Citoplasma

"Si Ia estructurano nos dice algo sobre)a función,

no la hemos observadoconectamente."
Szent-Gyórgyi

El citoplasmaestálimitado por la mem- Las organelasy las inclusiones ocupan, en

brana celular, o plasmalema, y rodea al
núcleo de la célula. La mavoría de los pro-
c e s o sm e l a b ó l i c o sc e l u l a i e st i e n e n l u g a r
en el citoplasma,pero son dirigidos por el
núcleo celular. La cantidad del citoplas-
ma Dresentanotables variaciones en los
distintostipos de células,pero por lo ge-
neral representavarias veces el volumen
del núcleo.
Como se vio en el capítulo 1, el cito-
plasma contiene distintos elementosfigu-
rados, en parte organelas,por lo general
estructuras limitadas por membranas, y
en parte inclusiones, por ejemplo depósi-
tos de sustanciasnutricias y pigmentos.
coniunto. alrededor de la mitad del volu-
men de una célula típica y se encuentran
en suspensiónen el resto del citoplasma,
denominado citosol (fig. 3-1). La parte
central, más pequeña,del citoplasmasue-
le ser un gel, es decir, de consistenciage-
latinosa rígida. Esta porción, el cuerpo
central o centrosoma,contiene centríolos,
pero, por lo general,carecede otras orga-
nelas.El centrosomase encuentrajunto al
núcleo y a menudo ejerce presión sobre
é1,por lo que le confiere un aspectoarri-
ñonado.
En la oeriferia del centrosomase obser-
va una zbna, el endoplasma, donde el ci-

Gránulos de secreción

Aparato de Golgi
Vacuolasde
condensación

Membrana
lisa(agranular)

Vesículas

Mitocondria
Ergastoplasma
Gránulosde
lamaúiz

Matriz

Crestas

Nucleolema Plasmalema

Membrana
Complejos il'r
oe poros
1il

Fig.3-1. En el centrode
este dibuloesquemático
se observa el aspecto

con microscopio óptico
de una célula con sus
organelas y sus inclu-
siones. Alrededorse
muestranlos aspectos al
microscopio electrónico
de estos componentes
celulares. (SegúnBloom
y Fawcett.)
oo
Cisternaperinuclear
Nucléolo
Filamentos
Componentegranular
Componentes de la matriz
Gotas de lípidos citoplasmática

cAPíruto CITOPLASMA 51
 tosol poseecaracterísticasde so1,es decir, membranas de las distintas organelas pre-
tiene consistenciamás fluida. Contiene la sentan, en esencia, el mismo aspecto ul-
mayor parte de las organelasy las inclu- t r a e s t n ¡ c t u r a l e. n r e a l i d a d s o n m ú y d i s t i n -
siones. En las células vivas, en esta zona tas desde el punto de vista bioquímico, ca-
se detectan corrientes citoplasmóticas. da una con sus propias moléculas especia-
p o r l a sq u e a l g u n a so r g a n e l aci i t o p l a s m á - lizadas y sistemas enzimáticos caracterís-
ticas se desplazandentro de la célula. ticos. La división del citoplasma en orga-
Inmediatamentepor debajodel plasma- nelas limitadas por membrana permiten,
lema el citosol vuelve a adquirir las carac- además, mantener separadas las enzimas
terÍsticas de gel. Esta zona se denomina de sus sustratos, por Io que la célula pue-
ectoplasma. de ejercer control sobre los procesos meta-
En los preparadospara microscopia óp- bólicos y mantener notables diferencias de
tica el citosol parece contener escasases- concentración (gradientes electroquími-
tructuras pero, en realidad, posee un en- cos) en el citoplasma. Como se verá más
tretejidoreticuladoformadopor finos fila- adelante, existe un importante transporte
m e n t o sq u e a c t ú ac o m ou n e s q u e l e t coe l u - de moléculas especÍficás entre las organe-
lar y forma el denominado citoesqueleto, las, lo cual contribuye al funcionamiento
junto con los microtúbulos. Las caracte- coordinado de Ia célula como un todo.
rísticas de gel del ectoplasmase deben a
una importante densidad de filamentos Membrana celular (plasmalema)
en estazona,respectoal endoplasma,más
fluido. En algunos casos, el citoplasma Una delgada membrana, denominada
puede sufrir la modificación de sol a gel plasmalema (gr. lemma, continuación ló-
(y a la inversa), denominada transforma- gica de algo), limita la célula de su entor-
ción sol-gel.De estemodo, el gel ectoplas- no. EI plasmalema es demasiado delgado
mático se degradalocalmenteen las célu- para poder ser detectado mediante el mi-
las móviles (lat. movere), que se despla- croscopio óptico pero, sin embargo, a me-
zan mediante la formación de sacosde en- nudo una línea oscura marca el límite ce-
doplasma,denominadospseudópodos(gr. lular, como consecuencia de que la direc-
pseudes,falso; podes, pies). ción del corte es diagonal respecto al plas-
Ademásdel citoesqueleto, en el citosol malema o porque éste forma pliegues muy
se encuentran disueltasvarias sustancias, cercanos entre sí (fig. 3-2). La presencia de
entre ellas iones inorgánicos, aminoáci- la membrana celular se demostró muy
dos,glucosay macromoléculascomo,por pronto mediante técnicas de micromani-
ejemplo, enzimas, IRNA y mRNA, y mu- pulación, que permiten observar cómo la
chas moléculas precursoras.
-lugar En el citosol ruptura de la membrana causa el flujo del
también tienen gran parte de los citoplasma hacia el exterior. La inmersión
procesosmetabólicosde Ia célula. de la célula en soluciones hipotónicas o
hipertónicas produce un aumento o una
disminución del tamaño celular, respecti-
Organelas citoplasmáticas vamente, como expresión de que está ro-
deada por una membrana con permeabili-
Las organelas más conocidas (mitocon- dad selectiva. Después del desarrollo de la
drias, ergastoplasma, aparato de Golgi) microscopia electrónica se demostró final-
fueron descritas mediante el microscopio mente la presencia de Ia membrana super-
óptico como gránulos (lat. granulum, gra- ficial. Se visualiza como una línea densa
no pequeño), filamentos (lat. Élum, hilo),
f a m i n i l l a s ( l a t . d i m . d e l o m i n o ) ,e t c . , d a d o
que se suponía que eran macizos. En la
mayoría de los casos, después de la incor-
poración de la microscopia electrónica se
demostró que eslas organelas clósicosy las
descubiertas con posterioridad eran es-
tructuras huecas, rodeadas por ddgadas
membranas (fig. 3-1). La organización es-
tructural del citoplasma en cavidades se-
paradas (ing. compartmenfs), compuestas
por organelas limitadas por membranas,
tiene importancia en muchos aspectos. Fig. 3-2. Foton
Los procesos bioquímicos celulares suelen de célulasadye
el ep¡tel¡oplan
tener lugar en las membranas o las super-
cado del esófa
ficies de las membranas v, en consecuen- caso se observ
cia, muchas de las enzimas oue catalizan ridad los límite
las reacciones quÍmicas están localizadas res. Corte colo
allí. Si bien la membrana celular v las Van Gieson.x6

