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3er Parcial
REPRODUCCIÓN EN BOVINOS
Oleadas Foliculares
- Los folículos mayores (FD) de una oleada serán ovulatorios si
logran establecer una cascada endocrina con la LH.
- Si esto no sucede los FD sufrirán atresia, mientras emerge otra
oleada folicular.
- Cada 12 horas se observa a los animales para ver cuales están en
estro.
Estado de salud
- Distocia
- Metritis
- Piometra
- Retención de membranas fetales
- Quistes ováricos
- Pérdida embrionaria temprana
- Enfermedades infecciosas
● IBR
● DVB
● Leptospirosis
● Brucelosis
● Campilobacteriosis
● Tricomoniasis
Tipo de empadre
- Monta libre: un toro para 40 a 50 hembras por año.
- Monta dirigida: 3 a 4 vacas por semana, 150 a 200 vacas por año.
● Se utiliza un macho celador para identificarlas pero no va a
dar el servicio.
● Se retira la hembra para llevarla con el macho (menos
desgaste para el semental).
- Inseminación artificial: 400 - 600 hembras servidas con un
eyaculado.
● Los machos que se colectan, se trabajan una vez a la
semana o cada 15 días.
Destete
- El amamantamiento alarga el anestro postparto
- Vacas que se retiran los becerros de forma precoz presentan
periodos más cortos entre el parto y el primer estro, aumenta el
porcentaje de vacas gestantes.
Tratamientos hormonales
- Norgestomet: implante subcutáneo que se coloca en la parte
externa de la oreja, en todas las vacas independientemente de la
etapa del ciclo estral.
● Se complementa con una aplicación IM de valerato de
estradiol.
● También se puede aplicar una dosis de PgF2a, con la
finalidad de destrucción del cuerpo lúteo, para que no
interfiera con el desarrollo de la oleada folicular.
- CIDR (Control Internal Drug Release): contiene progesterona
natural, este se combina con benzoato de estradiol, se acompaña
de una aplicación de PgF2a.
- MGA (Acetato de melengestrol): efectivos y económicos.
Administración vía oral de 0.5 mg en el alimento. Se puede aplicar
una dosis de PgF2a.
- eCG o hCG: se utilizan en conjunto con tratamiento de
progestágenos, para simular la presencia de un cuerpo lúteo y
estimular desarrollo folicular.
● Se debe de tener cuidado en el ganado bovino debido a la
respuesta exagerada que tiene.
● Se utilizan como hormonas exógenas ya que se parecen a
las hormonas hipofisiarias (LH y FSH). no se utiliza en
protocolos de sincronización.
- Prostaglandinas: finalidad de alisar el cuerpo lúteo.
● Se utilizan en protocolos de sincronización. (se aplica
durante el diestro)
● PgF2a
● Cloprostenol: derivado sintético
● Fenprostalene: tercera opción
Protocolos
- Días largos y días cortos
- En caso de CIDR se coloca durante 12 días, considerando que la
hembra está ciclando, si está en anestro no se puede ciclar.
Detección de estros
- visual
- Podómetro
- Chin ball: se coloca en el pecho del Macho.
- Machos celadores
Inseminación Artificial
- Ovulación ocurre 12 horas después del estro
- La inseminación ocurre en el cuerpo del útero
- La inseminación en el cérvix disminuye el porcentaje de fertilidad.
- Inseminar muy profundo se puede inseminar en el cuerno
contrario al sitio de ovulación.
- Técnica de inseminación rectovaginal: Tomar el cérvix a través del
recto, un aplicador con una pajilla con semen colocada en la
punta se introduce atravesando la vagina manipulando a través
del cérvix.
Catálogos de macho
- Nombre y código del toro: compañía, raza, número del toro de la
compañía, nombre del toro, ET: producto de transferencia
embrionaria, si es o no portador de genes recesivos indeseables.
