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2. Material: Microscopio compuesto (se conoce como microscopio óptico), Estereoscopio, laminillas,
portaobjetos
Muestras: Recorte de papel de 2 X 2 cm., recorte de periódico 2 X 2 cm (De diferentes tamaños de
letras y colores, traer varias muestras, mínimo 5), escarcha de colores (mínimo 2 colores), un pedazo
de tela de 2 X 2 cm (Varios colores, mínimo 3 muestras), insectos que estén disecados, roca
(pequeña), muestras libres (Mínimo 5).
3. Marco Teórico
•El sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las lentes,
que permiten el movimiento para el enfoque.
•El sistema óptico comprende un conjunto de lentes, dispuestas de tal manera que
producen el aumento de las imágenes que se observan a través de ellas.
•E l s i s t e m a d e i l u m i n a c i ó n c o m p r e n d e l a s p a r t e s d e l m i c r o s c o p i o q u e
r e f l e j a n , transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a través del
microscopio.
•El pie: Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general
forma de Y o bien es rectangular.
•La columna o brazo: llamada también asa, es una pieza en forma de C, unida a la base por su
parte inferior mediante una charnela, permitiendo la inclinación del tubo para mejorar la captación de
luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se
adapta al pie.
•El tubo: tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las molestias que
ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares y en extremo
inferior el revólver de objetivos. El tubo se encuentra unido a la parte superior de la
columna mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante los
tornillos.
•El tornillo micrométrico: mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el
tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la preparación. Lleva acoplado un tambor
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graduado en divisiones de 0,001 mm., que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el
espesor de los objetos.
•La platina: es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que se va a
observar. Presenta un orificio, en el eje óptico del tubo, que permite el paso de los rayos luminosos a
la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros casos puede ser
giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
•Carro móvil: es un dispositivo que consta de dos tornillos y está colocado sobre la
platina, que permite deslizar la preparación con movimiento ortogonal de adelante hacia
atrás y de derecha a izquierda.
•El revólver: e s u n a p i e z a g i r a t o r i a p r o v i s t a d e o r i f i c i o s e n l o s q u e s e
e n r o s c a n l o s objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se
colocan en posición de trabajo, lo que se nota por el ruido de un piñón que lo fija.
Sistema óptico
El sistema óptico es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes mediante el conjunto de
lentes que lo componen. Está formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen
de la muestra que el ocular luego amplía.
•El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la
cercanía de la pieza con el ojo del observador. Tiene como función aumentar la imagen formada por
el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus poderes de aumento van desde
5X hasta 20X. Existen oculares especiales de potencias mayores a 20X y otros que poseen una
escala micrométrica; estos últimos tienen la finalidad de medir el tamaño del objeto
observado.
•Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revólver y producen el aumento de
las imágenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparación que se
examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos
de inmersión.
- Los objetivos secos: se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la
preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que producen, la
abertura numérica y otros datos. Así, por ejemplo, s i u n o b j e t i v o t i e n e e s t o s d a t o s : p l a n
40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es plan acromático, su aumento
4 0 y s u a p e r t u r a n u m é r i c a 0 , 6 5 \ , calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El
número de objetivos varía c o n e l t i p o d e m i c r o s c o p i o y e l u s o a q u e s e d e s t i n a . L o s
a u m e n t o s d e l o s objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 6X, 10X, 20X, 45X y 60X.
Figura 1.
Nomenclatura del objetivo. Las propiedades ópticas especiales en este objetivo denotan que puede
emplearse en Interferencia de contraste diferencial (DIC differential interference contrast) y la H
significa que puede emplearse en microscopios con platina caliente (heating stage). Modificado de
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Sistema de iluminación
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la
preparación u objeto que se va a observar en el microscopio de la
m a n e r a a d e c u a d a . Comprende los siguientes elementos:
•F u e n t e d e i l u m i n a c i ó n :
Se trata generalmente de una lámpara incandescente de tungsteno
sobrevoltada. Por delante de ella se sitúa un condensador (una lente
convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite controlar el diámetro de la parte de
la preparación que queda iluminada, para evitar que exceda el campo de observación produciendo
luces parásitas.
•E l e s p e j o :
Necesario si la fuente de iluminación no está construida dentro del
microscopio y ya alineada con el sistema óptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos.
Suele tener dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en t o d a s l a s
direcciones. La cara cóncava se emplea de preferencia con iluminación
artificial, y la plana, para iluminación natural (luz solar). Los modelos más modernos no poseen
espejos sino una lámpara que cumple la misma función que el espejo.
