FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

LABORATORIO DE GENÉTICA

CÁTEDRA DE GENÉTICA BÁSICA

GUÍA DE PRÁCTICAS PRIMER SEMESTRE

PRÁCTICA N° 1
TEMA: Técnicas e instrumentos en diagnóstico genético

AUTOR: Dra. Carmen A. Salvador Pinos

Lcda. Stephanie Michelena
Práctica N° 1

Tema Técnicas e instrumentos en diagnóstico genético

Propósito/ objetivo
Describir las técnicas genéticas utilizadas para diagnóstico
general
Resultados de Comprende los procesos de cada una de las técnicas
genéticas
aprendizaje 1
Resultados de
Describe con responsabilidad la utilización de las técnicas
aprendizaje 2 genéticas
Resultados de Comprende las técnicas genética que requiere emplear
dependiendo del diagnóstico que desea realizar
aprendizaje 3
(cromosómico, genético, genómico) .

Material on line Links, Biblioteca Virtual

Material que
provee la cátedra o
el laboratorio

A) Procedimiento en el laboratorio presencial (solo si aplica)

- Observación de fragmentos de ADN por electroforesis

Preparacion del buffer

-El buffer que se utilizara tiene concentración 10X, es necesario diluir a 1X para
poder utilizarla.
-Con la formula C1V1=C2V2, calcule el volumen que se necesita para obtener ___ml
de buffer 1X

Preparación del gel

-El gel que se utilizara será al 2%
-Calcule los gramos de agarosa que se necesitan en ___ml de buffer

-Una vez que se ha pesado la agarosa, colocar en un matraz Erlenmeyer junto con los
___ml de buffer
-Calentar en el microondas con intervalos de 10seg hasta que la agarosa se haya
diluido completamente

-Se necesitan 6ul de bromuro de etidio por cada 120ml de buffer, calcule el volumen
de bromuro que se debe añadir en este caso

Preparación de la bandeja

-Se necesita sellar la bandeja por ambos lados utilizando mastkin

-Se colocan el/los peines

Una vez sellado, se coloca la mezcla y se espera la solidificación

Preparación de cámara
-La cámara debe ser llenada completamente con buffer 1X
-Se retira el mastkin y los peines de la bandeja con el gel ya solido y se coloca en la
cámara de electrforesis

Colocación de muestras en el gel

-Las muestras deben ser llenadas una a una incluyendo el ladder (marcador de peso) y
el control.
-Se coloca la tapa a la cámara de electroforesis y se conecta los electrodos a la fuente
de poder
-Correr el gel por 30min a 100Wv

B) Procedimiento para practica de laboratorio en línea

 1. Ver los videos
PCR: https://www.youtube.com/watch?v=mslMRgxbdOA
Electroforesis https://www.youtube.com/watch?v=U1g2qt3juZw
Sanger https://www.youtube.com/watch?v=1JfHNedZUxU&t=109s
Secuenciacion por síntesis https://www.youtube.com/watch?v=BimurK8vlYc
Micromatriz https://www.youtube.com/watch?v=16V1q4nctdg

2. Explicación en clase sobre técnicas genéticas y la aplicación de las mismas en

Ciencias de la Salud
3. Resolver ejercicios sobre paternindad

A.- Ruta para el estudio

1.1. Lee los links enviados
1.2. Observa los videos enviados
1.3. Interactúa con el docente en la clase
1.4. El docente evalúa lo leído y observado a través preguntas.
1.5. Se expone la clase virtual presencial. Preguntas de los alumnos durante la
clase.
1.6. Explicar los deberes para realizarlos en casa y subirlos on line.

