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Módulo 2
Los virus
No son células
No son sistemas abiertos dinámicos
Son estructuras estáticas y muy estables
Incapaz de cambiar o reponer estructuras por si mismos
Necesitan de la maquinaria de la célula para replicarse y para sintetizar sus
proteínas
No tienen metabolismo propio
No tienen aparato de traducción
Son mucho más pequeños que las células
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Se descubrió luego que todos los organismos vivos se podían dividir en dos tipos celulares
distintos (procariotes y eucariotes) con base en diferencias fundamentales en la estructura
celular.
Todos los animales y plantas son eucariotes, como lo son tres grupos importantes de
microorganismos: algas, hongos y protozoos.
De estos estudios surgen tres linages celulares evolutivamente distintos, dos de los cuales
son procariotes en estructura y uno es eucariote.
A estos grupos se les dio el nombre de Bacteria, Archaea y Eukarya. Todos estos grupos
se piensa que vienen de un ancestro común o “ancestro universal”.
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Los procariotas comprenden las Bacteria y las Archaea. Bacteria y Archaea comparten
estructura celular, pero se diferencian mucho por su historia evolutiva o filogenia.
Más aún, las especies de Archaea están más relacionadas con los eucariotas que con las
especies del dominio Bacteria.
Este hecho ha sido ratificado por estudios comparativos realizados con otras
macromoléculas de especies de los tres dominios.
Por lo tanto, la diversificación evolutiva, a partir del ancestro común fue en dos direcciones,
hacia Bacteria y hacia otra cosa que finalmente se diversificó dando origen a los dominios
Archaea y Eukarya.
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Árbol filogenético de la vida construido a partir de la comparación de las secuencias del RNA ribosómico.
El árbol está formado por tres dominios de organismos: Bacteria y Archaea, que presentas
células procarióticas, y Eukarya (células eucarióticas).
El grupo en rosa son macro organismos, el resto de los organismos son microorganismos.
Como todas las células de los animales y plantas son eucarióticas, se deduce que los
microorganismos eucarióticos fueron los precursores de los organismos pluricelulares.
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b) Se aísla el gen que codifica el RNA ribosómico y se amplifica el número de copias por la
técnica de PCR (reacción en cadena de la polimerasa);
c) El gen es secuenciado;
(e) Que refleja las diferencias en la secuencia del RNA ribosómico del organismo analizado.
Si en el análisis se usa una muestra natural, los genes del RNA ribosómico aislados de los
diferentes organismos de una muestra deben ser clonados antes de ser amplificados y
secuenciados.
Los microbiólogos usan el sistema de nomenclatura binomial desarrollado por Linneo para
plantas y animales.
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Por ej. Escherichia coli, Brucella abortus, Brucella melitensis, Brucella suis, Agrobacterium
tumefaciens, Agrobacterium rhizogenes, Bacillus anthracis, Bacillus subtilis, Sinorhizobium
meliloti, etc.
En general, los nombres derivan del latín o griego latinizado que describen alguna
propiedad típica de la especie y se escriben en letras itálicas o cursivas. Por ej. Se han
descripto más de 100 especies diferentes del género Bacillus, tales como Bacillus (B.)
subtilis, B. cereus y B. tearothermophilus.
Estos nombres específicos significan “fino”, “ceroso” y “amante del calor”. En general
describen las características morfológicas, fisiológicas o ecológicas importantes de c/u.
Los MOs también interaccionan con el medio ambiente de su hábitat y pueden modificarlo.
La comunidad en un hábitat determinado está definida en gran parte por las características
físicas y químicas de ese medio.
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Estas características pueden cambiar con el tiempo debido al metabolismo propio de los
organismos.
Con el tiempo un ecosistema microbiano puede cambiar gradualmente, tanto desde el punto
de vista físico como químico.
El O 2 es un nutriente vital para algunos MOs mientras que es venenoso para otros.
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Algunos mariscos se alimentan filtrando las partículas procedentes de agua de mar. Si estas
aguas han sido contaminadas con aguas residuales, siempre existe el riesgo de que en
ellas existan organismos procedentes de individuos infectados.
El agua dulce también puede actuar como vehículo de bacterias, de protozoos y de virus
causantes de enfermedades por medio de su contaminación con efluentes de aguas
residuales que contengan materia fecal humana.
Implica que las células procarióticas constituyen la mayor porción de biomasa sobre la
Tierra y es la reserva de nutrientes esenciales para la vida.
La mayor parte de las células procarióticas se encuentra bajo la superficie en los ambientes
oceánicos y terrestres
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Hay que conocer cómo trabajan los MOs para diseñar metodologías tendientes a aumentar
los beneficios y disminuir los efectos perjudiciales.