52 CITOPLASMA CAPíTU
Fig.3-3. lmagende una
membrana plasmática,
obtenidacon microscopio
La imagenfue
electrónico.
captadacon muchoau-
mentoy se observacon
claridadque la membrana
celularestá compuesta
por dos capasdensas,se-
paradaspor una capa más
clara.x170.000.(Cedida
por A.B.Maunsbach.)
de alrededorde B nm de espesorque, con
mayor aumento aparece compuesta por
dos capasdensasde unos 2,5 nm de espe-
sor, separadaspor una capa mós clara de
alrededorde 3 nm de ancho (fig. 3-3).Esúo
estructura trilaminar se vaelve a encontrar
en ]as membronosque rodean las organe'
las citoplasmóticas. Sín embargo,como ya
se vio, estasúltimas membranasdifieren
en su composiciónbioquÍmica.
Composición molecular de la membra-
na celular. La teoría generalmenteaceptada
sobrela estructuramolecular de la membra-
na celular es el denominado modelo de mo-
saico fluido. Según este modelo, la mem-
brana celular se compone de una capa bi-
molecular de iípidos, en la cual a determi-
nadosintervalosse incluyen unidadespro-
teicasoue forma¡run mosaicocon la doble
capalipídica (fig. 3-e).La doble capalipÍdi-
ca esrelativamenteimpermeablea la mayo-
rÍa de las moléculashidrosolublesy repre-
sentaIa esüucturabásicade la membrana.
Las moléculasde proteínallevan a cabolas
funciones más especializadasde la mem-
Fig.3-4.Dibujoesquemático delmodelode
mosaicofluido parala estructuramolecular
de la membranaplasmática. (SegúnKrstiÓ.)
CAPITULO
branay se considerandisueltasen la bicapa
lioÍdica. A continuación se analizará este
mbdelo con mayor detalle.
Alrededor de la mitad de los lípidos de
la membrana celular son fosfolípidos (los
más importantes son fosfatidilcolina [le-
-fosfatidiletanolamina,
citinal, fosfatidil-
serina y esfingomielina). Son anfipáticas
con un extremo hidrófilo muy polar (la
"cabeza")y un extremo hidrófobo no po-
lar, compuesto por dos largas cadenasde
ácidosgrasos(la "cola") (véaseademásla
fíg. L-12).Los extremos no polares forman,
en conjunto, el interior hidrófobo de la
membrana, mientras que los extremos
muy polares se orientan hacia la superfi-
cie. La doble capa fosfolipídica es fluida,
tiene características de líquido, y las molé-
culas de lípido de cada monocapa se en-
cuentranen constantemovimiento, donde
se intercambian los lugarescon las molé-
culasvecinas.Laviscosidad de la capade-
pende,en parte,de la composiciónlipÍdi-
ca y, por ejemplo, una de las cadenasde
ácidos grasosde Ia cola de las moléculas
de fosfolípido contiene, por lo general,
uno o más doblesenlaces(es decir, son no
saturados).Esto causaun pequeñocambio
de direcciónde la cola,por Io que las mo-
léculasde lípido presentanun empaqueta-
miento menos densoy la capa es más flui-
da. La otra mitad de las moléculas lipídi-
cas de la membrana estó compuestapor
colesterol,que contribuye a que la doble
capalipídica seamenosfluida. Estose de-
be al rígido sistemacíclico esteroidede las
moléculas de colesterol,que se interpone
entre las mitades externasde las colas de
Ios fosfolíoidos.Las moléculas de coleste-
rot también impiden que la viscosidaddis-
minuya al descenderla temperatura,dado
que no permite el empaquetamientodenso
(la cristalización)de las cadenasde ácidos
- Oligosacáridos
Proteínas
CITOPLASMA 53
 Efecto de algunos venenos sobre la membrana celular
La propiedad que presentan algunos
solventes orgánicos de causar envenena-
mientos agudos o crónicos se debe a que
tienen la capacidad de modificar la vis-
cosidad de las membranas celulares o de
eliminar los lípidos de las membranas.
Los fosfolípidos también pueden ser mo-
grasos, a temperaturas inferiores al punto
de fusión de los ácidos grasos.En conjun-
to, el colesterol v 1as demás moléculas es-
teroides de Ia membrana tienen un efecto
estabilizador sobre la viscosidad.
A menudo las moléculas de fosfolíoido
e s l á n d e n s a m e n t ea g r t r p a d a a
s l r e d e d o rd e
l a s m o l é c u l a sp r o t e i c a sv . e n a l g r r n o sc a -
sos, contribuyen al anclaje de estas írlti-
mas a la membrana celnlar.
C o m o s e v i o a n t e s ,l a s n o l é c u l a s l i p í d i -
cas de la doble capa se pueden desplazar
sobre la sttperlicie en cadct capa, lo cual
se denomina difusión lateral. Durante es-
te desplazamiento las moléculas lipídicas
mantienen siempre la misma orientación,
con las cabezas hidrófilas dirigidas hacia
la superficie de la membrana y las colas
que protruyen hacia el interior. La difu-
sión lateral se produce con gran rapidez,
por lo que cada molécula lipídica se pue-
de mover de un extremo de la célula al
otro en escasossegundos. Por el contrario,
el desplazamiento de las moléculas de
fosfolípidos desde una nitad de Ia bicapa
hacia la of¡n, denominada flip-flop (ing.
flip flop, inversión repentina de la direc-
ción), se produce sólo con intervalos de
horas (o quizás inch-rso de dÍas o sema-
nas), en consecuencia es en extremo limi-
tado el desplazamiento total de las molé-
culas de fosfolípidos desde una mitad de
la membrana hácia la otra Como se verá
más adelante, el movimiento flip-flop de
l o s f o s f o l Í p i d o ss e p u e d e p r o d u c i r ' c o n
gran velocidad en las membranas del retí-
culo endoplasmático liso, cuando se lleva
a cabo la síntesis de nnevo material de
membrana, dado que, en este caso, el des-
plazamiento es catalizado por enzimas
denominadas translocadoras de fosfolíoi-
d o s o f l i p a s a s . L a c a p a c i d a d d e e s t a sÍ ' l i -
pasas de desplazar determinadas molécu-
