control Chemistry Laboratory

TECNICAS DE LA PREPARACION DE LA MUESTRA. Garca C. Mauricio a ,Prez A. Kristian a, Cortes D. Miguela.

a

Universidad Pedaggica y Tecnolgica de Colombia, Facultad de Ciencias bsicas, Escuela de Ciencias Qumicas, Programa Qumica de Alimentos, Tunja, Colombia.

RESUMEN La preparacin de la muestra tratada en el laboratorio tiene como fin el fraccionamiento, extraccin o pre-separacin de la muestra en este laboratorio se trabajo con dos marcas de refresco diferente una marca bonice y Breen A las muestras se le realizo cromatografa en capa fina comparndolas con unos colorantes qumicos como lo es el rojo 40, rojo pino en los cuales se ve la separacin del colorante y se comprueba la utilizacin de colorantes qumicos de acuerdo con la calidad del producto, Tambin se trabajo el mtodo de Bligh y Dyer con una muestra de soya a la cual se le realizo un tratamiento especifico determinando el extracto lipidico total este fue extrado con cloroformo el cual por su polaridad es el apropiado para extracciones se comprob que la muestra trabajada en laboratorio contiene lpidos. PALABRAS CLAVES: Bligh y Dyer, Cromatografa en capa Fina, Cloroformo, extracto lipidico. ABSTRACT The preparation of the sample treated in the laboratory aims to fractionation,extraction or preseparation of the sample in the laboratory is working wi th twodifferent soft drink brands and brand bonico reer A samples was performed by comparing thin-layer chromatography with some chemical dyes such as red 40, redpine which is the separation of the dye and test the use of chemical dyes in accordance with product quality, also work the method of Bligh and Dyer with asample soy to which a specific treatment was performed by determining the totallipid extract that was extracted with chloroform which by their polarity is suitable forextractions was found that the sample contains lipids worked in the laboratory. KEYWORDS: Bligh and Dyer, Thin layer chromatography, chloroform, lipid extract. Keywords: moisture in food, free water, bound water, adsorbed water, hydrate

INTRODUCCION Nuevas tcnicas de preparacin de la muestra La mayora de las muestras de alimentos que se analizan por mtodos instrumentales de separacin son demasiado complejas, estn demasiado diluidas o son incompatibles con el sistema cromatogrfico, lo que impide su introduccin directa Nuevas tcnicas de preparacin de la muestra se necesita preparar la muestra antes de su introduccin en el sistema, mediante fraccionamiento, extraccin o preseparacin. (1) Necesidad de nuevas tcnicas de preparacin de muestras de alimento Problemas actuales de mtodos oficiales y tradicionales: lentitud y laboriosidad empleo de grandes cantidades de disolventes txicos, poca selectividad, poco rendimiento Mtodos tradicionales de preparacin de la muestra:-ms de 2/3 del tiempo del analista responsable de al menos 1/3 del error en el anlisis -enorme volumen de disolventes (1) Fundamentos de la Cromatografa en capa fina (TLC, Thin Layer Chromatography)

La cromatografa en capa fina al igual que otras tcnicas cromatogrficas se basa en la retencin y elucin debido a la diferente interaccin del analito entre una fase slida y otra lquida. se basa en la preparacin de una capa, uniforme, de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte. Los requisitos son un absorbente, placas , un dispositivo que mantenga las placas durante la extensin, otro para aplicar la capa de absorbente, y una cmara en la que se desarrollen las placas cubiertas. La fase mvil es lquida y la fase estacionaria consiste en un slido. La fase estacionaria ser un componente polar y el eluyente ser por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor velocidad sern los menos polares. (2) Polaridad de los compuestos orgnicos en orden creciente: hidrocarburos < olefinas < fluor < cloro < nitro < aldehdo, aldehdo < ester < alcohol < cetonas < aminas < cidos < amidas.

ADITIVOS Los aditivos alimentarios siguen siendo el tema que ms se desconoce dentro de la alimentacin y que preocupa ms a los consumidores. Aunque se asocian a los tiempos modernos, los aditivos alimentarios llevan siglos utilizndose. (2) Se emplean desde que el hombre aprendi a conservar los alimentos de la cosecha para el ao siguiente y a conservar la carne y el pescado con tcnicas de salazn y ahumado. Los egipcios utilizaban colorantes y aromas para realzar el atractivo de algunos alimentos, y los romanos empleaban salmuera (nitrato potsico), especias y colorantes para conservar y mejorar la apariencia de los alimentos. Los cocineros han utilizado a menudo levadura en polvo, que hace crecer ciertos alimentos, espesantes para salsas y colorantes, como la cochinilla, para transformar materias primas de buena calidad en alimentos seguros, saludables y apetecibles. En general, los propsitos de la cocina casera tradicional y de la industria alimentaria, que emplea mtodos de elaboracin para preparar y conservar los alimentos, son los mismos. Gracias al desarrollo de la ciencia y la tecnologa de la alimentacin en los ltimos 50 aos, se han descubierto varias sustancias nuevas que pueden cumplir funciones beneficiosas en los alimentos, y estas sustancias, denominadas aditivos alimentarios, estn hoy al alcance de todos Entre ellas se destacan las emulsiones de margarina, los edulcorantes de los productos

