Aguuscullentes, Ags.

'ueves de Murzo de





Centro de Ciencias 8sicas
Departamento de qumica


Mdico Ciru[ano


Laboratorio de 8ioqumica

Pre Reportes

rct|ca No 8
"Determ|nac|n de rote|nas 1ota|es y A|bm|na en suero"

rct|ca No 11
"Cuant|f|cac|n de nemog|ob|na"

rct|ca No 13
"Determ|nac|n de G|ucosa y Co|estero| en Sangre"

Alumno: Dulce Mara Pedroza Montoya

C



Profesora: A.q.8. 1anett Snchez Arana


rct|ca No 8
"Determ|nac|n de rote|nas 1ota|es y A|bm|na en suero"

Cb[et|vo(s)
1 Ll alumno reallzara la cuanLlflcacln especLrofoLomeLrlca de proLelnas LoLales y albumlna en
muesLras de suero
2 Ll alumno comprender la lmporLancla de sollclLud de esLos parmeLros en paclenLes con dano
hepLlco y renal el dlseno del ensayo comprobando el clculo con una curva paLrn y con un klL
comerclal
Introducc|n
Determ|nac|n de rote|nas 1ota|es
3
klvANclA cllNlcA
as proLelnas LoLales resulLan uLlles para reallzar el segulmlenLo de los camblos LoLales de los
nlveles de proLelnas causados por dlversos esLados de enfermedad
CeneralmenLe se reallza [unLo con oLras pruebas Lales como la seroalbumlna las pruebas de la
funcln hepLlca o la elecLroforesls de proLelnas Con frecuencla se calcula una proporcln de
albumlna/globullna a fl n de obLener lnformacln adlclonal
Se encuenLran un aumenLo de los nlveles duranLe la deshldraLacln el mleloma mulLlple y las
enfermedades hepLlcas crnlcas mlenLras que un descenso de nlveles es proplo de la
enfermedad renal y del fallo hepLlco Lermlnal

M1OuOlOClA
os meLodos que se han ldeado para la deLermlnacln de las proLelnas LoLales lncluyen la
medlcln de la densldad el lndlce de refraccln la absorbancla de la luz en la regln ulLravloleLa y
la reaccln de las proLelnas con el reacLlvo de lolln y ClocalLeau
PlsLrlcamenLe las proLelnas LoLales se deLermlnaron por prlmera vez medlanLe el meLodo de
k[eldahl que aun hoy slgue slendo un meLodo de referencla a reaccln del blureL se ha uLlllzado
desde flnales del slglo xlx y es el meLodo de eleccln en los laboraLorlos cllnlcos debldo a su
slmpllcldad rapldez y flabllldad
Se han propuesLo mulLlLud de modlfl caclones del meLodo del blureL Ll reacLlvo uLlllzado en esLe
procedlmlenLo esL basado en el Lraba[o de Coodwln y col y llack y Woollen
os enlaces pepLldlcos de la proLelna reacclonan con los lones de cobre ll en solucln alcallna para
formar un comple[o azulvloleLa (la llamada reaccln del blureL) comple[ndose cada ln de cobre
con 3 6 enlaces pepLldlcos Se anade LarLraLo como esLablllzanLe mlenLras que se uLlllza yoduro
a fln de prevenlr la auLoreduccln del comple[o de cobre alcallno Ll color formado es proporclonal
a la concenLracln de proLelnas y se mlde a 320360 nm ara los anallzadores blcromLlcos se
debe fl [ar la longlLud de onda de blanco a 600 700 nm

Determ|nac|n de a|bm|na
1

a albumlna de las muesLras de plasma se puede deLermlnar por el camblo de coloracln del verde
de bromocresol cuando se une selecLlvamenLe a esLa a pP 42 Ll camblo de coloracln se refle[a
en que se provoca un camblo en la absorbancla del verde de bromocresol que Llene un mxlmo
de absorcln a 440 nm y pasa a presenLar su mxlmo a 630 nm Ll verde de bromocresol es
amarlllo mlenLras que el comple[o proLelnacoloranLe Llene un lnLenso color azul LsLe meLodo
permlLe deLecLar de 30 g a 02 g de albumlna

,ater|a| y equ|po
* 8ano de agua con LemperaLura conLrolada
* lpeLas de 1 y 3 m
* 8 Lubos de ensaye

