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UNA-EQ-LFQAC-43012-EDS-CL-P8-01

Electroforesis iii. Mueva la punta y sienta los lados del


pozo.
Fundamento teórico
iv. Coloque la punta en el centro y expulse
Se prepararán geles de agarosa. Se deberá Inyectar el líquido.
correctamente muestras y estándares en los pozos de un v. Remueve la punta con un movimiento
gel de agarosa, utilizando una fuente de poder se vertical.
separarán los colorantes e indicadores con base en su vi. Lave la punta con agua y etanol. Deje la
movilidad electroforética como análogos de punta en etanol.
biomoléculas. Se determinará la identidad de las 3. Cargue los patrones y las muestras incógnitas
sustancias presentes en la disolución incógnita tomando por duplicado.
en cuenta la dirección que tome la muestra (hacía el 4. Coloque la tapa de la cámara de electroforesis y
ánodo o cátodo), así como el color y cargas presentes en los electrodos.
las moléculas. 5. Con las manos secas y la fuente
apagada/desconectada y usando una sola mano,
Procedimiento de análisis conecte los electrodos a la fuente. ¡Cuidado!
A. Preparación de geles de agarosa 0,8%: 6. Encienda la fuente y asegúrese de que el
1. Mida 2,0 g (±0,05) de agarosa en un papel para indicador muestre corriente.
pesar. 7. Aplique 100 V (40 mA) por 60 minutos.
2. Transfiera a un Erlenmeyer de 250 mL y añada 8. Apague y desconecte la fuente. Espere 10 s.
250 mL de bicarbonato 10 mM. Lave el papel de ¡Cuidado!
pesar con la disolución mientras lo vierte. 9. Remueva la bandeja, anote el color y la
3. Tape el Erlenmeyer con un vidrio reloj. Caliente distancia migrada aproximada para cada
en microondas por 1 minuto y 30 segundos. patrón y muestra.
¡Caliente! Datos experimentales
4. Mezcle cuidadosamente por unos segundos y
caliente otros 20 s. ¡Caliente! Cuadro 1. Medición de la masa de agarosa medida en
5. Enfríe a temperatura ambiente por 10 minutos. una balanza analítica.
6. Coloque protectores en la plataforma de forma
Medición 1
que se eviten derrames del gel.
Masa del suelo
7. Vierta en la plataforma y coloque el peine en (±0,00018 g)
posición media.
8. Deje reposar 15-20 minutos.
9. Mientras espera, inspeccione la fuente de poder
y cámaras de electroforesis.
10. Limpie las cámaras con agua de tubo y agua
destilada. Asegúrese de que no tengan fugas y
colóquelas a una distancia apropiada del borde
de la mesa.
B. Electroforesis:
1. Coloque una fuente de luz debajo de la bandeja
y observe los pozos.
2. Inyecte azul de bromofenol (práctica) dos veces:
i. Mida 10 µL con pipeta mecánica.
Limpie con toalla.
ii. Inserte la punta dentro del pozo sin
perforar el fondo o los lados.
UNA-EQ-LFQAC-43012-EDS-CL-P8-02

Cuadro 2. Datos obtenidos de la distancia migrada de


cada patrón y muestra.

Nombre de Distancia Incógnita


sustancia migrada

Manejo de residuos

Proceso Sustancia Fórmula Clasificación


de reactivo
Agarosa C12H18O9
Electroforesis
Etanol C2H5OH 3

Observaciones
UNA-EQ-LFQAC-43012-EDS-CL-P8-03

Rubro Excelente

Numeración de páginas
(encabezado, centrado, letra, sigue el 2
consecutivo)

Título y fecha
3
(presentes y según orden solicitado)

Fundamento Teórico
(describe la técnica, reacciones y unidades 30
que se reportan)
Procedimiento de análisis
(completo y actualizado según se explica 10
en instrucción)

Datos experimentales
(título, número de cuadro, incertidumbres, 55
encabezados, unidades, columnas y filas)

NOTA FINAL

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