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MÉTODO 245.1

DETERMINACIÓN DE MERCURIO EN AGUA

POR ESPECTROMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA DE VAPOR FRÍO

Revisión 3.0
Versión EMMC

JF Kopp, MC Longbottom y LB Lobring - Mercurio en agua (técnica de vapor frío), revisión 1.0, (1972)

JF Kopp y LB Lobring - Método 245.1, Revisión 2.0 (1979)

LB Lobring y BB Potter - Método 245.1, Revisión 2.3 (1991)

JW O'Dell, BB Potter, LB Lobring y TD Martin - Método 245.1, Revisión 3.0 (1994)

LABORATORIO DE SISTEMAS DE MONITOREO AMBIENTAL OFICINA DE

INVESTIGACIÓN Y DESARROLLO AGENCIA DE PROTECCIÓN
AMBIENTAL DE EE. UU. CINCINNATI, OHIO 45268 MÉTODO 245.1

245.1-1
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DETERMINACIÓN DE MERCURIO EN AGUA

POR ESPECTROMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA DE VAPOR FRÍO

1.0 ALCANCE Y APLICACIÓN

1.1 1
Este procedimiento mide el mercurio total (orgánico + inorgánico) en aguas potables, superficiales,
subterráneas, marinas, salobres, industriales y domésticas.

Registro del Servicio de Resúmenes Químicos

Analizar Número (CASRN)

Mercurio 7439-97-6

1.2 El rango del método es 0.2-10 µg Hg/L. El rango puede extenderse por encima o por debajo del rango
normal aumentando o disminuyendo el tamaño de la muestra. Sin embargo, el límite de detección
del método real y el rango de trabajo lineal dependerán de la matriz de muestra, el tipo de
configuración de instrumentación y las condiciones de operación seleccionadas.

1.3 Las versiones de volumen reducido o semiautomáticas de este método, que usan los mismos reactivos
y proporciones molares, son aceptables siempre que cumplan con los requisitos de control de
calidad y rendimiento establecidos en el método (Sección 9.0).

1.4 Para referencia donde este método está aprobado para su uso en programas de monitoreo de
cumplimiento [por ejemplo, Ley de Agua Limpia (NPDES) o Ley de Agua Potable Segura (SDWA)]
consulte las secciones correspondientes del Código de Regulación Federal (40 CFR Parte 136
Tabla 1B para NPDES y la Parte 141 § 141.23 para agua potable), y los últimos anuncios del
Registro Federal.

2.0 RESUMEN DEL MÉTODO

2.1 Se transfiere una porción conocida de una muestra de agua a una botella de DBO, un matraz tapado de
vidrio esmerilado equivalente u otro recipiente cerrado adecuado. Se digiere en soluciones diluidas
de permanganato de potasio-persulfato de potasio y se oxida durante dos horas a 95°C. El mercurio
en la muestra de agua digerida se reduce con cloruro estannoso a mercurio elemental y se mide
mediante la técnica convencional de absorción atómica de vapor frío.

3.0 DEFINICIONES

3.1 Blanco de calibración : un volumen de agua reactiva acidificada con la misma matriz ácida que
en los estándares de calibración. El blanco de calibración es un estándar cero y se utiliza para
poner a cero automáticamente el instrumento.

245.1-2
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3.2 Estándar de calibración (CAL) : una solución preparada a partir de la dilución de soluciones
estándar de stock. Las soluciones CAL se utilizan para calibrar la respuesta del instrumento
con respecto a la concentración del analito.

3.3 Blanco de reactivo de campo (FRB) : una alícuota de agua reactiva u otra matriz de blanco
que se coloca en un recipiente de muestra en el laboratorio y se trata como una muestra en
todos los aspectos, incluido el envío al sitio de muestreo, exposición a las condiciones del
sitio de muestreo, almacenamiento , conservación y todos los procedimientos analíticos. El
propósito de la FRB es determinar si los analitos del método u otras interferencias están
presentes en el entorno de campo.

3.4 Solución de verificación del rendimiento del instrumento (IPC) : una solución del analito del
método, utilizada para evaluar el rendimiento del sistema del instrumento con respecto a un
conjunto definido de criterios del método.

3.5 Duplicados de laboratorio (LD1 y LD2) : dos alícuotas de la misma muestra tomadas en
el laboratorio y analizadas por separado con procedimientos idénticos. Los análisis de LD1 y
LD2 indican la precisión asociada con los procedimientos de laboratorio, pero no con los
procedimientos de recolección, conservación o almacenamiento de muestras.

3.6 Blanco fortificado de laboratorio (LFB) : una alícuota de LRB a la que se agrega una cantidad
conocida del analito del método en el laboratorio. El LFB se analiza exactamente como una
muestra, y su propósito es determinar si la metodología está bajo control y si el laboratorio
es capaz de realizar mediciones exactas y precisas.

3.7 Matriz de muestra fortificada de laboratorio (LFM) : una alícuota de una muestra ambiental a
la que se agrega una cantidad conocida del analito del método en el laboratorio. El LFM se
analiza exactamente como una muestra y su propósito es determinar si la matriz de la
muestra contribuye al sesgo de los resultados analíticos.
Las concentraciones de fondo de los analitos en la matriz de la muestra deben determinarse
en una alícuota separada y los valores medidos en el LFM deben corregirse para las
concentraciones de fondo.