8eacLlvos
* Suero fresco no hemollzado
* 8eacLlvo de 8lureL para proLelnas LoLales
1arLraLo de na y k 18 mmol/ yodaLo de k 10 mmol/ sulfaLo de cobre 12 mmol/ naCP
200 mmol/
* 8eacLlvo de color para albumlna
cldo lcLlco 806 mmol/ verde de bromocresol 1432 mmol/ naCP 30 mmol/ 1ween
2020 m/
* Solucln paLrn para proLelnas LoLales y albumlna Albumlna serlca bovlna 4 g/d
noLa uLlllzar agua reclen desLllada o deslonlzada con un pP 70

roced|m|ento
1 ara la CuanLlflcacln de roLelnas 1oLales

|petear con m|crop|peta en |os tubos de ensayo
8lanco aLrn rob|ema
Suero
atrn
keact|vo de 8|uret


23 m

30
23 m
S0 L

2S mL

Mezclar y de[ar en bano Marla a 37 C por 13 mlnuLos Medlr las absorbanclas del problema y del
paLrn conLra el blanco a 340 nm Ll color de la reaccln es esLable duranLe 6 horas

Calculo roLelna LoLal (g/100 m) (Abs roblema / Abs aLrn) x 4

valores de referencla
AdulLos y nlnos a parLlr de Lres anos 67 a 87 g/100 m
nlnos menores de 3 anos 34 a 87 g/100 m
8eclen nacldos 32 a 90 g/100 m

2 ara la CuanLlflcacln de Albumlna

|petear en |os tubos de ensayo
8lanco aLrn rob|ema
Suero 10 L
atrn
keact|vo de co|or

23 m
10
23 m

2S mL

Mezclar suavemenLe y de[ar en reposo a LemperaLura enLre 13 y 23 C por 13 mlnuLos Medlr la
absorbancla del problema y del paLrn conLra el blanco a 620 nm Ll color de la reaccln es esLable
duranLe 6 horas

Calculo Albumlna (g/100 m) (Abs roblema / Abs aLrn) x 4

valores normales de referencla 38 a 31 g/100 m

Cuest|onar|o
1) "Cu| es e| va|or norma| de prote|nas tota|es en or|na de 24 hrs en un adu|to?
Ll valor normal es de menos de 130 mlllgramos por dla o de menos de 10 mlllgramos por declllLro
de orlna
2) "Cu|es son |as |nd|cac|ones que se deben dar a| pac|ente para co|ectar |a or|na de 24
horas?
Ll medlco le puede sollclLar que de[e de Lomar LemporalmenLe cualquler medlcamenLo que pueda
lnLerferlr con el examen
Se recoge una muesLra aleaLorla de orlna en un reclplenLe llmplo Ln el caso de la recoglda de
orlna de 24 horas debe recogerse Loda la orlna duranLe un perlodo de 24 horas Ls lmporLanLe
manLener la muesLra refrlgerada duranLe esLe Llempo Ln el reclplenLe no debe haber nlngun
conservanLe
3) "or qu es |mportante cuant|f|car prote|nas tota|es?
ebldo a que se presenLan padeclmlenLos en que el valor de las proLelnas LoLales es elevado por
e[emplo en la orlna a causa de deshldraLacln (aporLe lnsuflclenLe de agua vmlLos o dlarreas
severos enfermedad de Addlson ceLoacldosls dlabeLlca) o a un aumenLo en la concenLracln de
proLelnas especlflcas (lnmunoglobullnas en lnfecclones mleloma mulLlple)

rct|ca No 11
"Cuant|f|cac|n de nemog|ob|na"
Cb[et|vo(s)
eLermlnar la cuanLlflcacln de hemogloblna en una muesLra de sangre a Lraves de un meLodo
colorlmeLrlco