- Datos del toro: fecha de nacimiento, calificación del tipo
● Excelente: 90 - 100
● 85 - 84 muy bueno
● 80 - 84 bueno más
● 75 - 79 bueno
● 65 - 74 aceptable
● -64 pobre
● Nombre del padre y la madre
- Datos de la producción, habilidad predicha de transmisión (HPT o
PTA),
● Mérito neto vitalicio (NM$) cálculo económico, lo que
produce la vaca a lo largo de su vida.
● Habilidad predicha de tipo (HA-USA): compuesto de ubre,
índice de producción y tipo, nacimientos difíciles en
vaquillas, tasa relativa estimada de concepción.
● Tasa de preñez de las hijas.
- Perfil lineal: rasgos corporales evaluados estadísticamente del
fenotipo de las hijas del toro.
Anatomía
Características reproductivas
- Territorial: no pueden estar con otros verracos
- Buen libido: es muy elevada
- Reproductor no estacional: producción espermática todo el año
● Alto productor de semen
● Alto productor espermático
Necesidades del Verraco
- Buena alimentación: minerales (zinc y selenio) vitamina E.
- Contacto con la hembra
- Los machos deben alojarse en corrales con baja densidad
- Los lechones no deben crecer solos.
Entrenamiento
- 6-7 meses (pubertad)
- Objetivo es el salto
- Alojamientos individuales
- Animales territoriales
- 15 minutos hasta que el cerdo salte.
- El potencial genético se alcanza al año y medio o dos años.
- Separar antes de la pubertad
Cerda
- Útero bicornual de fusión baja
- Una cerda multípara puede medir 2 metros completamente
extendidos de punta a punta.
- Mientras más grande sea el útero más lechones puede tener.
- El ovario de la cerda jamás se detiene.
- El folículo secundario no necesita de estrógenos solo los
terciarios.
Ciclo reproductivo de la cerda
- Dos ciclos: reproductivo y el productivo
- Nacimiento: picos estrogénicos, en machos ocurre a los tres
semanas (testosterona) → Pubertad (Kiss 1, Leptina, peso ideal)
- Se selecciona de la camada que provenga y se toman ciertas
características (que correspondan con la raza), número par de
glándulas mamarias 14-16, deben de ser pares y simétricas.
Momento de inseminación
- 0 horas → 12 horas → 24 horas →36 horas (ovulación) → 48 horas
Materiales para inseminación artificial en cerdos
- IA: 1 verraco por cada 200 cerdas
- Monta directa: 1 macho por cada 20 cerdas
- Más del 60% de las cerdas en producción en México son
inseminada artificialmente (tendencia en aumento día a día)
- Consideraciones
● Personal calificado: medico veterinario
● Higiene fundamental
● Materiales desechables
- Termo
- Dosis seminal
- Pipeta de inseminación
- Lubricante
- Guantes
- Toallas de papel
Preservación
- Botellas de plástico → 100 ml
- Tubos de plástico → 80 ml
- Todos tienen que ir a 300 x 106 de espermatozoides
- El 99% de las IA emplea un método de conservación
- De inp a cinco días de 15 a 17ªC, conservación ideal.
- Considerar: temperatura, protección la luz solar (rayos uv dañan
capa fosfolipídica de los espermatozoides), homogeneizar.
Tipos de pipetas
- Cervicales
- Post Cervicales
- Intrauterina
Gestación
- Placenta difusa: abarca por todo el útero
- Placenta epiteliocorial: el corion está unido al producto
- Las cerdas solo tienen una placenta de la cual salen todos los
cordones umbilicales.