Pre-requisitos teórico

Para enfermedades de origen genético la biología molecular ha sido

extremadamente útil, ya que nos brinda una gran cantidad de información que no se
limita a identificar la causa primaria de la enfermedad y a confirmar el diagnóstico,
sino que asume un valor predictivo. Por ejemplo, en las enfermedades genéticas de
aparición tardía como Huntington permite la identificación de portadores de
patología recesivas y la predicción de riesgo de recurrencia de una enfermedad. Así
mismo, para las enfermedades multifactoriales el análisis molecular permite la
medicina adquirir una naturaleza predictiva y por lo tanto expresar valoraciones
sobre la probabilidad deque un determinado evento se produzca. Sin embargo, el
desarrollo del campo de la genética molecular no habría sido posible sin la ayuda de
la bioinformática. Esta contiene la enorme cantidad de datos relativos a las
secuencias (de seres humanos, sujetos sanos o enfermos) almacenados en bases de
datos y construye sistemas de recolección de información. Muchas de las terapias
que se están desarrollando para enfermedades geneticas como errores congénitos
del metabolismo incluye inserción de copias adecuadas de genes sin mutaciones
alterando la lectura de un gen anómalo, modificando su expresión, etc

Las técnicas que están disponibles en un momento dado determinan aquello que
podemos conocer, y en ese sentido nuestro conocimiento es contingente de la
disponibilidad de dichas técnicas: conocemos en un sentido fuerte aquello que
podemos "observar" directamente. La Genética clásica infiere las propiedades del
material hereditario, pero no es hasta que se aplican las técnicas moleculares que se
puede determinar finalmente la composición y propiedades químicas de ese
material. Los nuevos desarrollos técnicos facilitan la adquisición de información
previamente inaccesible. El acceso a la secuencia de DNA, por ejemplo, ha generado
una información cualitativamente nueva y exenta de las limitaciones de otras
aproximaciones. Pero el desarrollo de las técnicas moleculares no ha significado una
eliminación de las otras técnicas genéticas. De hecho se ha producido una auténtica
integración de técnicas que permiten integrar, a su vez, los diferentes niveles de lo
genético. La genética del desarrollo o la genética de poblaciones son claros ejemplos
de integración de técnicas de análisis genético con técnicas moleculares. Fue la
integración de los estudios de cruces y la citología la que condujo, a principios de
siglo, a la teoría cromosómica de la herencia

Los científicos han desarrollado una serie de técnicas bioquímicas y genéticas

mediante las cuales el ADN puede ser separado y transferido de una célula a otra.
Algunos de esos métodos de laboratorio ayudan a los investigadores a estudiar las
propiedades de los genes en la naturaleza (permiten, por ejemplo, comparar los
ADN de diferentes animales para establecer distancias evolutivas). Otras técnicas de
ADN constituyen herramientas básicas en el campo de la ingeniería genética
(alteración de genes de un organismo). Esas herramientas son utilizadas en la
industria para desarrollar productos comerciales tales como cosechas más
resistentes a la desecación o a las plagas, microorganismos capaces de descomponer
compuestos contaminantes como hidrocarburos o petróleo, o capaces de producir
determinados compuestos útiles en medicina en grandes cantidades como la
insulina, el interferón o determinadas vacunas.

TERAPIA GÉNICA

En la actualidad, la dotación genética de una célula puede ser modificada mediante

la introducción de un gen normal en el organismo diana que sustituya al gen
defectuoso en su función; es lo que se denomina terapia génica. La terapia génica se
puede definir como el conjunto de técnicas que permiten vehiculizar secuencias de
ADN o de ARN al interior de células diana, con objeto de modular la expresión de
determinadas proteínas que se encuentran alteradas, revirtiendo así el trastorno
biológico que ello produce.

Aunque muchos descubrimientos fueron aplicados a las técnicas diagnósticas, la

utilización de técnicas moleculares en el tratamiento de enfermedades genéticas es
lógico y natural. Terapia génica consiste en la utilización de ácidos nucleicos con
fines terapéuticos. Aunque esta técnica es muy joven, ya que el primer paciente
tratado fue en 1990, presenta un futuro muy prometedor. En los primeros 9 años,
396 protocolos clínicos, en más de 3.000 pacientes de 22 países fueron ensayados.
La terapia génica es una técnica potencialmente poderosa, pero está restringida por
el conocimiento limitado de los vectores y la fisiopatología de las enfermedades a
tratar. Un mayor conocimiento del proceso de las enfermedades genéticas, mejoras
en el diseño de los vectores y gran atención a las aplicaciones de los aspectos
farmacológicos, van a permitir un eficaz y muy esperado desarrollo de la terapia
génica

Las aplicaciones de terapia génica en genética médica son complejas y ese hecho se
debe fundamentalmente a dos causas. La primera se debe a las características de la
especialidad misma. Los cuadros que estudiamos en genética médica son muy
heterogéneos y de expresión temprana en la mayoría de los casos. La patología
genética podemos dividirla en tres grandes grupos.

