BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

TRANSFERENCIA DE MASA EN
BIORREACTORES

Wilman Alcaraz Zapata

Escuela de Microbiología
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 Transferencia de masa
Se refiere al movimiento de especies químicas desde
una región de alta concentración hacia una de menor
concentración. La fuerza impulsora para la transferencia
de masa, es la diferencia de concentración.

Siempre que existe diferencia

de concentración, la
naturaleza tiende a igualar el
sistema
 Transferencia de masa
En un sólido o fluido estancado, la transferencia de materia se
debe a la difusión molecular. Sin embargo, en la mayoría de los
sistemas de transferencia de materia existe movimiento del fluido.

La difusión molecular es el
movimiento de las moléculas
debido solo a la diferencia de
concentración existente en el
sistema.

Gradiente de concentración del componente A que

induce la transferencia de masa a través del área a.
 Transferencia de masa
Por lo tanto, la transferencia de masa requiere la
presencia de dos regiones con concentraciones o
composiciones químicas diferentes.

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 Transferencia de masa

¿La transferencia de masa

solo depende del gradiente
de concentración?

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Transferencia de masa por difusión molecular
Ocurre en gases o líquidos que no se encuentran en movimiento. La
velocidad de transferencia de masa es debida a un gradiente de
concentración y se define por la ley de difusión de Fick (Ley de Fick).

JA = - DAB dCA
dy

JA: El flujo de masa que se transfiere es directamente proporcional al gradiente de concentración

o fuerza impulsora.
DAB: Coeficiente de difusión del soluto A en la mezcla A y B (cm2 seg-1 ).
dCA : La fuerza impulsora puede ser un gradiente de concentración, de densidad, de temperatura,
dy de presión, etc.
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 Analicemos:
Teniendo en cuenta que cada compuesto (sólido, líquido o
gaseoso) posee una capacidad específica de difundir, cómo sería el
comportamiento del gradiente de concentración de vapor de dos
mezclas de un compuesto A y B, los cuales se encuentran en una
relación 70-30 y 90-10, respectivamente. La presión de vapor de A
es de 185 P/mmHg y de B 442 P/mmHg a 20ºC.

• El coeficiente de difusión global de la mezcla de A-B: 70-30, es mayor que el

de la mezcla 90-10?

• La concentración de los dos componentes en la mezcla se mantiene

constante con el tiempo?
Importancia de la difusión en los bioprocesos
Escala de mezclado: Dentro de los remolinos generados en
la turbulencia del seno del fluido, el flujo es fundamentalmente
laminar por lo que la mezcla de los componentes en este punto se
produce por difusión.
Importancia de la difusión en los bioprocesos
Reacción en fase sólida: En sistemas que contienen
agregados, los sustratos deben ser transportados dentro del
sólido para que se produzca la reacción (transferencia de materia
por difusión molecular).

La difusión es también la responsable de la salida

de las moléculas de producto hacia el exterior del
lugar de reacción.

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Importancia de la difusión en los bioprocesos
Transferencia de materia a través de una interfase
(sólido-líquido, líquido-líquido, gas-líquido): un
ejemplo de ello es la transferencia de oxígeno desde la
burbuja de gas hacia el caldo de fermentación.

En biorreactores, gran parte del interés de la transferencia de

materia recae en la transferencia de oxígeno a través de la interfase
gas-líquido.
 Teoría de la película

La teoría de la película define la

transferencia de materia entre fases.
La transferencia de materia de un
determinado soluto de una fase a otra
incluye el transporte desde el seno de Dirección del flujo
una fase a la superficie límite o
interfase, y en caso de ser entre dos
fluidos, desde la interfase al seno del
segundo fluido.

N A2 = KL2 a (CA2i - CA2 ) N A1 = KL1 a (CA1 - CA1i )

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 Transferencia de masa por convección
Ocurre en líquidos que se encuentran sometidos al proceso de
agitación. Si existe movimiento de fluido, la velocidad global de
transferencia de masa será mayor debido a la contribución de las
corrientes de convección.
Velocidad de concentración de A
transferencia de materia en el seno del fluido

N A= K a (CAo - CAi)
concentración de A en
la interfase del fluido

área de transferencia
Coeficiente de
transferencia de masa
Transferencia de masa por convección

¿Qué representa el
coeficiente de
transferencia de masa y de
qué depente?