las de fosfolípidos desde una mitad de la
membrana hacia la otra, en relación con la
síntesis de la membrana celular en el retí-
culo endoplasmático liso, es esencial para
una importante propiedad de la membra-
na celular, stt. composición bioquímica
asimétrica. De esta manera. los fosfolíoi-
d o s d e l a m i t a d e x t e r n ad e l a m e m b r a n as e
componen casi con exclusividad de fosfa-
54 CITOPLASMA
dificados por el veneno de las abeias y
por ciertos venenos de ofidios, dado que
contienen enzimas, las lisolipasas, que
escinden Ia unión de una de Ias cadenas
de ácidos grasos del fosfolípido. En con-
secuencia se degrada la membrana celu-
Iar y la célula muere.
tidilcolina y esfingomielina (es decir, mo-
léculas lipídicas con colina en el extremo
polar), mientras que la mitad interna de la
membrana contiene una proporción mu-
cho mayor de los fosfolípidos fosfatidile-
tanolamina y fosfatidilserina. Estos últi-
mos poseen carga negativa, lo cual produ-
ce una notable diferencia de carsa eléctri-
c a e n t r e l a s d o s c a r a sd e l a , l o b l e c a o a l i -
p í d i c a . L a c o n r n o s i c i ó na s i m é t r i c ad e l a
iloble capa lipÍdica tar¡bién tiene impor-
tancia funcional en otro aspecto, dado que
la fosfaridilserina r o l r o f o s f o l Í p i d or e l a -
c i o n a d o c o n I a n l i i a d i n t e r n ad ó l a m e m -
brana, el fosfatidilinositol, intervienen en
la transmisión de determinadas señales
desde el plasmalema hacia el interior de
la célula.-La composición asimétrica del
plasmalema se refuerza aún más por la
presencia de glucolípidos que, en lugar de
grupos fosfato tienen cortas cadenas hi-
drocarbonadas, r.roligosacáridos, unidos a
los lípidos. Sólo se encuentran glucolípi-
Fig.3-5. Este dibujoesquemáticomuestrauna
membranacelular,separadapor la parte me-
dia de la doble capa l¡pídicamediante la téc-
nica de congelación y fractura.Trasla división,
las partículasde alrededorde 8 nm de tamaño
en el interiorde la membranaoermanecenuni-
das, en su mayorparte,a la cara denominadaP
(protoplasmática), es decir,la superficieque mira
haciael exteriorde la mitadinternade la mem-
brana.En la cara denominadaE (extracelular),
es decir,la superficieque mira haciael interior
de la mitadexternade la membrana,se obser-
van sobretodo oquedades.(SegúnKrstió.)
Partículas Oquedades
deSnm
Lámi
sI^a
( exten
Lámi
¡'n ¡nter
Parte
tac
"¡
CAPíTI
Fig. 3-6. lmágenesde de a Io largo de la mitad de la doble capa
una réplicade un prepa- lipídica, por lo que es posible estudiar la
radoobtenidomedianteIa estructura interna de las membranas me-
técnica de congelación
diante microscopia electrónica. Se obser-
y fractura, captadascon
microscopioelectrónico van entonces partículas de alrededor de
Las imágenesmuestran B nm de diámetro, que posiblemente estén
el aspectode las caras P compuestas por proteína (figs. 3-5 y 3-6).
y E, respectivamente,de Mientras que la composición básica,
una membranacelular bastante uniforme, del plasmalema y del
x37.000.(Cedidapor B. resto de las rnembranas celulares se debe
Van Deurs.) a la presencia de la doble capa lipídica, 1o
cantidad y eI tipo de proteínas es tnuy va'
riable en los clistintos tipos de membrana,
dos en la mitad externa de la bicapa de la lo cual les confiere sus identidades fun'
membrana, donde sns grupos hidrocarbo- cionales especÍales. Se han demostrado
nados protrul,en sobre 1a superficie celu- cientos cle distintas proteínas de membra-
lar. Como se verá más adelante, allí inter- na, que desempeñan determinaclas fun-
vienen liunto con otras molécnlas hidro- ciones de membrana específicas, por
carbonaáas ligadas a las proteínas de la ejemplo, proteínas de transporte, recepto-
membrana celular) en el denominado glu- res, sitios de anclaje para componentes
cocáliz y cumplen irnportantes funciones extracelulares o intracelulares, o cataliza-
en los procesos de señalamiento y de re- dores (enzimas) (más adelante se estudia-
conocimiento entre las células. rán con mayor detalle las funciones de la
Las proteínas de la membrana se en- membrana). Alrededor del 50% del plas-
cuentran incluidas o clistteltas en la doble malema se compone de proteína (el resto
capa lipídica de la nembrana celular, y está formado por lípidos), pero la canti-
protruyen en diverso grado sobre las su- dad de nolécttlos proteir;as es mttcho me-
perficies interna o externa de ia membra- nor que la cantidacl tle moléculas lipídi-
na r;elular, o de ambas (fig. 3-a). Mediante c a s , d e b i d o a l n e n o r t a m a ñ o d e e s t a sú l t i -
la técnica de congelación t' fractnra se hatt r r a s . P o r s r t p a r t e . l a t ; a t t t i d a dd c p r o t e í n a
o b t e n i d o i m p o r t a l i t e se t i t l e n r : i a sr e s l i c c l u p l e s e n t a r r o t a l l l e sr a r i a t : i r r l l t r s¡ l. t e t : i s a -
a la oresencia de proteínas como Llll lllo- m e n t e c l e r b i r l oa q l r e e s t o s c o m p r t e s t o se s -
saico i n c l u i d o d e n t r o d e l a m e m b r a u a . E n tán relar;ionaclast;on las ftturriones esPe-
Fig. 3-7. Dibujoesque-
máticode los distintos ti- los sitios donde la superficie cle ia meur- c i a l e s d e c ; a d ¿nre n b r a n a e n p a r t i c l t l a r .
pos de proteínas de brana transcnrle paralela al plano cle frac- En genelal, las proteíuas de membrana
membrana trlra, gran parte de la nembrana se escin- se c;lasific;an en pt'oteínos integrales de