- Gx: 114 días
- 1er tercio: 0 - 35 días (muerte embrionaria)
- 2do tercio: 35 - 78 días (aborto y momias)
- 3er tercio: 78 - parto (aborto y momias)
Primer tercio de gx
- Fase embrionaria
- Dia 1 hasta 35 de gx
- Migración del blastocisto - día 4
- Implantación → día 11 - 12
- Reconocimiento de gx → día 13 (estrógenos embrionarios)
Mantenimiento de la gx
- Cuerpo lúteo
- Progesterona dependiente
- Desarrollo dentro de la zona pelúcida → salida de la zona
pelúcida → reconocimiento materno de la gx → formación de
membranas extraembrionarias
Reconocimiento de la gx
- Durante la elongación es necesario que todos los productos
abarquen todo el endometrio
- Deben de tocarse los productos unos con otros
- Al momento de darse el contacto del producto con el endometrio
hay liberación de E2 embrionarios
- Los estrógenos endometriales cambian el sentido de la liberación
de PGF2a.
- Si un punto de endometrio queda sin contacto con algún
producto la liberación de la PGF2a (se produce en el endometrio)
se da hacia el torrente sanguíneo y se lisa el cuerpo lúteo.
- Se tiene que elongar en el tamaño del útero.
- El estrógeno embrionario hace que la PGF2a cambie de dirección
y ya no va hacia el torrente sanguíneo. (Día 13)
- Formación de placenta
- En cerdas no hay retención placentaria
Reabsorción embrionaria
- Muerte embrionaria → fisiológica → 5 días post concepción → 60%
de embriones mueren.
- Muerte embrionaria → Patológica → después del día 16 →
repetición irregular → 26 - 35 días.
Causas de momificación
- Parvovirus
- Aujeszky
- Influenza porcina
- Enterovirus
- Citomegalovirus
- FPC
- Ojo azul
- PRRS (Síndrome respiratorio y reproductivo porcino)
Causas de aborto
- Leptospirosis
- Brucelosis
- Toxinas
- Toxoplasmosis
- Estrés
*Litopedion: momificación
Tercer tercio
- De los 76 al parto
- Si se mueren antes del 110 y salen todos son aborto.
- Desarrollo fetal: 10-12 cm
- Muerte mortinato: uno o varios productos → feto muerto no
deshidratado
Manejo de Lechón
- Liberar vías aéreas
- Secado
- Corte de cordón umbilical
- Calostrado
*Frío → Letargo → Menor consumo → Muerte
- Lactancia dura de 14 - 28 días
- Se debe tomar en cuenta el cuidado de la cerda y del lechón.
Métodos naturales
- Bioestimulación
● Efecto macho: ovulación en 48-72 hrs. después de la
introducción
● Ovulación sin conducta estral
● Cuerpo lúteo de vida corta
● No sincroniza estros: No todas las hembras tienen la misma
respuesta.
● Jerarquía
- Efecto macho (época de transición)
● Aislar macho o utilizar diferentes machos → Introducir
machos 4-6 semanas antes del empadre → 48 horas
ovulación → ciclo corto de 5-6 días → Estro más ovulación 15
días → inicio del empadre.
- Fotoperiodo
● Calendario de días largos y después de días cortos
● Centros de IA para el manejo de los machos.
● Fotoperiodo natural: producción espermática durante
anestro es menor.
● Fotoperiodo artificial:se requieren de dos meses de luz y dos
meses de oscuridad para ovulación y para que haya
cambios en el SN.
Progesterona o progestágenos
- Sensibilidad al SNC para una correcta expresión del celo.
- Evitan la formación de CL de vida corta.
- MGA oral (Acetato de melengestrol)
- CIDR
- Esponjas vaginales: acetato de fluorogestrona (FGA)
- Inyecciones de P4
Uso de eCG
- Pueden usarse dosis desde 200 hasta 900 UI.
- Requiere de un pretratamiento de P4
- Se aplica 24-48 hrs. antes del retiro del P4 o durante el retiro.
- Se utiliza para:
● Promover crecimiento folicular
● Aumentar producción de estradiol
● Incrementar tasa ovulatoria
● Administración IM
Prostaglandinas
- Requiere de hembras ciclando
- La cabra es cl dependiente durante toda la gx.
