UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERÚ

FACULTAD DE AGRONOMIA

DETERMINACIÓN DE NITRÓGENO TOTAL (Norgánico+Ninorgánico)

1. Método
Microkjeldahl
2. Fundamento
El método tiene tres partes:
Digestión de la muestra
Destilación
Titulación
3. Reactivos
3.1 Ácido sulfúrico (H2SO4) al 96-98% (5 mL por muestra)
3.2 Tableta catalizadora (1/muestra)
3.3 Agua destilada
3.4 Hidróxido de sodio (NaOH) al 40% (2 litros)
3.5 Carbonato de sodio (Na2CO3), 310 g
3.6 Ácido clorhídrico 0.25 N
3.7 Ácido bórico (H3BO3) al 4%
3.8 Mezcla de solución indicadora: 0.5 g de verde de bromocresol más 0.1 g de rojo de metilo
en 100 mL de etanol al 90%.
4. Procedimiento
4.1 Digestión
Compuestos orgánicos + H2SO4 + Calor → (NH4)2SO4 + CO2 + H2O + SO2
4.1.1 Pesar 1 g de suelo tamizado por una malla de 0.15 mm (100 mesh) o 0.5 mm (32 mesh)
[para muestras vegetales = 0,5 g; para materia orgánica = 0,1 g]
4.1.2 Agregar la muestra de suelo al tubo de digestión
4.1.3 Agregar 5 mL de H2SO4 al tubo de digestión que contiene la muestra de suelo.
4.1.4 Agregar 1 tableta de catalizador al tubo con la muestra de suelo
4.1.5 Programar la digestión:
1: 150°C x 30 minutos
2: 280°C x 30 minutos
3: 380°C x 60 minutos
4.1.6 A cada botella del scruber agregar 600 mL de agua más 150 g Na2CO3
4.1.7 Agregar a la bomba de vacío 10 litros de agua más 10 g de Na 2CO3
4.1.8 Ejecutar la digestión, y al finalizar observar que el líquido quede de color verde
transparente. No deben quedar restos negros adheridos a la pared del tubo.
4.1.9 Sacar los tubos y dejar enfriar a temperatura ambiente
4.2 Destilación
(NH4)2SO4 + 2NaOH + Calor → 2NH4OH + Na2SO4
NH4OH + H3BO3 → NH4H2BO3 + H2O
4.2.1 Añadir 25 mL de agua destilada a cada tubo de digestión contenido líquido verde
transparente.
4.2.2 Evitar solidificar la muestra; si es necesario calentar nuevamente.
4.2.3 Colocar el tubo en el equipo destilador
4.2.4 Verificar que el equipo tenga el botellón con dos litros de NaOH al 40%.
4.2.5 Preparar en un matraz de 250 mL la siguiente mezcla: 25 ml de H3BO3 al 4% más 4 gotas
de la mezcla indicadora verde de bromocresol y rojo de metilo, apareciendo un color rojizo.
4.2.6 Iniciar la destilación, habiendo previamente llenado el equipo con agua destilada (2/3
partes, verificando con el punto verde) y calentado el equipo, apretar el botón Steam para
iniciar la destilación.
4.2.7 Cuando se agrega el NaOH la muestra se torna de color azulado.
4.2.8 El equipo automáticamente termina la destilación en un promedio de 10 minutos,
verificando que el matraz tenga una coloración verde.
4.3 Titulación
NH4OH + H2SO4 → H3BO3 + NH4SO4
4.3.1 Sacar el tubo del destilador, cuidadosamente, utilizando guantes para evitar quemaduras
y dejar enfriar, colocar en su lugar otra muestra o un vaso limpio.
4.3.2 Titular la muestra (matraz) con H2SO4 0.02 N, hasta la aparición de un color PALO DE
ROSA. Anotar el gasto.
4.3.3 Calcular el porcentaje de nitrógeno en la muestra de la siguiente manera:

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6 𝑚𝐿 𝑥 0,02 𝑥 1.4
% 𝑁𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 = = 0,168
1𝑔

5. Ejercicios de cálculo

5.1 Calcular la cantidad de nitrógeno total de un análisis de suelo, cuyo gasto de H2SO4 0,02
N fue de 6 mL, habiéndose utilizado 1000 mg de suelo para el análisis.

