FACULTAD DE INGENIERÍA

E.P. INGENIERÍA AMBIENTAL

PRÁCTICA DE LABORATORIO Nº 1: MICROSCOPÍA Y NORMAS DE

SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

I. OBJETIVOS
• Conocer las principales normas de seguridad que se deben aplicar en el laboratorio para
evitar accidentes.

• Conocer las acciones de primeros auxilios en caso de accidentes en el laboratorio.

• Aprender el uso y funcionamiento del microscopio

II. PRINCIPIOS TEÓRICOS SOBRE NORMAS DE SEGURIDAD

Tomar medidas de seguridad en el laboratorio es sumamente importante para evitar accidentes, ello
dependerá de seguir las indicaciones del docente, especificadas en los procedimientos de laboratorio
y evitar realizar acciones de experimentación espontáneas que, por falta de conocimiento de la
naturaleza de los reactivos y procedimientos, pueden originar accidentes.

2.1. BARRERAS CONTENCIÓN PRIMARIA

Constituyen la primera línea de defensa cuando se manipulan materiales biológicos, químicos o

físicos.
Las barreras de contención primaria son:
a) Equipos de protección personal (EPP).
b) Técnicas de laboratorio estándar y normas de higiene personal.
c) Inmunización (vacunación).
d) Esterilización y desinfección de instrumentales y superficies.

a) Equipos de protección personal (EPP)

- Los EPP no son un substituto de una buena práctica de laboratorio.
- El empleo de un equipo equivocado crea un riesgo adicional al generar en éste un falso
sentido de seguridad.
- Cualquier EPP exige una limpieza y un mantenimiento adecuados.

En las prácticas de laboratorio, el EPP que se usará en todas las clases es el mandil. En caso
que fuera necesario usar un EPP adicionalmente, el docente lo indicará con anticipación.

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Entre los EPP se tienen los siguientes:

❖ Guantes: Protege si se maneja muestras o material
contaminado.

❖ Mascarillas de protección respiratoria y lentes y

pantallas de protección ocular: Protege frente a polvo y
aerosoles.

EPP: Protección ocular

EPP: Protección respiratoria

❖ Mandiles y vestuario como equipo de protección

• No se usarán en el área de trabajo: collares largos,
brazaletes, relojes y todo lo que pueda ser un riesgo
potencial para el manejo de equipos.
• En el ambiente de trabajo no se debe llevar ropa de
calle que aumente la superficie corporal expuesta:
pantalones cortos, faldas, sandalias, bividí.
• Los (as) estudiantes con cabello largo debe usarlo
amarrado, para evitar accidentes.

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• Los (as) estudiantes debe usar calzado cerrado antideslizante, evitar usar calzado que
exponga alguna parte de los pies.
• Debe usarse un mandil largo y de manga larga que cubra la mayor superficie corporal.
• Los alumnos ingresan con mandil al laboratorio.
• Una vez terminada la práctica los alumnos guardan el mandil en una bolsa antes de
salir de laboratorio.
• Los mandiles deben ser lavados luego de ser usados.
• Un gorro para evitar accidentes, por ejemplo, frente al mechero.

b) Técnicas de laboratorio estándar y normas de higiene personal

Las técnicas de laboratorio estándar se refieren al seguimiento estricto de las buenas
prácticas de laboratorio.

❖ Higiene personal
✓ El lavado de manos debe efectuarse al comenzar y terminar la jornada y después de
realizar cualquier técnica que puede implicar el contacto con material infeccioso. Dicho
lavado se ejecuta con agua y jabón líquido.

✓ Tras el lavado de las manos éstas se secan con toallas de papel desechables o
corriente de aire.

✓ No comer, beber, fumar, aplicarse cosméticos, ni guardar o almacenar alimentos o

bebidas en el área de trabajo del laboratorio.

✓ Desarrollar el hábito de mantener las manos lejos de la boca, nariz, ojos y cara. Esto
puede prevenir la auto contaminación.

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❖ Higiene y seguridad en la zona de trabajo

✓ No colocar objetos como chompas, casacas, mochilas, etc.; encima de las mesas de
trabajo.

✓ No dejar obstáculos en las zonas de circulación, zonas de protección, o acceso a

salidas.

✓ Mantener limpia y ordenada la mesa de trabajo (antes, durante y después de la tarea).

✓ Alejar los productos químicos líquidos, soluciones o agua de las conexiones

eléctricas.
✓ Nunca enchufar los equipos con las manos mojadas.