- Hembras vacías
- Produce lisis de CL
● Ovejas: 5-14 días del ciclo
● Cabra: 5-16 días del ciclo
- No es conveniente usarlo en época de transición
Diagnostico de gestación
- Cabras: 19-23 después de la última IA
- Borregas: 16-18 después de la última IA
- Medición de progesterona:
● Cabra: después del dia 21 de que presentó estro
● Borrega: después del día 17 que presentó estro
● Niveles arriba de 2.5 ng/ml de P4.
- Ultrasonido Modo B: vía transrectal (se puede observar a partir de
los 15 días)
- Antes del día 24 es complicado ver la vesícula aminótica
- Factor de crecimiento se utiliza despues del dia 21
- Ultrasonido transabdominal: falsos positivos si no se observa
nada se realiza una transrectal.
- Doppler: puede dar un falso negativo. (vía rectal),
- 71-75: para observar placentomas y desarrollo del feto.
- A partir del día 65 ya se realiza rx porque que el feto ya esta
osificado.
Ecografía transrectal
- Plan y se cubre con con un guante de palpación. Se debe de
realizar despacio para evitar lesionar a la hembra. Craneal a la
vejiga se observa utero y ovarios, es más fácil que transabdominal
pero es más invasivo.
- Se observan los placentamos y el tamaño puede dar un tiempo de
gx. pero no es efectivo.
- Diámetro biparietal no medir pasando el día 100.
- Se identifica el sexo de la cría dependiendo de la posición del
producto.
Gestación y parto
- Cabra
● 148 días de gx.
● Preparación: 6 a 12 horas
● Expulsión: 30 a 60 minutos
● Expulsión de membranas: 3-4 horas después de que salió la
última cría.
- Borrega
● 150 días gx
● Preparación: 6 a 12 hras
● Expulsión: 30 a 60 minutos
● Expulsión de membranas: 3 a 4 horas después de que salio
la ultima cría
- Siempre revisar que solo sea una cría en caso de que vengan más
de 1.
- En cada contracción se debe jalar para evitar cualquier tipo de
lesiones tanto en la hembra como en la cría
- Cría amarilla → estrés fetal
- Si es parto múltiple se debe identificar que salgan todas las
placentas.
Causas de distocia
- Mala disposición
- Partos múltiples
- Obstrucción en el canal de parto
- Oxitocina: verificar tamaño de cría, disposición y presentación.
- Torsión uterina: puede ser comun cuando la hembra es vieja y a
tenido muchos partos, los ligamentos cada parto se hacen más
flexibles.
Sementales
- Se evalúa el semental: edad a la pubertad, diámetro testicular,
presencia de cuernos.
- Correlación entre la presencia de cuernos y la fertilidad → baja, si
el macho tiene cuernos → buena fertilidad.
- Si se retiran los cuernos puede disminuir su jerarquía y no es
atractivo para la hembra.
- Volumen, concentración y anormalidades
- Condición corporal: si el macho tiene baja cc tiene mala
producción, si tiene mala producción y tiene buena cc
→problemas genéticos.
- Circunferencia escrotal: desde crías → se relaciona con buena
producción espermática. Si el testiculo sube y baja no sirve
porque modifica la calidad espermática.
Introducción
- Situación actual
- En países desarrollados es accesible para casi todos los
ganaderos
- En méxico se emplea principalmente para la producción de pie de
cría.
- En europa está enfocado a ganado lechero.
- En norte américa se hace en ganado cárnico, como embriones y
ovocitos para fecundación in vitro.
- Mejoramiento genético: se evalúa una hembra buena productora
y reproductora, que tenga muchos ovocitos para ser inseminada
con semen de un macho de buena calidad.
- Costosa
- Pie de cría
Ventajas
- Incrementa la capacidad reproductiva de las hembras
- Selección y mejoramiento genético
- Disminuye el intervalo generacional
- Facilita la comercialización del material genético
- Disminuye los riesgos de transmisión de enfermedades.