3.8 Blanco de reactivo de laboratorio (LRB) : una alícuota de agua reactiva u otras matrices de
blanco que se tratan exactamente como una muestra, incluida la exposición a todo el material
de vidrio, equipo, solventes, reactivos y estándares internos que se usan con otras muestras.
El LRB se utiliza para determinar si el analito del método u otras interferencias están
presentes en el entorno, los reactivos o el aparato del laboratorio.

3.9 Rango dinámico lineal (LDR) - El rango de concentración sobre el cual el

la respuesta del instrumento a un analito es lineal.

3.10 Límite de detección del método (MDL) : la concentración mínima de un analito que se puede
identificar, medir e informar con un 99 % de confianza de que la concentración del analito es
mayor que cero.

245.1-3
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3.11 Muestra de control de calidad (QCS) : una solución del analito del método de concentración
conocida que se utiliza para fortalecer una alícuota de LRB o matriz de muestra. El QCS se
obtiene de una fuente externa al laboratorio y diferente de la fuente de los estándares de
calibración. Se utiliza para comprobar el rendimiento del laboratorio o del instrumento.

3.12 Adición estándar : la adición de una cantidad conocida de analito a la muestra para determinar
la respuesta relativa del detector a un analito dentro de la matriz de la muestra. Luego, la
respuesta relativa se usa para evaluar un efecto de matriz operativa o la concentración del
analito de la muestra.

3.13 Solución estándar madre : una solución concentrada que contiene uno o más analitos del
método preparados en el laboratorio utilizando materiales de referencia analizados o adquiridos
de una fuente comercial acreditada.

4.0 INTERFERENCIAS

4.1 Se han informado interferencias para aguas que contienen sulfuro, cloruro, cobre y telurio. Los
compuestos orgánicos que tienen absorbancia UV de banda ancha (alrededor de 253,7 nm)
son interferencias confirmadas. Los niveles de concentración de los interferentes son difíciles
de definir. Esto sugiere que se deben seguir estrictamente los procedimientos de control de
calidad (Sección 9.0).

4.2 Los materiales volátiles (p. ej., cloro) que absorben a 253,7 nm causarán una interferencia
positiva. Para eliminar cualquier material volátil que interfiera, se debe purgar el espacio de
aire muerto en el recipiente de digestión (botella de DBO) antes de agregar la solución de
cloruro estannoso.

4.3 La preparación, la digestión y el análisis de muestras de mercurio de bajo nivel pueden estar sujetos
a contaminación ambiental si se realizan en áreas con antecedentes ambientales altos donde
el mercurio se empleó anteriormente como reactivo analítico en análisis como nitrógeno
Kjeldahl total (TKN) o demanda química de oxígeno (COD). ).

5.0 SEGURIDAD

5.l La toxicidad y carcinogenicidad de cada reactivo utilizado en este método no se ha establecido

por completo. Cada producto químico debe considerarse como un riesgo potencial para la
salud y la exposición a estos compuestos debe minimizarse mediante buenas prácticas de
1
laboratorio. Deben seguirse las prácticas de seguridad de laboratorio normales aceptadas
durante la preparación de los reactivos y el funcionamiento del instrumento. Utilice siempre
gafas de seguridad o careta completa para proteger los ojos cuando trabaje con estos
reactivos. Cada laboratorio es responsable de mantener un plan de seguridad actualizado, un
archivo de conocimiento actualizado de las regulaciones de OSHA con respecto al manejo
seguro de los químicos especificados en este método.3,4

245.1-4
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5.2 Los compuestos de mercurio son altamente tóxicos si se ingieren, inhalan o absorben a través de la piel.
Los análisis deben realizarse en una campana extractora de laboratorio. El analista debe usar
guantes resistentes a productos químicos cuando manipule estándares de mercurio concentrado.

5.3 La acidificación de muestras que contengan materiales reactivos puede resultar en la liberación de gases
tóxicos, como cianuros o sulfuros. La acidificación de las muestras debe realizarse en una campana
extractora.

5.4 Todo el personal que manipule muestras ambientales que se sabe que contienen o que han estado
en contacto con desechos humanos debe estar inmunizado contra agentes causantes de
enfermedades conocidas.

6.0 EQUIPOS Y SUMINISTROS

6.1 Sistema de vapor frío de absorción atómica

6.1.1 Espectrofotómetro de absorción atómica: es adecuada cualquier unidad de absorción atómica

que tenga un área de presentación de muestra abierta en la que montar la celda de
absorción. Deben seguirse los ajustes del instrumento recomendados por el fabricante en
particular. Se recomienda el uso de corrección de fondo, pero no es obligatorio.

6.1.2 Lámpara de cátodo hueco de mercurio - Lámpara de cátodo hueco de elemento único o
lámpara de descarga sin electrodos y fuente de alimentación asociada.

6.1.3 Celda de absorción: se pueden usar celdas de espectrofotómetro estándar de 10 cm de largo

con ventanas de cuarzo. Las celdas adecuadas se pueden construir con tubos de plexiglás,
de 1 pulgada de diámetro exterior por 4 ½ pulgadas de largo. Los extremos se esmerilan
perpendicularmente al eje longitudinal y las ventanas de cuarzo (1 pulgada de diámetro por
1/16 de pulgada de espesor) se cementan en su lugar. Los puertos de entrada y salida de
gas (también de plexiglás pero de ¼ de pulgada de diámetro exterior) se conectan
aproximadamente a ½ pulgada de cada extremo. La celda está atada a un quemador para
soporte y alineada en el haz de luz para dar la máxima transmitancia.