Aunque muchos sólo consideran a los MOs en el contexto de las enfermedades infecciosas,
en realidad sólo unos cuantos causan enfermedades.
Los MOs afectan muchos aspectos de nuestras vidas, además de ser los agentes
etiológicos de enfermedades.
Microorganismos y agricultura:
En el suelo y el agua los MOs convierten estos elementos en formas asimilables por las
plantas.
Microorganismos y alimentación
Los productos agrícolas o los animales deben llegar a los consumidores con calidad
sanitaria, de allí la importancia de los MOs en la industria alimentaria.
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También son importante las enfermedades que pueden ser transmitidas a través de los
alimentos. Algunos alimentos requieren para su preparación la actividad de determinados
MOs.
Este es el caso de los productos lácteos que se manufacturan, como el queso, el yogurt o
la manteca.
Los alimentos de panadería se elaboran usando levaduras al igual que algunas bebidas
alcohólicas.
Los MOs desempeñan funciones clave en lo que respecta a la energía. La mayor parte del
gas natural (metano) es un producto bacteriano, derivado de las actividades de las bacterias
metanogénicas.
Los MOs fotótrofos pueden utilizar la luz como fuente de energía para la formación de
biomasa, es decir la energía acumulada en forma de organismos vivos.
Los MOs también pueden ayudar para eliminar la polución originada por las actividades
humanas, un proceso que se denomina biorremediación.
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La biotecnología depende en gran medida de la ingeniería genética, una disciplina que trata
de la manipulación artificial de genes y de sus productos.
Una vez que se tiene el gen por síntesis o por selección a partir de una fuente natural, el
mismo se puede insertar en un MO y se puede expresar allí originando el producto génico
deseado.
Esta hormona se prepara hoy en día a partir del gen de la insulina humana expresado en
un MO.
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Los microorganismos tienen un efecto benéfico y uno perjudicial este último debido a que
los microorganismos pueden causar efectos nocivos como ejemplo las enfermedades de
vegetales por microorganismos las cuales tienen consecuencias económicas importantes.
Benéficamente los microorganismos intervienen en los ciclos del N, C y S regulando las
concentraciones de estos elementos en el ambiente, algo indispensable para una zona
productivamente fértil. También intervienen en el tratamiento de aguas al transformar los
elementos mencionados a forma que sean fácilmente tomados por las plantas.
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Muchas de las cosechas que obtenemos son de plantas pertenecientes a las leguminosas
que viven estrechamente asociadas con un tipo de bacteria que forma en sus raíces
estructuras llamadas nódulos donde el nitrógeno molecular se convierte en compuestos
nitrogenados, algo indispensable para que la planta crezca.
Los microorganismos son la principal causa del deterioro en los alimentos. Esto tiene una
gran importancia económica en las industrias alimentarias, en donde tratan de preparar los
alimentos de modo que no sufran deterioro por microorganismos (envasados, congelados,
secos, etc.). Aunque existen productos lácteos como el queso, yogurt y el suero de leche
que durante el proceso de manufactura intervienen actividades microbianas Otro ejemplo
es la levadura que se utiliza para la elaboración de pan o la levadura de las bebidas
alcohólicas saccharomyce cerevisiae.
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Los microorganismos tienen una intervención importante en la obtención de energía por los
humanos. La mayor parte del gas natural (metano) que sirve como combustible primario en
las actividades humanas es un producto hecho por bacterias metanogenicas, junto con el
petróleo el cual también puede ser atacado por microorganismos, tanto en la perforación
como la recuperación y almacenaje del petróleo crudo debe ser en condiciones que
reduzcan al mínimo el daño causado por los microorganismos.
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Los microorganismos constituyen aún una amenaza seria para la humanidad, pero se debe
resaltar el hecho de que la mayor parte de los microorganismos no son perjudiciales para
el humano. Por ello pueden beneficiar más de lo que perjudican al tener un conocimiento
de cada uno de ellos. Aunque en lo personal creo que siempre habrá más por descubrir.
La biotecnología es una de las principales áreas del uso de microorganismos ya que lo hace
en procesos industriales a gran escala. La biotecnología es la aplicación de procedimientos
genéticos para crear nuevos microorganismos capaces de sintetizar productos específicos
de alto valor comercial. Aunque también se depende de la ingeniería genética la cual se
centra en la manipulación artificial de genes y sus productos.
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Se estudió la frecuencia de las diez causas de muerte más usuales en USA en el año 1900
y en el año 2000 (Datos del Centro Nacional de Estadísticas de la salud de USA). En el año
1900 las enfermedades infecciosas eran las principales causas de muerte en USA. Hoy en
día son las minoritarias.
