Prácticas de Microbiología de la Licenciatura en Cirujano Dentista

PRACTICA 2.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS ORALES.

INTRODUCCIÓN

La cavidad bucal está compuesta de muchas superficies, cada una de ellas

recubierta por una gran cantidad de bacterias, la biopelícula bacteriana
proverbial. Algunas de estas bacterias han sido implicadas en enfermedades
bucales como la caries y la periodontitis, que están entre las infecciones
bacterianas más comunes en los seres humanos.

Cada vez más existen pruebas que apoyan que los microorganismos de área
bucal contribuye a las dos enfermedades bucales más comunes del hombre
(caries dental y enfermedades periodontales), que presentan factores de riesgo
significativos para condiciones de salud humana, tales como tumores, diabetes
mellitus, enfermedades cardiovasculares, bacteriemia, el parto prematuro y el
bajo peso al nacer en los bebés. Es ampliamente aceptado que los
microorganismos bucales causan enfermedades principalmente por una forma
sinérgica o cooperativa, y las interacciones entre especies dentro de la
comunidad por vía oral juegan un papel crucial en la determinación de si los
microorganismos del área bucal provocan enfermedades o no.

Entender el microbioma bucal es una tarea compleja, debido a la gran variedad

de hábitats dentro de la cavidad bucal y esto depende de las concentraciones
de oxígeno, la disponibilidad de nutrientes, la temperatura, la exposición a
factores inmunológicos y las características anatómicas.4 Las especies del
género Streptococcus se encuentran en una alta proporción en tejidos blandos,
saliva y en la lengua. Las especies del género Actinomyces se encuentran a
nivel supragingival e infragingival y en fisuras de la lengua. Otras bacterias
como Veillonella parvula y Neisseria pueden ser aisladas en todos los hábitats
orales.

OBJETIVOS.

1. Que el alumno sea capaz de identificar los microorganismos que son capaces
de vivir en la cavidad oral.
2. Que los alumnos aprendan a inocular medios de cultivos para permitir el
crecimiento de los microorganismos de manera in vitro. El alumno aprenderá la
técnica básica para hacer estriado.

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MATERIALES

OBJETOS REACTIVOS EQUIPOS

• Aza de • Solución • Microscopio
dicromo salina fisiológica • Cuenta
• Mecheros (SSF). colonias
• Bandeja • Agua
para tinción peptonada.
• Guantes • Cristal Violeta
• Cubrebocas • Lugol
• Cronometro • Safranina
• Bata blanca • Alcohol:cetona
de laboratorio • Alcohol 70%
manga larga • Aceite de
• Portaobjetos inmersión
• Tubos de • Medios de
ensaye. cultivos: Agar
• Hisopos nutritivo, Agar papa
esteriles dextrosa y agar
salado manitol.

PROCEDIMIENTO

1. Realiza una toma de muestra con ayuda de un hisopo estéril,

tomarla de alguna de las siguientes áreas: dientes, encías o lengua.
Tratar de que se tomen muestras de las partes mas significativas
(dientes entre las caries, encías en las áreas que conectan los
dientes y la legua en el área que se acerca a los dientes).
2. El hisopo deberá colocarse en un agua peptona estéril, agitar para
homogeneizar en toda el agua.
3. Tomar un segundo hisopo en la misma área y colocar en un
portaobjetos. De este portaobjetos hacer tinción gram para observar
en un microscopio. Trata de localizar microorganismos. Tomar fotos.
4. El primer hisopo en agua peptona se debe utilizar para realizar las
siembras en tres medios de cultivo (Agar papa dextrosa (hongos),
agar MAS (Patógenos) y agar Nutritivo (Microbiota normal).
5. Una vez terminada la inoculación colocar en la incubadora a 30 y
37°C correspondientes para su crecimiento.
6. Tomar fotos posteriormente de 48 horas de las placas inoculadas
para ver el crecimiento y poder concluir resultados.
7. Una vez terminada la observación realizar la limpieza del
microscopio y la disposición de los portaobjetos de acuerdo como lo
señale el docente o el auxiliar de laboratorio.

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RESULTADOS

Realiza las anotaciones correspondientes a tus resultados.

1. Realiza tu conclusión correspondiente de lo observado en la

práctica:

2. Fotografías tomadas de la practica:

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CUESTIONARIO

1. ¿Cuáles son los microorganismos que suelen albergar en

cavidad oral? Menciona un ejemplo de cada uno

2. Menciona que clase de microorganismos pueden crecer en un

Agar Salado Manitol, así como sus componentes en la
formulación.

3. Menciona que clase de microorganismos pueden crecer en un

Agar Papa dextrosa, así como sus componentes en la
formulación.
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4. Menciona que clase de microorganismos pueden crecer en un

Agar nutritivo, así como sus componentes en la formulación.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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DATOS GENERALES

Nombre del Alumno

Grado y Grupo
Sello y Firma del Docente

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