EXTBACELULAR
ESPACIO

Proteínatransmembrana Proteína Proteínaoeriférica

de paso múltiple transmembranade
pasoúnico

Proteínaperiférica Proleína
ancladaa lípido
CITOSOL

CAPITULO CITOPLASMA 55
 membrana, proteínas de membrana pertfe-
ricas y proteínas unidas a lípidos (fig. e-Z).
Las proteínas integrales de membrana
son moléculas anfipáticas con zonas hidró-
fobas no cargadas,-que se extienden a tra-
vés de Ia totalidad de la doble capa lipídi-
ca, y zonas hidrófilas con carga, localiza-
das en las superficies externa e inte¡na de
la membrana, donde se encuentran en un
medio acuoso. Las proteínas integrales es-
tán ancladas a la membrana a través de los
aminoácidos de Ia porción hidrófoba, que
se ecuentran en estrecho contacto con las
cadenas hidrófobas de los ácidos qrasos de
la bicapa lipÍdica. En consecuenc'ía,se las
considera integrales en el sentido de que
sólo se las puede extraer mediante méto-
dos que disuelven Ia doble capa lipídica de
la membrana (como, por ejemplo, la extrac-
ción con solventes orgánicos). Como se
describió antes, las proteínas integrales de
membrana son f¡onsmem brana v reDresen-
tan la base estructural de la mavor óa¡te de
Ios mecanismos de transporte eipeóÍficos y
de los receptores relacionados con la mem-
brana. Algunas se extienden sólo una vez a
través de la doble capa lipídica y se deno-
minan proteínas transmembrana de paso
único, mientras que Ia cadena polipeptídi-
ca de otras atraviesa varias veces la bicaoa
lipÍdica, en cuyo caso se denominan pro-
teínas transmembrana de paso múltiple.
Las porciones hidrófobas de las moléculas
proteicas que atraviesan Ia doble capa lipí-
dica presentan Ia forma de hélice alfa.
Las proteínas de membrana periféricas
son moléculas hidrófilas cr.ryas cadenas
polipeptídicas se localizan por fuera de la
doble capa lipídica, sobre las superficies
externa o interna de la membrana. Están
unidas mediante enlaces no covalentes a
otras proteínas de membrana o a los gru-
pos de Ias cabezasde los fosfolípidos, por
lo que se pueden extraer mediante la apli-
cación de procedimientos menos agrósi-
vos (p. ej., soluciones de elevada concen-
tración iónica, de pH muy diferente, o la
eliminación de Ca** del medio circundan-
te, por tratamiento con EDTAJ.
Las proteínas unidas a lípidos se pueden
caracterizar como intermedias entre las
proteínas integrales y periféricas. AI igual
que estas últimas se localizan por fuera de
la doble capa lipídica, sobre las superficies
externa o interna de la membrana, pero pre-
sentan enlaces covalentes con las molécu-
las lipídicas de Iabicapa (fig. e-z). Los enla-
ces se producen entre una cadena lateral de
un aminoácido, en el extremo N-terminal
de la proteína, y un grupo de anclaie, que
puede ser una cadena de ácido graso o un
fosfolÍpido. Por ejemplo, algunas proteínas
quedan ancladas sobre Ia superficie externa
de célula a través del denominado anclaie
glucosilfosfaüdilinositol (GPI).
56 CITOPLASMA
Muchas de las moléculas proteicas de la
membrana celular presentañ uniones con
cadenas hidrocarbonadas, tales como oli-
gosacáridos, sobre Ia superficie externa,
para formar glucoproteínas. funto con las
moléculas hidrocarbonadas de los glucolí-
pidos de la membrana, las glucoproteínas
constituyen parte del glucocáliz. También
contribuye otro tipo de hidrato de carbono
de membrana, los proteoglucanos de la
membrana, moléculas compuestas por una
columna vertebral proteica a Ia que se
unen largas cadenas de polisacaridos (los
proteoglucanos se encuentran, casi con ex-
clusividad, en Ia matriz extracelular; se ve-
rán con mayor detalle en el capítulo B, re-
ferido a tejido conectivo). Los proteogluca-
nos de la membrana celular son moléculas
integrdes de membrana, y la columna ver-
tebral proteica se puede extender a través
de la doble capa lipídica o estar adosada a
la superficie externa, mediante anclaje GPI.
Algunas de las proteína de membrana
tienen capacidad para desplazo¡se libre-
mente en la membrana celular por difu-
sión loteral aunque, debido al gran tama-
ño de las moléculas proteicas, la veloci-
dad de desplazamiento es mucho menor
que para los fosfolípidos. Se ha demostra-
do la difusión lateral de las proteínas me-
diante experimentos de fusién celular, en-
tre otros, en los que se marcaron dos tipos
celulares que poseían distintos antígenos
de superficie con anticuerpos adecuados,
a los que se les habían adosado un colo-
rante fluorescente verde y otro rojo, res-
pectivamente. Poco después de la fusión
celular se observó que la superficie estaba
dividida en dos mitades, una fluorescente
roja y otra verde, pero después de 40 mi-
nutos de incubación a37.C se observaron
sectores rojos y verdes diseminados por
toda la superficie celular. La disminución
de ia temperatura a niveles que desecan Ia
doble capa lipídica causó una importante
inhibición del desplazamrenro.
No obstante, muihas proteÍnas de mem-
brana sólo presenlan difusión lateral dentro
de una zona limitada de la membrana celu-
Iar, que p¿rrece estar compuesta por domi-
nios de membrana separados. Así, se pue-
den mantener estos dominios cuando las
células forman barreras proteicas debido a
contactos celula¡es, lo cual ocurre en cier-
tas células epiteliales, como es el caso del
intestino delgado (los contactos celulares se
verán con mayor detalle en el cap. 6). Las
proteínas de Ia porción apical de las células
epiteliales no se pueden desplazar hacia la
parte basolateral del plasmalema, debido a
Ia presencia de las denominadas zonulae
occludentes anulares, que crean estrechas
uniones entre las membranas de células ve-
cinas. Este contacto forma una bien defini-
fa barrera a la difusión entre los dos domi-
CAPíTL
Fig. 3-8. lmagende una
membrana plasmática y
su correspondiente glu-
cocáliz, captada con mi-
croscopioelectrónicocon
Glucocáliz
granaumento.x170.000.
( C e d i d a p o r A BM a u n s -
bach.)
nios. En este caso, las moléculas lipídicas
de la membrana tampoco pueden atravesar
los complejos de contacto, en lo que respec-
ta a la mitad externa de la membrana.
Las proteínas también se pueden unir a
determinados sitios de la membrana, por
anclaje de las proteínas de membrana a
ciertos elementos del citoesqueleto del ci-
toolasma o a estructuras extracelulares.
Glucocáliz. Todas las células eucariotas
poseen una delgada cubierta externa de
material rico en hidratos de carbono, la de-
nominada "cubierta celular" o glucocáliz
(fig. 3-B). Se puede demostrar su existen-
cia mediante el método de PAS o por la
unión con moléculas de lectina marcadas.
Como se describió antes, las moléculas de
hidratos de carbono oue intervienen son
parte de los glucoiípidos de la membrana
y (especialmente) glucoproteínas y proteo-
glucanos, por lo que el glucocáliz es und
parte integrada de la membrana celular,
que desempeña un papel importante en
distintas formas de interacción celular, por
ejemplo, procesos de adhesión celular, cir-
culación de linfocitos y otros procesos de
señalamiento o de reconocimiento, dado
que a menudo el glucocáliz interviene en
la formación de receptores sobre la super-
ficie celular. Un receptor es un sifio de
unión -compuesto por una proteína, una
glucoproteína o un polisacárido- en cual-
quier sitio sobre la superficie o dentro de
una célula, al que se une específicamente
una sustancia, por ejemplo, una hormona,
un neurotransmisor, un metabolito, un
agente farmacológico o un virus, para en-
tonces dar lugar a Ia formación de una ¡es-
puesta específica. La sustancia que se une
a un receptor se suele denominar ligando
(lat. Iigare, ligarl. La especificidad de la
unión entre el receptor y el ligando se de-
be a que estas últimas poseen complemen-
tariedad estereoquímica, por lo que pre-
sentan configuraciones tridimensionales
oue coinciden exactamente en el sitio de
unión, como una "llave con la cerradura".
Por su narte. los hidratos de carbono son
buenos añtígenos e intervienen, por ejem-
plo, en los antígenos de superficie de los
glóbulos rojos de la sangre que determinan
el grupo sanguíneo de un individuo.
cAPíruto
Función del plasmalema. En la sección
anterior se describieron brevemente algu-
nas de las funciones de la membrana celu-
lar, por ejemplo en relación con la media-
ción de señales y en los procesos de adhe-
sión celular, funciones que se analizarán
con mayor detalle en los capítulos 6 y 7.
Aquí, para terminar, se presentarán algu-
nas nociones adicionales referidas al
transoorte de distintas sustancias a través
de Ia membrana celular.
El transporte a través del plasm4lema
es fundamental para que la célula lleve a
cabo el intercambio de sustancias con el
medio circundante. La capacidad de las
m o l é c u l a s d e a t r a v e s a re l ó l a s m a l e m a d e -
pende en parte de la bicapa lipídica, que
en principio funciona como barrera per-
meable (lo que permite la separación de
Ias cavidades con distinta composición
química) y en parte de las protéínas de
membrana, que facilitan el pasaie de mo-
léculasde mayor tamaño.
Para oue una molécula atraviese Ia bica-
pa lipídica tienen importancia el tamaño y
Ia liposolubilidad (es decir, si es hidrófoba
o no polar); a menor tamaño y mayor solu-
bilidad, mayor facilidad de pasaje.Así, pe-
queñas moléculas no polares como, por
ejemplo, oxígeno, nitrógeno y dióxido de
carbono y, posiblemente, lÍpidos sin gru-
pos polares atraviesan con facilidad la
membrana celuiar por difusión simple, es
decir por gradiente de concentración (de
mayor a menor concentración) sin nigún
tipo de asistencia (véase más adelante),
dado oue se disuelven con facilidad en la
doble óapa lipídica. Las moléculas polares
muy pequeñas y sin carga como, por eiem-
plo, agua y etanol también pasan con rapi-
dez por difusión simple; se cree que por su
tamaño se pueden deslizar entre las molé-
culas lipídicas. A medida que aumenta el
peso molecular de estas moléculas polares
no cargadas disminuye Ia velocidad de pa-
saje por difusión simple; por ejemplo, pa-
ra la glucosa, de peso molecular 180 D, es
cercana a 0. Lo mismo vale para todas las
moléculas cargadas (es decir, iones), sin
importar el tamaño (incluso para iones tan
pequeños como Na* y K*, la permeabilidad
es 10s veces menor que para el agua). Estas
moléculas, que atraviesan con gran difi-
cultad la doble capa lipídica, o que no la
atraviesan en absoluto, son transportadas a
través del plasmalema con la asistencia de
proteínas éspeciales de la membrana, de-
nominadas proteínas de transporte de
membrana. Son todas proteínas integrales
de transmembrana del tipo de pasaje múl-
tiple, por lo cual se cree que les permite fa-
cilitar el pasaje de sustancias hidrófilas a
través del plasmalema, sin que éstas en-
tren en contacto directo con el interior hi-
drófobo de Ia doble capa lipídica.
CITOPLASMA 57
 Fibrosis quística