Sin embargo los MOs pueden ser aún un riesgo importante para la supervivencia por ej. en
pacientes inmunodeprimidos o con SIDA. Aún hoy las enfermedades microbianas
constituyen la principal causa de muerte en los países subdesarrollados.
La viruela se erradicó, pero aún continúa la malaria, tuberculosis, cólera, enfermedad del
sueño, síndromes diarreicos severos, etc.).
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Se sospechaba que había criaturas demasiado pequeñas para ser percibidas a simple vista.
El desarrollo del microscopio permitió verlas. -1664 Robert Hooke describió los cuerpos
fructíferos de mohos. -1684 Antonie van Leeuwenhoek diseñó un microscopio de lente
simple y fue capaz de ver microorganismos tan pequeños como los procariotas. Lo
comunicó en la Royal Society of London.
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Replica en bronce del microscopio de Leeuwenhoek. Se muestra también como se sostiene el mismo.
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Recién en el siglo XIX se contó con una amplia distribución de microscopios mejorados.
La microbiología como ciencia se desarrolló a fines del siglo XIX con el desarrollo del
microscopio y de técnicas básicas de laboratorio para el estudio de microorganismos.
-Microscopios mejorados
-Esterilización
-Cajas de Petri
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-Tapones de algodón
El botánico Ferdinand Cohn (1828-1898) fundó la bacteriología (el estudio de las bacterias).
Ideó métodos simples para evitar la contaminación de medios de cultivo estériles, como el
uso de matraces y algodón para cerrar los tubos.
Estos métodos fueron utilizados posteriormente por Koch permitiéndole aislar y caracterizar
varias bacterias causantes de enfermedades.
Pasteur demostró primero que existen en el aire estructuras muy similares a las
encontradas en las sustancias putrefactas.
Concluyó que los microorganismos se originan a partir de MOs presentes en el aire.
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Pasteur desarrolló vacunas para enfermedades como el carbunco, el cólera aviar y la rabia
(1880-1890). Carbunco (Antrax), Bacillus anthracis; cólera aviar, bacilo; rabia, virus).
Se sospechaba que los MOs podrían ser los responsables de enfermedades, pero faltaban
las pruebas definitivas. MOs → ¿causa o efecto de las enfermedades?
La teoría microbiana de las enfermedades infecciosas fue probada por el médico Robert
Koch (1843-1910).
Koch estudió el carbunco, enfermedad causada por la bacteria Bacillus anthracis formadora
de endoesporas.
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Sus estudios dieron origen a los postulados de Koch que demostraron que un tipo concreto
de MO es el agente etiológico de una enfermedad específica. Por estudios cuidadosos de
microscopía demostró que:
Koch demostró que la enfermedad podía ser transmitida de un animal enfermo a uno sano
inyectando una pequeña cantidad de sangre.
En todos los casos podía demostrar por microscopía en muestras de sangre de los animales
enfermos la presencia de las bacterias formadoras de esporas características.
Koch pudo además cultivar el MO fuera del animal en caldos nutritivos e incluso luego de
numerosas resiembras o transferencias de cultivo, la bacteria podía causar aún la
enfermedad cuando se reinoculaba a un animal.
Postulados de Koch:
2- El organismo debe cultivarse en cultivo axénico o puro fuera del cuerpo del animal.
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Usando estos postulados como guía otros investigadores revelaron la causa de muchas
enfermedades importantes para el hombre y para los animales.
Medios sólidos, la placa de Petri y los cultivos puros Koch fue el primero que cultivó
bacterias en medios de cultivo sólidos.
Empleó gelatina como agente solidificante de diversos caldos nutritivos que usaba para
cultivar bacterias patógenas.
Fue reemplazado más tarde por el agar (polisacárido derivado de algas rojas) que es más
versátil y permite utilizar temperaturas más elevadas de incubación. El primer uso del agar
como agente solidificante se debe a Walter Hesse.
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La técnica utilizando agar fue adoptada por Koch para sus estudios clásicos sobre el
aislamiento de la bacteria Mycobacterium tuberculosis, agente etiológico de la tuberculosis.
En 1887 Richard Petri publicó un trabajo corto describiendo una modificación de las
técnicas de láminas horizontales de Koch. La mejora de Petri resultó ser enormemente útil.
- Luego de añadir el medio fundido a la más pequeña de las dos tapaderas circulares, la de
mayor tamaño podía usarse como tapa para evitar contaminaciones.
-Las colonias que se formaban en la superficie del agar quedaban expuestas al aire y
podían ser fácilmente manipuladas para su estudio.