-El primero es de enfermedades cromosómicas. La base del trastorno es un defecto

en el número o estructura de los cromosomas. En conjunto estas alteraciones
afectan a 7 de cada 1.000 nacimientos. A medida que aumenta la edad materna y
paterna aumenta el riesgo de tener un niño con este tipo de enfermedades. La
enfermedades monogénicas están causadas por genes mutados con diferentes
patrones de herencia. El número de estas enfermedades es de alrededor de 5.000
cuadros descriptos. Las enfermedades multifactoriales son el resultado de factores
genéticos y ambientales. En la mayoría de los casos se expresan con malformaciones
congénitas. La frecuencia de las malformaciones congénitas en los recién nacidos es
de 2-3%.

La terapia ex vivo se caracteriza por la extracción al paciente de células con genes

alterados e incorporación de copias normales, las que son retornadas al organismo.
Se suelen utilizar células sanguíneas. El problema es que las células corregidas tienen
vida limitada, desapareciendo poco a poco, por lo cual se deben realizar
tratamientos periódicos. Otra posibilidad es actuar sobre las células precursoras.

-El segundo método de terapia génica en células somáticas es el tratamiento in situ.

Implica la introducción de genes correctores directamente en el tejido donde está
localizado el problema. Es ideal para la corrección de un defecto localizado. No
puede corregir problemas generalizados. El tratamiento in situ se aplica actualmente
en varias enfermedades. Una de las frecuentes aplicaciones es en la enfermedad
fibroquística del páncreas, en forma de aerosoles sobre la mucosa nasal y bronquial.
La terapia in situ tiene aún el inconveniente de la falta de vías seguras y eficaces
para la implantación de genes correctores en ciertos órganos. No siempre producen
cantidades suficientes de proteínas, y la vida de las células portadoras de genes
útiles es limitada.

Indicaciones para la atención en un servicio de genética

Las siguientes son las razones más comunes por las que los pacientes acuden a los
servicios de genética:

a) Pacientes de cualquier edad que presentan síntomas o signos sugerentes de

alguna de las centenares de enfermedades genéticas o defectos congénitos
conocidos (anomalías congénitas, retardo mental, trastornos de la
diferenciación sexual, trastornos del crecimiento y desarrollo, displasias
esqueléticas, trastornos neurológicos, etc).
 b) Personas o parejas con riesgo aumentado de tener un hijo afectado con una
enfermedad genética o defecto congénito por alguna de las siguientes
razones:

-portadores de genes recesivos

- afectados con una enfermedad dominante
- edad materna avanzada
- hijos previos con una enfermedad genética o defecto congénito
- valores de marcadores bioquímicos en sangre materna (alfa-fetoproteína,
gonadotrofina coriónica, estriol) que sugieren riesgo aumentado de
sindrome de Down durante la gestación
- anomalías fetales ecográficas - abortos habituales, infertilidad

c) Personas sanas con riesgo aumentado de desarrollar una enfermedad por la

probabilidad de haber heredado un gen determinístico (por ejemplo,
enfermedad de Huntington) o predisponente (por ejemplo, cáncer de
mama).
d) Personas sanas que por historia familiar, o pertenencia a algún grupo étnico
o poblacional particular, tienen una probabilidad mayor de ser portadores
de algún gen recesivo, y por lo tanto tienen riesgo de tener un hijo afectado
si el otro progenitor también es portador (p. ej. fibrosis quística, talasemia,
enfermedad de Tay-Sachs, etc).
e) Mujeres que por historia familiar tienen una probabilidad mayor de ser
portadoras de un defecto en un gen ligado al sexo (p.ej. distrofia muscular
progresiva, hemofilia, sindrome X-frágil), y por lo tanto tienen riesgo de
transmitir enfermedad a sus hijos varones.