6.1.4 Tubería de aireación: la tubería inerte sin mercurio se utiliza para el paso del vapor de mercurio
desde la botella de muestra hasta la celda de absorción. En algunos sistemas, el vapor de
mercurio se recicla. Se utiliza un tubo de vidrio recto que termina en un aspirador de vidrio
poroso grueso para purgar el mercurio liberado de la muestra de agua en la botella de DBO.

6.1.5 Bomba de aire - Cualquier bomba (sistema de presión o vacío) capaz de pasar aire 1 L/min.
se usa El aire comprimido regulado se puede utilizar en un sistema abierto de un solo paso.

245.1-5
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6.1.6 Tubo de secado - Tubo (6 pulg. x ¾ pulg. DE) que contiene 20 g de perclorato de magnesio. El
tubo lleno se inserta (en línea) entre la botella de DBO y el tubo de absorción. En lugar del
tubo de secado de perclorato de magnesio, se coloca una pequeña lámpara de lectura para
irradiar calor (alrededor de 10 °C por encima del ambiente) en la celda de absorción. El calor
de la lámpara evita la condensación de agua en la celda.

6.1.7 Registrador - Es adecuado cualquier registrador de velocidad variable de múltiples rangos o

sistema de datos que sea compatible con el sistema de detección UV.

Nota: Los instrumentos diseñados específicamente para la medición de mercurio utilizando

la técnica de vapor frío están disponibles comercialmente y pueden sustituirse por el sistema
de vapor frío de absorción atómica descrito anteriormente.

6.2 Caudalímetro, capaz de medir un caudal de aire de 1 L/min.

6.3 Un baño de agua con tapa cubierta y capacidad para mantener una profundidad de agua de 2 a 3 pulgadas.
a 95°C.

6.4 Balanza analítica, con capacidad para medir hasta 0,1 mg, para uso en el pesaje de reactivos y
preparación de estándares.

6.5 Material de laboratorio: todo el material de laboratorio reutilizable debe estar lo suficientemente limpio para los objetivos de la tarea.
Se debe prestar especial atención a todas las superficies de vidrio esmerilado durante la limpieza.
Rutinariamente, todos los artículos deben empaparse en HNO al 303 % y enjuagarse tres veces en
agua reactiva. Los recipientes de digestión utilizados en la preparación de muestras que no se
enjuagan de la muestra anterior deben lavarse con una solución de detergente antes de la limpieza
con ácido.

6.5.1 Material de vidrio - Matraces aforados y probetas graduadas.

6.5.2 Botellas de DBO (u otros recipientes cerrados adecuados equivalentes).

6.5.3 Pipetas calibradas variadas.

7.0 REACTIVOS Y ESTÁNDARES

7.1 Los reactivos pueden contener impurezas elementales que sesgan los resultados analíticos.
Todos los reactivos deben ser analizados por el fabricante de productos químicos para
detectar mercurio y cumplir con las especificaciones de ACS. El nivel de mercurio analizado
de todos los reactivos sólidos utilizados en este método no debe exceder las 0,05 ppm. Se
recomienda que el analista de laboratorio analice todos los reactivos para detectar mercurio.

7.2 Agua Reactiva, ASTM Tipo II .5

7.3 Ácido nítrico (HNO ), concentrado (sp.gr. 1.41), el nivel de mercurio medido no debe exceder 1 µg/L.
3

245.1-6
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7.3.1 Ácido nítrico (1+1) - Agregar 500 mL de HNO concentrado a 400 mL de agua
3 reactiva y diluir a 1 L.

7.4 Ácido sulfúrico (H SO2),4 concentrado (sp.gr. 1,84), el nivel de mercurio medido no debe exceder 1 µg/L.

7.4.1 Ácido sulfúrico, 0,5 N - Agregar lentamente 14,0 mL de conc. H SO a 500 mL

2 4 de agua reactiva y
diluir a 1 L con agua reactiva.

7.5 Estándar de mercurio, stock, 1 mL = 100 µg Hg: NO SECAR. PRECAUCIÓN: muy

elemento tóxico. Disolver 0,1354 g de HgCl en 75 ml 2 de agua reactiva. Agregar 50,0 mL de HNO
concentrado (Sección 7.3)
3 y diluir al volumen en un matraz volumétrico de 1 L con agua reactiva.

7.6 Estándar de calibración de mercurio (CAL) - A cada matraz volumétrico utilizado para
diluciones, acidificar con (0.1-0.2% por volumen) HNO (Sección 7.3).
3 Con el estándar de stock de mercurio
(Sección 7.5), realice diluciones en serie para obtener una concentración de
0,1 µg Hg/mL.

7.7 Solución de permanganato de potasio - Disolver 5 g de KMnO en 100 mL de reactivo

4
agua.

7.8 Solución de persulfato de potasio - Disolver 5 g de KSO en 100 mL de22agua

8 reactiva.

7.9 Solución de cloruro de sodio-cloruro de hidroxilamonio - Disolver 12 g de NaCl y

12 g de clorhidrato de hidroxilamina (NH OHCHCl) en 1002mL de agua reactiva.
(sulfato de hidroxilamina (NH OH) 2 224 CH SO se puede usar en lugar de hidroxilamina
clorhidrato.)

