Universidad Autónoma de Baja California

FACULTAD DE CIENCIAS
Licenciatura en Biología

MICROBIOLOGÍA
Reporte No. 1 de Laboratorio
"USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO Y
MEDICIÓN DE CÉLULAS "

García Paredes D.
Reynoso Rios I.

Grupo 621
Prof: Portillo López
Ensenada B. C. a 23 de agosto 2022.

1
INTRODUCCIÓN.
 La última década ha sido testigo de un enorme crecimiento en la aplicación de la
microscopía óptica para investigaciones a nivel de micras y submicras en una
amplia variedad de disciplinas (B. Herman et al., 1993, S. Bradbury et al., 1998).
El rápido desarrollo de nuevos marcadores fluorescentes ha acelerado la expansión
de la microscopía de fluorescencia en aplicaciones e investigación de laboratorio
(B. Herman, 1988, F. W. D. Rost, 1992). Los avances en imágenes y análisis
digitales también han permitido a los microscopistas adquirir mediciones
cuantitativas de manera rápida y eficiente en muestras que van desde compuestos
enjaulados fotosensibles y superconductores cerámicos sintéticos hasta
microscopía de fluorescencia en tiempo real de células vivas en su entorno natural
(G. Sluder et al., 1998). La microscopía óptica, con la ayuda del vídeo digital,
también se puede usar para obtener imágenes de secciones ópticas muy delgadas, y
los sistemas ópticos confocales ahora están en funcionamiento en la mayoría de las
principales instituciones de investigación (C. J. R. Sheppard et al., 1997, J. B.
Pawley, 1995). Los primeros microscopistas se vieron obstaculizados por la
aberración óptica, las imágenes borrosas y el mal diseño de las lentes, que
fracasaron hasta el siglo XIX. Las aberraciones se corrigieron parcialmente a
mediados del siglo XIX con la introducción de los objetivos acromáticos Lister y
Amici que redujeron la aberración cromática y elevaron las aperturas numéricas a
alrededor de 0,65 para objetivos secos y hasta 1,25 para objetivos de inmersión
homogéneos ( S. Bradbury, 1967). En 1886, el trabajo de Ernst Abbe con Carl
Zeiss condujo a la producción de objetivos apocromáticos basados por primera vez
en principios ópticos de sonido y diseño de lentes. Estos objetivos avanzados
proporcionaron imágenes con aberración esférica reducida y sin distorsiones de
color (aberración cromática) en aperturas numéricas altas. Varios años más tarde,
en 1893, el profesor August Köhler informó sobre un método de iluminación que
desarrolló para optimizar la fotomicrografía, lo que permitió a los microscopistas
aprovechar al máximo el poder de resolución de los objetivos de Abbe. La última
década del siglo XIX vio innovaciones en la microscopía óptica, incluidos los
microscopios metalográficos, las fotolentes anastigmáticas, microscopios
binoculares con prismas formadores de imágenes y el primer estereomicroscopio.

2
En el microscopio compuesto, cada lente del objetivo forma una imagen
intermedia ampliada de la muestra iluminada en el tubo óptico. Luego, esta imagen
se amplía nuevamente y se ve a través del ocular como una imagen virtual
ampliada que parece estar ubicada a unas 10 pulgadas del ojo. Los microscopistas
deben enfocar sus ojos en ese plano más distante, en lugar de intentar enfocar a la
distancia de la platina del microscopio. Un ejemplo de un microscopio simple es
una lente de aumento que aumenta los objetos que son difíciles de ver a simple
vista. Las unidades de proyección de salas de cine incorporan este sistema de
manera eficiente. El microscopio compuesto emplea dos sistemas de lentes
separados, objetivo y ocular, cuyo producto produce el aumento final. Los
microscopios estándar usan iluminación de campo claro en la que la luz pasa a
través de la muestra delgada.