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❖ Manejo de sustancias químicas

✓ No inhalar, oler o probar productos químicos si no estás debidamente informado.
Nunca acercar la nariz para oler un producto químico o sustancia.

✓ Está terminantemente prohibido hacer experimentos no autorizados por el profesor.

✓ No utilizar ningún frasco de productos químicos que haya perdido su etiqueta y mucho
menos etiquetarlo. Entregarlo inmediatamente al docente.

✓ No sustituir un producto químico por otro, sin autorización del docente.

✓ Si derrama algún producto químico o mezcla, límpielo inmediatamente.

✓ No transportar innecesariamente los productos químicos.

✓ Transportar los frascos de productos químicos cogiéndolos siempre de la base
y no de la tapa.

✓ No calentar un recipiente totalmente cerrado.

✓ Dirigir siempre la boca del recipiente a calentar, en dirección contraria al
estudiante que realiza el experimento y a las demás personas cercanas.
✓ Atención con las características de los productos químicos (tóxicos, corrosivos
o inflamables).

✓ Alejar los mecheros de los productos químicos. No calientes nunca productos

químicos inflamables con el mechero.
✓ Como norma general, lee las hojas de seguridad de los productos químicos a
utilizar.

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❖ Manejo de material y equipo de laboratorio

✓ No pipetear con la boca. Usa siempre un dispositivo especial para pipetear líquidos.

✓ No utilizar un equipo sin conocer su funcionamiento.

✓ Es de vital importancia mantener la limpieza de los equipos y materiales.

✓ Nunca forzar un tubo de vidrio, ya que, en caso de ruptura los cortes pueden ser
graves.

✓ El material de vidrio caliente debe dejarse apartado encima de una plancha,

esperando que se enfríe para poder manipularlo. Si es el caso que necesitas
manipularlo, hazlo usando tenazas o pinzas.

✓ No usar material de vidrio que esté agrietado o roto. Deposita el material de vidrio roto
en un contenedor para “vidrio rotos” y no en la papelera.

Nota:
✓ Manipular los equipos, materiales, reactivos del laboratorio y muestras, con
mucha responsabilidad, evitar estar distraídos (usando celulares, bromeando,
etc.), ya que un segundo de distracción puede causar un accidente que ponga en
riesgo su vida y la de sus compañeros.
✓ En caso de cualquier duda, consulta con el docente.

Fuente: Adaptado del Instituto Nacional de Salud. Ministerio de Salud. Bioseguridad en Laboratorio de
Ensayo Biomédicos y Clínicos. 2005.

2.2. CONTENCIÓN SECUNDARIA

El diseño y construcción de un laboratorio, lo que en seguridad se conoce como contención o barrera

secundaria, contribuye a la protección de las personas que se localizan fuera del laboratorio y protege
a las personas de la comunidad frente a posibles escapes accidentales de agentes infecciosos.
En la evaluación de riesgo se debe tener en cuenta las siguientes consideraciones generales:

a) Acceso de personal
En general, debe ser restringido y solo permitir el ingreso a personal autorizado:
mantenimiento, docente y estudiantes.
Está prohibido que durante la práctica de laboratorio ingresen estudiantes que no lleven el
curso.

b) Lavatorios
Existen en el laboratorio, lavatorios dotados de grifos que permitan el aseo de manos, ojos (si
fuera necesario).

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c) Lavaojos
Se recomienda que exista uno dentro del laboratorio como equipo de emergencia.

d) Superficies interiores
Los techos, paredes y suelos deben ser lisos y fáciles de lavar, impermeables a los líquidos y
resistentes a las acciones de las sustancias químicas y productos desinfectantes usados de
ordinario en el laboratorio de forma que permitan una limpieza a fondo y una posterior
descontaminación.

e) Superficies de trabajo
Las mesas y bancos de trabajo deben ser resistentes al calor moderado, a disolventes
orgánicos, ácidos y álcalis.

f) Señalización
Todas las áreas deben estar debidamente marcadas con la señal de riesgo y su nivel de
contención.

Señales de prohibición

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Señales: Material contra incendio

Señales: De obligación

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Señales: De advertencia

Señales: De seguridad

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g) Servicios auxiliares
En todos los laboratorios, los servicios auxiliares de gas, aire y eléctrico deben
instalarse de manera que facilitan su mantenimiento, se debe contar con extintores,
así como de áreas o salas de primeros auxilios, convenientemente equipados y de
fácil acceso.