7.10 Solución de cloruro estannoso - Agregar 25 g de SnCl2 2 C2H O a 250 mL de 0,5 NH SO 24

(Sección 7.4.1). Esta mezcla es una suspensión y debe agitarse continuamente.
durante el uso.

7.11 Blancos: se requieren tres tipos de blancos para el análisis. El blanco de calibración
se utiliza para establecer la curva analítica, se utiliza el blanco de reactivo de laboratorio
para evaluar la posible contaminación del procedimiento de preparación de la muestra, y la
El blanco enriquecido de laboratorio se utiliza para evaluar el rendimiento de laboratorio de rutina.

7.11.1 El blanco de calibración debe contener todos los reactivos en las mismas concentraciones
y en el mismo volumen que se usó en la preparación de las soluciones de calibración.

7.11.2 El blanco de reactivo de laboratorio (LRB) se prepara de la misma manera que

El blanco de calibración, excepto el LRB, debe llevarse a cabo durante todo el
esquema de preparación de muestras.

7.11.3 El blanco enriquecido de laboratorio (LFB) se prepara enriqueciendo un tamaño de muestra

volumen de solución de blanco de reactivo de laboratorio con mercurio a un volumen adecuado

245.1-7
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concentración de >10X el MDL, pero menor que la concentración del punto medio de la
curva de calibración. El LFB debe llevarse a cabo durante todo el esquema de
preparación de muestras.

7.12 Solución de comprobación del rendimiento del instrumento (IPC): la solución IPC se utiliza para
verificar periódicamente el rendimiento del instrumento durante el análisis. Debe contener todos
los reactivos en la misma concentración que las soluciones de calibración y mercurio en una
concentración adecuada para aproximarse al punto medio de la curva de calibración.
La solución de IPC debe prepararse con el mismo estándar CAL (Sección 7.6) que se utilizó para
preparar las soluciones de calibración. Los programas de la agencia pueden especificar o solicitar
que se preparen soluciones de verificación de rendimiento de instrumentos adicionales en
concentraciones específicas para satisfacer las necesidades particulares del programa.

7.13 Muestra de control de calidad (QCS): para la verificación inicial y periódica de los estándares de
calibración y el rendimiento del instrumento, se requiere el análisis de un QCS. El QCS debe
obtenerse de una fuente externa diferente de la solución madre estándar, pero debe prepararse
de la misma manera que las soluciones de calibración. La concentración de mercurio en la
solución QCS debe ser tal que la solución resultante proporcione una lectura de absorbancia
cerca del punto medio de la curva de calibración. El QCS debe analizarse trimestralmente o con
mayor frecuencia según sea necesario para satisfacer las necesidades de calidad de los datos.

8.0 OBTENCIÓN, CONSERVACIÓN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS

8.1 Debido a la extrema sensibilidad del procedimiento analítico y la presencia de mercurio en un

entorno de laboratorio, se debe tener cuidado para evitar la contaminación externa. Se debe
determinar que los dispositivos de muestreo, los recipientes de muestras y los artículos de plástico
no contienen mercurio; la muestra no debe exponerse a ninguna condición en el laboratorio que
pueda resultar en contaminación por vapor de mercurio en el aire.

8.2 Para la determinación del mercurio total (inorgánico + orgánico) en muestras acuosas, las
muestras no se filtran, sino que se acidifican con ácido nítrico (1+1) (Sección 7.3.1) a pH <2
(normalmente, 3 mL de (1+1) ) ácido por litro de muestra es suficiente para la mayoría de las
muestras de agua potable y ambiental). La conservación se puede realizar en el momento de la
recolección; sin embargo, para evitar los peligros de los ácidos fuertes en el campo, las
restricciones de transporte y la posible contaminación, se recomienda que las muestras se
devuelvan al laboratorio lo antes posible después de la recolección y se conserven en ácido
después de la recolección. recepción en el laboratorio. Después de la acidificación, la muestra
debe mezclarse, mantenerse durante 16 horas y luego verificar que tenga un pH <2 justo antes
de extraer una alícuota para procesarla. Si por algún motivo, como una alta alcalinidad, se verifica
que el pH de la muestra es >2, se debe agregar más ácido y se debe mantener la muestra
durante 16 horas adicionales hasta que se verifique que el pH es <2. La muestra preservada debe
analizarse dentro de los 28 días posteriores a la recolección.

Nota: Cuando se desconoce la naturaleza de la muestra o se sabe que es peligrosa, la

acidificación debe realizarse en una campana extractora. Consulte la Sección 5.2.

245.1-8
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8.3 Se debe preparar y analizar un campo en blanco según lo requiera el usuario de los datos. Use el
mismo recipiente y ácido que se usó en la recolección de muestras.

9.0 CONTROL DE CALIDAD

9.1 Se requiere que cada laboratorio que utilice este método opere un programa formal de control de
calidad (QC). Los requisitos mínimos de este programa consisten en una demostración inicial
de la capacidad del laboratorio mediante el análisis de blancos de reactivos de laboratorio,
blancos enriquecidos y muestras utilizadas para la verificación continua del rendimiento del método.
Las muestras de control de calidad del agua disponibles en el mercado son aceptables para
uso rutinario en el laboratorio. Se requiere que el laboratorio mantenga registros de desempeño
que definan la calidad de los datos generados.