Introducc|n
a hemogloblna (Pb) presenLe en la muesLra en presencla de ferrlclanuro se oxlda a hemlgloblna
(Pl Lamblen llamada meLahemogloblna) que a su vez se comblna con lones clanuro a pP 72
convlrLlendose en clanuro de hemlgloblna (PlCn o clanmeLahemogloblna) 1odos los
homocromgenos a excepcln de la sulfohemogloblna reacclonan compleLamenLe en 3 mlnuLos
y la lecLura se efecLua a 340 nm
a hemogloblna (P8) es una proLelna globular que esL presenLe en alLas concenLraclones
en lo glbulos ro[os y se encarga del LransporLe de C2 del aparaLo resplraLorlo hacla los Le[ldos
perlferlcos y del LransporLe de CC2 y proLones (P+) de los Le[ldos perlferlcos hasLa los pulmones
para ser excreLados os valores normales en sangre son de 13 18 g/dl en el hombre y 12 16
g/dl en la mu[er
as cuaLro cadenas pollpepLldlcas de la Pb conLlenen cada una un grupo prosLeLlco el Pem un
LeLraplrrol clcllco que les proporclona el color ro[o a los hemaLles un grupo prosLeLlco es una
porcln no pollpepLldlca que forma parLe de una proLelna en su esLado funclonal Ll Lomo de
hlerro se encuenLra en esLado de oxldacln ferroso (+2) y puede formar 3 o 6 enlaces de
coordlnacln dependlendo de la unln del oxlgeno a la Pb (oxlPb desoxlPb) CuaLro de esLos
enlaces se producen con los nlLrgenos plrrllcos de la porflrlna en un plano horlzonLal Ll qulnLo
enlace de coordlnacln se reallza con el nlLrgeno del lmldazol de una hlsLldlna denomlnada
blstlJloo ptoxlmol llnalmenLe el sexLo enlace del
Lomo ferroso es con el C2 que adems esL unldo a un segundo lmldazol de una hlsLldlna
denomlnada blstlJloo Jlstol
1anLo el qulnLo como el sexLo enlace se encuenLran en un plano perpendlcular al plano del
anlllo de porflrlna a parLe porflrlnlca del Pem se slLua denLro de una bolsa hldrofblca que se
forma en cada una de las cadenas pollpepLldlcas
Cuando una proLelna esLa con su grupo prosLeLlco se denomlna boloptoteloo y cuando
esLa sln esLe se lo denomlna opoptoteloo
Adems por poseer un grupo prosLeLlco se dlce que la Pb es una proLelna coojoqoJo es una
bemoptoteloo

os nlveles de hemogloblna por deba[o de lo normal pueden deberse a
* Anemla (dlversos Llpos)
* Sangrado
* esLruccln de glbulos ro[os
* eucemla
* esnuLrlcln
* eflclenclas nuLrlclonales de hlerro folaLo vlLamlna 812 y vlLamlna 86
* SobrehldraLacln
os nlveles de hemogloblna por enclma de lo normal pueden deberse a
* CardlopaLla congenlLa
* Cor pulmonale
* eshldraLacln
* LrlLroclLosls
* nlveles ba[os de oxlgeno en la sangre (hlpoxla)
* llbrosls pulmonar
* ollclLemla vera

Determ|nac|n de hemog|ob|na
1
os nlveles de hemogloblna en sangre pueden deLermlnarse por un meLodo especLrofoLomeLrlco
que se fundamenLa en la capacldad que presenLan la hemogloblna y sus derlvados (excepLo la
sulfohemogloblna) en medlo alcallno y en presencla de ferroclanuro poLslco de ser oxldados a
meLahemogloblna esLa ulLlma reacclona con el clanuro poLslco para produclr clanohemogloblna
la cual presenLa un mxlmo de absorcln a 340 nm a absorbancla es proporclonal a la canLldad
de hemogloblna presenLe en las muesLras

,ater|a|

O 1 gradllla
O 1 Lubo de ensayo
O 2 plpeLas (e 1 m y 3 m)

8eacLlvos
O Sangre humana
O 8eacLlvo de rabkln

roced|m|ento

1 Marcar 2 Lubos de ensayo como problema (p) y blanco (b)
2 Agregar 3 m de la solucln de rabkln a cada uno de los Lubos de ensayo
3 Agregar 002 ml de sangre al Lubo de ensayo marcado como problema (p)
4 Mezclar por lnmersln los Lubos de ensayo y de[arlos reposar duranLe 10 mlnuLos
3 eer la absorbancla de (p) a la longlLud de onda de 340 nm en el especLrofoLmeLro uLlllzando
como blanco la solucln de rabkln (b) Ll color es esLable 20 mlnuLos despues de Lermlnada la
reaccln

Clculos
Absorbancla del problema (p) x 368 Cramos de hemogloblna / 100 m

valores de referencla
Gramos de hemog|ob|na ] 100 mL
nombres 14 18
,u[eres 12 16
kec|n nac|dos 16 2S
Lactantes 10 1S
reesco|ares 11 14
Lsco|ares 12 16

