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ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE BACTERIAS ASOCIADAS AL SARGAZO DEL CARIBE MEXICANO

Poster · November 2019

DOI: 10.13140/RG.2.2.18003.32801

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Karina Maldonado Lorena Pedraza

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Universidad Iberoamericana Ciudad de México
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Sylvie Le Borgne
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 ACTVIDAD ENZIMÁTICA DE BACTERIAS ASOCIADAS AL
SARGAZO DEL CARIBE MEXICANO
Karina a
Maldonado , Lorena
Pedraza ,
aDepartamento de Ingeniería Química, Industrial y de Alimentos, Universidad Iberoamericana, 01219
México D.F.
bDepartamento de Procesos y Tecnología, UAM-Cuajimalpa, 05348 México D.F.
ib.karinamaldonado@gmail.com
Introducción
El sargazo es una macroalga flotante color marrón, que se puede encontrar
en las costas del Caribe, especialmente Sargassum nathans y fluitans1. La
aparición de esta alga de manera ocasional (meses de otoño e invierno) ha sido
común, sin embargo, en los últimos años su arribo ha sido masivo y en todas
las estaciones del año, generando preocupación a los pobladores por posibles
daños económicos y ecológicos.
Desde inicios de 2011 a 2018 el Caribe mexicano ha experimentado un
incremento sin precedentes de Sargassum spp1. esta engloba 150 especies2 y
está compuesta por polímeros como alginato, fucoidano, celulosa entre otros
(Fig. 1).
A pesar de ser considerada una plaga, esta macroalga cumple con una
función, que es dar albergue a diversas especies marinas, mientras realiza su
recorrido en el océano, por lo que se debe buscar que la posible solución no
dañe la función que este tiene en el ecosistema.
Las comunidades marinas microbianas juegan un papel importante en la
degradación de estas algas, en el intercambio de nutrientes y en los ciclos
biogeoquímicos; debido a que los compuestos de alto peso molecular no
pueden ser catabolizados de manera directa las bacterias deben hidrolizar los
polímeros a moléculas más pequeñas y de esta forma incorporarlos al
metabolismo mediante enzimas extracelulares.
El propósito de este trabajo es buscar enzimas capaces de degradar los
componentes del sargazo, así como otras de interés biotecnológico.
Figura 1 ) Estructura de los polisacáridos de las algas cafés adaptada de (adaptada de Kloareg et al.,
1986).
Metodología
Se aislaron 19 microorganismos de muestras del sargazo del Caribe
mexicano en agar con medio ASW el cual contiene en g/L (5.94 MgSO4, 4.53
MgCl2, 0.64 KCl, 1.3 CaCl2, 5 YE, 35 NaCl); a estos aislados se le realizaron
pruebas enzimáticas para determinar su función en la degradación del
sargazo, estas se realizaron en medio sólido ASW con 1% de sustrato
(celulosa, tirosina, laminarina, fucoidano, alginato, glutamina y asaparagina).
Se incubó hasta que se observó crecimiento, revelándose con lugol, rojo
congo al 1% y cetavlon. Para el caso de degradación de alginato se realizaron
pruebas cuantitativas de actividad enzimática solamente a los
microorganismos que dieron positivo en la prueba preliminar en caja. Las
bacterias se cultivaron en medio ASW líquido con 1% de alginato,
posteriormente se colocaron 20 μL del sobrenadante en un papel filtro en una
caja Petri con medio ASW con alginato al 1%, finalmente se midieron los halos
revelados con lugol.
Resultados
Las pruebas en caja dieron positivas para los primeros aislados obtenidos
del sargazo en cuanto a celulosa y alginato (fig. 2). La enzima tirosinasa se
evaluó debido al interés que tiene y al hecho de que se encuentra presente en
microorganismos marinos. Los aislados obtenidos del sargazo inicial
mostraron ser positivos en esta actividad, sin embargo, algunos tienen una
velocidad de degradación más rápida. En el caso de alginato liasa, se
realizaron pruebas enzimáticas cualitativas para determinar la actividad.
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a
Doris a
Rodríguez , Sylvie Le Borgneb
Figura 2 ) Pruebas enzimáticas para alginato liasa, celulasas y tirosinasa, se muestran cuatro
aislados que fueron los que dieron resultados para las cuatro pruebas.
Se realizaron pruebas enzimáticas para fucoidano, laminarina, asparagina
y glutamina, esto con la finalidad de observar la degradabilidad de estos
compuestos; la laminarina y el fucoidano son polímeros componentes del
sargazo, mientras que la asparagina y la glutamina no, estas se seleccionaron
para la obtención de enzimas de interés, ya que pueden fermentar salsas con
concentraciones de sal y para combatir el cáncer.
Dentro de los resultados se observó que el mayor número de
microorganismos tuvo actividad en fucoidano seguido por glutaminasa,
laminarina y asparagina, sin embargo la actividad en fucoidano no fue mucha,
comparado con las demás, ya que sólo dos microrganismos mostraron un halo
de tamaño significativo. En la figura 3 se muestran los resultados para tres
microorganismos que dieron positivo a las cuatro pruebas, los cuales fueron
obtenidos del sargazo fresco.
Figura 3 ) Pruebas de laminarina, fucoidano, asparagina y glutamina en cajas, se muestran 3
aislados que resultaron positivos.
Conclusiones
En este trabajo se observó el comportamiento de los microorganismos en
la degradación de diversos polímeros presentes en el sargazo mediante
técnicas sencillas de detección de actividad enzimática. Al obtener los
resultados de los diferentes aislados se pudo corroborar que los obtenidos del
sargazo fresco son los encargados de degradar los polímeros, mientras que los
secundarios crecen a partir de las moléculas generadas por la hidrólisis de los
mismos.
Referencias
1.Lapointe, B. E. (1986). Phosphorus-limited photosynthesis and growth of
Sargassum natans and Sargassum fluitans (Phaeophyceae) in the western
North Atlantic. Deep Sea Research Part A. Oceanographic Research Papers,
33(3), 391-399.
2.Budhiyanti S et al. (2012). Antioxidant activity of brown algae Sargassum
species extract from the coastline of Java Island. American Journal of
Agricultural and Biological Science. 7. 337-346
3. Kloareg, B et al. (1986). Proceedings of the IVth International Meeting ‘Cell
Walls, 300–303.
Agradecimientos
Al Dr. Porfírio Álvarez Torres, por su ayuda en la recolección y
envío de las muestras de sargazo.