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Técnicas generales de laboratorio

1º Laboratorio Clínico y Biomédico

La Granja

Reservados todos los derechos.


No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
TEMA 2: EL MATERIAL DE LABORATORIO
1. El material de laboratorio
Podemos establecer una clasificación en dos grandes grupos:

- Material fungible. Son instrumentos que tienen una vida corta. Pueden ser:
• Reutilizables, cuando se pueden usar en varias ocasiones, siempre después de
desinfectar y/o esterilizar en cada uso.
• Desechables, cuando son de un solo uso.
- Material inventariable. Son materiales de larga duración. Se incluyen en este grupo
todos los equipos del laboratorio.

2. El material fungible
2.1. Los materiales de vidrio
Las propiedades de este material lo hacen muy adecuado para diversos usos.

Características del vidrio

El vidrio es un material muy resistente a los cambios de temperatura y de una gran


estabilidad química, además de su transparencia que nos permite ver su contenido. Pero
por el contrario, su fragilidad es un gran inconveniente.

En el laboratorio se suele usar un vidrio que contiene borosilicato y tiene algunas ventajas
sobre otros tipos de vidrio:

- Resiste sin problemas temperaturas de hasta 600ºC.


- Apenas se expande por efecto de la temperatura.
- Tiene poca tendencia a agrietarse o a romperse con los cambios brucos de temperatura.
- Permite realizar paredes gruesas en los utensilios, lo que le da más resistencia mecánica
sin disminuir su resistencia térmica.
- Es resistente al ataque químico, por lo que es menos propenso al deterioro a lo largo del
tiempo.

Instrumentos volumétricos de vidrio

Características de los instrumentos volumétricos

- Según la forma de medir el volumen:


• Graduados. Tiene un sistema de graduación que consiste en una serie de marcas
que indican el volumen contenido cuando el líquido alcanza una altura determinada.
• Aforados. Llevan grabada una línea horizontal que indica la altura hasta donde debe
llenarse el instrumento para que contenga la cantidad establecida.
- Según se mida el volumen contenido o el vertido:
• Para medir el volumen contenido. El volumen impreso corresponde a la cantidad
que contienen cuando se llenan hasta la marca.
• Para medir el volumen vertido. El volumen impreso corresponde a la cantidad que
se va a verter.

- Según la exactitud:
• Poco exactos (clase C). El volumen es aproximado y no se indica la incertidumbre.

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• De moderada exactitud. Algo más precisos, pero con límites de incertidumbre
cercanos al 2%.
• De buena exactitud (clase B). Incertidumbre inferior al 1%.
• De gran exactitud (clase A). Incertidumbre inferior al 0,5%.

Manejo de instrumentos volumétricos

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En la medición podemos identificar tres situaciones:

- El llenado. Cuando la altura de la columna de líquido llegue justo a la línea que


corresponda, decimos que se ha enrasado.
- La lectura. La forma correcta de ajustar la medida es que la base de la curvatura (el
menisco) quede exactamente sobre la línea grabada en el instrumento.
- El vaciado. No se debe forzar el vertido del residuo que quede en el instrumento, ya que
ello supondría un volumen adicional y haría incorrecta la medición.

Principales instrumentos volumétricos

➢ Pipetas: son instrumentos de vidrio de un uso muy habitual, pueden ser de distintos
tipos.
- Pipetas aforadas:
• De enrase simple. Tienen una sola línea de aforo.
• De doble enrase. Tienen dos líneas de aforo.
- Pipetas graduadas, son menos precisas que las aforadas:
• Tipo 1. Son de vaciado parcial y tienen el 0 en la zona superior.
• Tipo 2. Son de vaciado total y tienen el 0 en la zona inferior.
- Pipetas Pasteur. Se usan para verter pequeñas cantidades sin medir.
- Pipetas serológicas. La punta está graduada y tienen un filtro para impedir el paso de
microorganismos hacia el auxiliar de pipeteo.
➢ Buretas: las hay de clase A y B. Se utilizan en procesos que requieren dispensar un
líquido poco a poco y con precisión sobre otro.
➢ Matraces aforados: son de clase A. Se utilizan para preparar disoluciones muy precisas
y para diluir disoluciones hasta un volumen fijo.
➢ Matraces Erlenmeyer: son de clase C. Se utilizan para lo mismos que los vasos de
precipitado, pero su forma reduce la evaporación de los líquidos contenidos.
➢ Probetas: la mayoría son de clase B. Se utilizan para medir volúmenes con una exactitud
moderada y verterlos.
➢ Vasos de precipitado: son de clase C. Se utilizan para mezclas sustancias, pesar líquidos,
calentar, etc.

Instrumentos de vidrio para otros usos

➢ Cubreobjetos: se colocan sobre una muestra que va a ser observada al microscopio.


➢ Embudos: se usan para trasvasar líquidos o con un papel de filtro para filtrar.
➢ Matraces Kitasato: tienen la pared gruesa y una tubuladura lateral, se usan para filtrar
al vacío.
➢ Portaobjetos: se usan para colocar muestras y visualizarlas al microscopio.
➢ Tubos de ensayo: se usan para contener, conservar, mezclar, calentar, etc. pequeñas
cantidades de producto.
➢ Varillas agitadoras: se usan para agitar líquidos.

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➢ Vidrios de reloj: se usan para depositar sólidos y pesarlos o transferirlos de un recipiente
a otro.

2.2. Los materiales de plástico


Tipos de plásticos:

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- PET: usado para envases.
- HDPE
- PVC
- PP: material de tubos Eppendorf y puntas de pipeta.
- PS
- Otros

Instrumentos de plástico más habituales

➢ Auxiliares de pipeteo: peras de goma, tetillas para pipetas, aspiradores de vacío y


de rueda.
➢ Pipetas Pasteur: pequeñas pipetas con sistema de succión para enrasar y coger
pequeñas cantidades.
➢ Puntas de pipeta: para acoplar a pipetas automáticas.

