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Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

Facultad de Ciencias Químicas

Laboratorio de Biología Molecular de la Célula


Cuestionario “Microscopio”

Otoño 2021
1. Diga que es un microscopio.
Un microscopio es un aparato o mecanismo que posibilita una mejor visibilidad de los
elementos u objetos de menor tamaño, obteniendo una imagen aumentada de los
mismos. Este instrumento se caracteriza por aumentar la imagen hasta el nivel de la
retina para así poder captar mucho mejor la información.
2.Qué significa la palabra microscopio.
Etimológicamente hablando la palabra microscopio proviene del griego μικρός σκοπέω,
que quiere decir «dispositivo o aparato para observar pequeñas cosas, que no son
visibles a simple vista», vocablo formado por «micro» que significa “pequeño” y
“scopio” alude a “aparato para ver u observar”.
3.Diga que es un microscopio compuesto.
Como microscopio compuesto se denomina aquel que cuenta con más de una lente
objetiva. Son empleados fundamentalmente para observar objetos transparentes o
cortados en láminas muy finas.
El microscopio compuesto de uso común también se conoce con el nombre microscopio
óptico en base a que sus propiedades derivan del empleo de lentes ópticas
4- Diga cuántos y cuáles son los sistemas que constituyen a un microscopio compuesto.

R= El microscopio está conformado por tres sistemas: sistema mecánico,


sistema óptico y sistema de iluminación.
5- Diga cuáles son las partes que constituyen al sistema óptico.
R= Lentes oculares y lentes objetivos
6- Diga cuál es la función de cada una de las partes que constituyen al sistema óptico.
R= Los oculares son los sistemas de lentes más cercanos al ojo del observador. Se trata
de cilindros huecos que se encuentran en la parte superior del microscopio y tienen
lentes convergentes. Estos elementos ópticos son los que proporcionan la segunda
etapa de ampliación de la imagen. Es decir, primero la imagen es aumentada por los
objetivos y, luego, otra vez aumentada por los oculares y los objetivos son las lentes
convergentes que son reguladas mediante el revólver. Estas lentes son las que ofrecen
la primera etapa de aumento. Girando el revólver en el sentido de las agujas del reloj, los
objetivos van acoplándose los unos con los otros, permitiendo aumentar la imagen de lo
que se esta observando.

7- Diga cuáles son las partes que constituyen al sistema mecánico.

R= Son aquellos que sirven de sostén, movimiento y sujeción de los sistemas ópticos y
de iluminación así como de los objetos que se van a observar. Constituyen: la base o
pie, el brazo, estativo o columna, la platina, el tubo óptico, el revolvedor o portaobjetivos,
los tornillos macrométrico y micrométrico, engranajes y cremallera y el cabezal.

8- Diga cuál es la función de cada una de las partes que constituyen al sistema mecánico.

• Base o pie: Es un soporte metálico, amplio y sólido en donde se apoyan y sostienen


los otros componentes del microscopio.
• Brazo, estativo o columna: Permite la sujeción y traslado del microscopio.
Soporta al tubo óptico, a la platina y el revolver.
• Platina: Superficie plana de posición horizontal que posee una perforación circular
central. En ella se apoya la preparación (lámina portaobjetos que contiene a la
muestra que se va a examinar) que se sujeta a la platina mediante pinzas o con un
carrito o charriot que, mediante mandos especiales facilitan el movimiento de la
preparación de derecha a izquierda y de adelante hacia atrás.
• Tubo óptico: Consiste en un cilindro metálico que suele medir 160mm o 170
mm de longitud (dependiendo del fabricante del microscopio) el cual en un
extremo, está conectado al revolver o portaobjetivos y en el otro se relaciona con
el (los) ocular(es).
• Revolver o portaobjetivos: Es un componente que gira alrededor de un eje con la
finalidad que los objetivos que sostiene coincidan de manera perpendicular con
la perforación central de la platina. En su superficie inferior posee varios
agujeros donde se atornillan los objetivos.
• Tornillos macrométrico y micrométrico: Generalmente están situados en la parte
inferior del brazo o columna. Ambos tornillos permiten el desplazamiento de la
platina hacia arriba y hacia abajo con la finalidad de acercar o alejar la
preparación hacia los objetivos y así conseguir un enfoque óptimo de la
imagen. El macrométrico produce desplazamientos evidentes y rápidos de la
platina, en cambio el tornillo micrométrico produce movimientos imperceptibles
de la platina y sirve para efectuar el enfoque fino y definitivo de la imagen.
• Engranajes y cremallera: Constituyen mecanismos de desplazamientos de las
diferentes partes del microscopio.
• Cabezal: Es un componente situado en relación con el tubo del microscopio que
alberga principalmente prismas o espejos que sirven para acondicionar en él
dos o más oculares, o sistemas mecánicos que soportan cámaras fotográficas, de
vídeo o sistemas de proyección de la imagen