- Permite optimizar el uso de semen de gran valor genético
Sincronización y superovulación
- Sincronización: a la donadora y a las receptora
- Prostaglandinas
- Con progestágenos auricular o CIDR, puede realizarse a partir del
día 4 o 9 la aplicación de FSH durante 4 días con 2 aplicaciones
diarias, de manera decreciente.
- FSH y eCG para superovular
Sincronización
- Prostaglandinas
- Vacas ciclando
- Vacas vacías
- Esquema de 0-11 días.
- Presentación de estros
● 10-15% : 48-55 HRS
● 60-70% : 60 - 72 HR
● 10-15% : 73 -96 HR
● 10 -15% 97-114 HRS
- Progestagenos
● Ciclando (PFG2a)
● Anestro (inducción + eCG)
● Estradiol, Somatotropina, GnRH, MuSe, eCG, hCG
Manejo de las donadoras y receptoras
- Vacunar
- Desparasita
- Vitaminar: A, D, E, complejo B en caso de problema digestivo
- Suplementar: incrementar la proteína para tener buena
producción hormonal
- Minerales: cobre (solo en vacas) selenio y zinc
- C.C: 3.0
Agentes infecciosos
- Bacterianos: leptospira interrogans, Actinomyces pyogenes,
Ureaplasma diversum, Haemophilus somnus, Brucella abortus
- Virales: DVB, rinotraqueítis bovina
- Protozoarios: Trichomona foetus
- Medioambientales: estrés calórico, época del año (lluvias).
Tratamientos superovulatorios
- Vacas superovuladas de manera individual (inicio del tx en el días
4 post estro).
- No debe haber FD dominante, idealmente debe presentar CL.
- Esquema de superovulación
- Dosis varía dependiendo de la raza.
Inseminación de donadoras
- Observar estros de 24 horas después del retirado del implante
- 2 a 3 inseminación (IA) con intervalo de 12 horas después de
iniciado el estro.
- 2 a 5 dosis de semen
- Aplicación De GnRH en la primera IA y simular el pico de LH
- Evaluación
Técnica quirúrgica
- Se requiere de quirófano que hay pocos
- En pequeños rumiantes hay mayor manejo: laparatomia linea
media se expone el utero. Sonda de follie
- Especies grandes: se usa téncnica no quirurgica
Técnica no quirúrgica
- Anestesia epidural: se entra vía rectal y vía vaginal, se hace para
evitar lesiones en la hembra.
- Se retiran las heces del recto para que no estorben y se hace
limpieza de la zona vulvar
- Sonda de foley: sonda flexible para que se fije en los cuernos
uterinos, tiene dos vías se apoyan de un aplicador ya que no
entra fácilmente.
- Aprox 100 ml, dependiendo de la hembra y la cantidad de
embriones que se van a colectar.
- Se trabaja en Manga de manejo por precaución
- Se hace un masaje con finalidad de elevar los embriones y
puedan salir, se desinfle, se cambia de cuerno y se realiza el
mismo procedimiento.
Evaluación de embriones
- Microscopio estereoscópico: da un volumen, la luz viene de arriba
y el óptico se ve en plano.
- Lavado de embriones
- Medio Holding o medio de mantenimiento: pH 70.25-7.35
● Osmolaridad 275 mOsm
● Temperatura 36 ºC
- 16 → Morúla temprana → blastocisto temprano → blastocisto →
blastocisto eclosionado → blastocisto eclosionado expandido
(salida de la zona pelúcida).
- Ovocito sale del foliculo entra a traves de la fimbria y llega al
punto de fecundación
- Zona de fecundación: ámpula
- Ovotide: es una célula que tiene gameto femenino y masculino.
- Segmentación
- Cel trofoblasto: placentación, se empiezan a diferenciar desde la
etapa de mórula. Uniones estrechas tipo células de sertoli.
- Células MCI: capas embrionarias, células que están alrededor son
el trofoblasto. Unión tipo GAP, intercambio de información entre
un citosol hacia las células.
