Problema 1

Se dispone de una enzima purificada hasta la homogeneidad de PM = 170.000 Da de la

cual se sabe que posee una sub unidad catalitica y otra regulatoria. Para poder analizar su
estructura se realizan electrodoreis en distintas condiciones.
I) Electroforesis nativa pH = 8 previo tratamiento de la muestra con β-Mercaptoetanol: Se
obtuvieron 2 badas, solo una de ellas con actividad.
II) SDS-PAGE sin β-Mercaptoetanol: Una banda de 85 KDa.
III) SDS-PAGE con β-Mercaptoetanol: 2 bandas una de 35 KDa y otra de 50 KDa.

a) Represente mediante un esquema los geles obtenidos indicando sentido de la

corrida, lugar de siembra, bandas obtenidas y tipo de revelado. Justifique.
b) Proponer una estructura posible para la enzima.
c) Con estos datos no es posible determinar el PM y caracteristicas de las sub
unidades cataliticas y regulatorias ¿Que necesitaria saber para poder hacerlo?
Justifique.

Problema 2

a) A que grafico corresponde el representado más abajo.

b) Describir como se procede para su obtencion.
c) Que puede decir respecto a sus PI y PM de las proteínas A, B y C.