COMPONENTES, FUNCIONES Y MANEJO

Los componentes y la función de cada parte del microscopio se resumen a
continuación (Figura 1):
1. Los oculares, generalmente están equipados con lentes 103 (el grado de aumento
es 103). Las lentes magnifican la imagen intermedia formada por las lentes
objetivo en el tubo óptico; también limitan el área de visibilidad.
Los microscopios pueden tener uno o dos oculares ajustables. Todos los oculares
deben usarse correctamente para un enfoque óptimo.
Los oculares no deben intercambiarse con oculares del mismo modelo o otros
modelos de microscopios, porque los oculares en un par están ópticamente
emparejados.
2. El control interpupilar se utiliza para ajustar la separación lateral de los oculares
para cada individuo. Cuando se ajusta correctamente, el usuario debe poder enfocar
ambos ojos cómodamente en la muestra y visualizar una imagen clara.
3. El tubo óptico conecta los oculares con la lente del objetivo. La imagen
intermedia se forma en este componente. La longitud estándar es de 160 mm, que,
funcionalmente, es la distancia desde el plano de la imagen real (oculares) hasta las
lentes del objetivo.
4. El cuello, o brazo, proporciona un sitio estructural de unión para el revólver
portaobjetivos.
3
5. El soporte es el soporte vertical principal del microscopio. El montaje del
escenario, junto con el condensador y la base, está soportado por el soporte.
6. El revólver portaobjetivos sostiene los objetivos y permite una fácil rotación de
una lente del objetivo a otra. La distancia de trabajo (WD) entre los objetivos y el
portaobjetos varía según la marca y el modelo del microscopio.

Interpupillary control

Optical
tube

Eyepieces
Neck/arm

Nosepiece

Objectives

Stage clip Stand

Stage

Power
Condenser
switch
Field
diaphragm
Rheostat
Coarse and
fine focus

Light source
Stage X-Y Base
adjustment knobs

Figura 1 Componentes de un microscopio compuesto. (Cortesía Nikon

Instruments, Inc., Melville, NY.)

7. Por lo general, hay tres o cuatro lentes objetivo (Figura 2), cada uno con un
poder de aumento específico. Grabado en el cilindro de cada lente del objetivo está
el poder de aumento y la apertura numérica (NA). La NA está relacionada con el
ángulo de la luz captada por el objetivo; en esencia, indica la capacidad de
captación de luz de la lente del objetivo. Funcionalmente, cuanto mayor sea el NA,
mayor será la resolución o la capacidad de distinguir entre los detalles finos de dos
objetos situados muy cerca. Las cuatro potencias estándar de aumento y NA
utilizadas en el laboratorio de hematología son 103/0,25 (baja potencia), 403/0,65
4
 453/0,66 (alta potencia, seco), 503/0,90 (inmersión en aceite) y 1003/1,25
(inmersión en aceite). Cuanto menor sea el aumento, mayor será el campo de
visión; cuanto mayor sea el aumento, menor será el campo de visión. El aumento
total se calcula multiplicando el aumento del ocular por el aumento de la lente del
objetivo; por ejemplo, 103 (ocular) multiplicado por 1003 (inmersión en aceite) es
un aumento total de 10003. Los microscopios empleados en el laboratorio clínico
se utilizan con lentes objetivo acromáticas o planas acromáticas, cuyo campo está
enfocado, mientras que la periferia no lo está (Rodak, B. F., 2015).

Figura 2 Lente del objetivo del microscopio. La apertura numérica (NA) indica la
capacidad de captación de luz de la lente del objetivo y refleja su capacidad para
distinguir entre detalles finos de dos objetos situados muy cerca. La distancia de
trabajo (WD) es la distancia en milímetros entre la lente del objetivo y el
cubreobjetos cuando la muestra está enfocada. (Cortesía Nikon Instruments, Inc.,
Melville, NY.)