6 𝑥 0,02 𝑥 1.4
% 𝑁𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 = = 0,168
1

Según este resultado, el contenido de N en esta muestra de suelo, sería: ¿alto, bajo o medio?
Contenido de N en el suelo:
Bajo : < 0,1 % = < 1 g/kg
Medio : 0,1 – 0,2 % = 1 – 2 g/kg
Alto : > 0,2% = > 2 g/kg

5.2 Considerando un contenido de 19 g MO/kg suelo, ¿cuál sería el contenido de N total en

este suelo? (1º calcular, 2º calificar)

Se considera que la materia orgánica del suelo tiene 5% de N total en promedio.

(19 g MO/kg suelo) x (5/100) = 0,95 g Nt/kg suelo = 0,095 % Nt = Bajo

5.3 Considerando un contenido de 15 g CO/kg suelo, ¿cuál será el contenido de N total en

este suelo? (1º calcular, 2º calificar)
1,29 g/kg = medio

(15 g CO/kg suelo) x 1,724 x (5/100) = 1,29 g Nt/kg suelo = Medio

MO

Respuesta: 1,29 % Nt = 1,05 %

Se considera que el COS x 1,724 = MOS

Dato:
(15 g COS/kg suelo) x 1,724 = (25,86 g MOS/kg) x (5/100) = 1,293 g Nt/kg suelo = 0,1293 % Nt

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5.4 Para un suelo con 1,8 g Nitrógeno total/kg de suelo; cuya muestra proviene de una
parcela de 6 000 m2, profundidad del suelo = 23 cm, y densidad aparente = 1,35 Mg.m-
3
; calcular la cantidad de nitrógeno total (kg). Respuesta = 5 589 (kg)

Masa suelo = 6000 x 0,23 x 1,35 = 1863 Mg suelo = 1 863 000 kg suelo

1,8 g Nt ………………….. 1 kg suelo

X ………………….. 1 863 000 kg suelo
X = 3353,4 kg

A. Dato: 1,8 g Nt/kg suelo

1,8 g Nt …………………………………… 1 kg suelo

X ………………………………….. parcela: 1 863 000 kg

X = 3 353,4 kg Nt/parcela

La masa de suelo de la parcela = (1,35 x 0,23 x 6 000) = 1 863 000 kg

5.5 Un suelo del distrito de Orcotuna tiene 1,50 g Nitrógeno total/kg de suelo; la muestra fue
obtenida de una parcela de 8 000 m 2, profundidad del suelo = 20 cm; densidad aparente
= 1,4 Mg.m-3. Calcular el contenido de nitrógeno mineral (kg/ha), considerando una tasa
de mineralización del nitrógeno total = 2%.

Respuesta = 67,2; 6720; 168

Dato:
1,5 g Nt ……………… 1 kg suelo ¿N mineral (kg/ha)?
X ………………. 1 ha = 2 800 000 kg suelo
X = 4 200 kg Nt/ha

Masa de suelo de la hectárea = (1,4 x 0,20 x 10 000) = 2 800 Mg = 2 800 000 kg

Entonces:
(4 200 kg Nt/ha) x (2/100) = 84 kg Nm/ha/año

5.6 Calcular la cantidad de nitrógeno mineral presente en una parcela de dimensiones: (10
m largo x 5 m ancho). Calcular el nitrógeno mineral presente (kg/ha), considerando una
tasa anual de mineralización del nitrógeno total, de 2%. El contenido de nitrógeno total
es de 1,9 g/kg.

Respuesta = 76 kg Nm/ha/año = 114 kg Nm/ha = 76 kg/ha

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Kg Nm/ha = (0,19/100) x (2 000 000 kg suelo/ha) x (2/100) = 76

¿ El contenido de N encontrado en este suelo, se califica como: ¿bajo, medio o alto?

ALTO; ALTO;

¿Por qué este suelo tendría contenido medio de N? (Interpretación)

La cantidad media de N en este suelo se debe posiblemente al contenido medio de materia

orgánica, que es la fuente principal en un suelo.
En las condiciones del valle del Mantaro, se ha encontrado que la tasa de mineralización del N
total del suelo es baja, por lo tanto, cuando los suelos tienen contenidos medios o altos de materia
orgánica, la baja tasa de mineralización, debido a las bajas temperaturas promedio anual (12-13
ºC) liberan lentamente el nitrógeno mineral.