Diagnóstico genético precoz y preciso en pacientes afectados

El diagnóstico precoz y preciso es un servicio esencial en el manejo de las

enfermedades genéticas, pues de él dependen las medidas preventivas y
terapéuticas ulteriores. Se conocen centenares de enfermedades genéticas y el
diagnóstico puede ser complejo. La sospecha de una enfermedad genética proviene
generalmente de un médico general en base a signos y síntomas y/o historia familiar
(p.ej. defectos congénitos, retardo mental, trastornos de crecimiento y/o
diferenciación sexual, signos característicos de alguna enfermedad genética
conocida, etc). El diagnóstico genético específico está usualmente a cargo del
genetista clínico en el servicio de genética, al cual es referido el paciente en
consulta. Las herramientas diagnósticas básicas son la genética clínica (examen físico
clínico-genético especializado), exámenes auxiliares (laboratorio clínico, radiología,
etc) orientados por la clínica e interconsultas con otros especialistas (neurólogos,
oftalmólogos, hematólogos, etc).

Los diagnósticos clínicos se confirman con análisis de laboratorio de citogenética,

genética molecular (análisis de ADN) o genética bioquímica, de acuerdo a la
sospecha clínica.

Técnicas actuales

1. PCR (Reacción en la cadena de la polimerasa)

La reacción en cadena de la polimerasa es la amplificación in vitro de secuencias

específicas de ácido nucleico. Esta reacción se somete repetidamente a un ciclo de
cambios de temperatura lo que permite la amplificación
Los procesos de PCR y la enzima ADN polimerasa fueron nombrados por la revista
Science como la "Molécula del año" de 1989 porque probablemente tenían la mayor
influencia en la historia (Guyer y Koshland, 1989). La ciencia dijo que la PCR estaba
"revolucionando los enfoques que los investigadores están tomando para muchos
problemas en biología".
Los pasos básicos de la PCR son (1) la desnaturalización por calentamiento (94°C–
98°C) de una molécula de ADN molde a copiar, (2) la hibridación (50°C–65°C) de
pares de oligonucleótidos de secuencias específicas (cebadores, típicamente de 10 a
14 nt de longitud) elegidos para ser homólogo a las secuencias dentro de la molécula
de ADN molde y (3) la extensión (72°C) por la ADN polimerasa de los cebadores para
copiar la molécula de ADN plantilla. Estos tres pasos se repiten muchas veces
(durante muchos ciclos) para amplificar la plantilla de ADN. Si en cada ciclo se hace
una copia de cada una de las cadenas de la plantilla, el número de moléculas de ADN
producidas se duplica en cada ciclo. Debido a esta duplicación, al final de 20 ciclos,
se hacen más de un millón de copias de la plantilla de ADN.

2. Electroforesis para analizar resultados de PCR

La electroforesis en gel de agarosa ha demostrado ser una forma eficiente y efectiva
de separar los ácidos nucleicos. La alta resistencia del gel de agarosa permite el
manejo de geles de bajo porcentaje para la separación de grandes fragmentos de
ADN.
El uso de electroforesis en gel de agarosa revolucionó la separación del ADN. Antes
de la adopción de geles de agarosa, el ADN se separaba principalmente mediante
centrifugación en gradiente de densidad de sacarosa, que solo proporcionaba una
aproximación del tamaño. Para separar el ADN usando electroforesis en gel de
agarosa, el ADN se carga en pozos prefabricados en el gel y se aplica una corriente.

La molécula de ADN (y ARN) está cargada negativamente, por lo tanto, cuando se

coloca en un campo eléctrico, los fragmentos de ADN migrarán al ánodo cargado
positivamente. Debido a que el ADN tiene una relación masa / carga uniforme, las
moléculas de ADN están separadas por tamaño dentro de un gel de agarosa en un
patrón tal que la distancia recorrida es inversamente proporcional al registro de su
peso molecular. Una vez que la corrida es finalizada, se coloca el gel bajo luz UV y se
visualiza