Cuest|onar|o

1 ";u es |a hemog|ob|na? a hemogloblna es una proLelna globular consLlLulda por cuaLro
subunldades proLelcas Cada subunldad denomlnada cadena de hemogloblna esL formada por
una cadena pollpepLldlca denomlnada globlna que esL unlda de modo no covalenLe a un grupo
hemo "Cu| es su func|n f|s|o|g|ca? a funcln de la hemogloblna es la de LransporLar oxlgeno
desde los pulmones a los Le[ldos y dlxldo de carbono desde esLos a los pulmones donde se
produce su ellmlnacln

2 ";u d|ferenc|a hay entre hemog|ob|na A hemog|ob|na A
2
y hemog|ob|na I? a hemogloblna
es una proLelna con esLrucLura cuaLernarla es declr esL consLlLulda por cuaLro cadenas
pollpepLldlcas dos -y dos .(hemogloblna adulLa PbA) dos - y dos 0(forma mlnorlLarla de
hemogloblna adulLa PbA2 normal 2) dos -y dos (hemogloblna feLal Pbl)

3 "A part|r de que concentrac|n de hemog|ob|na se d|ce que un varn adu|to es anm|co y una
mu[er adu|ta es anm|ca? a anemla es deflnlda por el nlvel de hemogloblna a mayorla de los
proveedores de culdado de salud concuerdan en que un nlvel de hemogloblna por deba[o de 63
lndlca anemla que puede llegar a ser morLal os nlveles normales son de al menos 12 en las
mu[eres y 14 en los hombres

rct|ca No 13
"Determ|nac|n de G|ucosa y Co|estero| en Sangre"
Cb[et|vo(s)
Ll alumno efecLuar dlferenLes pruebas uLlllzando Llrlllas de qulmlca seca
Aprender a mane[ar un reflecLmeLro y comprender la lmporLancla de la valoracln de los
nlveles del colesLerol sangulneo
Ser capaz de enLender el fundamenLo de la prueba de qulmlca seca para el colesLerol

Introducc|n
Determ|nac|n de G|ucosa
2
a glucosa es un azucar senclllo que se encuenLra en clerLos allmenLos especlalmenLe en las
fruLas consLlLuye una fuenLe fundamenLal de energla presenLe en los llquldos corporales de los
anlmales y el hombre
a glucosa enLra a Lodas las celulas pero en musculos Le[ldo adlposo y varlos Le[ldos ms la
lnsullna faclllLa la enLrada al aumenLar el numero de LransporLadores de la glucosa en las
membranas celulares
una funcln lmporLanLe del hlgado es la de amorLlguar las concenLraclones de glucosa en sangre
LsLa accln se reallza en gran parLe medlanLe la accln de la glucoqulnasa una enzlma propla del
hlgado Asl pues el hlgado Llene unas caracLerlsLlcas unlcas en cuanLo a que es capaz de responder
a las concenLraclones de glucosa en sangre elevadas medlanLe un aumenLo de la capLacln y
fosforllacln de la glucosa que flnalmenLe da lugar a un depslLo en forma de glucgeno
os carbohldraLos de la dleLa en su mayor parLe pollmeros de las hexosas de las que las ms
lmporLanLes son galacLosa frucLosa y glucosa a mayor parLe de los monosacrldos que exlsLen
en el organlsmo son los lsmeros Ll prlnclpal producLo de la dlgesLln de los carbohldraLos y el
prlnclpal azucar clrculanLe es la glucosa Ll valor normal de glucosa sangulnea en ayunas en la
sangre venosa perlferlca es de 70 a 110 mg/dl Ln la sangre arLerlal el valor de glucosa es 13 a 30
mg/dl mayor que en la venosa
Ln la lnanlcln la uLlllzacln de la glucosa es anormalmenLe ba[a a causa de que los sumlnlsLros de
glucosa son lnsuflclenLes Ln la dlabeLes melllLus la uLlllzacln de la glucosa es Lamblen ba[a pero
en esLe caso la razn es que el esLlmulo hormonal para la uLlllzacln de la glucosa es declr la
lnsullna es deflclenLe3
a dlabeLes melllLus es una enfermedad crnlca que aparece como consecuencla de la deflclencla
absoluLa o relaLlva de lnsullna debldo a alLeraclones de su slnLesls secrecln o funcln a
dlabeLes melllLus se caracLerlza por nlveles alLos de glucosa en sangre y compllcaclones como
reLlnopaLla neuropaLla nefropaLla y enfermedad cardlovascular a deLermlnacln de glucosa en
sangre o glucemla es la prueba por excelencla para dlagnsLlco de dlabeLes y de las hlpoglucemlas