La fibrosis ouística es una enfermedad cos para los iones cloro de las células epi-
hereditaria grave caracterizada por la pro- teliales. También se demostró la localiza-
ducción de una secreción de densidad ción del gen de la fibrosis quísüca en el
anormalmente elevada en varias elándu- brazo largo del cromosoma 7 y se estable-
las exocrinas. entre ellas, el páncreásy las ció la secuencia de nucleótidos. Se cree
glándulas secretoras de mucus de las vÍas que el gen codifica una proteína denomina-
aéreas y ei tubo digestivo. Esto causa dis- da regulador de la conductancia trans-
minución del pasaje u obstrucción de los membrana de la fibrosis quística (RCFQ,
conductos de excreción en las glándulas pero se desconoce aún si este factor es la
afectadas y retención de mucus espeso en proteína que forma el canal para los iones
las vías aéreas, con tendencia a la apari- cloro, o si regula la función de otros cana-
ción de infecciones bacterianas.En conse- Ies para estos iones. De todos modos, ei co-
cuencia, la causa más fiecuente de muer- nocimiento del gen y de la secuencia de
te, en esta patología, son las infecciones aminoácidos dei RTFQ permite abrigar la
recunentes de las vías aéreas, esperanza de la posibilidad de realizar eI
Se ha demostrado que la fibrosis quísti- diagnóstico prenatal y de corregir el defec-
ca se debe a ür defecto de los canales ióni- to mediante tratamiento con terapia génica.

