EL CITOESQUELETO

Profesora: Cristina Murga Montesinos Asignatura: Mtodos avanzados en Biologa Celular, Molecular y Gentica. MASTER EN BIOFISICA.

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EL CITOESQUELETO
Filamentos intermedios de queratina en un fibroblasto Tincin de las protenas mayoritarias de una clula fijada (con azul de Coomassie) Microtbulos en clulas epiteliales

! l citoesqueleto es el andamio estructural de la E clula, pero es DINMICO (capaz de ensamblarse y desensamblarse) !Responsable de grandes movimientos (no slo es el esqueleto celular, sino tambin del movimiento muscular por ejemplo) ! epresenta, adems, la Red de Carreteras del R transporte intracelular.

Tipos de componentes del citoesqueleto:

!Microfilamentos o filamentos de actina (AF): cables de 2 cadenas de actina filamentosa-FLEXIBLES (protuberancias de la membrana) !Microtbulos o filamentos de tubulina (MT): tubos huecos con paredes de tubulina polimerizada- RIGIDOS (red de carreteras, esqueleto axonal y huso mitico) !Filamentos intermedios (IF): compuestos de protenas especficas de cada tipo celular o compartimento subcelular (lminas en el ncleo, queratinas en epitelio, etc)- RESISTENTES (soporte de estructuras)

8-9 10 24 Dimetro (nm):

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Filamentos intermedios

Microfotografa electrnica de los filamentos intermedios de lminas nucleares (bajo la membrana nuclear)

Estructuras especializadas (desmosomas) anclan la red de filamentos intermedios a las membranas para mantener las clulas unidas y dar RESISTENCIA MECANICA a los epitelios (capa de clulas que recubre 1 rgano).
DESMOSOMA

Epitelios con mutaciones en queratinas: epidermolisis bullosa simple

ESTRUCTURA Y FUNCION DE LOS FILAMENTOS INTERMEDIOS

MICROFILAMENTOS DE ACTINA:
! Se componen de la protena actina. ! La actina monomrica libre es globular (actina-G) y a la actina polimerizada se le denomina F (filamentosa) . ! La actina puede hidrolizar el ATP (actividad ATPasa): la actina-ATP tiende a polimerizarse y la actina-ADP a despolimerizarse (un filamento de actina-ADP es ms inestable que uno de actinaATP). ! Tienen POLARIDAD y se designa extremo (-) al que tiene expuesto el bolsillo de unin a ATP al medio: un filamento crece 5-10 veces ms rpido por el extremo (+) que por el (-).

ESTRUCTURA Y POLARIDAD.

ATP

(+)

Actina en las proyecciones de la Mb plasmtica

1.- Estables: ! icrovilli en clulas del intestino. M ! niones adherentes en clulas U epiteliales (acomplejada con cadherinas): cinturn adherente. 2.- Dinmicas: ! ibras de estrs (A) F ! amelipodios (B) L ! ilopodios y microespculas (C) F

Varias protenas se asocian a los filamentos de actina y controlan su ensamblaje en estructuras ESTABLES.

Ensamblaje de microfilamentos en REDES (filamina)

Ensamblaje de los filamentos de actina en redes/haces. Ensamblaje de actina en HACES (Fimbrina y !-actinina)
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La actina bajo la membrana de la clula (actina cortical) sufre una polimerizacin/ despolimerizacin es MUY dinmica formando estructuras que ayudan al movimiento celular.

Actina en azul, miosina II en rojo

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(1) La actina bajo la membrana se va polimerizando en forma de ATP-actina G (rojo), a menudo en ramificaciones a 70 por el complejo Arp2/3 (azul, 2), se estabiliza por FILAMINA (3) y va hidrolizando su ATP (4). Cuando es mayoritariamente ADP-actina (blanco), las protenas de CAPPING (amarillo) tapan los extremos (+) del filamento e impiden ms crecimiento. Entonces las protenas de corte (SEVERING) como COFILINA Y GELSOLINA (gris) transforman la actina F en actina G (5) que forma complejos citoslicos con la profilina (verde) y queda as lista para un nuevo ciclo de polimerizacin, o con timosina "4 quedando secuestada en forma de actina G (en rojo).