Una "línea" de ADN bien definida en un gel se llama banda. Cada banda contiene un
gran número de fragmentos de ADN del mismo tamaño que han viajado juntos a la
misma posición. Un fragmento único de ADN (o incluso un pequeño grupo de
fragmentos de ADN) no sería visible por sí mismo en un gel.
Al comparar una banda en una muestra con el marcador de peso molecular,
podemos determinar su tamaño aproximado.
 3. PCR en tiempo real
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real es la capacidad de
monitorear el progreso de la PCR a medida que ocurre (es decir, en tiempo real). Por
lo tanto, los datos se recopilan durante todo el proceso de PCR, en lugar de al final
de la PCR. Esto revoluciona por completo la forma en que uno aborda la
cuantificación basada en PCR de ADN y ARN. En la PCR en tiempo real (qPCR), las
reacciones se caracterizan por el punto en el tiempo durante el ciclo cuando se
detecta por primera vez la amplificación de un objetivo en lugar de la cantidad de
objetivo acumulada después de un número fijo de ciclos. Esto se logra incorporando
una molécula fluorescente que se asocia al ADN amplificado, donde el incremento
de esta fluorescencia es la proporcional al incremento de la cantidad de moléculas
de ADN amplificadas en la reacción.

Para la amplificación por PCR en tiempo real además de los reactivos que se
emplean en la PCR punto final, es necesario emplear un fluoróforo. Los fluoróforos
utilizados para seguir la amplificación del ADN durante la PCR en tiempo real pueden
ser de dos tipos: a) fluoróforos con afinidad por el ADN y b) sondas específicas para
fragmentos del ADN, es decir, que sólo emiten fluorescencia cuando se ha
amplificado un fragmento del ADN de interés

a) Fluoróforos con afinidad por el ADN

Estos fluoróforos emiten fluorescencia cuando se unen al ADN. La intensidad
de la fluorescencia se incrementa proporcionalmente a la concentración del
ADN de doble cadena.
b) Sondas especificas
Los sistemas de detección específicos para una secuencia de interés se
pueden dividir en tres tipos: a) sondas de hidrólisis, b) sondas de hibridación
y c) sondas de horquilla. Consisten en la transferencia de energía entre dos
fluoróforos: un donador (reportero) y un aceptor (apagador o quencher), los
cuales emiten fluorescencia a diferente longitud de onda.
 4. RFLP (polimorfismos de longitud de fragmento de restricción)

Los polimorfismos de longitud de fragmento de restricción, o RFLP, son diferencias

entre individuos en la longitud de fragmentos de ADN cortados por enzimas. Las
enzimas de restricción son proteínas que cortan el ADN en secuencias cortas y
específicas llamadas sitios de restricción. Después de que un segmento de ADN se ha
cortado en pedazos con enzimas de restricción, los investigadores pueden examinar
los fragmentos utilizando electroforesis, que separa los fragmentos de ADN de
acuerdo con su tamaño. Si dos individuos tienen diferencias en sus secuencias de
ADN en sitios de restricción particulares, entonces las enzimas de restricción
cortarán su ADN en fragmentos de diferentes longitudes. También puede haber
diferencias en el número de fragmentos de ADN observados entre dos o más
individuos. El análisis RFLP puede usarse como una forma de prueba genética para
observar si un individuo porta un gen mutante para una enfermedad que se
encuentra en su familia.

5. Micromatrices

Las micromatrices o microarrays permiten el análisis en paralelo de más de cien mil

biomoléculas en volúmenes de reacción muy pequeños. Una de sus aplicaciones es
la detección de mutaciones causantes de enfermedad o mutaciones que
predisponen a enfermedad para diagnóstico. Sobre la superficie de una placa de
cristal se sintetizan en un orden determinado miles de oligonucleótidos (fragmentos
cortos de DNA, 20-50 nucleótidos) que contienen todas las mutaciones conocidas de
un gen o todas las variaciones posibles en la región codificante del gen. El DNA de
los pacientes y controles sanos se amplifica y se marca con fluorescencia utilizando
PCR, y luego se añade a la micromatriz. La fluorescencia en una posición
determinada indica que el DNA se ha unido al oligonucleótido.

POST REQUISITOS
 6. Secuenciación

La secuenciación del DNA consiste en determinar el orden exacto de los nucleótidos

(bases, G, A, T y C) a lo largo de un segmento de DNA. De esta secuencia se deduce
la secuencia de aminoácidos de la proteína codificada.

