero faltaban
las pruebas definitivas. MOs → ¿causa o efecto de las enfermedades?

La teoría microbiana de las enfermedades infecciosas fue probada por el médico Robert
Koch (1843-1910).

Koch estudió el carbunco, enfermedad causada por la bacteria Bacillus anthracis formadora
de endoesporas.

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Sus estudios dieron origen a los postulados de Koch que demostraron que un tipo concreto
de MO es el agente etiológico de una enfermedad específica. Por estudios cuidadosos de
microscopía demostró que:

1- La bacteria B. anthracis estaba presente en la sangre de todos los animales enfermos y


no así en los sanos, pero la mera asociación de la bacteria con la enfermedad no
demostraba que la bacteria fuera la causa de la enfermedad, por el contrario, podría ser un
efecto de la enfermedad.

Koch demostró que la enfermedad podía ser transmitida de un animal enfermo a uno sano
inyectando una pequeña cantidad de sangre.

Esto lo podía repetir en otro ratón y así sucesivamente.

En todos los casos podía demostrar por microscopía en muestras de sangre de los animales
enfermos la presencia de las bacterias formadoras de esporas características.

Koch pudo además cultivar el MO fuera del animal en caldos nutritivos e incluso luego de
numerosas resiembras o transferencias de cultivo, la bacteria podía causar aún la
enfermedad cuando se reinoculaba a un animal.

Es decir, la bacteria procedente de un animal enfermo y la mantenida en cultivo inducían


los mismos síntomas de enfermedad tras su inoculación.

Basándose en éste y en otros experimentos, Koch formuló los siguientes criterios,


conocidos en la actualidad como postulados de Koch para demostrar que un tipo concreto
de MO es el agente etiológico de una enfermedad.

Postulados de Koch:

1- El organismo debe estar siempre en los animales que sufren la enfermedad y no en


individuos sanos.

2- El organismo debe cultivarse en cultivo axénico o puro fuera del cuerpo del animal.

3- Cuando dicho MO se inocula a un animal susceptible, debe iniciar en él los síntomas


característicos de la enfermedad.

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4- El organismo debe aislarse nuevamente de estos animales experimentales y cultivarse


nuevamente en el laboratorio, tras lo cual debe mostrar las mismas propiedades que el MO
original.

Los postulados se resumen en la siguiente figura.

Usando estos postulados como guía otros investigadores revelaron la causa de muchas
enfermedades importantes para el hombre y para los animales.

Medios sólidos, la placa de Petri y los cultivos puros Koch fue el primero que cultivó
bacterias en medios de cultivo sólidos.

Empleó gelatina como agente solidificante de diversos caldos nutritivos que usaba para
cultivar bacterias patógenas.

Fue reemplazado más tarde por el agar (polisacárido derivado de algas rojas) que es más
versátil y permite utilizar temperaturas más elevadas de incubación. El primer uso del agar
como agente solidificante se debe a Walter Hesse.

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La técnica utilizando agar fue adoptada por Koch para sus estudios clásicos sobre el
aislamiento de la bacteria Mycobacterium tuberculosis, agente etiológico de la tuberculosis.
En 1887 Richard Petri publicó un trabajo corto describiendo una modificación de las
técnicas de láminas horizontales de Koch. La mejora de Petri resultó ser enormemente útil.

Las ventajas de las cajas de Petri:

-Fácilmente almacenadas y esterilizadas independientemente del medio.

- Luego de añadir el medio fundido a la más pequeña de las dos tapaderas circulares, la de
mayor tamaño podía usarse como tapa para evitar contaminaciones.

-Las colonias que se formaban en la superficie del agar quedaban expuestas al aire y
podían ser fácilmente manipuladas para su estudio.

Las cajas de Petri ya sea de vidrio o de plástico son utilizadas en la actualidad y constituyen
una de las principales herramientas en los laboratorios de microbiología, junto con los
microscopios, las técnicas de tinción, los medios de enriquecimiento, los tapones de
algodón, los cultivos axénicos, etc.

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Transferencia aséptica (A) y Método para hacer una extensión en placa para obtener
cultivos axénicos o puros (B).

Colonias de Micrococcus luteus cultivadas en placas de agar sangre.

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Variaciones en la morfología de una colonia vista a simple vista

Koch observó que sobre el medio sólido expuesto a contaminantes se desarrollaban


colonias con formas diferentes (diferían en color, forma, tamaño u otros caracteres) y que
tales colonias se podían perpetuar y diferenciar entre sí por sus características particulares.

Las células de diferentes colonias diferían microscópicamente y a menudo también en sus


temperaturas óptimas de crecimiento o en sus requerimientos nutricionales.