Ciclo de la actina cortical

Arp2/3

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Estmulos migratorios
Membrana plasmtica

El ciclo de la actina cortical est regulado por seales extracelulares.

Estmulos de adhesin

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EL CITOESQUELETO ES DINAMICO: AGREGACIN DE PLAQUETAS

A) Morfologa basal de las plaquetas---B) en presencia de molculas coagulantes emiten filopodios--C) estos agentes hacen que se extiendan sobre la lesin (formando lamelipodios) para taponarla.

1-Mb.plasmtica 2-Red 2D de filamentos intermedios 3-Filamina: red de actina bajo la membrana 4-Contactos con el sustrato (actina en haces) 5-Anillo perifrico de !tbulos

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MICROTBULOS

(-)
! on polmeros de tubulina organizada en tubos S cilndricos huecos. ! orman estructuras estables (axones, cilios, F flagelos, etc.) y otras dinmicas (huso mittico). ! a unidad de polimerizacin son DIMEROS de !/ L " tubulina que unen GTP (la tubulina " lo hidroliza a GDP). ! iene POLARIDAD (+ es el extremo de T polimerizacin)

(+) GTP
Protofilamento

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POLIMERIZACIN DE LA TUBULINA
Los !T s ensamblan por adicin de dmeros de tubulina Necesitan GTP y una T adecuada (a 4C despolimerizan) Tienen un extremo preferencial de polimerizacin (+) Tras polimerizarse en un !T, la " tubulina hidroliza su GTP con el tiempo-->la mayora de la tubulina en el !T se queda como GDP excepto una tapa (cap) de GTP en el extremo (+).

"#

ENSAMBLAJE/DESENSAMBLAJE: La polimerizacin est favorecida dentro de la clula porque la concentracin crtica a partir de la cual sucede la polimerizacin suele ser de 0.03!M y la [tubulina] celular es de 10-20!M. Al ENSAMBLARSE, los dmeros de tubulina se polimerizan en forma de pequeos protofilamentos individuales y no alrededor del extremo (cap) en crculos. Al desensamblarse, se desestabilizan las interacciones laterales y se separan tambin como protofilamentos individuales. Ver video en: http://www.studiodaily.com/main/technique/tprojects/6850.html

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Inestabilidad dinmica de los !T: modelo de la catstrofe.

slo se aade tubulina GTP (la tubulina GDP tiende a despolimerizar)

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El centro de organizacin de microtbulos (MTOC)

!El MTOC es la estructura de la que emanan los !T. Adems establece su orientacin dentro de la clula: el MTOC se asocia sin contacto fsico al extremo (-) de los !T y lo fijan en el cuerpo celular dejando el extremo (+) hacia la membrana. De esta manera determina la direccin de transporte de orgnulos y materiales desde o hacia la periferia celular. !Las clulas en interfase suelen tener 1 solo, pero las epiteliales, las de plantas y las embrionarias pueden tener cientos. Las clulas en divisin tienen 2. !Cada MTOC suele tener 2 centriolos compuestos por 9 tripletes de !T cortos cada uno.

Estructura de un centriolo

ECB 2nd Ed

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Microfotografas electrnica y de fluorescencia de un !T que irradia del MTOC

#-tubulina en verde, y !-" tubulina en rojo

La matriz pericentriolar contiene el $TuRC ($-tubulin Ring Complex) desde donde se nuclea la polimerizacin de !T a partir de un anillo de # tubulina incluso a concentraciones sub-crticas de !/" tubulina. Se localiza en el extremo (-).
PC: matriz pericentriolar C: Centriolo MT: microtbulo

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Papel de los microtbulos en la separacin de los cromosomas durante la mitosis celular

Durante la mitosis los centrosomas se duplican y los centriolos resultantes se separan en polos opuestos de la clula para formar el HUSO MITTICO.

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VIDEO: Mathews 4ed 19.02

! l cinetocoro es un complejo de protenas que se ensambla en en E centrmero del cromosoma y sirve de anclaje a los !T del huso mittico ! a fuerza combinada de la dinmica de los !T (polimeriz/despolim) y L de los motores moleculares del cinetocoro consiguen: 1.- pescar a los cromosomas, 2.- alinearlos en el ecuador de la clula, y 3.transportar cada cromosoma a los polos opuestos durante la divisin celular.