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 Transferencia de masa por convección

N A= K.a (CAo - CAi)

El coeficiente de trasferencia de masa puede estimarse en
función de las siguientes variables:

• Propiedades del fluido (densidad, peso especifico, etc.)

• Condiciones del flujo (área, viscosidad, Re, volumen, N, P/V,
etc.)
• Geometría del sistema (L, diámetro, etc.)

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Transferencia de masa por convección
Las tres situaciones que pueden ocurrir en bioprocesos son:

1. Transferencia de materia líquido-sólido.

2. Transferencia de materia líquido-líquido entre

disolventes inmiscibles.

3. Transferencia de materia gas-líquido

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 Transferencia de masa por convección

Líquido - sólido Líquido - líquido Gas - líquido

N A= kLa (CAo - CAi) N A2 = KL2 a (CA2i - CA2 ) N A1 = KL1 a (CA1 - CA1i ) NA = KL a (CALi – CAL) NA = KG a (CAG – CAGi)

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Transferencia de masa gas-Líquido

NA = KG a (CAG – CAGi)
NA = KL a (CALi – CAL)

KG es el coeficiente de
transferencia de materia en la fase
gas y KL es el coeficiente de
transferencia de materia en la fase
líquida Resistencia en la Resistencia en la
película de la fase película de la fase
líquida gaseosa

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La resistencias a la transferencia gas - líquido

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 Transferencia de masa gas-Líquido

NA = KL a (C*AL – CAL) Concentración de

oxígeno en el cultivo
(mol/m3)
velocidad de transferencia de
oxígeno por unidad de volumen del
fluido (mol/ m3 s),
Concentración de
Área interfacial
oxígeno en el cultivo
coeficiente de líquido-gas por unidad
en equilibrio con la
transferencia de materia de volumen del fluido
fse gaseosa (mol/m3)
de la fase líquida (m/s) (m2/m3)

KL es el coeficiente global de transferencia de materia en fase líquida, a, es el

área interfacial entre las dos fases, C*AL es la solubilidad del oxígeno en el
caldo de cultivo. (C*AL – CAL) representa la fuerza impulsora para la
transferencia de materia.

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 Por qué es importante la transferencia de O2
en los bioprocesos?

 Condiciona el crecimiento de los cultivo

aerobios y la formación de productos de interés
 Su disponibilidad se ve afectada por múltiples
factores que afectan la transferencia de oxígeno
 Por lo tanto, la eficiencia de la transferencia de
oxígeno es muchas veces el factor limitante en
los cultivos microbianos
 Satisfacer la demanda de oxígeno de un cultivo
es una de las etapas más costosas
Parámetros que influyen en la capacidad de transferencia
de oxígeno en un sistema de cultivo
Diseño del fermentador:
Organismo:
• Turbinas
• Morfología
• Baffles
• Fase de crecimiento
• Aireadores
• La especie utilizada
• Geometría
Parámetros operacionales del
Medio de cultivo: proceso:
• Solubilidad del oxígeno • Velocidad de agitación (rpm)
• Viscosidad • Caudal de aireación (vvm)
• Presencia de agentes • Presión parcial de O2 (pO2)
tensoactivos
Relación entre la concentración de oxígeno disuelto del medio
y la tasa específica de consumo de O2
Velocidad de consumo de oxígeno Velocidad de Transferencia de oxígeno
(OUR: oxygen uptake rate) (OTR: O2 Transfer Rate)

𝑑𝐶𝐿 Concentración de saturación de O2

𝑂𝑈𝑅 = = 𝑟𝑂2 en el medio
𝑑𝑡
tasa de absorción de oxígeno 𝑑𝐶𝐿
por volumen de caldo
𝑂𝑇𝑅 = = 𝐾𝐿𝑎 . (𝐶𝐿∗ − 𝐶𝐿 )
𝑑𝑡
𝑟𝑂2 = 𝑄𝑂2 . 𝑋 Concentración residual de
Coeficiente volumétrico de O2 en el medio
transferencia de masa (O2)
tasa específica de
absorción de oxígeno

µ𝑋
𝑄𝑂2 =
𝑌𝑋/𝑂2

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La velocidad a la que el oxígeno es consumido por las células en los fermentadores determina
la velocidad a la cual el oxígeno debe ser transferido desde la fase gaseosa a la fase líquida.