9.2 Demostración inicial de rendimiento (obligatorio).

9.2.1 La demostración inicial de desempeño se usa para caracterizar el desempeño del

instrumento (determinación de rangos dinámicos lineales y análisis de muestras de
control de calidad) y el desempeño del laboratorio (determinación de los límites de
detección del método) antes de los análisis realizados por este método.

9.2.2 Rango dinámico lineal (LDR) - Se debe establecer el límite superior del LDR. Debe
determinarse a partir de una calibración lineal preparada a partir de un mínimo de tres
estándares de concentración diferentes, uno de los cuales está cerca del límite
superior del rango lineal. La LDR debe determinarse analizando sucesivamente
concentraciones estándar más altas de mercurio hasta que la concentración del analito
observada no sea más del 10 % inferior a la concentración establecida del estándar.
El LDR determinado debe documentarse y archivarse. El LDR que puede utilizarse
para el análisis de muestras debe ser juzgado por el analista a partir de los datos
resultantes. Las concentraciones de analito de muestra determinadas que superen el
90 % del límite LDR superior determinado deben diluirse y volver a analizarse. El LDR
debe verificarse anualmente o siempre que, a juicio del analista, un cambio en el
rendimiento analítico causado por un cambio en el hardware del instrumento o en las
condiciones de funcionamiento requiera que se vuelvan a determinar.

9.2.3 Muestra de control de calidad (QCS): al comenzar el uso de este método, trimestralmente,
después de la preparación de soluciones estándar de calibración o stock o según sea
necesario para satisfacer las necesidades de calidad de los datos, verifique los
estándares de calibración y el rendimiento aceptable del instrumento. con la
preparación y análisis de un QCS (Sección 7.13). Para verificar los estándares de
calibración, la concentración determinada del QCS debe estar dentro del ±10 % del
valor establecido. Si no se puede verificar el estándar de calibración, el desempeño
del paso determinante del método es inaceptable. La fuente del problema debe
identificarse y corregirse antes de continuar con la determinación inicial de los límites
de detección del método o continuar con los análisis en curso.

245.1-9
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9.2.4 Límite de detección del método (MDL): se debe establecer un MDL de mercurio
utilizando una solución de LRB fortificada a una concentración de dos a tres
5
veces el límite de detección estimado. Para determinar los valores de MDL,
tome siete alícuotas repetidas del LRB fortificado y procese a través de todo el
método analítico. Realice todos los cálculos definidos en el método e informe
los valores de concentración en las unidades apropiadas. Calcule el MDL de la
siguiente manera:

dónde:
t = valor t de Student para n-1 grados de libertad al 99% de nivel
de confianza; t = 3.143 para seis grados de libertad
S = desviación estándar de los análisis repetidos

Nota: Si la desviación estándar relativa (RSD) de los análisis de las siete

alícuotas es <10 %, la concentración utilizada para determinar el MDL de
mercurio puede haber sido inapropiadamente alta para la determinación. Si es
así, esto podría resultar en el cálculo de un MDL demasiado bajo.
Al mismo tiempo, la determinación de MDL en una solución LRB representa la
mejor situación posible y no refleja los posibles efectos de matriz de las muestras
del mundo real. Sin embargo, los análisis exitosos de LFM (Sección 9.4) pueden
dar confianza al valor de MDL determinado en la solución LRB.

El MDL debe ser suficiente para detectar mercurio en el nivel requerido de

acuerdo con la regulación de monitoreo de cumplimiento (Sección 1.2). El MDL
de mercurio debe determinarse anualmente, cuando un nuevo operador
comienza a trabajar o siempre que, a juicio del analista, un cambio en el
rendimiento analítico causado por un cambio en el hardware del instrumento o
en las condiciones de operación requiera que se vuelvan a determinar.

9.3 Evaluación del desempeño del laboratorio (obligatorio)

9.3.1 Blanco de reactivo de laboratorio (LRB): el laboratorio debe analizar al menos un

LRB (Sección 7.11.2) con cada lote de 20 o menos muestras de la misma matriz.
Los datos de LRB se utilizan para evaluar la contaminación del entorno del
laboratorio. Los valores de LRB que exceden el MDL indican que se debe
sospechar contaminación del reactivo o del laboratorio. Cuando los valores de
LRB constituyen el 10 % o más del nivel de analito determinado para una
muestra o son 2,2 veces el MDL del analito, lo que sea mayor, se deben preparar
alícuotas frescas de las muestras y analizar nuevamente los analitos afectados
después de que se haya corregido la fuente de contaminación. y se han obtenido
valores LRB aceptables.

245.1-10
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9.3.2 Blanco fortificado de laboratorio (LFB): el laboratorio debe analizar al menos un LFB (Sección 7.11.3)
con cada lote de muestras. Calcule la precisión como porcentaje de recuperación usando la
siguiente ecuación:

dónde:
R = porcentaje de recuperación
LFB = blanco fortificado en laboratorio
LRB = equivalente de concentración de mercurio en
s =
blanco de reactivo de laboratorio agregado para fortalecer
el LRB
solución.

Si la recuperación de mercurio cae fuera de los límites de control requeridos de 85-115%, el

análisis se considera fuera de control y la fuente del problema debe identificarse y resolverse antes
de continuar con los análisis.