Una lente acromática plana proporciona correcciones adicionales para la curvatura

del campo, lo que da como resultado un campo plano con un enfoque uniforme.
Las lentes planas acromáticas a veces se denominan lentes de campo plano. Las
aplicaciones críticas de microscopía pueden requerir una lente apocromática plana,
que enfoca la luz de tres colores y corrige casi por completo la aberración
cromática. Este tipo de lente objetivo es más caro y rara vez se necesita para el uso
rutinario en el laboratorio. Se dice que un conjunto de lentes con puntos focales
correspondientes en el mismo plano es parafocal.
5
A medida que la pieza de la nariz se gira de un aumento a otro, la muestra
permanece enfocada y solo es necesario un ajuste fino mínimo.
8. La platina soporta el portaobjetos de microscopio preparado para su revisión. Un
conjunto de resorte asegura el tobogán al escenario.
9. Los controles de enfoque (o ajustes) se pueden incorporar en una perilla o
pueden ser dos controles separados. Cuando se usa una sola perilla, moverla en una
dirección activa el control grueso, mientras que moverla en la dirección opuesta
activa el control fino. Un intervalo de gradación de torneado equivale a 2 mm.
Muchos microscopios están equipados con dos ajustes separados: uno grueso y
otro fino. El orden de uso es el mismo: active primero el ajuste grueso y luego
ajuste con el ajuste fino.
10. El condensador, que consta de varias lentes en una unidad, puede montarse de
forma permanente o puede ajustarse verticalmente con un mecanismo de piñón y
cremallera. Reúne, organiza y dirige la luz a través de la muestra. Adjunto y en la
parte inferior del condensador se encuentra el diafragma de apertura, un iris
ajustable que contiene numerosas hojas que controlan el ángulo y la cantidad de
luz enviada a través de la muestra. El ángulo, también expresado como NA, regula
el equilibrio entre el contraste (capacidad de realzar partes dentro de una celda) y
la resolución (capacidad de diferenciar detalles finos de dos objetos situados muy
cerca). La mejor resolución se logra cuando el iris se usa completamente abierto,
pero se sacrifica un poco el contraste de la imagen. En la práctica, este iris se cierra
lo suficiente como para crear un ligero aumento en el contraste de la imagen.
Cerrarlo más allá de este punto conduce a una pérdida de resolución. Algunos
microscopios están equipados con una lente basculante inmediatamente arriba o
debajo de la lente condensadora principal. Esta lente se utiliza para permitir un
campo de iluminación más amplio cuando la NA de la lente del objetivo es inferior
a 0,25 (p. ej., la lente del objetivo 43/0,12). Si la lente oscilante está por encima del
condensador principal, debe estar fuera para usar con la lente del objetivo 43 y para
lentes con un aumento de 103 y superior. Si está debajo del condensador, debe
estar adentro para usar con la lente del objetivo 43 y afuera para lentes de aumento
de 103 y más. El objetivo 43 no se utiliza habitualmente para el examen de frotis
de sangre periférica.
6
La platina y el condensador (Figura 3) constan de una lente oscilante, un diafragma
de apertura, un control para el ajuste vertical del condensador y dos tornillos de
centrado para el ajuste del condensador.

Vertical
Swingout
adjustment of
condenser lens

Aperture
diaphragm

Centering adjustment
of condenser

Field Diaphragm
Control

Figura 3 Condensador. (Cortesía Nikon Instruments, Inc., Melville, NY.)