 Sanger

El DNA que se va a secuenciar se desnaturaliza y se mezcla con un cebador

(complementario a un sitio en una de las hebras), polimerasa de DNA y los
cuatro nucleótidos (dNTPs). También se añaden pequeñas cantidades de los
cuatro terminadores de la síntesis (ddNTPs) marcados cada uno con un
fluoróforo distinto. Cada vez que uno de ellos se incorpora previene la
incorporación de otros nucleótidos a la cadena. De esa manera se genera un
conjunto de fragmentos de DNA marcados con fluorescencia que difieren en
tamaño solo en un nucleótido. Los fragmentos se separan mediante
electroforesis en un capilar de un analizador automático. Cuando los fragmentos
van migrando por el capilar pasan por un rayo láser que los hace fluorescer. Un
detector de fluorescencia graba el orden del color de las bandas que luego se
traduce en la secuencia. Finalmente, la secuencia de los fragmentos del gen de
pacientes se compara con la secuencia normal para determinar la presencia de
mutaciones
 NGS

El ADN polimerasa cataliza la incorporación de desoxirribonucleótidos trifosfatos

(dNTP) marcados fluorescentemente en una cadena molde de ADN durante los
ciclos secuenciales de síntesis de ADN. Durante todo el ciclo, en el punto de
incorporación, los nucleótidos se identifican por excitación de fluoróforo. La
diferencia fundamental es que, en lugar de secuenciar un solo fragmento de
ADN, la NGS extiende este proceso a través de millones de fragmentos en una
paralelización masiva.Más del 90% de los datos de secuenciación del mundo son
generados por la secuenciación por síntesis química (SBS) de Illumina. Se realiza
por los siguientes pasos:

1. Preparación de la biblioteca

La biblioteca de secuenciación se prepara por fragmentación aleatoria de la

muestra de ADN o ADNc, seguido de unión de adaptador. Alternativamente, la
"etiquetación" combina la fragmentación y las reacciones de ligadura en un solo
paso que aumenta en gran medida la eficiencia del proceso de preparación de la
biblioteca. Los fragmentos adaptados se amplifican por PCR y se purifican en gel.

2. Generación de clusters

Para la generación de clúster, la biblioteca se carga en una celda de flujo donde

los fragmentos se capturan en oligos unidos a la superficie, complementarios a
los adaptadores de la biblioteca. Cada fragmento se amplifica luego en clones de
clusters distintos a través de la amplificación del puente. Cuando se completa la
generación de clúster, las plantillas están listas para la secuencia.

3. Secuenciación

Se utiliza un método basado en termociclador reversible que detecta bases

individuales ya que están incorporados en hebras de plantilla de ADN. Como los
cuatro dNTP reversibles vinculados al termociclador están presentes durante
cada ciclo de secuenciación, la competencia natural minimiza el sesgo de la
 corporación y reduce en gran medida las tasas de error en bruto en comparación
con otras tecnologías.

4. Análisis de datos

Durante el análisis y la alineación de datos, las lecturas de la secuenciación

recientemente identificadas se alinean con un genoma de referencia. Después
del alineamiento, es posible encontrar muchas variaciones de análisis, como el
polimorfismo de nucleótido único (SNP) o la identificación por inserción /
eliminación (indel), el recuento de lectura para los métodos de ARN, el análisis
filogenético o metagenómico, entre otros.

Referencias
Pei Yun Lee, John Costumbrado, and Yong Hoon Kim (2012). Agarose Gel
Electrophoresis for the Separation of DNA Fragments

Aguilera P, Ruiz M , Rocha M, Pineda B y Chánez M. PCR en tiempo real

F. Claverie Martín, E. Ramos Trujillo, F.J.(2008) González Paredes. Técnicas para el

diagnóstico molecular de enfermedades hereditarias

Guía de prácticas de laboratorio. Cátedra de Genética 2013-3014

EJERCICIO 1 (3ptos)

PRÁCTICA Nº 1 TEMA: Técnicas e instrumentos en diagnóstico genético

Apellidos:__________________________Nombres:___________________________
Paralelo: ________ Mesa Nº. ____ Fecha: ___________
Calificación:_______________
Analice los siguientes gráficos