- Congelación : morula blastocisto temprano y blastocisto.
Congelación
- En este caso se requiere de un congelador donde se utiliza
nitrógeno líquido.
- Empajillado: se trabaja un embrión por pajilla
- Se toma un poco de media de congelación → burbuja de aire →
embrión → medio de congelación → sellar la pajilla
- Embrión biopsiado: estadio de 4 células se quita una célula y se
mete al ovocito y se desarrolla un nuevo embrión.
Congelación tradicional
- Proceso de equilibrio a temperatura de cuarto
- Bajar la temperatura hasta -6º C
- “Seeding”
- Temperatira a -35ºC (0.3 - 0.5 ºC por minuto) durante 15 minutos
- Guardar en N líquido.
Congelación de Vitrificación
- Mayor concentración de crioprotector
- Ocurre a temperaturas de 20-25ºC
- Se combinan crioprotectores penetrantes y no penetrantes
(Sucrosa o trehalosa)
- La exposición final a los crioprotectores está limitada a 40-45
segundos
- Se colocan las pajillas directamente en el N líquido
Descongelación de embriones
- En baño maría a 36-37ºC por 15 segundos
- Glicerol es detrimental para los embriones, se debe remover antes
de transferir
- Etilenglicol para transferencia directa.
Aspiración folicular oocitos guiada por ultrasonido, ovum pick up (OPU)
- Fue reportada por primera vez en 1988 por Pieterse
- Se realiza con un eqeuipo de ultrasonografía como guía para la
punción.
- El dispositivo para la extracción de los ovocitos es introducido en
la vagina, este consiste en una sonsa para ultrasonografía que
posee un sistema de punción con una aguja de 18 G con punta
ecogénica, conectado a una bomba peristáltica de vacío a
presión de 75-100 mmHg para la succión del líquido folicular.
Fecundación in vitro
- Técnica de laboratorio que permite fecundar un óvulo con un
espermatozoide fuera del útero.
- Se retiran células de la granulosa para que pasen los
espermatozoides directo la zona pelucida
- Requisitos necesarios para asegurar FIV efectiva
● Obtener ovocitos suficientemente maduros: tuvo que haber
liberado el cuerpo polar
● Obtener espermatozoides adecuado que tengan reacción
acrosomal
● Identificar el medio de cultivo adecuado para ovocitos,
espermatozoides y para la FIV.
● Asegurar la transferencia segura de embriones al útero.
● Apoyar la implantación y el mantenimiento de embriones: se
manja con P4, para reconocimiento y se desarrolle de
manera adecuada
Maduración de ovocitos
- Temperatura: 38-39ºC
- 24 HORAS
- 5% de CO2
- Medio de maduración (TCM-199) suplementado con piruvato
- Hormonas: FSH, LH, factores de crecimiento (EGF, IGF-1).
Sexado de embriones
- Cariotipo: células individuales son removidas del embrión y se
verifica sin son XX o XY.
- Inmunología: anticuerpos son usados para detetar antígenos
específicos de macho.
- Análisis de DNA: por medio de PCR.
- Detección de diferencias metabólicas: ensayos de colorimetría de
una enzima ligada al cromosoma X.
PCR
- Desnaturalización
- Alineamiento de primers
- Síntesis de DNA
Utilidades
- identificar mutaciones
- Terapias génicas
- Ampliar información
- Evolución
- Diferencias entre especies
Animales transgénicos
- Son el resultado de la manipulación de genes específicos de
interés para la creación de modelos animales y biorreactores
para producir vacunas y anticuerpos.
- Son animales que han sido transformados genéticamente por
splicing e inserción de genes foráneos dentro de sus
cromosomas.
- Animales knockout: se silencian genes
- Transferencia de genes de retrovirus modificados: permite meter
un gen en una célula, solo se usa en investigación no se ocupa en
medicina humana.
- Transferencia de células pluripotenciales a nivel de embrión: se
desarrolla hasta un estadio hasta que se pueda transferir