11-03-2019

Organización
microscópica del
cuerpo humano

Métodos de
estudios histo-
embriológicos
María Corina Peña J.

Tejidos
Composición de cualquier tejido
Se forman por la agrupación de las células para
desarrollar colectivamente una función especial.
En la conformación de los órganos participan dos o • Células
más tejidos de manera característica para cada • Sustancia intercelular
órgano. – fibrilar
• colágeno
• Tipos de tejido • elastina
– amorfa
–Epitelial • proteoglicanos
–Conectivo • agua
–Muscular • Líquido tisular (LEC)
–Nervioso

• Las primeras investigaciones

histológicas fueron posibles a
partir del año 1600, cuando
se incorporó el microscopio
a los estudios anatómicos.

• Marcello Malpighi es el
fundador de la Histología y
su nombre aún está ligado a
• La Histología (del griego ιστός: histós "tejido") varias estructuras
es la ciencia que estudia todo lo referente a
los tejidos orgánicos: su estructura histológicas.
microscópica, su desarrollo y sus funciones.

• La Histología se ha llamado anatomía

microscópica.

1
 11-03-2019

Teoría Celular
• La mayor parte de los tejidos no puede ser observada
• Desarrollada en 1838 por Schleiden para el reino vegetal, y in vivo.
extendida en 1839 por Schwann para el reino animal.

• Virchow en 1858, confirmó esta hallazgo en sus estudios de • La visualización de organismos y sus estructuras se
citogénesis llegando a la conclusión que toda célula se realiza mediante el uso del microscopio (en sus distintos
origina de otra célula (teoría omnis cellula e cellula). tipos).

TIPOS DE MICROSCOPIOS

Microscopio
Óptico Simple Lupa

Microscopios
Microscopio
óptico M.O. Normal
Microscopio
Campo oscuro
Óptico
Contraste de fases
Compuesto
Fluorescencia
Tipos de
microscopios

Microscopio Transmisión
electrónico Barrido

Microscopios

Células de corcho de
Hooke

Microscopio óptico

Micra o micrón: Unidad de longitud equivalente a la millonésima parte de un

metro, representada por el símbolo griego µ y la letra m  µm. (1000 µm = 1
mm)

2
 11-03-2019

MICROSCOPIOS

MICROSCOPIO CAMPO OSCURO Microscopio de Contraste de Fase

Se utiliza la luz difractada, el espécimen Permite ver células y tejidos vivos sin colorear, aprovecha las pequeñas
aparece brillante contra un fondo oscuro. diferencias de los índices de refracción en las distintas partes de una
célula y en distintas partes de una muestra de tejido.

MICROSCOPIO DE INTERFERENCIA

Microscopía óptica Microscopía contraste fases

Se utiliza para mediciones

cuantitativas, detecta cambios en los
índices de refracción de los
especimenes observados.
Microscopía de interferencia

3
 11-03-2019

MICROSCOPIO DE LUZ POLARIZADA

MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA

Utiliza un filtro polarizador que permite

identificar sustancias que presentan
birrefringencia (que brillan con luz
polarizada)

Drpspphila
MICROSCOPIO ELECTRONICO DE
TRANSMISIÓN

hela

Mitocondria 60.000x

Bacteria fagocitada por un

Célula de cebolla (peroxisomas) macrófago

MICROSCOPIO ELECTRONICO DE
BARRIDO
Espermatozoides
bovinos

Glomérulo renal 1200x

Piel humana

4
 11-03-2019

Elementos del microscopio óptico

MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

Aumento del Microscopio
• No poner la preparación al revés ( cubreobjetos hacia
arriba)
Aumento = Ocular * Objetivo
• Regular la luz a intensidad media
• Ajustar condensador (arriba) Ejemplo : Ocular 10X Objetivo
40X
• Ajustar diafragma (abierto)
• Empezar por poco aumento (4x) Aumento = 10 * 40 =
400X
• Mirando por fuera subir la platina sin chocar con la placa
a visualizar Un objeto de 2 mm se verá de 2 * 400 =
800 mm
• Mirar por el ocular, enfocar y ajustar
• Pasar al siguiente aumento y enfocar
• Al terminar la observación retirar la preparación del
microscopio *Obviamente sólo se verá una parte del
• Dejar el microscopio en posición de descanso (apagar la objeto
luz, dejar platina abajo y aumento menor)

 El examen al microscopio se hace (generalmente)

por luz transmitida, lo que significa que la luz debe
"atravesar" el objeto.