Koch señaló que “toda bacteria que mantenga las características que la diferencian de
otras, cuando se cultivan en el mismo medio y bajo las mismas condiciones, debería ser
designada como especie, variedad, forma o cualquier otra designación adecuada”.

Los trabajos de Koch permitieron que la microbiología fuera aceptada como una ciencia
biológica independiente.

Koch y la tuberculosis:

El mayor logro de Koch en la bacteriología médica está relacionado con la tuberculosis.

Para aislar el agente causante de la enfermedad Koch empleó todos los métodos que se
habían desarrollado previamente: microscopía, tinción de tejidos, aislamiento en cultivo
puro e inoculación en animales.

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Diseñó un método de tinción en muestras de tejido usando azul de metileno alcalino y un


segundo colorante (marrón de Bismark) que teñía solo el tejido.

El método de Koch fue el precursor del método de Ziehl-Nielsen usado hoy para teñir
bacterias ácido-alcohol resistente como el Mycobacterium tuberculosis.

Para la obtención de cultivos de M. tuberculosis se utilizó suero de sangre coagulada. Koch


pudo obtener cultivos de este MO a partir de diversas fuentes de origen humano y de
animales.

Con el MO aislado pudo demostrar que era el causante de la tuberculosis.

Koch recibió el Premio Nobel de fisiología y medicina en 1905.

Dibujos de Koch de células de Mycobacterium tuberculosis:

a) Sección transversal de un tubérculo en tejido pulmonar. Las células de Mycobacterium


tuberculosis se tiñen en azul mientras que las del tejido pulmonar se tiñen en marrón.

b) Células de M. tuberculosis en esputo de paciente tuberculoso

c) Crecimiento en cultivo puro de M. tuberculosis en placa de vidrio con suero sanguíneo


coagulado.

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d) Se tomó una colonia de la placa anterior y se observó al microscopio a 700 aumentos.


Las células aparecen formando largas “cuerdas”.

Diversidad microbiana

El holandés Martinus Beijerinck y el ruso Sergei Winogradsky fueron microbiólogos pioneros


en el estudio de las bacterias del suelo y del agua y se destacaron por sus importantes
contribuciones al conocimiento de la diversidad microbiana. Beijerinck: formulación de
cultivos de enriquecimiento o cultivos selectivos para aislar microorganismos específicos
relacionados fisiológicamente a partir de muestras naturales.

Beijerinck aisló los primeros cultivos puros de muchos MOs del suelo y del agua (bacterias
aerobias fijadoras de N 2 como el Azotobacter, reductoras del SO 4 =, oxidantes del azufre,
bacterias fijadoras de N2 en los nódulos radiculares, especies de Lactobacillus, algas
verdes, etc.)

Dibujo realizado por la hermana de Beijerinck mostrando células de Azotobacter


chroococcum, bacteria aerobia fijadora de N 2.

Este dibujo era usado para dar clases en una época en que no existían transparencias,
diapositivas y cañones de proyección con computadora

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Beijerinck describió los principios básicos de la virología:

En sus estudios sobre la enfermedad del mosaico en el tabaco puso de manifiesto,


mediante el uso de técnicas de filtración selectiva, que el agente infeccioso (un virus) no
era una bacteria y que se incorporaba a las células de la planta y necesitaba que ésta
estuviera viva para reproducirse.

Winogradsky logró aislar por primera vez varias bacterias importantes del suelo, en
particular las implicadas en los ciclos del nitrógeno y del azufre, por ej.

Las bacterias nitrificantes (oxidación de NH3 a NO3-), bacterias oxidantes del azufre.

Postuló el concepto de quimiolitotrofía, es decir, la oxidación de compuestos inorgánicos


acoplada a la liberación de energía utilizable.

Demostró que las bacterias nitrificantes obtenían su carbono del CO2 del aire, es decir que
eran autótrofos.

Dibujos coloreados a mano de células de bacterias fotosintéticas rojas del azufre incluidas
en la monografía Microbiology du Sol, de Sergei Winogradsky.

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Se muestran células del género Chromatium, como C. kenii (Fig. 3 y 4) y de C. vinosum (Fig. 5-8).

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Subdisciplinas más importantes de la microbiología

 Microbiología médica e inmunología


 Microbiología agrícola
 Citología
 Microbiología industrial
 Bioquímica microbiana
 Microbiología acuática
 Genética bacteriana
 Ecología microbiana
 Biología molecular
 Sistemática bacteriana
 Bacteriólogos (virus)
 Fisiología bacteriana
 Biotecnología

Desarrollo de las subdisciplinas más importantes de la microbiología

Desarrollo rápido de la microbiología → Básica y aplicada

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1- Trabajos de Koch → expansión de la microbiología médica y de la inmunología (en la


primera parte del siglo)

-Descubrimiento de muchas bacterias patógenas nuevas.