Las proteínas de transporte de mer-nbra- en que esta últinra se 1ler,aa r;abomediante

na se clasifican ell proteínas cle conol r r ^ . - r - ' ^ . .. : ^ r ^ r . . . . , r , t r r l at l e u r o t e Í t t ar l e
l d r l ¡ l ¡ l r l l l . l d ( ¡ r l d l l l r r l r

transportado¡os. Mientras que la difusiót.r r ; a r t a l .p o r l t r q r r c l i r v " l o r - i d r t rdl e c l i f i t s i ó n

s i m p l e a l l a r ' ú sd e l a l r i c a p al i p i r l i c a s ó l o ¡ t a r a l a s u s t a n c i ae r r c r r e s t i ó n s e t c it ¡ t u c h o
p r e s e n l i -r r. i c r t as e l e c l i v i d a r gl r r r e s l f r e n l e rite\/ot'qLreen el coso de la dilusión sintple.
a las sustancias qr.rela atraviesan, las pro- Las proteínas de canal específicas for-
teínas de transporte de membrana son man canales iónicos v en la memlrrana
mlry específicas respocto a las moléculas, cxisten canalcs para importantes iones ce-
cuyo pasaje facilitan. lulares como Nan, Ki, Ca++y Cl . La difu-
Las proteínas de canal fbrman poros o sión a través de los canales iónicos no re-
canales hidrófilos a través de la doble cana ouiere un cambio cle confbrmación de la
l i p í r l i r . aq. r r ep e r m i t e ne l p r s a j ed c d e t e r m i - proteína de r;anal y, en consecuenr;ia,la
nadas sustancias disueltas (por lo general velocidad es notablemente suuerior a la
iones inorgánicos), r;uando los poros están d c l p a s a j e l a r : i l i l a d op o r t r a n i p o r l r t l o r c s
abiertos. El pasaje sicrnpre es pasivo (a Ja- (vóasc más adclante). Por 1o tanto, los ca-
yor del gradiente de concentrar;ión)v se de- nales iónicos no se deben consiclerarr;omo
nomina difusión facilitada. Al igual que en simples oriflcios dc la nrentbrana, dado
el r;asode la diftrsión simple, la fnerza mo- que en parte puerlen rlisr;riminar entre los
tora es ia diferencia de r;onr;entrar:iónr:ntre d i s t i n t o s i o n e s ( s o n s e l e r ; t i v o s )y, e n p a l t e
ambas caras de la nren-rbranat'. cuando la s r r e l e r tp o s e e r p o r ' ! t t l e sl i r r g . g o l c s ) q u e s e
s u s l a n c i a l r a r r s p o r t a r l ipr ( , s e e c a r 3 a . t a n t - r;ierran v se ¿rirrenen resDLresta a estímuios
bién contril¡ur,e la diferencia de potencial a , l e , . u a d o sÉ. s t o s p r r e , l e ns e r v a r i a c i o n e s
eléctrico; en conjunto se crea tn gradiente de los poter-rcialesde membrana, en cuyo
electroqLrítttico.La diferencia entre la difti- caso se denominan canales dirigidos por
sión simple y la difusión facilitada raclica potenciales, o la unión de una molécula

Alosterismo

Muchas proteínas presentan alosteris- manera, la interacción de una molécula

mo, es decir que la unión de una molé- con el sitio aiostérico regula la actividad
cula a un sitio determinado de la proteí- de la enzima, dado que puede actuar co-
na. e/ silio alostérico, causa una vario- mo estimulante o inhibidor de la unión
ción de }a conformación que se transmi- con el sustrato. Este proceso se denomi-
te a otro sitio de )a proteína y modifica na regulación alostérica de la enzima.
)as propiedades de este segundo sitio. A La proteína capaz de presentar alosteris-
menudo, este último es un sitio de unión mo se denomina proteína alostérica y la
con otra molécula y, al producirse el en- modificación de Ia conformación, reac-
lace, la proteína desarrolla su actividad, ción alostérica. Es difícil estimar Ia im-
que puede ser conformar el sitio de fiia- Dortancia de las reacciones alostéricas
ción del sustrato de una enzima. De esta ón los procesos biológicos celulares.

58 CITOPLASMA CAPIT
 ESPACIOEXTRACELULAR

#gf,:*"0

Transportadorde
glucosa

Fig. 3-9. Dibujoesque- señal (un neurotransmisor) a la proteína
máticodel transportador de canal, en cuyo caso se denominan ca'
de glucosa. nales dirigidos por transmisores (véase
con mayor detalle en caps. 7 y M).
Los lransportadores ftrrtciollan de ma-
nera difelente a las proteínas de canal, da-
dcr que fijan ta sústctttcia qtte se debe
lrunsporlor a utt sitio de uniótt específico
o receptor. Este proceso produce variacio-
nes de conformacióu alostéricas en la pro-
teína de transporte, qne favorecen el des-
olazamiento de la suitancia a través de Ia
membrana. La velot;idad de transporte que
s e l o s l ' a n l e d i a n t e e s t e n l e c a n i s m oe s b o s -
tanti ntenor que la del transporte a través
de las proteÍnas de canal que, conto se vio
a n t e s . n o f i j a l a s u s t a n c i a t r a n s p o r l a d aa
través de cambios de conformación. Mr-r-
Fig. 3-10. Dibujoesque- chos transportadores funcionan por d/u-
máticode la bomba de sión facilitada, es decir, tlansporte pasirro
Na*K- "a favor" dei gradiente electroquímico (al
igual que 1o qr-reocurre c;on las proteínas
de canal), pero otras, poseen capacidad
oara bonbectr las sustancias a través de la
membrana contra e\ gradiente electroquí-
mico, proceso denorninadr-rtransporte ac-
tivo. Este tipo de transportadores también
se denomina bombas; el proceso tiene una
dirección deterrniu¿rri¿ry debe estar cerca
de una fuente de enelgía, ya sea ATP (se
verá más sobre ATP t;onto dt-rnante de
energía al estudiar las mitocor.rdrias)cl un
-sradiente iónico.
Un ejemplo de transpctrtador que actúa
oor difusión facilitada es el denominado
iransportador de glucosa (fig. 3-9). Posee
un Írnico sitio de unión para giucosa, ca-
paz de dirigirse alternativamente hacia
una v otra cara de la menbrana, en corres-
uondencia con las clos confr¡rmaciones al-
iemativas cle la proteína de transporte. En
consecLrencia,la modificación de Ia con-

EXTRACELULAR
ESPACIO
6E
@
ATPasaNa*-K.
@

t-
\_+Ej
Fosforilación
seguido Desfosforilación
de cambiode la seguidode cambio
conformación de la conformación
CITOSOL