9.3.3 El laboratorio debe usar los datos de análisis de LFB para evaluar el desempeño del laboratorio frente
a los límites de control requeridos del 85-115 % (Sección 9.3.2).
Cuando se dispone de suficientes datos internos de rendimiento (por lo general, un mínimo de 20
a 30 análisis), se pueden desarrollar límites de control opcionales a partir del porcentaje medio de
recuperación (x) y la desviación estándar (S) del porcentaje medio de recuperación. Estos datos
se pueden utilizar para establecer los límites de control superior e inferior de la siguiente manera:

LÍMITE DE CONTROL SUPERIOR = x + 3S

LÍMITE DE CONTROL INFERIOR = x - 3S

Los límites de control opcionales deben ser iguales o mejores que los límites de control requeridos
de 85-115%. Después de cada cinco a diez nuevas mediciones de recuperación, se pueden
calcular nuevos límites de control usando solo los 20-30 puntos de datos más recientes. Además,
los datos de desviación estándar (S) deben usarse para establecer una declaración de precisión
continua para el nivel de concentraciones incluido en el LFB. Estos datos deben mantenerse en
archivo y estar disponibles para su revisión.

9.3.4 Solución de verificación del rendimiento del instrumento (IPC): para todas las determinaciones, el
laboratorio debe analizar la solución IPC (Sección 7.12) y un blanco de calibración inmediatamente
después de cada calibración, después de cada 10 muestras (o con más frecuencia, si es necesario)
y al final. de la ejecución de la muestra. El análisis del blanco de calibración siempre debe ser
menor que el MDL. El análisis de la solución de IPC inmediatamente después de la calibración
debe verificar que el instrumento esté dentro del ±5 % de la calibración. Los análisis posteriores
de la solución IPC deben estar dentro del ±10 % de la calibración. Si la calibración no puede ser

245.1-11
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verificado dentro de los límites especificados, se debe suspender el análisis, determinar la causa y/o en
caso de desviación, recalibrar el instrumento.
Todas las muestras posteriores a la última solución aceptable de IPC deben volver a analizarse.
Los datos de análisis del blanco de calibración y la solución IPC deben mantenerse archivados con los
datos de análisis de muestras.

9.4 Evaluación de la recuperación de analitos y la calidad de los datos

9.4.1 La homogeneidad de la muestra y la naturaleza química de la matriz de la muestra pueden afectar la

recuperación de mercurio y la calidad de los datos. En algunos casos, tomar alícuotas separadas de la
muestra para análisis duplicados y enriquecidos puede evaluar el efecto. A menos que el usuario de los
datos, el laboratorio o el programa especifique lo contrario, se requiere el siguiente procedimiento de
matriz fortificada de laboratorio (LFM) (Sección 9.4.2).

9.4.2 El laboratorio debe agregar una cantidad conocida de mercurio a un mínimo del 10 % de las muestras o una
muestra por conjunto de muestras, lo que sea mayor. En cada caso, la alícuota LFM debe ser un
duplicado de la alícuota utilizada para el análisis de la muestra. Seleccione una muestra con un fondo
bajo en mercurio que sea representativa del tipo de muestras de agua que se analizan. Se recomienda
que esta muestra sea analizada antes de la fortificación. La concentración de mercurio agregado puede
variar según la naturaleza de las muestras que se analizan. Cuando sea posible, la concentración debe
ser la misma que se agregó al LRB, pero no debe exceder la concentración del punto medio de la curva
de calibración. Con el tiempo, se deben fortalecer las muestras de todas las fuentes de muestras de
rutina.

9.4.3 Calcule el porcentaje de recuperación, corregido por la concentración de fondo medida en la alícuota de la
muestra no fortificada, y compare estos valores con los límites de control del rango de recuperación de
LFM designado de 70-130%.
El porcentaje de recuperación se puede calcular usando la siguiente ecuación:

dónde:

R = porcentaje de recuperación
C s= concentración de muestra fortificada
C = concentración de fondo de la muestra s =
concentración equivalente de mercurio añadido a la muestra de agua

9.4.4 Si la recuperación de mercurio cae fuera del rango designado, y se demuestra que el desempeño del
laboratorio está bajo control (Sección 9.3), se considera que el problema de recuperación encontrado
con la muestra de agua fortificada está relacionado con la matriz, no con el sistema. El resultado de
mercurio en la muestra no fortificada debe

245.1-12
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etiquetarse para informar al usuario de los datos que los resultados son sospechosos debido
a efectos de matriz.

10.0 CALIBRACIÓN Y ESTANDARIZACIÓN

10.1 Organice y conecte convenientemente los diversos componentes del sistema del instrumento utilizando una
de las opciones que se muestran en la Figura 1. Si es ajustable, el monocromador debe establecerse
en 253,65 nm. Antes del uso de este método, se debe optimizar el flujo de aire. (La tasa de flujo de aire
recomendada a través del sistema es de 1 L/min.) Para todas las determinaciones, deje que el
instrumento y la lámpara de cátodo hueco se calienten durante un período de no menos de 15 minutos.
Cuando se utiliza un instrumento diseñado específicamente para la determinación de mercurio por la
técnica de vapor frío, el analista debe seguir las instrucciones proporcionadas por el fabricante.