11. La lente superior del condensador puede salirse de su posición.

12. Los controles del escenario ubicados debajo del escenario lo mueven a lo largo
de un eje x o un eje y.
13. El diafragma de campo está ubicado debajo del condensador dentro de la base.
Cuando está abierto, permite que un círculo de luz de tamaño máximo ilumine la
diapositiva. Casi cerrando el diafragma, cuando se usa poca potencia, ayuda a
centrar el aparato del condensador mediante el uso de dos tornillos de centrado.
Algunos microscopios tienen condensadores permanentemente centrados, mientras
que en otros los tornillos se utilizan para esta función. El vidrio en la parte superior
del diafragma de campo protege el diafragma del polvo y daños mecánicos.
14. Los microscopios dependen de la electricidad como fuente principal de poder
de iluminación. Hay dos tipos de iluminación de campo claro: (1) iluminación
crítica, en la que la fuente de luz se enfoca en la muestra, lo que da como resultado
un brillo aumentado pero desigual; y (2) el sistema Koehler (o Köhler), en el que la
7
fuente de luz y el condensador están correctamente alineados. El resultado final de
la iluminación de Koehler es un campo de brillo distribuido uniformemente en la
muestra. Esto es especialmente importante cuando se utilizan objetivos de aceite o
cuando se toman microfotografías. Las bombillas de tungsteno-halógeno se
utilizan con mayor frecuencia como fuente de iluminación. Consisten en un
filamento de tungsteno encerrado en una pequeña bombilla de cuarzo que se llena
con un gas halógeno. El tungsteno posee un alto punto de fusión y emite una luz
amarillenta brillante. Se debe usar un filtro azul (luz diurna) para eliminar el color
amarillo producido por el tungsteno.4,5 El reóstato o la perilla o palanca de control
de la luz enciende la luz y se debe usar para regular el brillo de la luz necesaria
para visualizar la muestra. La palanca de control del diafragma de apertura nunca
debe usarse para este propósito, porque cerrarla reduce la capacidad de resolución.
(Rodak, B. F. 2015).

Los microscopios disponibles en la actualidad reflejan mejoras en todos los

aspectos desde el primer microscopio de Anton van Leeuwenhoek (1632-1723)
(Asimov, I. 1969). La tecnología avanzada aplicada a la microscopía ha dado como
resultado sistemas de lentes diseñados por computadora, soportes más resistentes,
condensadores perfeccionados y sistemas de iluminación incorporados. Los
microscopios se pueden equipar con múltiples cabezales de visualización para la
enseñanza o conferencias, o se pueden conectar a una computadora para permitir
que un objeto se proyecte en un monitor o una pantalla grande. El cuidado regular
y la limpieza adecuada aseguran el servicio continuo de este poderoso instrumento
de diagnóstico.

COMPETENCIA.

El alumno conocerá el adecuado manejo del microscopio y lo indispensable que es

dentro del laboratorio de Microbiología para el estudio de la morfología y
estructura de los microorganismos, así como su reacción a diferentes colorantes, lo
cual con otras metodologías permitirá su identificación.

8
 MATERIALES.

✓ Microscopio con ocular con reglilla

✓ Laminillas preparadas
✓ Aceite de inmersión
✓ 1 portaobjetos
✓ 1 cubreobjetos
✓ 1 microscopio óptico
✓ Papel para limpiar el microscopio
✓ Alcohol isopropilico (1 frasco para todo el grupo)

METODOLOGÍA.

Manejo del Microscopio:

1. TRANSPORTE; Se transporta con cuidado, colocando una mano en la
base y otra en el brazo
2. CORDÓN DE ELECTRICIDAD: Deberá de desenchufarse desde la base, nunca
jalarlo del cordón para desconectar
3. CUIDADO DE LOS LENTES: Los lentes deberán limpiarse antes y después de
su uso, con papel seda, que es especial para ello, y remover el aceite del objetivo
de 100x con el líquido especial para ello ó con alcohol isopropílico 95-100%. El
objetivo de 100x deberá remover el exceso de aceite primero y después limpiarse
con el alcohol.
4. PROTECCIÓN DEL POLVO: Colocar la manta ó plástico después de usarse
5. TRANSPORTE: Debe sostenerse firmemente con ambas manos una abajo y otra
del brazo (Figura 1)
6. Al terminar la sesión colocar el objetivo menor y bajar la platina para evitar
cualquier golpe o maltrato a los objetivos.