Las cajas de Petri ya sea de vidrio o de plástico son utilizadas en la actualidad y constituyen
una de las principales herramientas en los laboratorios de microbiología, junto con los
microscopios, las técnicas de tinción, los medios de enriquecimiento, los tapones de
algodón, los cultivos axénicos, etc.
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Transferencia aséptica (A) y Método para hacer una extensión en placa para obtener
cultivos axénicos o puros (B).
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Koch señaló que “toda bacteria que mantenga las características que la diferencian de
otras, cuando se cultivan en el mismo medio y bajo las mismas condiciones, debería ser
designada como especie, variedad, forma o cualquier otra designación adecuada”.
Los trabajos de Koch permitieron que la microbiología fuera aceptada como una ciencia
biológica independiente.
Koch y la tuberculosis:
Para aislar el agente causante de la enfermedad Koch empleó todos los métodos que se
habían desarrollado previamente: microscopía, tinción de tejidos, aislamiento en cultivo
puro e inoculación en animales.
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El método de Koch fue el precursor del método de Ziehl-Nielsen usado hoy para teñir
bacterias ácido-alcohol resistente como el Mycobacterium tuberculosis.
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Diversidad microbiana
Beijerinck aisló los primeros cultivos puros de muchos MOs del suelo y del agua (bacterias
aerobias fijadoras de N 2 como el Azotobacter, reductoras del SO 4 =, oxidantes del azufre,
bacterias fijadoras de N2 en los nódulos radiculares, especies de Lactobacillus, algas
verdes, etc.)
Este dibujo era usado para dar clases en una época en que no existían transparencias,
diapositivas y cañones de proyección con computadora
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Winogradsky logró aislar por primera vez varias bacterias importantes del suelo, en
particular las implicadas en los ciclos del nitrógeno y del azufre, por ej.
Las bacterias nitrificantes (oxidación de NH3 a NO3-), bacterias oxidantes del azufre.
Demostró que las bacterias nitrificantes obtenían su carbono del CO2 del aire, es decir que
eran autótrofos.
Dibujos coloreados a mano de células de bacterias fotosintéticas rojas del azufre incluidas
en la monografía Microbiology du Sol, de Sergei Winogradsky.
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Se muestran células del género Chromatium, como C. kenii (Fig. 3 y 4) y de C. vinosum (Fig. 5-8).
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-Establecimiento de los principios por los cuales estos patógenos infectan el cuerpo y se
hacen resistentes a sus defensas.
5- Ecología microbiana.
6-Sistemática bacteriana.
7- Fisiología microbiana. Estudio de los nutrientes que requieren los MOs y productos que
se originan.
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12- Biotecnología
Las moléculas de RNA habrían funcionado con el fin exclusivo de replicarse a sí mismas y,
probablemente, habrían llevado a cabo un número mínimo de reacciones catalíticas
necesarias para esta finalidad.
Estudios derivados de varias ribozimas catalíticas de RNA han demostrado que pueden
catalizar varias reacciones, tales como la síntesis de nucleótidos. Así, un período de vida
con RNA podría haber precedido a la vida celular. Estas formas de vida con RNA podrían
haber evolucionado hacia las primeras formas de vida celulares, cuando el RNA
autorreplicativo quedara encerrado en vesículas de lipoproteína.
Estas estructuras parecidas a las células podrían haber surgido mediante la agregación
espontánea de moléculas de lípidos y de proteínas para formar estructuras membranosas
en cuyo interior quedaron atrapados los RNA y otros precursores de biomoléculas clave.
Esta etapa pudo haber ocurrido un sinnúmero de veces en la Tierra primitiva para volver a
extinguirse, pero finalmente, los constituyentes apropiados y las circunstancias adecuadas
coincidieron y surgió un organismo celular primitivo.
Aunque carecía de DNA y procesaba tan sólo proteínas producidas abióticamente, esta
forma de vida celular se asemejaría en otros aspectos a una célula moderna.
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A medida que estas formas de vida se extendían, la selección natural las conduciría hacia
su posterior desarrollo evolutivo.
Los RNAs autorreplicativos podrían haber llegado a ser entidades celulares mediante su
integración estable en vesículas de lipoproteína.
Con el tiempo, las proteínas reemplazaron las funciones catalíticas del RNA y el DNA
reemplazó sus funciones de codificación
Las proteínas muestran un grado de especificidad catalítica mucho mayor que el que
poseen los RNAs catalíticos.
El establecimiento del DNA como genoma de la célula pudo ser una consecuencia de la
presión evolutiva hacia una mayor eficacia y fidelidad en la replicación de la información
genética (las DNA polimerasa son más precisas que las RNA polimerasas).
A juzgar por las células actuales, este sistema fue un éxito evolutivo: todas las células
conocidas contienen estos tres tipos de macromoléculas.
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