10.2 Antes de usar el procedimiento (Sección 11.0) para analizar muestras, debe haber datos disponibles que
documenten la demostración inicial del desempeño. Los datos requeridos y el procedimiento se
describen en la Sección 9.2. Estos datos deben generarse utilizando las mismas condiciones de
funcionamiento del instrumento y la misma rutina de calibración utilizada para el análisis de muestras.
Estos datos documentados deben mantenerse en archivo y estar disponibles para su revisión por parte
del usuario de datos.

10.3 La rutina de calibración recomendada se da en la Sección 11.2.

11.0 PROCEDIMIENTO

11.1 Preparación de muestras

11.1.1 Transfiera 100 mL de la muestra de agua [o una alícuota diluida con agua reactiva (Sección 7.2)
a 100 mL] a un recipiente de muestra.

Nota: Para análisis de volumen reducido, ajuste los volúmenes de muestra y reactivo para
mantener las proporciones requeridas de muestra a reactivo.

11.1.2 Agregue 5 mL de H SO24(Sección 7.4) y 2.5 mL de HNO (Sección 7.3) 3al

envase.

11.1.3 A cada contenedor agregue 15 ml de solución de KMnO

4 (Sección 7.7). Para aguas residuales o
aguas residuales de la industria, se puede requerir KMnO
4 adicional. Agite y agregue porciones
adicionales de solución de KMnO, si es necesario,
4 hasta que el color púrpura persista durante
al menos 15 minutos. Agregue 8 mL de solución de KSO (Sección 7.8) a cada
22 contenedor.
8 Mezcle
bien, tape y cubra la parte superior del recipiente de la muestra (si es necesario) con papel de
aluminio u otra tapa apropiada. Calentar durante dos horas en un baño de agua a 95°C.

11.1.4 Retire los recipientes de muestra del baño de agua y enfríe a temperatura ambiente. (Durante el
período de enfriamiento, continúe con el calentamiento y la calibración del instrumento).

245.1-13
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11.1.5 Cuando las muestras estén a temperatura ambiente, a cada recipiente, agregue 6
mL de solución 2de
22 NaCl-(NH
4 OH) CH SO (Sección 7.9) para reducir el exceso de
permanganato.

11.2 Análisis de muestras

11.2.1 Antes de comenzar la calibración diaria, el instrumento debe reconfigurarse a las

condiciones optimizadas. Encienda el instrumento y la bomba de circulación. Ajuste
la velocidad de la bomba a 1 L/min. o según sea necesario. Permita que el sistema
se estabilice.

11.2.2 Prepare los estándares de calibración transfiriendo alícuotas de 0,5, 1,0, 2,0, 5,0 y
10 mL de 0,1 µg/mL CAL (Sección 7.6) a una serie de recipientes de muestra
(Sección 6.5.2). Diluya las alícuotas estándar a 100 mL con agua reactiva (Sección
7.2) y procese como se describe en las Secciones 11.1.2, 11.1.3 (sin calentar) y
11.1.5. Estas soluciones contienen 0,05-1,0 µg de Hg. (También se pueden usar
otros estándares, volúmenes y rangos de calibración apropiados).

11.2.3 Tratando cada contenedor de solución estándar individualmente, agregue 5 ml de

solución de SnCl2 (Sección 7.10) e inmediatamente conecte el contenedor al
aparato de aireación. La absorbancia, tal como se muestra en el instrumento o en
el dispositivo de registro, aumentará y alcanzará el máximo en 30 segundos. Tan
pronto como se obtenga la respuesta máxima, aproximadamente un minuto, abra el
valor de derivación (u opcionalmente retire el aspirador del recipiente de la muestra
si está ventilado debajo de la campana) y continúe la aireación hasta que la
absorbancia vuelva a su valor mínimo.

11.2.4 Cierre el valor de derivación, retire el aspirador del contenedor de solución estándar
y continúe la aireación. Repita (Sección 11.2.3) hasta que se hayan recopilado los
datos de todos los estándares.

11.2.5 Construya una curva estándar trazando la altura del pico, el área o la respuesta
máxima obtenida de cada solución estándar, versus microgramos de mercurio en el
recipiente. La curva estándar debe cumplir con la Sección 9.2.2. Es aceptable la
calibración usando técnicas de ajuste de curvas de regresión basadas en
computadora o calculadora en datos de concentración/respuesta.

11.2.6 Después de la calibración, las muestras digeridas se analizan de la misma manera

que las soluciones estándar descritas en la Sección 11.2.3. Sin embargo, antes de
agregar la solución de SnCl, coloque el2 aspirador dentro del recipiente sobre el
líquido y purgue el espacio superior (20-30 segundos) para eliminar la posible
interferencia gaseosa.

11.2.7 Durante el análisis de muestras, el laboratorio debe cumplir con el control de calidad
requerido descrito en las Secciones 9.3 y 9.4.

12.0 ANÁLISIS DE DATOS Y CÁLCULOS

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12.1 A partir de la curva de calibración preparada (Sección 11.2.4), calcule los valores de la muestra por
comparando la respuesta con la curva estándar.

12.2 Calcular la concentración de mercurio en la muestra mediante la fórmula:

12.3 Informe las concentraciones de mercurio con las cifras significativas adecuadas en mg/L, µg/L o
ng/L, según se requiera.