e los meLodos empleados en el laboraLorlo con el ob[eLo de deLermlnar la glucosa el
procedlmlenLo colorlmeLrlco de Somogylnelson es sln duda uno de los ms uLlllzados
preflrlendolo al del lollnWu por su mayor especlflcldad 8eclenLemenLe se han desarrollado
enLre oLros el meLodo de la oLoluldlna que deLermlna solamenLe aldohexosas y el meLodo
enzlmLlco de la glucosaoxldasa el cual es especlflco para glucosa
a deLermlnacln de glucosa con la Llra reacLlva es un nuevo meLodo rpldo y baraLo que se ha
empleado en los ulLlmos anos a Llra reacLlva PaemoglukoLesL 20800 se basa en la reaccln de la
glucosaoxldasaperoxldasa os slsLemas lndlcadores especlales permlLen la deLeccln lncluso de
valores de glucosa muy ba[os os valores ms elevados dan lugar a una creclenLe lnLensldad de
color de manera que queda garanLlzada una buena dlferenclacln a Lraves del lnLervalo enLero
a glucosaoxldasa es ampllamenLe especlflca para .-glucosa una solucln acuosa de glucosa
conLlene la Lercera parLe de --glucosa y dos Lerceras parLes de .-glucosa en equlllbrlo A
medlda que la .-glucosa es oxldada por la glucosaoxldasa la -- glucosa se Lransforma en la .por
la ley de accln de masas a concenLracln de glucosa es proporclonal al P2C2 producldo o al
oxlgeno que se consume y ambos son suscepLlbles de medlcln

Clucosaoxldasa

-glucosa + C2 glucono-0-lacLona + P2C2

as enzlmas que lnLervlenen en procesos de oxldacln y reduccln se denomlnan
oxldorreducLasas Se claslflcan en cuaLro grupos oxldasas deshldrogenasas hldroperoxldasas y
oxlgenasas as oxldasas uLlllzan oxlgeno como acepLor del hldrgeno CaLallzan la ellmlnacln de
hldrgeno de un susLraLo usando al oxlgeno como acepLor de hldrgeno lorman agua o peroxldo
de hldrgeno como un producLo de la reaccln os valores de referencla van desde 74 110
mg/ml

Determ|nac|n de co|estero|
1

a deLermlnacln de colesLerol puede llevarse a cabo fundamenLalmenLe medlanLe dos Llpos de
meLodos qulmlcos y enzlmLlcos os enzlmLlcos son ms preclsos pero Lamblen ms cosLosos
Ll colesLerol al lgual que oLros esLeroles se encuenLra en muchos Le[ldos y puede exlsLlr LanLo en
forma llbre como en forma esLerlflcada con un cldo graso de cadena larga or LanLo en una
muesLra se puede anallzar cada fraccln lndependlenLemenLe o blen puede deLermlnarse el
colesLerol LoLal ara la separacln de las fracclones llbre y esLerlflcada se puede uLlllzar dlglLonlna
que es un glucsldo naLural que forma con el colesLerol llbre un comple[o lnsoluble en la mayorla
de los dlsolvenLes lncluso el agua pudlendose separar de esLa manera el colesLerol llbre del
esLerlflcado Ll colesLerol LoLal (llbre ms esLerlflcado) puede exLraerse de una muesLra uLlllzando
un dlsolvenLe orgnlco como el eLer de peLrleo el cloroformo o el alcohol lsoproplllco a
cuanLlflcacln puede reallzarse dlrecLamenLe en el exLracLo obLenldo uLlllzando un meLodo
qulmlco os resulLados pueden me[orarse sl prevlamenLe a la cuanLlflcacln los esLeres de
colesLerol se hldrollzan ya sea calenLando la muesLra a reflu[o con hldrxldo poLslco 1 M en
eLanol 93 o blen sea uLlllzando la enzlma esLer colesLerol hldrolasa os meLodos enzlmLlcos no
mlden el colesLerol esLerlflcado de manera que cuando se uLlllza esLe Llpo de meLodos para la
deLermlnacln del colesLerol LoLal es necesarla una eLapa prevla de hldrllsls ara medlr el
colesLerol llbre no se requlere reallzar una preclplLacln con dlglLonlna