Fuente: Adaptado del Instituto Nacional de Salud. Ministerio de Salud. Bioseguridad en Laboratorio de
Ensayo Biomédicos y Clínicos. 2005.

2.3. PRIMEROS AUXILIOS EN CASO DE ACCIDENTE

En los laboratorios se suelen producir pequeños accidentes (incidentes) que en la mayoría de

los casos no son graves.

Es importante comunicar al médico todos los detalles del accidente y mostrarle, siempre que
sea posible, la etiqueta del producto que lo ha causado. Sólo en caso en que la asistencia
del facultativo no sea inmediata podrán seguirse las instrucciones que, en concepto de
primeros auxilios, se describen a continuación.

1. Quemaduras
Las pequeñas quemaduras producidas por material caliente,
planchas calefactoras, etc., se trataran lavando la zona
afectada con agua fría durante 10-15 minutos. Las
quemaduras más graves requieren atención médica
inmediata. No utilices cremas y pomadas grasas en las
quemaduras graves.

2. Heridas punzantes, cortantes y abrasivas

Debe quitarse la ropa protectora, lavarse manos y zona
afectada con abundante agua y jabón. Se desinfecta y se
consulta al médico responsable sobre el procedimiento por
seguir, teniendo en cuenta la sustancia o el agente
manipulado.

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3. Contacto con productos químicos

Si hubo contacto con la piel, se lavará inmediatamente con abundante agua, durante 15
minutos como mínimo. Recuerda que la rapidez en el lavado es muy importante para reducir
el daño y la extensión de la herida. Proporciona asistencia médica a la persona afectada.

3.1. Por ácidos

Corta lo más rápidamente posible la ropa. Lava con agua corriente abundante la zona
afectada. Neutraliza la acidez con bicarbonato de sodio durante 15 minutos. Saca el
exceso de pasta formada, seca y cubre la parte afectada con linimento óleo-calcáreo.

3.2. Por álcalis

Lava la zona afectada con agua corriente abundante y aclárala con una disolución saturada
de ácido bórico o con una disolución de ácido acético al 1%. Seca y cubre la zona afectada
con una pomada de ácido tánico.

4. Corrosiones en los ojos

En este caso el tiempo en actuar es esencial (menos de 10 segundos). Cuanto antes se lave
los ojos, menos grave será el daño producido. Lava con abundante agua durante 15
minutos como mínimo en el lavatorio, mantener los ojos abiertos con la ayuda de los dedos
para facilitar el lavado debajo de los párpados. Es necesario recibir asistencia médica,
por pequeña que parezca la lesión.

5. Ingestión de productos químicos

Antes de cualquier actuación concreta pide asistencia médica. Se informa al médico sobre el material
ingerido y se sigue sus consejos.
Si el paciente está inconsciente, ponlo en posición inclinada, con la cabeza de lado, y
échale la lengua hacia fuera.

Si está consciente, mantenlo apoyado, tápalo con una manta para que no tenga frío.
No provoques el vómito si el producto ingerido es corrosivo.

6. Inhalación de productos químicos

Conduce inmediatamente a la persona afectada a un sitio con aire fresco.
Dependiendo de la gravedad se requerirá asistencia médica lo antes posible.
Al primer síntoma de dificultad respiratoria, inicia la respiración artificial boca a boca por una
persona entrenada.

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7. Accidente por mordedura de arañas caseras

Se debe trasladar al afectado al Centro de Salud más cercano para su tratamiento con el suero
antiarácnido (antiloxoscélico o antilatrodéctico) correspondiente.
Se debe tranquilizar al paciente, en lo posible trate de obtener al arácnido agresor para el diagnóstico
etiológico.
No aplique ligadura, ni apriete la lesión. Nunca coloque hielo sobre la zona mordida, agrava las
lesiones. NO USE GLUCONATO DE CALCIO. Inmovilizar el miembro afectado.
Traslade al paciente al servicio de salud más cercano para su atención inmediata, y aplique
tratamiento
Recuerde que el envenenamiento por mordedura de araña puede ocasionar la muerte, si no es
atendido a tiempo.

6. Caso de Incendio

6.1. Fuego en el laboratorio: Evacuar, por pequeño que sea el fuego, por la salida
principal. Avisar a todos los compañeros de trabajo sin que se extienda el pánico y
conservando siempre la calma.

6.2. Fuegos pequeños: La persona capacitada deberá apagarlo utilizando un extintor o

cubriendo el fuego con un recipiente de tamaño adecuado que lo ahogue. Retirar los
productos químicos inflamables que estén cerca del fuego. No utilices nunca agua para
extinguir un fuego provocado por corto circuito.