-Establecimiento de los principios por los cuales estos patógenos infectan el cuerpo y se
hacen resistentes a sus defensas.

2-Avances prácticos en el campo de la microbiología agrícola

-Impulsores fueron Beijerinck y Winogradsky -Comprensión de los procesos microbianos


en el suelo.

Son beneficiosos o perjudiciales para el crecimiento de las plantas.

3- Se abrió el uso de los MOs para la obtención de productos industriales (síntesis de


antibióticos, etc.) y dio origen a la microbiología industrial luego de la segunda guerra
mundial.

4- Microbiología acuática. Tratamiento de aguas residuales, suministro de agua potable


para uso humano.

5- Ecología microbiana.

Biodiversidad, actividades de los MOs en su hábitat.

Los conocimientos de los principios básicos de la función microbiana permitió descubrir y


clasificar muchas clase de MOs nuevos dando origen a la extensión de la

6-Sistemática bacteriana.

7- Fisiología microbiana. Estudio de los nutrientes que requieren los MOs y productos que
se originan.

8- Citología. Conocimiento de la estructura física y química de los MOs.

9- Bioquímica. Metabolismo, enzimas y reacciones que llevan a cabo los MOs.

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10- Genética bacteriana. Herencia, variación genética, intercambio genético. Conocimiento


del DNA, RNA, síntesis de proteínas.

11- Bacteriófagos. Estudio de los virus. Analogía con la transferencia genética.

12- Biotecnología

13- Análisis genómico. Relaciones evolutivas.

14- Microbiología industrial.

La vida con RNA

Las moléculas de RNA habrían funcionado con el fin exclusivo de replicarse a sí mismas y,
probablemente, habrían llevado a cabo un número mínimo de reacciones catalíticas
necesarias para esta finalidad.

Estudios derivados de varias ribozimas catalíticas de RNA han demostrado que pueden
catalizar varias reacciones, tales como la síntesis de nucleótidos. Así, un período de vida
con RNA podría haber precedido a la vida celular. Estas formas de vida con RNA podrían
haber evolucionado hacia las primeras formas de vida celulares, cuando el RNA
autorreplicativo quedara encerrado en vesículas de lipoproteína.

Estas estructuras parecidas a las células podrían haber surgido mediante la agregación
espontánea de moléculas de lípidos y de proteínas para formar estructuras membranosas
en cuyo interior quedaron atrapados los RNA y otros precursores de biomoléculas clave.

Esta etapa pudo haber ocurrido un sinnúmero de veces en la Tierra primitiva para volver a
extinguirse, pero finalmente, los constituyentes apropiados y las circunstancias adecuadas
coincidieron y surgió un organismo celular primitivo.

Aunque carecía de DNA y procesaba tan sólo proteínas producidas abióticamente, esta
forma de vida celular se asemejaría en otros aspectos a una célula moderna.

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A medida que estas formas de vida se extendían, la selección natural las conduciría hacia
su posterior desarrollo evolutivo.

Escenificación hipotética de la evolución de las formas de vida celulares a partir de las


formas de vida con RNA.

Los RNAs autorreplicativos podrían haber llegado a ser entidades celulares mediante su
integración estable en vesículas de lipoproteína.

Con el tiempo, las proteínas reemplazaron las funciones catalíticas del RNA y el DNA
reemplazó sus funciones de codificación

Las proteínas muestran un grado de especificidad catalítica mucho mayor que el que
poseen los RNAs catalíticos.

A medida que los organismos primitivos se hicieron bioquímicamente más complejos, se


produjo una presión evolutiva hacia la utilización de las proteínas como principales agentes
biocatalíticos.

La célula moderna: DNA → RNA → Proteína


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El establecimiento del DNA como genoma de la célula pudo ser una consecuencia de la
presión evolutiva hacia una mayor eficacia y fidelidad en la replicación de la información
genética (las DNA polimerasa son más precisas que las RNA polimerasas).

Además, al guardar toda la información genética en un lugar en la célula y procesar


solamente la que se necesita bajo unas determinadas condiciones (al regular la expresión
génica), las células habrían ahorrado energía, lo que incrementaría su adecuación
competitiva.

De alguna manera, en los estadios tempranos de la evolución microbiana, el sistema


tripartito DNA-RNA-proteína quedó fijado en las formas de vida celulares como la mejor
solución al procesamiento de la información biológica.

A juzgar por las células actuales, este sistema fue un éxito evolutivo: todas las células
conocidas contienen estos tres tipos de macromoléculas.

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