•Condensador:
Está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el
plano de la preparación, formando un cono de luz con el mismo ángulo que el del
campo del objetivo. El condensador se sitúa debajo de la platina y su lente superior es
generalmente planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la preparación cuando
se usan objetivos de gran abertura (los de mayor ampliación); existen condensadores de
inmersión, que piden que se llene con a c e i t e e l e s p a c i o e n t r e e s a l e n t e s u p e r i o r y
l a p r e p a r a c i ó n . L a a b e r t u r a n u m é r i c a máxima del condensador debe ser al menos igual
que la del objetivo empleado, o no se l o g r a r á a p r o v e c h a r t o d o s u p o d e r s e p a r a d o r . E l
c o n d e n s a d o r p u e d e d e s l i z a r s e verticalmente sobre un sistema de cremallera mediante un
tornillo, bajándose para su uso con objetivos de poca potencia.
•Diafragma:
El condensador está provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla a la del
objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace
cerrándolo más de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolución del sistema óptico.
Estereoscopio
Los estereoscopios permiten hacer estudios de objetos y especímenes demasiado pequeños para ser
estudiados a simple vista, pero demasiado grandes para ser estudiados bajo el microscopio
compuesto. Su magnificación va desde cerca de 5x hasta más de 60x. Los estereoscopios también
son conocidos como microscopios de disección, pues en muchas ocasiones son usados para disecar los
especímenes o muestras, separando de ellos aquellas partes que serán examinadas mediante otros
tipos de microscopía. Son ideales para la observación de objetos relativamente grandes.
Son utilizados para realizar investigaciones de botánica, de mineralogía, en la industria
microelectrónica y dentro de la medicina como microscopios quirúrgicos
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cremallera) para enfocar la muestra; además, este tipo de microscopios utiliza un sistema de
iluminación para iluminar el objeto. Las imágenes obtenidas son erectas.
El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o
bien es rectangular
El tubo. Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las molestias que
ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares.
El revólver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar
el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, la cual se nota
por el ruido de un piñón que lo fija.
La columna, llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la parte posterior del aparato.
Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se adapta al pie.
La platina. Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que se va a
observar. Presenta un orificio en el eje óptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la
preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros casos puede ser
giratoria, es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
Carro. Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la preparación con movimiento
ortogonal de adelante hacia atrás y de derecha a izquierda.
El tornillo macrométrico. Girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio,
deslizándose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el
enfoque rápido de la preparación.
El tornillo micrométrico. Mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la
platina, se logra el enfoque exacto y nitido de la preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en
divisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los
objetos.
4. Procedimiento
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i. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el
objetivo de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar
la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en
posición de observación.
j. Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para
óptica. Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio.
Mantenimiento y precauciones
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de
observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma y
dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar
que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su
caja dentro de un armario para protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un
papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con
pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se
pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y
pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que
abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las
lentes y su sujeción.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina,
revólver y condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación
para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo
del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, secarlo
con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol.
9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al acabar
el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos.
Se procedió a conocer el microscopio sus partes, su morfología, sus uso e importancia, se uso el
microscopio para observar tres muestras diferentes: el primero fue un trozo de periódico con una letra
impresa…
Microscopio
Muestra
Periódico
Muestra
_______________________
5
5X 10X 20X 40X
Muestra
_______________________
Muestra
_______________________
Muestra
_______________________
Muestra
_______________________
6
5X 10X 20X 40X
Muestra
_______________________
Muestra
_______________________
Muestra
_______________________
Muestra
_______________________
7
5X 10X 20X 40X
Muestra
_______________________
Muestra
_______________________
Muestra
_______________________
Estereoscopio
Muestra
Periódico
8
20X 40X
Muestra
Piedra
20X 40X
Muestra
Escarcha
20X 40X
Muestra
______________
20X 40X
Muestra
______________
9
20X 40X
Muestra
______________
20X 40X
Muestra
______________
20X 40X
Muestra
______________
20X 40X
Muestra
______________
10
20X 40X
Muestra
______________
20X 40X
6. Cálculos y Resultados
Para conocer en el microscopio compuesto el aumento definitivo de una imagen se aplica la siguiente
fórmula:
Microscopio
Estereoscopio
7. Análisis de Resultados
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Observación de muestras microscópicas con un microscopio compuesto:
Inspección de detalles pequeños: Se pueden examinar detalles finos, como la textura de una
superficie, los poros de una roca o la morfología de un insecto.