6.3. Fuegos grandes: Aislar el fuego utilizando los extintores adecuados. Si el fuego no se
puede controlar rápidamente, avisar a los bomberos y evacuar el edificio.

6.4. Fuego en el cuerpo: Si se incendia la ropa estirarse en el suelo y rodar sobre si

mismo para apagar las llamas. No corras ni intentes llegar a la ducha si no está muy cerca de
ti.

No usar nunca un extintor sobre una persona. Una vez apagado el fuego, mantén a la
persona tendida, procurando que no coja frío y llevarlo de inmediato al Centro de Salud más
cercano.

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III. PRINCIPIOS TEÓRICOS SOBRE MICROSCOPÍA.

3.1. Historia del microscopio.

Antes de la invención del microscopio ya estaba ampliamente extendido el uso de lentes que
permitían observar una imagen de forma aumentada y que hoy en día se conocen como lupas. Las
propiedades de este tipo de lentes fueron detalladamente estudiadas por Roger Bacon en el siglo XIII.
No fue hasta finales del siglo XVI cuando Zacharias Janssen, un fabricante de anteojos holandés,
fabricó el primer microscopio compuesto. Este primer microscopio consistía en dos lentes montadas
en un tubo (de aquí el nombre de microscopio compuesto) y permitía amplificar una imagen hasta 9
veces. Esto representó una mejora significativa respecto a los aumentos obtenidos mediante lupas,
también conocidas como microscopios simples.
Aproximadamente durante estas mismas fechas Galileo Galilei también fabricó un microscopio
combinando una lente convexa y una cóncava. Es por eso que todavía hoy se debate entre los
historiadores quién fue el verdadero inventor del microscopio.
Sí está claro, sin embargo, que Giovanni Faber fue quien en 1625 utilizó por primera vez el término
microscopio para referirse a este nuevo invento.
Durante la segunda mitad del siglo XVII empiezan a aparecer las primeras obras científicas
documentando observaciones llevadas a cabo con el microscopio. La primera de estas obras se
tituló Micrographia, fue escrita por Robert Hooke y publicada en 1665. En ella se pueden encontrar
ilustraciones de plantas e insectos observados a través del microscopio.
Otro gran personaje de este período es Antonie van Leeuwenhoek, considerado el padre de la
microbiología. Este comerciante y científico holandés mejoró la calidad de los microscopios existentes
hasta el momento mediante la fabricación de mejores lentes. Esto le permitió descubrir las bacterias y
los glóbulos rojos en la sangre.
La tecnología del microscopio fue evolucionando y perfeccionándose durante los siglos XVIII y XIX
hasta resultar en el tipo de microscopio que utilizamos hoy en día. Uno de los fabricantes de
microscopios más importantes del siglo XIX fue Carl Zeiss. Las innovaciones de su empresa
modernizaron el microscopio incorporando las teorías de óptica desarrolladas por el físico Ernst Abbe.
Los avances científicos del siglo XX permitieron desarrollar nuevas técnicas de microscopía
resultando en nuevos tipos de microscopios entre los que hay que destacar el microscopio
electrónico.
Fuente: https://www.mundomicroscopio.com/

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3.2. Funcionamiento del microscopio

El principio de funcionamiento de un microscopio óptico se basa en la propiedad de algunos
materiales que permiten cambiar la dirección de los rayos de luz. Esto permite fabricar lentes capaces
de hacer converger o divergir los rayos de luz. Mediante la combinación de estas lentes se puede
generar una imagen aumentada de cualquier objeto. El ejemplo más sencillo sería utilizar una sola
lente, como en el caso de una lupa, para producir una imagen aumentada de una muestra.
En el caso de un microscopio óptico se genera la imagen aumentada a partir de distintas lentes.
Algunas de ellas montadas en el objetivo del microscopio y otras en el ocular. En primer lugar las
lentes del objetivo generan una imagen real aumentada de la muestra. Esta imagen real es a
continuación ampliada mediante las lentes del ocular dando lugar a una imagen virtual de tamaño
superior a la muestra original.

Representación del funcionamiento del microscopio óptico

El otro elemento esencial para el funcionamiento del microscopio óptico es la luz. Es por este motivo
que los microscopios ópticos vienen equipados con un foco de luz y un condensador para focalizar un
haz de luz hacia la muestra. Una vez la luz ha atravesado la muestra, las lentes son las encargadas
de desviar esta luz de forma correcta para generar la imagen aumentada.