EJERCICIO 1 (4pts)

Utilice el grafico para colocar el peso de las bandas en la columna correspondiente de la tabla

Muestr MIRU2 MIRU4 MIRU MIRU16 MIRU2 MIRU23 MIRU2 MIRU26 MIRU27 MIRU3 MIRU39 MIRU 40
a 10 0 4 1
Peso bp

1 pto

¿Por qué es importante conocer el tamaño de la banda? 2 pto

_________________________________________________________________________________________
EJERCICIO 2 (2ptos)

¿Qué ADN corresponde a la escena del crimen? Sospechoso #1, #2 o #3?

……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

Señale las bandas que se comparten entre el padre y el niño. Seleccione quién es positivo para la prueba
de paternidad?
……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

Señale las bandas que se comparten entre la victima, la evidencia y los sospechosos. Quién es el culpable
en la escena del crimen: sospechoso 1 o 2?

……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
EJERCICIO 3 (1pto)

Qué es heterocigosidad? Qué es la pérdida de heterocigosis? Consulta

…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
…
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

EJERCICIO 4 (1pt)

Lea a continuación 3 informes genéticos.

INFORME GENETICO

PACIENTE 1:

ESTUDIO DE MAPEO GENETICO POR ARRAY

Se encontró 51 Mb de material genético con variaciones en el número de copias cromosómicas (normal: dos
copias). Se evidencian alteraciones como ganancia y perdida de material genético de tamaño inferior a una
megabase.

RESUMEN: arr(1p31.1,2q23.3,2q24.1,5q21.1,11p11.2,11q13.1,11q13.4, 12p11.22,

15q14,17q22,19q13.2,20q11.21,Xp22.33,Xq11.1)x2
hmz,arr (2q11.2)X1, (6q26)x1,(14q32.33)x3,(Xp22/33)x3

Atentamente,

Dr. Cesar Paz y Miño Dra. Paola E. Leone

Medico Genetista Bióloga Genetista
 INFORME GENÉTICO

PACIENTE2:

ESTUDIO DE MAPEO GENETICO POR ARRAY

Se encontró 50 Mb de material genético con variaciones en el número de copias cromosómicas (normal: dos
copias). Se evidencian alteraciones como ganancia y perdida de material genético de tamaño inferior a una
megabase.

RESUMEN:
arr(3p12.2,3q22.2,4p15.1,6p22.3,7q11.22,11p11.2,12q15,17q21.2,Xp11.4,Xp11.22,Xq11.1,Xq13.2,Xq22.3)x
2 hmz,arr(3p25.2)x3,(6p21.33)x1,(10q26.3)x3,(14q32.33)x3

Atentamente,

Dr. Cesar Paz y Miño Dra. Paola E. Leone

Medico Genetista Bióloga Genetista
 INFORME GENETICO

PACIENTE3:

ESTUDIO DE MAPEO GENETICO POR ARRAY

Se encontró 86 Mb de material genético con variaciones en el número de copias cromosómicas (normal: dos
copias). Del resultado cabe resaltar la ganancia de 3p25.3 y sobre todo de 9p24.3 que se interpretaría como
una trisomía parcial del brazo corto del cromosoma 9 lo que explica el fenotipo que presenta la paciente.

RESUMEN: arr(1q25.1,3p12.2,3p11.2,7q21.3,9p21.3,12q11,12q12,14q21.2,20q11.21,Xq23,Xq27.3)x2
hmz,arr(3p25.2)x3,(7p14.1)x1,(9p24.3)x3,(14q11.2)x1,(14q32.3)x3,(Xq26.3)x4

Atentamente,

Dr. Cesar Paz y Miño Dra. Paola E. Leone

Medico Genetista Bióloga Genetista

De los 3 informes presentados, qué paciente posee más variación en el número de copias y por lo tanto má
s anomalías por qué?

…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
…
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
EJERCICIO 5 (2ptos)

Enumerar las bandas que se observan con su respectivo peso. Confirme los pesos de HPV 16, 61 y la
coinfección.

Ejemplo HPV