MeLodos qulmlcos para la deLermlnacln de colesLerol
os meLodos qulmlcos se basan en la reaccln de lebermann8urchard Ll colesLerol llbre y el
esLerlflcado son oxldados con una mezcla de cldo sulfurlco y anhldrldo aceLlco para formar un
producLo coloreado del que puede deLermlnarse la absorbancla (llgura 1623) LsLa reaccln no
es muy especlflca ya que reacclonan Lamblen oLros esLeroles Adems cuando se uLlllzan muesLras
de sangre la hemogloblna y la blllrrublna absorben en la mlsma regln que el producLo coloreado
por lo que se pueden obLener resulLados errneamenLe elevados

llgura 1623 eLermlnacln de colesLerol por un meLodo basado en la reaccln de lebermann
8urchard

MeLodos enzlmLlcos para la deLermlnacln de colesLerol
Ln general los meLodos enzlmLlcos son ms flables y exacLos que los qulmlcos Como slo
permlLen la deLermlnacln del colesLerol llbre para deLermlnar colesLerol LoLal es necesarla la
hldrllsls prevla de los esLeres de colesLerol (llgura 1626) osLerlormenLe el colesLerol llbre
(LoLal) se oxlda por accln de la enzlma colesLerol oxldasa a 4colesLen3ona produclendose
slmulLneamenLe perxldo de hldrgeno a 4colesLen3ona Llene un mxlmo de absorcln a 240
nm pero alLernaLlvamenLe puede medlrse la canLldad de perxldo de hldrgeno uLlllzando un
lndlcador Pay un meLodo en que se uLlllza como lndlcador la oxldacln del meLanol a
formaldehldo que puede medlrse adlclonando nP + 4 y aceLllaceLona ya que se forma un
comple[o coloreado amarlllo que puede deLermlnarse a 403 nm LsLe Llpo de anllsls es especlflco
de manera que no es preclso reallzar un proceso prevlo de exLraccln Ls el meLodo ms uLlllzado
hoy en dla Sl el lndlcador oxldado Llene color se mlde su absorbancla en un especLrofoLmeLro
1amblen puede reallzarse una medlda por fluorlmeLrla e lncluso puede uLlllzase un elecLrodo de
oxlgeno que mlda su consumo en la segunda reaccln



llgura 1626 Lsquema de meLodo enzlmLlco para la deLermlnacln de colesLerol


,ater|a| keact|vos y ,uestras
O 8eflecLmeLro
O anceLas
O 1orundas
O Apllcador para lanceLas
O 1lras reacLlvas para glucosa
O 1lras reacLlvas para colesLerol
O Sangre compleLa

roced|m|ento

Ln ambos A!uS1A8SL A A ML1CCCClA L lA88lCAn1L

Cuest|onar|o
1) "Cu| es e| fundamento de |a prueba de determ|nac|n de g|ucosa med|ante |a t|ra
react|va?
Se basa en la reaccln de la glucosaoxldasaperoxldasa os slsLemas lndlcadores
especlales permlLen la deLeccln lncluso de valores de glucosa muy ba[os os valores ms
elevados dan lugar a una creclenLe lnLensldad de color de manera que queda garanLlzada
una buena dlferenclacln a Lraves del lnLervalo enLero
a glucosaoxldasa es ampllamenLe especlflca para .-glucosa una solucln acuosa de
glucosa conLlene la Lercera parLe de --glucosa y dos Lerceras parLes de .-glucosa en
equlllbrlo A medlda que la .-glucosa es oxldada por la glucosaoxldasa la -- glucosa se
Lransforma en la .por la ley de accln de masas a concenLracln de glucosa es
proporclonal al P2C2 producldo o al oxlgeno que se consume y ambos son suscepLlbles
de medlcln

Clucosaoxldasa

-glucosa + C2 glucono-0-lacLona + P2C2


2) Lxp||que e| fundamento de |a prueba de determ|nac|n de co|estero| por t|ra react|va

ara la deLermlnacln de colesLerol LoLal se uLlllzan reacLlvos comerclales que lncluyen
las enzlmas y susLraLos necesarlos para la cuanLlflcacln de Lodas las formas de colesLerol
presenLes en el suero (lt cometclol Je lloeotcbemlcols) as reacclones que Llenen lugar
son
CPL
LsLeres de colesLerol + P
2
C ColesLerol + Ac Crasos