DETERMINACIÓN DE VALORES MICROMÉTRICOS:

1. Utilizar un microscopio que tenga un micrómetro en el ocular
2. Enfocar la escala del micrómetro de platina a través del microscopio.
3. Girar el ocular micrométrico hasta que las dos escalas estén paralelas.
9
4. Mover el micrómetro de platina hasta que el comienzo (extremo izquierdo) de su
escala coincida con el de la escala del micrómetro ocular.
5. Ubicar la línea del micrómetro ocular más distante del comienzo de la escala que
coincida con una línea de la escala del micrómetro de platina o calcular el largo
en micras de la distancia representada en el micrómetro de platina, que
corresponde al largo total del micrómetro ocular o de contar con un tambor
micrométrico desplazar el trazo perpendicular hasta que coincida con una línea
distante del comienzo de la escala de la platina.
6. Determinar las unidades que éstas representan en ambas escalas.
7. Cálculo del valor micrométrico (VM) en micras
8. Medida del micrómetro de platina, en micras
VM = Unidades del micrómetro ocular
9. Repetir el cálculo para cada objetivo, usando aceite para el objetivo de
inmersión.

10
 RESULTADOS.

Como medidas tenemos que la regla del ocular del microscopio mide 10 unidades
pero no son exactas y comparándola con la regla que nos fue proporcionada en el
portaobjetos está mide 0 a 2000 micras y sacamos a unidad de referencia tanto para
5X, 10X y 40X.
Para la de 5X las separaciones miden 200 micras cada uno, para 10X mide 100
micras cada uno y para 40X miden 25 micras.
Medimos 6 ejemplares para probar nuestra medida de calibración y las medidas
fueron: 35 ,25, 25, 35, 37.5 y 52.5 micras. El promedio oficial son 40 micras.

Imagen 1
Foto de la regla ya calibrada midiendo a un Dinoflagelado ¨Lingulodinium
polyedra¨.

Imagen 2
Foto de Dinoflagelado ¨Lingulodinium polyedra¨.
11
 Imagen 3
Foto de el proceso de de como se calibra la regla para tener una medida más real.

DISCUSIÓN.

Se tuvo algunos problemas para enfocar la muestra porque girabamos con mucha
velocidad el macroscopio, con la ayuda de la profesora logramos enfocar en todos
los objetivos, así como medir dinoflagelados en el objetivo 40x. Medimos más de
cinco ejemplares y logramos capturar con la cámara de nuestro celular algunos.
Concluimos en que los procesos de calibración para medidas de muestras son de
gran importancia para la investigación y el tener un buen sistema para la medición
de los organismos.

CONCLUSIÓN.
Según la literatura los dinoflagelados varían en tamaño desde alrededor de 5 a
2000 micrómetros (0,0002 a 0,08 pulgadas). Nuestros resultados concuerdan con la
literatura pues el promedio del tamaño de los dinoflagelados medidos es de 40
micras.

12
 REFERENCIAS / BIBLIOGRAFÍA

Asimov, I. (1969). Understanding Physics: Light, Magnetism, and Electricity. New

American library..

B. Herman, Fluorescence Microscopy. 2e, BIOS Scientific Publishers Ltd,

Oxford, UK, 1998, 170 pp.

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Applications. Academic Press, New York, 1993, 441 pp.

Booth, DG, Cheeseman, LP, Prior, IA y Royle, SJ (2013). Estudio de la

ultraestructura de cinetocoro-fibra mediante microscopía electrónica de luz
correlativa. En Métodos en biología celular (Vol. 115, págs. 327-342). Prensa
Académica.

C. J. R. Sheppard and D. M. Shotton, Confocal Laser Scanning Microscopy. BIOS

Scientific Publishers Ltd., Oxford, UK, 1997, 106 pp.

S. Bradbury and B. Bracegirdle, Introduction to Light Microscopy. BIOS Scientific

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G. Sluder and D. E. Wolf (eds.), Methods in Cell Biology, Vol. 56: Video
Microscopy. Academic Press, New York, 1998, 327 pp.