 La forma más común y clara de observar estructuras

Etapas del
es mediante el estudio de tejidos muertos y
coloreados. procesamiento
 Para esto se deben efectuar una serie de
“manipulaciones”, ya que la mayoría de las
estructuras son transparentes y se encuentran
del tejido
formando masas macizas tridimensionales donde se
superponen unas a otras.

5
 11-03-2019

• Para empezar se debe obtener una MUESTRA DEL TEJIDO a

estudiar y existen 2 formas:
1. Obtención de la
muestra
2. Fijación
• Necropsia: Examen u obtención de tejido de un organismo
3. Deshidratación muerto.
4. Aclaramiento o
diafanización
5. Impregnación • Biopsia:(del griego bios = vida y oasis = visión) Examen u
6. Inclusión obtención de tejido de un organismo vivo.
7. Sección o corte
8. Adhesión a
portaobjetos • HISTOLOGIA TEJIDOS NORMALES
9. Tinción
10. Montaje
• ANATOMIA PATOLOGICA TEJ.PATOLÓGICOS

Fijación Fijación

√ Procura que la muestra esté lo más parecida al • Fijadores Físicos:

estado vivo.
1. Desecación.
√ Una vez ocurrida la muerte del tejido comienzan
los procesos degradativos. 2. Calor seco.

√ La fijación preserva la morfología y la 3. Calor húmedo.

composición química de los tejidos evitando que
aparezcan los fenómenos agónicos o post- 4. Frío.
mortem (autólisis, desintegración, etc.).

5. Congelación y desecación
√ Hay fijadores físicos y químicos.

Fijación
• Fijadores Químicos:

√ Fijadores simples: Formaldehído, alcohol (etílico,

metílico), etc.

√ Fijadores compuestos: mezclas de un número

variable de fijadores simples, con el fin de completar
la acción de cada uno de ellos o atenuar sus
defectos, ej. Zenker (mezcla bicromato-sublimado-
acética), Bouin (mezcla picro-formo-acética).

√ Fijador más utilizado Formaldehído

(formalina). John Hunter (1728-1793)

6
 11-03-2019

Deshidratación Aclaramiento
• Es la sustitución del agua que poseen los
tejidos por alcohol o acetona, mediante una • Es la sustitución del agente
batería creciente. deshidratante por otro,
denominado de transición
(generalmente Xilol) que a su
vez es miscible en el medio de
impregnación que proporcione
a la muestra la necesaria
dureza para poder ser
seccionada.

Impregnación
• Se utiliza parafina, que es una cera y por lo tanto
no miscible en agua. Así, esta sustancia sustituye
el agua que inicialmente estaba en las células y
tejidos.
• Penetración de la parafina a 56-58ºC. Se
embebe en este medio para proporcionar
dureza al tejido.
Inclusión
• Es la transferencia de la muestra (previamente
impregnada) a moldes de papel o de metal (ej.
barras de Leuckart) a los cuales se vierte
previamente la parafina fundida.

Sección o corte
Sección o corte • Tipo Minot: Permite obtener cortes seriados en forma de cinta.

• Se utilizan instrumentos llamados micrótomos.

• Estos son instrumentos de gran precisión que

nos proporcionan cortes delgados parejos y
de espesor graduable. Los cortes más
corrientes son entre los 4-6 micrones.

7
 11-03-2019

Sección o corte
• Crióstato: Micrótomo tipo
Minot incluido en una
cámara de congelación.

Cortes de intestino grueso: (a) Congelación y azul de metileno (b) Rutina HE

Montaje y coloración
Montaje y coloración

Coloración (tinción)
Colorantes: Sustancias que pueden conferir color a otros cuerpos.

Coloración: Proceso mediante el cual un cuerpo es teñido por

una sustancia colorante.

8
 11-03-2019

Coloración (tinción)
.
Coloración de rutina: Hematoxilina-eosina (H-E)

Hematoxilina – Eosina - HE

Problemas en la
interpretación

Artefactos Conceptuales
Cambios estructurales inducidos por las
técnicas histológicas (errores en la ejecución
del procesamiento).

 Fijación
 Deshidratación
 Aclaramiento
 Corte
 Montaje

3D

9
 11-03-2019

Conceptuales

Métodos de estudio
2D v/s 3D
de
embriología

MODELOS DE ESTUDIO

DIAFANIZACIÓN

10
 11-03-2019

ECOGRAFÍA ECOGRAFÍA DOPPLER

ECOGRAFÍA 3D Y 4D Bibliografía

Geneser F. (2007). “Histología”. (3ra Ed).

España .Madrid: Editorial Panamericana

Embriología Médica. Langman S. Editorial

Panamericana/ 12ª Ed./2012

Link animaciones:
http://www.wesapiens.org/class/4933003/Histological+techniques

11