9- Diga cuáles son las partes que constituyen al sistema de iluminación.

R= Se consideran dentro de este grupo a los instrumentos que proporcionan energía


luminosa al microscopio. Las fuentes de energía luminosa son de dos tipos natural y
artificial. Las partes que lo constituyen son: Iluminador, condensador y diafragma.

10- Diga cuál es la función de cada una de las partes que constituyen al sistema de iluminación.
El sistema de Iluminación está formado por la fuente de iluminación, Espejo,
Condensador, y Diafragma.

Foco o fuente de luz: Este es un elemento esencial que genera un haz de luz dirigido
hacia la muestra. La posición del foco en el microscopio depende de si se trata de un
microscopio de luz transmitida o de luz reflejada. Consta generalmente de una lámpara
incandescente de tungsteno.

Espejo: Es necesario si la fuente de iluminación no está dentro del microscopio, tiene


una cara plana y una es cóncava. En algunos casos el haz de luz es primero dirigido hacia
el espejo que a su vez lo desvía hacia la muestra.

Condensador: El condensador es el elemento encargado de concentrar los rayos de luz


provenientes del foco a la muestra (captar los rayos luminosos y dirigirlos hacia la
muestra que se va a enfocar). En general, los rayos de luz provenientes del foco son
divergentes. El condensador consiste en un sistema de lentes que cambian la dirección
de estos rayos de modo que pasen a ser paralelos o incluso convergentes.
Diafragma: El diafragma es una pieza que permite regular la cantidad de luz incidente que
debe pasar por el condensador a la muestra. Regulando la luz incidente es posible variar
el contraste con el que se observa la muestra. El punto óptimo del diafragma depende
del tipo de muestra observada y de su transparencia. Ayuda eliminando los rayos
luminosos que en forma oblicua podrían tornar borrosa la imagen.

11- Porqué a los objetivos de 10X y de 40X se les llama “seco débil” y “seco fuerte”,
respectivamente.
El 10x es “seco débil” porque no necesitan aceite de inmersión para su uso y tiene menos
poder de magnificación o aumento, usado para observar la apariencia general de un
espécimen y su campo de visión es grande. Por otro lado, el objetivo de 40x es “seco
fuerte” debido a que tiene más poder de aumento y revela más detalle de la porción
estudiada sin utilizar aceite de inmersión.

12- Porqué al objetivo 100x se le llama “objetivo de inmersión”.


Debido a que para las observaciones microscópicas con el objetivo 100x se emplea aceite
de inmersión, el cuál tiene el mismo índice de refracción que el vidrio y brinda la
propiedad de reducir significativamente la dispersión de la luz entre el objetivo 100x y el
portaobjetos (placa), aumentando su poder de resolución, gracias a la captura de una
mayor cantidad de rayos refractados.

13- ¿Cuál es la función del aceite de inmersión?