13
Hallett, R.I., 1999. Consequences of environmental change on the growth and
morphology of Lingulodinium polyedrum (Dinophyceae) in culture. Ph.D. thesis.
University of Westminster, 109 pp.

J. B. Pawley (ed.), Handbook of Biological Confocal Microscopy. 2e, Plenum

Press, New York, 1995, 632 pp.

M. Abramowitz, Contrast Methods in Microscopy: Transmitted Light. Olympus

America, Inc., Melville, New York, 1987, 31 pp.

Rodak, B. F. (2015). Microscopes available today reflect improvement in every

aspect from the first microscope of Anton. Rodak's Hematology: Clinical
Principles and Applications, 34.

S. Bradbury, The Evolution of the Microscope. Pergamon Press, New York, 1967,
357 pp.

Valks, M. y Burch, D. (2002). El tratamiento y control de las infecciones por

micoplasma en Turquía . Octagon Services Ltd., Old Windsor, Berks, Reino
Unido.

Willis, Randall C (2007). «Portraits of life, one molecule at a time». Analytical

Chemistry 79 (5): 1785-8.

Zernike, F. (1942). Phase contrast, a new method for the microscopic observation
of transparent objects part II. Physica, 9(10), 974-986.

14
 CUESTIONARIO

1. Analizar un diagrama del recorrido de la luz a través de un microscopio

compuesto de campo claro, insertar la imagen analizada:

2. Consultar el fundamento de la microscopía electrónica, en campo oscuro,

de epifluorescencia y de contraste de fases:
- Microscopía Electrónica: La microscopía electrónica de luz correlativa
(CLEM) es una técnica que permite visualizar células de interés mediante
microscopía de luz (LM) antes de transferirlas a EM para un examen
ultraestructural.
- Campo Oscuro: La iluminación de campo oscuro requiere bloquear la rayos
de luz centrales que normalmente pasan a través o alrededor del espécimen y
que solo permiten que los rayos oblicuos iluminen el espécimen. Este
método es un método simple y popular para obtener imágenes de
especímenes sin teñir, que aparecen como objetos brillantemente iluminados
sobre un fondo oscuro. Los rayos de luz oblicuos que emanan de un
15
 - condensador de campo oscuro inciden sobre la muestra desde todos los
acimutes y se difractan, reflejan y refractan en el objetivo del microscopio.
- Epifluorescencia: La microscopía de fluorescencia es una herramienta
excelente para estudiar material que puede generar fluorescencia, ya sea en
su forma natural (primaria o autofluorescente) o cuando se trata con
productos químicos capaces de emitir fluorescencia (fluorescencia
secundaria). Esta forma de microscopía óptica está alcanzando rápidamente
la madurez y ahora es una de las áreas de investigación de más rápido
crecimiento utilizando el microscopio.
- Contraste de Fases: Investigación de Frits Zernike a principios de la década
de 1930 sobre diferencias descubiertas de fase y amplitud entre el orden cero
y la luz desviada que pueden alterarse para producir condiciones favorables
para la interferencia y la mejora del contraste. Los especímenes sin teñir que
no absorben luz se llaman objetos de fase porque alteran ligeramente la fase
de la luz difractada por el espécimen, generalmente al retardar dicha luz
aproximadamente 1/4 de longitud de onda en comparación con la luz directa
no desviada que pasa a través o alrededor del espécimen no afectado.

3. Mencionar ejemplos de utilidad de las anteriores microscopias:

- Microscopía Electrónica: Es la única técnica de imagen que permite a los
investigadores ver la ultraestructura celular completa a la vez con resolución
nanométrica.
- Campo Oscuro: Los objetos de campo oscuro son bastante espectaculares
de ver y los objetos de muy bajo contraste en campo claro brillan
intensamente en campo oscuro. Tal iluminación es mejor para revelar
contornos, bordes y límites.
- Epifluorescencia: El microscopio de epifluorescencia cuenta con un par de
leds y filtros, para excitar fluoróforos que se excitan con una longitud de
onda entre 400 - 600 nm
- Contraste de Fases: El microscopio de contraste de fases permite observar
células sin colorear y resulta especialmente útil para células vivas.