Fuente: https://www.mundomicroscopio.com/

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http://www.partesdel.com/microscopio.html

IV. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Proporcionado por el Laboratorio: Proporcionado por el estudiante:

• Microscopio. • Láminas y laminillas.

• Estereoscopio. • Trozo de lana (5 cm).
• Láminas porta objeto y • Cabello (5cm).
láminas cubre objeto. • Ala de insecto (encontrado
• Agua destilada. muerto)
• Gotero. • 1 hojas de revista o
• Placa Petri. periódico.
• Pinza. • EPP.
• Papel lente.
• Alcohol isopropílico.
• Aceite de inmersión.

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V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

5.1. Manejo del microscopio compuesto.

a) Limpie las lentes y el condensador con papel lente o algodón humedecido en alcohol
isopropílico. No presionar con brusquedad las lentes.
b) Coloque sobre la platina una lámina portaobjeto con la muestra a observar, asegurándose que
esté bien asegurada con el sistema de pinzas o presillas de manera que el objeto a observar
este ubicado sobre la abertura de la platina.
c) Inicie la observación colocando la lente objetivo de menor aumento sobre la muestra ubicada
en la lámina preparada. La lente debe estar lo más alejado posible de la lámina y
progresivamente se debe ir acercando hacia la muestra hasta observarla con cierto detalle. El
acercamiento de la lente se realiza moviendo los tornillos macrométricos.
d) Observe por la lente ocular y regule la cantidad de luz que ingresa por la abertura de la platina
con el diafragma. El campo óptico debe estar iluminado sin que la luz perturbe la visión.
e) Observe nuevamente por el lente ocular girando hasta que aparezca la imagen.
f) Gire suavemente el tornillo micrométrico hasta lograr una imagen nítida de la misma.
g) Para observar el objeto con mayor aumento, primero gire el tornillo macrométrico para alejar el
lente, luego gire el revólver para cambiar el objetivo y finalmente repita toda la operación
realizada anterior.
h) Para observar la muestra con el objetivo de mayor aumento también denominado objetivo de
inmersión (100x) es necesario colocar una gota de aceite de inmersión sobre la lámina
cubreobjeto. Repita la operación descrita anteriormente hasta que el lente entre en contacto
con el aceite y la muestra se vea enfocada con claridad.
i) Una vez terminada la observación, gire el revólver para colocar en posición el objetivo de
menor aumento.
j) Retire la lámina. Limpie el lente de 100x con alcohol isopropílico para eliminar el aceite de
inmersión. Limpie con cuidado la platina.
k) Esquematice sus observaciones.

5.2. Comprobación de la Imagen Invertida

a) Dibuje o recorte una letra “e” en un trozo de papel milimetrado de 5 x 5 mm.

b) Coloque el papel en una lámina y añada una gota de agua, luego cubra el papel con una
lámina cubreobjeto.
c) Utilizando el objetivo de menor aumento observar la imagen de la letra escrita en el papel.
Haga distintas observaciones utilizando las otras lentes.
d) Esquematice sus observaciones.

5.3. Mediciones con el Microscopio

a) Coloque un trozo de papel milimetrado de 5 x 5 mm en una lámina, agréguele una gota de

agua y cúbralo.

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b) Utilizando el objetivo de 4x, trate de medir lo más exactamente posible el diámetro del campo
óptico que está observando. Esto se realiza determinando cuantos cuadrados del papel caben
dentro del campo óptico.
c) Repita el procedimiento anterior con los objetivos de 10x y 40x.

5.4. Manejo del Estereoscopio

a) Coloque una fibra de lana sobre la lámina de vidrio en la base del estereoscopio.
b) Ubique adecuadamente el espejo o la fuente de luz para iluminar la muestra; regule el grado
de aumento y la altura de los lentes con relación al objeto hasta obtener una imagen clara.
c) Haga lo mismo con los insectos que va a observar.
d) Esquematice sus observaciones.

VI. BIBLIOGRAFÍA
1. Instituto Nacional de Salud. Ministerio de Salud. Bioseguridad en Laboratorio de Ensayo
Biomédicos y Clínicos. 2005. Perú.
2. Universidad de Granada. Manual de Buenas Prácticas de Laboratorio. 2008. España.
3. http://www.who.int/gpsc/5may/tools/es/
4. https://www.mundomicroscopio.com/

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