Evaluación de muestras biológicas: También se puede como insectos o plantas, para utilizar
para examinar muestras biológicas, identificación taxonómica o para estudios de ecologia.
8. Conclusiones
Pelusa: La pelusa se observó tanto con el microscopio compuesto como con el estereoscopio
para examinar su estructura microscópica y su aspecto tridimensional. Esto podría revelar
detalles como la composición de la pelusa y la presencia de fibras u otras partículas.
Moneda: La moneda se observó tanto con el microscopio para apreciar las características
detalladas de la superficie y cualquier posible desgaste o daño.
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Hígado humano: Se utilizaron técnicas de preparación adecuadas para observar secciones del
hígado humano bajo el microscopio compuesto, permitiendo la identificación de estructuras
celulares y tejidos hepáticos.
Bisturí: El bisturí se observó para verificar su estado de afilado y examinar cualquier desgaste
en su hoja utilizando el estereoscopio.
9. Consulta
Microscopio óptico: un dispositivo que utiliza la luz visible para magnificar objetos pequeños,
permitiendo la observación de detalles que no son visibles a simple vista,
Microscopio simple: Un tipo básico de microscopio que consta de una sola lente para aumentar la
imagen de un objeto.
Microscopio compuesto: Un tipo de microscopio que utiliza múltiples lentes y fuentes de luz para lograr
un aumento significativo y una mejor resolución que el microscopio simple.
Microscopio de luz ultravioleta: Un microscopio que utiliza luz ultravioleta en lugar de luz visible para
observar muestras, lo que permite una mayor resolución en ciertos casos.
Microscopio electrónico: Un tipo de microscopio que utiliza haces de electrones en lugar de luz para
obtener imágenes de alta resolución de muestras muy pequeñas, como células y materiales a nivel
nanométrico.
Microscopio de antimateria: Es un tipo de microscopio que usa partículas de antimateria para crear
una imagen de un objeto. El microscopio de antimateria puede usarse para crear imágenes de objetos
muy pequeños, que incluso podrían estar fuera del alcance de un microscopio electrónico.
10. Glosario
• Aumento linear: Con un rango que puede ir desde 0,5x hasta 200x
• Correcciones ópticas: Achro, Achromat (acromáticos); Fluar, Neofluar (semi- apocromáticos); Apo
(apocromáticos); Plan, Plano (corrige curvatura de campo); ICS (infinity corrected system), UIS
(universal infinity system); N, NPL (normal field o view plan); CF, CFI (chrome-free, chrome free
infinity) y muchas otras especificaciones cuya nomenclatura depende del fabricante.
• Apertura numérica: Es un valor que indica el ángulo de apertura del cono luminoso.
• Longitud del tubo: Longitud que separa al objetivo del ocular, usualmente en milímetros (160, 170,
220) o con el símbolo (8) para objetivos con corrección infinita.
• Espesor del cubre-objeto a emplear: Ha sido estandarizada a 0,17mm pero hay diversos espesores
lo cual produce aberraciones. Algunos objetivos poseen un collar de corrección en las lentes internas
para realizar la corrección y se denominan CR, Corr, w/corr, o pueden tener una escala graduada
móvil para el ajuste.
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• Distancia focal: Distancia entre el punto focal y la lente frontal del objetivo, expresada en milímetros.
• Propiedades ópticas especiales: En caso de objetivos que en ciertas condiciones tienen resultados
óptimos (para luz polarizada, contraste de fase, entre otros).
• Rosca del objetivo: La mayoría de objetivos están estandarizados de acuerdo a la Royal Microscopy
Society para garantizar una compatibilidad universal y se designan con las siglas RMS, sin embargo,
algunos fabricantes tiene sus propias dimensiones. El diámetro general es de 20mm, pero los
objetivos Leica y Nikon son de rosca más amplia y sólo funcionan en sus microscopios. M25 y M32
designan roscas de 25 y 32 mm respectivamente.
• Medio de inmersión: Algunos objetivos ameritan el uso de medios de inmersión y para ello se emplea
un código de colores o las abreviaciones Oil, Oel (aceite); HI (homogeneous immersion); W, Water,
Wasser (agua) y Gly (glicerol).
• Código de colores: Algunos fabricantes marcan sus objetivos con anillos de colores para facilitar la
identificación del aumento
11. Bibliografía
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