16
4. Describir cuáles tipos de microscopios electrónicos existen actualmente:
 - Microscopio electrónico de transmisión (TEM)
- Microscopio electrónico de barrido (SEM)
- -Microscopio electrónico de reflexión (REM)

5. Consultar y describir una técnica de preparación de una muestra biológica

para ser observada en el microscopio electrónico de barrido:

- Las muestras destinadas al SEM han de cumplir dos condiciones: deben

estar secas y ser conductoras. El proceso de secado ha de llevarse a cabo
preservando al máximo la estructura original de la muestra. Para ello
tenemos dos alternativas: usar el método clásico de fijación y deshidratación
química que el usuario realiza en su laboratorio y que finaliza con el secado
por punto crítico en nuestras instalaciones, o utilizar el moderno método de
fijación física por criofijación que ya está acoplado a uno de los
microscopios. En ambos casos la muestra necesita recubrirse después con un
material que la haga conductora y permita su observación en el microscopio.
- Recubrimiento de muestras en bajo vacío: Con este método se realizan
dos tipos de recubrimientos: “spputtering” de oro para obtener las mejores
condiciones de imagen y, si se requiere microanálisis por rayor X, el
recubrimiento por hilo de carbono.
- Recubrimiento de muestras en alto vacío: Sus aplicaciones van más allá
de la necesidad de obtener una muestra conductora para el SEM. Consigue
recubrimientos de grano mucho más fino y está preparado para realizar
“spputtering” con distintos metales. También trabaja por el método de
evaporación, con lo que aumenta el rango de posibles elementos de
recubrimiento. Utiliza electrodos de carbono para evaporarlo y obtener
“films” que recubren las rejillas destinadas al TEM.
- Observación de muestras criofijadas: El microscopio electrónico de
barrido (SEM) puede dotarse de un sistema capaz de observar la muestra a
muy baja temperatura de forma que su preservación estructural es máxima y
la capacidad de trabajo del microscopio no se afecta en absoluto, pues ya no
tratamos con una muestra hidratada sino congelada.
17
- El proceso se inicia fuera del microscopio, enfriando la muestra a la máxima
velocidad posible mediante nitrógeno nieve. A continuación ya pasa al
sistema de criobservación, donde se puede fracturar, sublimar el hielo
superficial y recubrir con oro o carbono para su observación y/o análisis. La
 ventaja de este sistema es que se puede observar cualquier muestra biológica
o hidratada con una preparación mínima y rápida con una buena
preservación estructural.

6. Cuál fue la precisión de la medición de tu célula comparada con la

reportada en la literatura?
- Comparado con la literatura nuestras medidas variaron un poco pero son
muy similares.

7. Para que nos sirve medir las células?

- Descubrir y observar tanto la composición como las estructuras de las
unidades más pequeñas capaces de vivir por sí mismas, las células.

8. Investigar cuál bacteria es la más pequeña y cuál la más grande, diga sus
medidas y características:
- Pelagibacter ubique es la bacteria no parasitaria más pequeña. Tiene una
longitud de 0.37-0.89 μm.
- Thiomargarita namibiensis es la bacteria más grande del mundo. Esta
bacteria se encuentra entre los sedimentos de la plataforma continental de
Namibia, África . Con 0,75 milímetros de ancho.

9. En el caso de las células eucariotas investigar lo mismo que el inciso

anterior:
- En promedio las células eucariotas logran tener de diámetro entre 10 y 100
micrómetros, mientras que las células procariotas suelen medir entre 0.2 y 2
micrómetros.
- Esto se debe, en cierta parte, a la complejidad de las células ecuariotas, al
tener más elementos son más grandes que las células procariotas que tienen
menos elementos.
18
10. Que tipo de equipo nos dará mayor precisión en la medición de células:
- El uso de un microscopio.