13.0 RENDIMIENTO DEL MÉTODO

13.1 En un solo laboratorio (EMSL), utilizando una muestra compuesta del río Ohio con una concentración
de fondo de mercurio de 0,35 µg/L Hg y reforzada con una concentración de 1,0, 3,0 y 4,0 µg/L
Hg, las desviaciones estándar fueron ±0,14, ± 0,10 y ±0,08 µg/L Hg, respectivamente. La
desviación estándar al nivel de 0,35 µg/L Hg fue de ±0,16 µg/L Hg. Los porcentajes de
recuperación en los tres niveles fueron 89%, 87% y 87%, respectivamente.

13.2 En un estudio conjunto entre laboratorios EPA/ASTM de la técnica de vapor frío para mercurio total
en agua, se agregaron incrementos de mercurio orgánico e inorgánico a las aguas naturales.
Las recuperaciones se determinaron por diferencia. Un resumen estadístico de este estudio se
encuentra en la Tabla 1.

14.0 PREVENCIÓN DE LA CONTAMINACIÓN

14.1 La prevención de la contaminación comprende cualquier técnica que reduzca o elimine la cantidad
o toxicidad de los desechos en el punto de generación. Existen numerosas oportunidades para
la prevención de la contaminación en el funcionamiento del laboratorio. La EPA ha establecido
una jerarquía preferida de técnicas de gestión ambiental que coloca a la prevención de la
contaminación como la opción de gestión de primera elección. Siempre que sea factible, el
personal de laboratorio debe utilizar técnicas de prevención de la contaminación para abordar
la generación de desechos. Cuando los desechos no se pueden reducir de manera factible en
la fuente, la Agencia recomienda el reciclaje como la siguiente mejor opción.

14.2 Para obtener información sobre la prevención de la contaminación que puede ser aplicable a
laboratorios e instituciones de investigación, consulte "Menos es mejor: Gestión de productos
químicos de laboratorio para la reducción de desechos, disponible en el Departamento de
Relaciones Gubernamentales y Política Científica de la Sociedad Química Estadounidense",
1155 16th Street NW, Washington CC 20036, (202) 872-4477.

15.0 GESTIÓN DE RESIDUOS

15.1 La Agencia de Protección Ambiental exige que las prácticas de gestión de desechos de laboratorio
se lleven a cabo de conformidad con todas las normas y reglamentaciones aplicables. La
Agencia insta a los laboratorios a proteger el aire, el agua y la tierra minimizando y

245.1-15
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controlando todas las descargas de las operaciones de campanas y bancos, cumpliendo con las
letra y espíritu de cualquier permiso y reglamento de descarga de alcantarillado, y por
cumpliendo con todas las normas de residuos sólidos y peligrosos, en particular la
reglas de identificación de desechos peligrosos y restricciones de disposición en el suelo. para más
información sobre gestión de residuos consultar “Manual de Gestión de Residuos para
Personal de laboratorio”, disponible en la American Chemical Society en el
dirección que figura en la Sección 14.2.

16.0 REFERENCIAS

1. Kopp, JF, Longbottom, MC y Lobring, LB, "Método de 'vapor frío' para

Determinación de Mercurio”; Mermelada. Asociación de Obras Hidráulicas, vol. 64, No. 1, enero de 1972.

2. “Seguridad en laboratorios académicos de química”, American Chemical Society

Publicación, Comité de Seguridad Química, 3.ª edición, 1979.

3. “Estándares de Seguridad y Salud de OSHA, Industria General”, (29CFR 1910),

Administración de Salud y Seguridad Ocupacional, OSHA 2206, revisado
enero de 1976.

4. “Normas de seguridad y salud propuestas por OSHA, laboratorios”,

Administración de Seguridad y Salud, Registro Federal, 24 de julio de 1986.

5. “Especificación para agua reactiva”, D1193, Libro anual de normas ASTM,

vol. 11.01, 1990.

6. Código de Regulaciones Federales 40, Cap. 1, punto 136 Apéndice B.

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17.0 TABLAS, DIAGRAMAS, DIAGRAMAS DE FLUJO Y DATOS DE VALIDACIÓN

TABLA 1. DATOS DE PRECISIÓN Y EXACTITUD INTERLABORATORIOS PARA

ABSORCIÓN ATÓMICA SIN LLAMA

Estándar Significar
Número de valores verdaderos Valor medio Desviación RSD Precisión como
laboratorios
µg/L µg/L µg/L % % Parcialidad

76 0,21 0,349 0,276 89 66

80 0,27 0,414 0,279 67 53
82 0,51 0,674 0,541 80 32
77 0,60 0,709 0,390 55 18
82 3,4 3,41 1,49 44 0.34
79 4,1 3,81 1,12 29 -7.1
79 8,8 8,77 3,69 42 -0.4
78 9,6 9,10 3,57 39 -5.2

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Figura 1. Aparato para la determinación de mercurio sin llama

Debido a la naturaleza tóxica del vapor de mercurio, debe evitarse la inhalación. Por lo tanto, un desvío
se ha incluido en el sistema para ventilar el vapor de mercurio en una campana extractora o pasar
el vapor a través de algunos medios absorbentes, tales como:

a) Volúmenes iguales de KMnO 0,1 N y H SO 4 al 10 % con yodo

24
b) al 0,25 % en una solución de KI al 3 %.

Un carbón especialmente tratado que absorberá el vapor de mercurio también está disponible en Barnebey y
Cheney, PO Box 2526, Columbus, OH 43216, número de catálogo 580-13 o 580-22.

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