bajos en caloras, y una gran variedad de conservadores antioxidantes que garantizan la degradacin y rancidez de los productos pero mantienen su sabor. (3) PROCEDIMIENTO EXTRACCION Y CONTRACION DE LOS COLORANTES ARTIFICIALES DE ALIMENTOS. Se obtuvo una muestra de refresco, transfiriendo una alcuota de 50ml a un vaso de precipitado de 100ml y se acidifico con 1ml de acido actico 5 N. De igual manera se hiso con el refresco marca reer. Colocando una tira de gasa blanca enrollada, se coloco la gasa hasta ebullicin de la mezcla hasta que esta absorbi tanto color cmo fue posible. Se lavo la lana con agua fra, transfirindola a un vaso de precipitado pequeo, con 10 ml de amoniaco se coloco en ebullicin se hirvi hasta que el color paso a la solucin. Despus el color se desprendi, y se concentro la muestra tanto del refresco bonice y reer, aplicando sobre la placa una pequea cantidad de los colorantes extrados y los patrones. METODO DE BLIGH Y DYER Se toman 6 gr de muestra de soya la cual se incorporo a los tubos. Adicionando 15ml de metanol y 7,5 ml de cloroformo, llevando a agitacin por lapso de 1 hora; Se

agrego 7,5 ml de cloruro de sodio (3%) y 7,5 ml de cloroformo. Agitando por unos minutos, se centrifuga la mezcla por 5 minutos a 450 r.p.m se tomo la capa inferior de cloroformo, sin romper la capa sobre nadantes por medio de una jeringa de 5ml y se filtra con papel filtro #2. Hallando el extracto lipdica total, se pipetea 5ml del filtrado claro en una capsula de vidrio seca y tarada.

VT: Volumen total de cloroformo Va: Volumen de la alcuota tomada grasa A (g/100g) = VT x P2 / Va x P1 A (g/100g) = 15 mL x 0,521g /3mL x 6g A (g/100g) = 0,4344 La grasa obtenida de la soya fue de 0,4344 la cual es un valor bajo segn la norma chilena debido a que en esta norma el rango esta de 1,0 1,5 las consecuencias de esto pueden ser de que en cada regin las plantas o frutos producidos son diferentes por el clima, la composicin del suelo, las variedades que se utilizan y la humedad del medio todo esto trae consecuencias en el desarrollo del fruto que a la hora de procesarlo cambian sus propiedades fisicoqumicas. En relacin con los otros grupos de laboratorio vario el contenido de grasa se ve la diferencia de los diferentes solventes como se puede observar en la imagen (1).

RESULTADOS El mtodo para analizar el contenido de grasa de las harinas en este caso de soja, es el mtodo de Bligh and Dyer, cuya principal ventaja es que la grasa que se extrae puede ser utilizada para anlisis posteriores de ella. Pesado de la muestra y primera extraccin: 6g de homogneos de material con 80% de humedad se extraen con cloroformo y metanol. Conociendo el volumen total obtenido y la cantidad de grasa de la alcuota, fue posible calcular la grasa total contenida en la capa clorofrmica, la que corresponde a la muestra pesada. EXPRESION RESULTADOS DE LOS

A( g/100g) = VT X P2 Va x P1 Donde : A: Concentracin en g/100g(%) de grasa P1: Peso de la muestra (soya) P2: Peso de la grasa seca obtenida IMAGEN (1)

CROMATOGRAFIA

RF = DA/DS RF BONICE=1.4 / 7 RF BONICE = 0,2

RF = DA/DS RF BREEN = 1.2 / 7 RF BREEN = 0,171

RF = DA/DS RF PATRON = 1.6 / 7 RF PATRON = 0,2285 DONDE: RF: Factor de retencin DA: Distancia recorrida por el analito DS: Distancia recorrida por el

FIGURA 1 En la aplicacin de los analitos que provienen de Bonice, Breen, y los dos patrones uno el rojo 40 y el otro rojo Pinzan fueron arrastrados gracias a la fase mvil que fue cloroformo y metanol debido a su polaridad. Conclusiones. La tcnica de cromatografa en capa fina (CCF) tiene numerosas ventajas, aparte de ser rpida, sencilla, barata... tiene tambin la ventaja de utilizar poca cantidad de muestra. Las manchas de los reactivos fueron arrastradas hasta el tope de la hoja de revelado, sin dejar ninguna mancha, es decir, solamente se elevaron, como lo indica la figura 1. La grasa contenida en la soya se encuentra por debajo de la norma chilena, lo que indica un bajo contenido.

Lo que se puede observar es que el ms retenido es el patrn esto debido a su concentracin respecto a los analitos las manchas del patrn se ven mucho ms pronunciadas. Se basa en la diferencia de solubilidad de los pigmentos. Con una mezcla de disolventes de distinta densidad, podemos conseguir que los diferentes pigmentos se separen en bandas, ya que cada tipo de pigmento es soluble en un tipo de Disolvente. Utilizando el mismo extracto

BIBLIOGRAFIA

(1) Anlisis qumico e instrumental moderno. Harold F. Walton y Jorge Reyes. Ed. Revert. Mxico D.F. (2) Anlisis Qumico Cuantitativo. Gilbert H. Ayres. Ed. Harla. Mexico D.F. Va Internet (3)http://www.cienciahoy.org. (4)Microsoft Encarta 2001