CPC
ColesLerol + C
2
+ P
2
C ColesLenona + P
2
C
2

C
P
2
C
2
+ lenol + 4A Culnona + P
2
C

1 una colesLerol esLearasa (CPL) hldrollza los esLeres de colesLerol a colesLerol mas cldos
grasos llbre
2 A conLlnuacln una colesLerol oxldasa (CPC) oxlda Lodo el colesLerol a colesLenona y
perxldo de hldrgeno
3 Ll perxldo de hldrgeno es susLraLo de una peroxldasa (C) que [unLo con 4amlno
fenazona (4A) da lugar a la formacln de una qulnona ro[a
a qulnona formada es proporclonal a la concenLracln de colesLerol en la muesLra

3) "Cu|es son |os va|ores de referenc|a para e| co|estero| de ba[a dens|dad y e| de a|ta
dens|dad?

VaIores de referencia de coIesteroI
TotaI LDL DL
menos <190
mg/dI
menos de
115mg/dl
Hombres Mujeres
al menos
40mg/dl
al menos
45mg/dl

4) ";u factores pueden ocas|onar errores en |as med|c|ones de g|ucosa y co|estero| por |as
tcn|cas de t|r|||as react|vas?
8euLlllzacln de las Llras (as Llras reacLlvas son para un slo uso)
a uLlllzacln de suero o plasma
lnLerferenclas AceLoamlnofeno sallcllaLos cldo urlco cldo ascrblco (vlLamlna
C) y oLras susLanclas reducLoras (cuando se encuenLran en concenLraclones
sangulneas normales o en concenLraclones LerapeuLlcas normales) no afecLan
slgnlflcaLlvamenLe los resulLados Sln embargo concenLraclones anormalmenLe
alLas en sangre pueden causar resulLados alLos lncorrecLos
a mala lecLura del cdlgo de la Llra C blen la uLlllzacln de una Llra caduca
oblar corLar o alLerar de alguna forma una Llra reacLlva

S) "Cu|es son |os |nterva|os o rangos de med|c|n de |as t|r|||as de g|ucosa y de co|estero| y
como se comparan d|chos rangos con |os va|ores de referenc|a norma|es para ambos
metabo||tos?


GIucosa CoIesteroI TrigIicridos

ntervalos
de
medicin
20 - 600 mg/dl
(1.1 - 33.3 mmol/l)
150 - 300 mg/dl
(3.88 - 7.76
mmol/l)
70 - 600 mg/dl
(0.8 - 6.86 mmol/l)
Precisin < 3 % < 5 % < 5 %
Exactitud 5 % comparado
con un mtodo de
precipitado libre de
protena hexocinasa
5 %
comparado con
el mtodo
CHOD-PAP
3 % comparado
con el mtodo
GPO-PAP
Volumen de la muestra Una gota de sangre
Principio de medicin Fotometra de reflectancia
Material de muestra Sangre capilar aplicada
directamente de la yema del
dedo o sangre venosa con
EDTA

ado que los valores normales de colesLerol LoLal son 190 mg/dl pueden ser medldos a
la perfeccln por esLe Llpo de Llras sln embargo debemos Lener en cuenLa que en esLe
caso no se reglsLrarlan valores muy ba[os o exceslvamenLe alLos
Ln relacln a la glucosa sus valores normales oscllan enLre 70110 mg/dl en esLe caso el
rango de medlcln es ms ampllo en las Llras


8|b||ograf|a Genera|
1) 8oca llar Cllver !ordl 8odrlguez Ana Marla 8loqulmlca Lecnlcas y meLodos Lspana
LdlLorlal Pellce 2004 CopyrlghL 2004 LdlLorlal Pellce All rlghLs reserved
hLLp//slLeebrarycom/llb/unlveraguascallenLessp/oc?ld10066476ppg243

2) hLLp//wwwcucludgmx/esLudlosreglonales/ponenclas/mesa202/8esumen20LxLenso
201lra208eacLlva20LncuenLropdf ConsulLado por ulLlma vez el dla 30/03/11

3) hLLps//wwwLhermocom/e1hermo/CMA/ls/varlous/llle_28467pdf ConsulLado por
ulLlma vez el dla 30/03/11

4) hLLp//wwwdlavanLlaLamcom/dlavanL/CMSlronLhLml?pgld310003100231
ConsulLado por ulLlma vez el dla 30/03/11