2.3. Los materiales de porcelana


➢ Embudos buchner: se usan para llevar a cabo filtraciones en condiciones de vacío,
acoplados a un matraz Kitasato.
➢ Morteros: se emplean para pulverizar las partículas.

2.4. Los materiales de metal


Instrumentos metálicos de soporte

Se trata de elementos que permiten mantener distintos instrumentos en la posición


correcta, y manejar instrumentos calientes de forma segura. Son los soportes, trípodes,
aros, pinzas, gradillas, etc.

3. El material inventariable
3.1. Los equipos básicos del laboratorio
Las balanzas

La utilizamos para la pesada, y obtenemos una lectura de masa.

Características de las balanzas:

- Su exactitud, nos indica en qué medida se aproxima el valor medido al valor real.
- Su precisión, capacidad de dar un mismo resultado para una misma medición en
diversas ocasiones.
- Su sensibilidad, que informa de la cantidad más pequeña que es capaz de medir.

Tipos de balanzas:

- Balanzas mecánicas: utilizan un mecanismo de palanca o muelle.

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- Balanzas electrónicas: utilizan un electroimán para generar la fuerza que contrarreste la
muestra que se pretende medir.

Recomendaciones para el uso correcto:

Deben estar instaladas sobre una mesa que evite y absorba las vibraciones, en una ubicación
sin corrientes de aire y con una temperatura y humedad constantes. Sobre la mesa, la
balanza debe quedar nivelada. Para utilizarla correctamente, es necesario conectarla unos
30 min antes de usarla, para que rinda con total exactitud.

La operación de pesada:

Se realizan depositando el producto en un recipiente de pesada, esto implica que será


necesario tarar la balanza una vez depositado el recipiente. La pesada se puede realizar por
distintos métodos:

- Directa, se tara y se pesa.


- Indirecta, se recurre a métodos indirectos.
- Por diferencia

Las pipetas automáticas o micropipetas

Son sistemas de pipeteo automáticos de gran precisión, en los cuales el líquido se carga en
puntas de plástico desechables.

Tipos de micropipetas:

- Micropipetas fijas, y otras que tienen un rango de volúmenes, también las hay manuales
en las que el volumen se establece antes de usarlas.
- Micropipetas simples, de una sola punta y multicanales, que permiten incorporar varias
puntas.
- Micropipetas combitips, que permiten realizar una serie de descargas sin necesidad de
cambiar la punta.

Los enjuagues previos, esta operación sirve para:

- Equilibrar la capa de líquido que se adhiere al interior de la punta


- Adaptar el aire que hay en la pipeta a la temperatura de la muestra.
- Ayudar a neutralizar los efectos capilares.

Técnica directa de pipeteo, se realiza siguiendo estos pasos:

1. Seleccionamos la pipeta, ajustamos el volumen y le colocamos la punta.


2. Presionamos el émbolo hasta el primer tope.
3. Introducimos verticalmente la punta en el líquido.
4. Soltamos lentamente el émbolo.
5. Sacamos la punta del líquido, tocando las paredes del recipiente.
6. Dispensamos el líquido en el recipiente presionando el émbolo hasta el primer tope y
después hasta el segundo.
7. Sacamos la punta del recipiente tocando sus paredes y dejamos el émbolo en posición
inicial.

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Técnica inversa de pipeteo:

Se usa para pipetear soluciones con una gran viscosidad o tendencia a formar espuma.

Las diferencias con el pipeteo directo, es que se presionan los dos topes al extraer la
cantidad de muestra, y al soltarla en otro recipiente, solo presionamos el primer tope y lo
que quede en el segundo se desecha.

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Los equipos de calor

Permiten mantener una temperatura superior a la ambiental, de forma más o menos


precisa, a lo largo de un cierto periodo. Existen distintos tipos de calor:

- Estufas: son equipos similares a los hornos domésticos.


• Estufas de cultivo o de incubación, se usan en microbiología.
• Estufas de desecación y esterilización, se usan para eliminar la humedad.
• Muflas, se usan para calcinar muestras.

- Baños termostáticos: proporcionan un calentamiento indirecto, que evita que la fuente


de calor actúa directamente y permite un calentamiento homogéneo y controlado. El
baño María es el más habitual.

- Placas calefactoras: son aparatos que proporcionan calor seco, las más habituales son
placas calefactoras-agitadoras, que además de calentar agitan el producto.

Los equipos de frío

Permiten mantener una temperatura inferior a la ambiental, de forma más o menos precisa.
Se usan mayoritariamente para la conservación.

Equipos de frío para conservación:

- Neveras.
- Congeladores.
- Ultracongeladores.

Bombas de vacío

Se puede hacer el vacío o reducir la presión en el interior de un instrumento o conjunto de


ellos, estos instrumentos deben disponer de:

- Un sistema hermético de cierre.


- Una tubuladura.

3.2. Los equipos para mezclar y separar


Los equipos agitadores

Facilitan la mezcla de los distintos componentes de una mezcla o la correcta


homogeinización de disoluciones.

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- Agitadores magnéticos: se utilizan para homogeneizar muestras líquidas. Funcionan a
través de fuerzas electromagnéticas entre imanes, que consiguen la agitación. Permiten
regular la potencia de agitación.

- Agitadores cinéticos. Consiguen la agitación:


• Mediante movimientos del soporte. (Vórtex)

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• Mediante agitación con una varilla conectada al equipo.

- Sonicadores: convierten una señal eléctrica en una vibración física que se transmite al
líquido en forma de ondas.

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