El aceite de inmersión es un líquido viscoso y transparente que tiene un alto índice


refractivo. Este, aumenta la resolución del microscopio al reemplazar el espacio de aire
entre la lente del objetivo y el cristal del cubreobjetos con un medio alto índice de
refracción y así reducir la refracción de la luz que distorsiona la imagen de la muestra
cuando esta es ampliada permitiendo así obtener imágenes mucho más nítidas.

El aceite de inmersión se utiliza colocando una gota en el objetivo para facilitar la visión
del microscopio, al entrar en contacto con el cubre-objetos. Su falta o secado puede
producir una mala visión en el microscopio.

14- Diga por qué para enfocar una preparación, debe iniciarse con el objetivo seco débil.
El microscopio aumenta varias veces la imagen de lo que vamos a observar. Esta cuenta
generalmente con tres objetivos que son:

• Seco débil (10x) = aumenta 100 veces


• Seco fuerte (40x) = aumenta 400 veces
• Objetivo de inmersión (100x) = aumenta 1000 veces

La función de estos objetivos es delimitar el tamaño de la imagen, entonces, para realizar


el enfoque hay operaciones que facilitan y aceleran el enfoque y al mismo tiempo evitan
que se estropee la preparación o el microscopio, la más indicada y sencilla para el
enfoque inicial es el usar el objetivo de 10X, porque la mayoría de los microscopios tienen
un tope que impide que esta lente pegue con el portaobjetos.

Colocar en primera instancia el objetivo seco débil nos sirve para lograr un enfoque
correcto. Este paso en muy importante y se debe realizar siempre, ya que permitirá la
observación de una panorámica del preparado, un campo de visión más grande y la
ubicación de áreas de interés para su análisis posterior.

Este objetivo de pequeño aumento o "Seco débil", es útil para observar microorganismos
grandes, p. ej. Protozoarios. Este objetivo está marcado con un “3” o “2/3”, que significa
2/3 de pulgada o 16 mm. Tiene una lente en el extremo mucho más grande que cualquiera
de los otros objetivos.

15- Diga los cuidados que se deben tener para el uso y manejo del microscopio.

Durante su empleo:

• Para transportar el microscopio a la mesa de trabajo deberá tomarse del brazo con
la mano derecha y de la base con la mano izquierda y en posición vertical.
• La mesa que se vaya a utilizar debe ser estable para evitar molestas vibraciones
de la muestra, estar alejada de las ventanas y de preferencia ser de fondo negro.
• Mantener el microscopio por lo menos 15 cm del borde de la mesa de laboratorio,
es decir, mantenerlo retirado de la orilla de la mesa.
• La posición ante el microscopio debe ser cómoda y estar a una altura correcta.
• Mantener limpio el sistema óptico y el de iluminación (libre de polvo, aceite, grasa,
etc)
• Cerciorarse del voltaje de la toma de corriente.
• Antes de usarlo, limpiar perfectamente la fuente de luz del microscopio, parte
superior del condensador, oculares y objetivos.
• Al limpiar las lentes primeramente eliminar las partículas de polvo, ya sea con un
bulbo inyector de aire, un pincel o bien soplando fuertemente sobre la lente.
Posteriormente usar de preferencia papel para lentes seco, en caso de estar sucios
de grasa o aceite usar una mezcla de alcohol – acetona- éter (80%/10%/10%) y en
última instancia con xilol . Esta limpieza debe de realizarse antes y después de usar
el microscopio.
• Las partes externas del microscopio se limpian con un lienzo seco, o en su efecto
humedeciendo un algodón con un detergente suave, posteriormente limpiar con
un trapo húmedo, nunca limpiar con alcohol o acetona.
• No encender la fuente de luz, sino hasta que se vaya a usar.
• Colocar la muestra sobre la platina y girar el objetivo que se va a usar colocándolo
en la posición correcta mientras que se observa el material.
• Ver por el ocular y controlar la cantidad de luz adecuada, moviendo el condensador
y diafragma.
• Para enfocar, bajar el objetivo que se va a usar con el uso del tornillo macrométrico
hasta donde tope, sin forzarlo, luego enfocar primero con el tornillo macrométrico
y una vez que se ha localizado el campo, usar el tornillo micrométrico para enfocar
adecuadamente.
• Con respecto al objetivo de inmersión, hay que tener mucho cuidado, ya que la
distancia focal es muy corta y habrá que emplear únicamente el tornillo
micrométrico y no el macrométrico debido a que se puede dañar la preparación y
el lente del objetivo, para su utilización es recomendable:
a) Levantar el tubo óptico del microscopio, antes de poner el objetivo en
posición. b) Colocar una gota de aceite de inmersión sobre la preparación.
No usar aceite en exceso, ya que daña el cemento de las lentes.
c) Viendo por fuera del microscopio, como ya se insistió anteriormente, bajar
el objetivo con el macrométrico hasta que toque la gota de aceite. A partir de
ese momento el objetivo estará prácticamente dentro de su distancia focal.
Enfocar la preparación con movimientos del tornillo micrométrico.
• Evitar girar el revólver de los objetivos sin antes levantar el tubo óptico del
microscopio.
• Recordar que el objetivo 45X es más largo que el de 10X y más todavía que el de
inmersión, por lo que deberá tenerse cuidado, pues si llegan a rozar, la platina los
inutiliza permanentemente.
• Cuando se vaya a utilizar el objetivo seco fuerte (45X), hacer primero el enfoque
de la preparación con el objetivo seco débil, luego, girar el revólver de tal manera
que el siguiente objetivo sea el seco fuerte, cuidando que la lente no tope con la
preparación.
• Secar la platina cuando cualquier liquido caiga en ella.
• Evitar que las lentes estén en contacto con saliva debido a que al mezclarse con
el polvo forma una capa difícil de remover.
• Cuando se observe a través del ocular no pegar los ojos a la lente (los cosméticos
las dañan).
• Evitar que las lentes objetivas se rayen o quiebren al enfocar. Para realizar el
enfoque hay una de operaciones que facilita y acelera el enfoque y evita al mismo
tiempo que se estropee la preparación o el microscopio la más indicada y sencilla
para el enfoque inicial es el usar el objetivo de 10X, porque la mayoría de los
microscopios tienen un tope que impide que esta lente pegue con el portaobjetos
• Al enfocar hacerlo siempre tratando de alejar la lente de la muestra y nunca en
sentido contrario.
• Nunca deje la lente sumergida en el aceite o en contacto con muestras líquidas.
• No quitar las lentes objetivas y oculares de su lugar.
• No cambiar las lentes objetivas tomándolas con los dedos por su estructura
metálica, ya que el sudor contiene ácidos grasos y otras sustancias que los dañan,
además al moverlos de esta forma los desajusta.
• No quitar el condensador, ni tratar de ver si estos tienen diafragma con el dedo
usar siempre en dispositivo provisto por fabricante para hacerlo.
• El microscopista que use anteojos debe quitárselos cuando vaya a observar al
microscopio, excepto el que sufre astigmatismo, o que las lentes oculares tengan
indicaciones de que pueden usarse con gafas, en este caso evitar el contacto de
las lentes oculares con los anteojos pues los oculares pueden rayarse e
inutilizarse.
• Nunca mueva ninguna parte del microscopio si antes no sabe para qué sirve.
• Siempre que enfoque primero localice visualmente las partes que va utilizar y
posteriormente proceder a moverlas

Al concluir su utilización

• Apagar la lampara
• Separar el lente objetivo de la preparación con el tornillo macrométrico
• Colocar la tapa a cada objetivo
• Lo más conveniente es dejar fijo el microscopio en la mesa de trabajo cubierto con
una funda para evitar el polvo cuando no se utiliza o bien guardarlo en un armario.
• Apague la lámpara, desenchufe y cloque el cable alrededor del microscopio, de
manera holgada y sin apretarlo.
• Al desconectar los enchufes del microscopio no tirar del alambre, sujetar
firmemente el enchufe y luego desconectarlo de la toma.

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