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RESUMEN DE LA CLASE Y CONCEPTOS IMPORTANTES

! ! ! El citoesqueleto es una red de diferentes filamentos que dan soporte estructural a la clula a la vez que organizan su actividad motriz y facilitan el transporte de orgnulos y materiales. Hay 3 tipos de fibras: microtbulos (tubulina), microfilamentos (actina) y filamentos intermedios Los filamentos intermedios estn compuestos de subunidades proteicas diferentes en distintos tipos celulares y slo existen en vertebrados. Son fibras elsticas estables que proporcionan a las clulas resistencia mecnica y mantienen la estructura de los epitelios (capas de un solo piso de clulas) y de la lmina nuclear. Los microfilamentos son polmeros helicoidales de actina que tienen una polaridad de crecimiento (el extremo + tiene mayor velocidad de polimerizacin). Son flexibles, de longitud variable y forman haces, redes y otras estructuras dinmicas que cambian la forma de las clulas. Estn concentrados en la zona cortical (bajo la membrana plasmtica). Su estructura y longitud estn determinadas por muchas protenas que se unen a la actina que regulan la estructura y velocidad de polimerizacin y, adems, por la hidrlisis de molculas de ATP por los propios monmeros de actina. Los microtbulos son tubos huecos muy rgidos cuyas paredes se forman de dmeros de alfa+beta tubulina. Su polimerizacin/despolimerizacin depende de la hidrlisis del GTP: los dmeros de tubulina-GDP no forman microtbulos estables. Los microtbulos irradian desde el MTOC con su extremo (+) hacia la periferia celular y ayudan como red de carreteras intracelular al transporte de orgnulos y materiales, as como al correcto anclaje y distribucin de los cromosomas durante la mitosis (gracias a su inestabilidad dinmica). Los microtbulos se polimerizan cerca de los centriolos del MTOC a partir de un anillo iniciador de gama-tubulina

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Bibliografa y pginas web de inters:

KIMBALLS BIOLOGY PAGES: UN LIBRO DE TEXTO, ACTUALIZADO, CLARO Y CONCISO DISPONIBLE ONLINE:
http://biology-pages.info

LIBROS DE BIOLOGA CELULAR: Essential Cell Biollogy (ECB) 3Ed: un muy buen http://www.classwire.com/garlandscience
libro de los conceptos y elementos FUNDAMENTALES de la biologa celular y gentica. Tiene una URL en:

GM Cooper & RE Hausman: The cell: a molecular approach. EL LIBRO QUE OS RECOMIENDO PARA VUESTRO NIVEL. Muy actualizado con una visin

general con una muy buena perspectiva (que no se pierde en los detalles) que trata nicamente lo esencial. Os lo recomiendo en general, y en particular para la parte ms celular (seales, regulacin del citoesqueleto, ciclo celular, etc).

LIBROS DE BIOQUMICA Voet & Voet : muy didctico y grfico. Genial en motores moleculares y membrana plasmtica. Lehninger : El libro de bioqumica por excelencia. Estupenda la parte de motores moleculares y metabolismo Stryer : Muy bueno en general y espectacular para estructuras de macromolculas. Mathews & Van Holde : muy bueno para membrana plasmtica y con una visin ms biofsica que el resto de los libros de bioqumica. Lodish 6ed: en su web estn disponibles todas las figuras del libro y muchas animaciones y videos dignos de ver clasificados por captulos: http://bcs.whfreeman.com/lodish5e/ Alberts 5ed: estos dos son mucho ms especializados y amplios. Para mirar cosas en detalle, nomenclatura, etc.
VIDEOS DE CELULAS EN MOVIMIENTO: http://www.cellmigration.org/sciMovies.html http://cellix.imolbio.oeaw.ac.at/Videotour/video_tour.html http://www.bio.unc.edu/faculty/salmon/lab/mafia/ mafiamovies.html 22

Garrett & Grisham: lo podis encontrar en la web: http://www.web.virginia.edu/Heidi/home.htm El captulo de hoy es el Ch. 17