CAP¡TULO CITOPLASMA 59
 formación de la proteína relacionada con
la unión a Ia molécula de slucosa causa el
d e s p l a z a m i e n t od e I a g l u c ó s a d e u n l a d o a
otro de la membrana.
La denominada bomba Na*-K* (fig. 3-r0)
es un ejemplo que se encuentra en el plas-
malema de casi todas las células animales.
En realidad, en este caso Ia proteína de
transporte es una ATPasa (enzima que es-
cinde Ia molécula de ATP), denominada
ATPasa Na*-K*. La bomba Na*-K* trans-
porta en forma activa el Na* hacia el exte-
rior de la célula y el K* hacia el interior; en
ambos casos, el proceso se lleva a cabo en
contra del gradiente de concentración
electroquímico; la energía es provista por
la escisión de ATP dentro de la célula, ca-
talizado por la bomba (es decir, la ATPasa).
Por cada molécula de ATP que se degrada
salen, por proceso activo, 3 Na* e ingresan
2 K+. Esto ocune porque se fijan 3 Na* a los
sitios de unión de la bomba Na*-K*, que se
encuentran en la cara citoplasmática del
plasmalema, La unión de los 3 Na* causa
la fosforilación de la bomba Na*-K*, con
degradación simultánea del ATP; a conti-
nuación, esta fosforilación produce una
modificación de la conformación. oue
traslada los sitios de unión oara el sodio
hacia la superficie exterior de Ia célula y
hace que pierdan la tendencia a unirse con
el Na*. En cambio, ahora se fiian 2 K* a los
s i t i o s d e u n i ó n , o r i e n t a d o sh a c i a l a s u p e r -
ficie externa de la membrana celular; ósta
unión produce la desfosforilación de la
bomba Na*-K* que causa una modificación
de la conformación de la proteÍna, por lo
que los sitios de unión para el K. (y el Na*)
nuevamente adquieren una dirección ha-
cia Ia superficie citoplasmática del plas-
malema y, al mismo tiempo, pierden su
afinidad por el K*. En consecuencia, el re-
sultado neto es el tralado de 3 Na* hacia el
exterior de la célula y de 2 K- hacia el in-
terior, mientras que la bomba Na*-K* alter-
na entre las dos conformaciones. Como se
verá más adelante, la fosforilación de las
proteínas es un mecanismo frecuente para
causar modificaciones de las conformacio-
nes. Además de la bomba Na*-K*, numero-
sos otros transportadores están compues-
tos por proteínas con características de en-
zimas; muchos autores consideran que to-
das las proteínas transportadoras de mem-
brana de este tipo tienen características de
enzimas.
Algunos transportadores sólo trasladan
una única sustancia de un Iado a otro de
la membrana y se denominan uniporta-
dores. Un ejemplo lo constituye la capta-
ción celular de glucosa desde el líquido
extracelular mediante el transporlador de
glucosa. En olros casos,están acoplados
los transportes de dos sustancias; éstos se
denominan simportadores, si ambas sus-
60 CITOPLASMA
tancias se trasladan en Ia misma direc-
ción, lo que ocurre por ejemplo en la cap-
tación de glucosa del contenido intestinal
por las células epiteliales intestinales,
que se realiza por bombeo activo con sim-
porte de Na*. Por último, los antiportado-
res transportan dos sustancias en direc-
ción opuesta, como es el caso de Ia bom-
ba Na*-K*.
Si bien las moléculas de asua atraviesan
l a d o b l e c a p a l i p í d i c a , a l g u n - o st i p o s c e l u -
lares, por ejemplo, las células tubulares re-
nales, poseen un sistema especializado pa-
ra el transporte de agua. En determinadas
zonas del plasmalema de estas células se
encuentrari "canales de agua" especiales,
que son proteínas transportadoras de
membrana y se denominan acuaporinas.
Por úitimo, cabe destacar que las célu-
l a s t a m b i é n t i e n e n l a c a p a c i d á dd e c a p t a r
material del espacio extracelular por inva-
ginación del plasmalema, con desprendi-
miento de una vesícula que contiene lÍ-
quido y posibles moléculas disueltas o
partículas sólidas. El proceso se denomi-
na endocitosis y se vení con mayor detalle
en el capítulo 4.
Retículo endoplasmático granular
(rugoso)
Muchos tipos celulares contienen en el
citoplasma üna sustancia que adquiere
un intenso color con los colorantes bási-
cos. En algunas células este componente
celular confiere una difusa basofilia al ci-
toplasma (fig. 2-18), mientras que en
otras, se forman zonas basófilas aisladas
$í9. 2-23). Este material basófilo se deno-
mina ergastoplasma (gr. ergon, trabajo) o,
en las células nerviosas, sustancia de
Nissl (por su descubridor). Después de su
descubrimiento, el material basófilo del
citoplasma se identificó posteriormente
con un ócido ribonucleico. dado oue se
demostró que absorbe la luz ultravioleta
de longitud de onda 260 nm y que se eli-
mina mediante el tratamiento con la enzi-
ma ribonucleasa, Io cual no ocurre con la
d esoxirrib onuc I easa.
Con Ia microscopia electrónica se en-
cuentra ergastoplaima o sustancia de
Nissl en los sitios que conesponden a un
sistema de sacos limitados por membrana;
se lo denominó retÍculo endoplasmático
(dim del lait rete, red, es decir, redecilla).
Los sacos forman una red anastomosada
(gr. anastomosis, abertura, unión abierta)
de túbulos o bolsas aplanadas ramifica-
dos, denominados cistérnas. Por lo gene-
ral, las cisternas tienen una disposición
en paralelo (fig. 3-11); no obstante, pue-
den estar aisladas. Parte del retículo endo-
plasmático puede adoptar la forma de ve-
sículas aisladas de menor tamaño.
CAPITULO
F i g . 3 - 1 1 .l m a g e nd e l r e -
tículo endoplasmático
rugoso de una célula
glandularexocrinadel
páncreas,captadacon
microscopio electrónico.
Las cisternasmuy agru-
padas,de disposición
ralela,estándensamente
cubiertasoor ribosomas
en la superficie externa
(citoplasmática), al igual
oue la membranaexterna
del núcleox32.000.(Ce-
dida por J.P Kroustrup)
CAPiTULO
Nucleolema(membranaexterna) Núcleo
pa-
Cisternas Ribosomas
La basofilia característica se debe a la
presencia de gran cantidad de pequeñas
partículas de ribonucleoproteína (RNP),
Fig. 3-12. Dibujoesquemáticode los aspectos
al microscopioelectrónicode a, una célula que
sintetizagran cantidad de proteínaque per-