Velocidad de consumo de oxígeno Velocidad de Transferencia de oxígeno

(OUR: oxygen uptake rate) (OTR: O2 Transfer Rate)

𝑟𝑂2 = 𝑄𝑂2 . 𝑋 𝑑𝐶𝐿

= 𝐾𝐿𝑎 . (𝐶𝐿∗ − 𝐶𝐿 )
𝑑𝑡
𝑑𝐶𝑂2𝑟𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢𝑎𝑙
= 𝐾𝐿𝑎 . 𝐶𝐿∗ − 𝐶𝐿 − 𝑟𝑂2
𝑑𝑡
En estado estacionario no puede existir acumulación de oxígeno en ningún lugar del biorreactor, por lo que la velocidad de
𝑑𝐶𝑂2𝑟𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢𝑎𝑙
transferencia de oxígeno será igual a la velocidad de consumo de oxígeno por las células =0
𝑑𝑡

0 = 𝐾𝐿𝑎 . 𝐶𝐿∗ − 𝐶𝐿 − 𝑄𝑂2 . 𝑋

𝐾𝐿𝑎 . 𝐶𝐿∗ − 𝐶𝐿 = 𝑄𝑂2 . 𝑋

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Concentración máxima de biomasa que puede soportar el sistema
∗
𝐾𝐿𝑎 . 𝐶𝐿
𝑋𝑚𝑎𝑥 =
𝑄𝑂2
¿¿Que implica que el Xmax estimado sea menor que X requerido en el
proceso??

El mínimo Kla necesario para mantener CL ≥ CLcrit en el biorreactor

puede calcularse como:
𝑄𝑂2 . 𝑋
𝐾𝐿𝑎𝑐𝑟𝑖𝑡 = ∗
𝐶𝐿 − 𝐶𝐿𝑐𝑟𝑖𝑡
 Analicemos:
Qué pasa con el Kla durante el desarrollo de un cultivo?

𝑑𝐶𝐿 ∗
𝑂𝑇𝑅 = = 𝐾𝐿𝑎 . (𝐶𝐿 − 𝐶𝐿 )
𝑑𝑡

Se mantiene constante o cambia con el tiempo???

 Criterios para definir el KLa adecuado
-El tipo de célula: las bacterias, hongos, células animales crecen a distinta μ,
por lo tanto tendrán distintas qO2.
-La concentración de biomasa final alcanzada.
-La susceptibilidad de las células a las fuerzas de corte.

Tipo celular Xf (g/l) μ (h-1) KLa (h-1)

Animal 0,5 0,01-0,04 1-25

Vegetal 10-15 0,007-0,03 20-30

Levadura 10-30 0,2-0,6 100-1000
Hongo
bacteria 10-20 0,6-1,4 100-1000
Parámetros que influyen en la
capacidad de transferencia de
oxígeno en un sistema de
cultivo
Influencia de la temperatura sobre la OTR

> T < Solubilidad de O2

> T > Difusión de O2
10ºC – 40ºC: predomina >
difusión, aumenta OTR
> 40ºC: predomina < Solubilidad
de O2, disminuye OTR

𝑑𝐶𝐿
𝑂𝑇𝑅 = = 𝐾𝐿𝑎 . (𝐶𝐿∗ − 𝐶𝐿 )
𝑑𝑡
Influencia de la morfología sobre el Kla
Influencia de los componentes del medio sobre la OTR
Influencia de los componentes del medio sobre la OUR

La elección del sustrato adecuado para la fermentación

puede afectar también significativamente a la demanda
de oxígeno. Las velocidades de demanda de oxígeno
son mayores cuando se utilizan fuentes de carbono
simples como azúcares, por qué??
Influencia de la agitación y caudal de aireación en la OTR
 Influencia de la pO2 sobre la OTR

pO2 puede ser variada de dos maneras:

 Aumento de la presión en el tanque

 Incremento de la concentración de
oxígeno en el gas suministrado

Importante:

Debe realizarse un exhaustivo análisis de costo antes de

implementar el aumento de presión o uso de oxígeno puro
 Medición del KLa
Método del balance de oxígeno:
En este método se mide el contenido de oxígeno en las corrientes gaseosas hacia
y desde el fermentador. De un balance de materia en estado estacionario, la
diferencia entre el flujo de oxígeno a la entrada y a la salida debe ser igual a la
velocidad de transferencia de oxígeno desde el gas hacia el líquido.

VL es el volumen del líquido en el fermentador, Fg es el caudal

volumétrico de gas; CAG es la concentración de oxígeno en fase gas
Dado que la concentración de gas se mide generalmente como
presión parcial, puede incorporarse la ley de los gases ideales:

PGA es la presión parcial de oxígeno en el gas y T es la

temperatura absoluta
Método dinámico:
Este método se basa en un balance de materia en estado no estacionario para el
oxígeno.
Cierre de aire
Apertura de aire

Suponiendo KLa constante con el tiempo,

la ecuación puede integrarse entre t1 y t2

El KLa puede calcularse utilizando dos puntos de la

figura anterior, o con más precisión utilizando diferentes
valores de CAL1, t1 y CAL2, t2

Tiempo
El KLa se obtiene a partir de la pendiente utilizando los
diferentes valores de CAL1, t1 y CAL2, t2
 Analicemos:
Si se tienen dos microorganismos, el primero requiere para el adecuado
crecimiento una saturación de oxígeno del medio del 40% y el segundo ¼ de
la requerida por el microorganismo anterior. Con experimentaciones previas
se evaluó la capacidad de un reactor para transferir oxígeno al medio de
cultivo y se determinó el Kla del Sistema (22 h-1). Bajo las características de
este sistema, la solubilidad del oxígeno es al rededor del 80% de la máxima
reportada bajo condiciones estándar (8 ppm).
 Si se desea cultivar de forma conjunta ambos microorganismos en este bioreactor y empleando la
información anterior, determine la velocidad de transferencia de oxígeno mínima necesaria para que
ambos microorganismos crezcan adecuadamente?. ¿Que significa este valor?

 Que pasa si en determinado momento del cultivo la velocidad de transferencia de oxígeno

disminuye o aumenta a la establecida anteriormente?

 Si la velocidad de transferencia es menor o mayor que haría usted?

 Sigamos analizando…
Se desea cultivar un microorganismo empleando el reactor del punto
anterior bajo las mismas condiciones. Este requiere que los niveles de
oxígeno del medio siempre estén por encima del 50% de la
saturación. Por experiencias previas se conoce que este
microorganismo posee una velocidad específica de crecimiento de
0,1 h-1 y un requerimiento de oxígeno de 4,06 moles por cada 1,82
moles de biomasa producida (CH1,703O0,459N0,171). Si en determinado
momento del cultivo, se alcanza una concentración de biomasa de 5
g/L, ¿cuál será el valor de Kla que se deberá mantener en el cultivo?
 Sigamos analizando…
Se tienen dos microorganismos (A y B) los cuales se requiere cultivar
simultáneamente en un bioreactor a 30°C. La demanda de oxígeno del
microorganismo A es de 1,28 gO2/L.h y la demanda del microorganismo B es
de ¾ en relación al primero. La concentración de oxígeno crítica para el
adecuado crecimiento del m.o A es de 1,92x10-4 g/L y para el m.o B es de
1,28x10-4 g/L. La solubilidad del oxígeno en el caldo de fermentación se
calcula en un 90% respecto a la solubilidad que posee en agua, debido a los
efectos del soluto. (solubilidad del oxígeno en agua a 30°C: 8,05x10-3 g/L).

¿Cuál es el coeficiente volumétrico de transferencia de materia que sería

necesario para mantener este cultivo?.

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