manece en la célula, por ejemplocélulasem-
brionariasy estadosinmadurosde eritrocitos,
sintetizadoresde hemoglobina(con muchosribo-
somaslibresen el citoplasma)y b, una célula
que s¡ntetizagran cantidad de proteínaexcre-
tada por la célula, por ejemplo,una célulaexo-
crinadel páncreas(con gran cantidadde riboso-
mas unidosa membrana,que dan lugara la for-
maciónde retículoendoplasmático rugoso).
denominadas ribosomas, que se adosan a
Ia superficie externa de las membranas (fig.
3-11); de allí, la designación retículo endo-
plasmático granuloso o rugoso (RER). Los
ribosomas miden alrededor de 25 nm y son
asiento de Ia síntesis celular de proteínas.
Al igual que el plasmalema,-lam s em-
branas del retículo endoplasmático son
de tioo trilaminar. La cavidad del RER se
obseiva como una estrecha hendidura en-
tre las dos membramas, muy cercanas en-
tre sí. Con mayor frecuencia se observa
una cavidad definida que, en las células
con proceso de síntesis activo, suele estar
distendida debido al contenido de mate-
rial electrondenso dentro de las cisternas.
El RER es una continuación de la mem-
brana nuclear externa, dado que la cister-
na perinuclear se puede considerar como
una parte del RIR (véase con mayor deta-
IIe en el cap. 4). En mayor o menor grado,
el RER puede estar relacionado con el re-
tículo óndoplasmático agranular (liso)
(véase más adelante).
Los ribosomas no están todos unidos a
las membranas, también aparecen Iibres en
el citosol. Se encuentran ribosomas libres
en todas las células, excepto los eritrocitos
maduros, pero, por lo general, en cantidad
demasiado escasa como para poder desa-
rrolla¡ basofilia visible. Los ribosomas li-
bres son el asiento de la sintesis de los pro-
teínas que se encuentran en el citosol y el
núcleo celulor, además de deterntinadas
proteínas mitocondriales. Se encuentra
una cantidad muv importante de riboso-
mas libres en las células que sufren fre-
cuentes divisiones; por ejemplo, las células
embrionarias (y cancerosas) y }as céluias
que sintetizan una proteína específica, que
permanece en la célula (fig. 3-12); por
ejemplo, los estadiosiniciales de los eritro-
citos, durante los cuales se sintetiza la he-
moglobina. En consecuencia, estas células
nresentan basofilia intensa con distribu-
óión difusa del colorante.
CITOPLASMA 61
 Los ribosomas ligados a membrana son
el asiento de la sínfesis de proteínas secre-
Ioros. es decir. proteínas que son secreta-
das por la célula, o de proteínas lumina-
1es, que permanecen localizadas en la luz
de Ias organelas citoplasmáticas, por ejem-
plo, el retículo endoplasmático, el aparato
de Golgi, los lisosomas y otras vesículas
citoplasmáticas. Además, los ribosomas li-
gados a membrana son asiento de la sínte-
sis de proteínas integrales de membrana,
que permanecen localizadas en la doble
capa lipídica de la membrana del retículo
endoplasmático, una vez finalizada la sín-
tesis proteica. Así, se sintetiza la mayor
parte de las proteínas integrales de mem-
brana de la célula, Io cual también vale pa-
ra el plasmalema (el "transporte" de ias
membranas se describe más adelante).
Con Ia síntesis de las proteínas dentro
de la luz del R-ERse logra la separación de
estos productos del resto del citoplasma,
debido a Ia presencia de las membranas.
Esto implica que se mantienen aisladas las
enzimas capaces de degradar el citoplas-
ma si se encontra¡an libres en el citosol.
Por lo general, los ribosomas libres y Ii-
gados a membrana se encuentran en cade-
nas denominadas polirribosomas, que
contienen, de unos pocos, hasta más de
30 ribosomas, y forman círculos, espirales
o rosetas. Los oolirribosomas se mantie-
nen unidos poi una hebra delgada de 1-
1,5 nm de diámetro (fig. 3-13), compuesta
por RNA mensaiero (mRNA). Los riboso-
mas están formados por dos subunidades
de distinto tamaño. La subunidad más
grande está en contacto con la membrana
cuando los polirribosomas están ligados a
Ia membrana (fig. 3-1a). La hebra de mR-
NA transcurre paralela a la membrana por
una hendidura ubicada entre ambas uni-
dades (un poco más adentro de la más pe-
queña).
Fig. 3-13. lmagende un polirribosoma(de re-
ticulocitos)captadacon microscopioelectróni-
co. Se distinguecon claridadque los 5 riboso-
mas del polirribosoma estánunidosmed¡ante
un filamentodelgado,compuestopor RNA
mensajero.x280.000 (SegúnSlayter,Warner,
Richy Hall.)
62 CITOPLASMA
Síntesis de proteínas. Los conocimien-
tos sobre los procesos moleculares rela-
cionados con la síntesis proteica provie-
nen de investigaciones realizadas en siste-
mas libres de células obtenidos de homo-
geneizados logrados después de una cen-
trifugación diferencial (véase fracciona-
miento celular en Ia pág. 31). Una de las
fracciones, compuesta por partículas sub-
microscópicas v denominada fracción mi-
crosoma[ es rnuv rica en RNA. Los deno-
minados "microiomas" son trozos peque-
ños de RER, limitados por membrana, qub
se forman durante el proceso de homoge-
neización. Después de la solubilización
de las membranas, y de una posterior cen-
trifugación diferencidl, es posible aislar
los ribosomas y, en la década de 1950, se
demostró que estas suspensiones de ribo-
somas aislados tratados con aminoácidos
con marcas radiactivas tenían la caoaci-
d a d d e s i n t e t i z a r p r o t e í n a s ,s i e m p r e q u e
se agregaran los cofactores necesarios.
Los tres tipos de RNA intervienen en
Ia síntesis proteica, es decir mRNA
(RNA mensajero), IRNA (RNA de trans-
porte) y rRNA (RNA ribosomal). Los tres
son sintetizados en el núcleo celular por
transcripción del DNA y luego expoita-
dos al citoplasma, después de sufrir un
tratamiento ulterior, como se verá con
mayor detalle en el capítulo 4. Después
del pasaje al citoplasma, cada molécula
de mRNA tiene el esquema de produc-
ción para determinado polipéptido, baio
la forma de una secuencia de grupos de
tres bases, cada uno de los cuales se de-
signa codón y codifica un aminoácido
esoecífico. El IRNA interviene en Ia sín-
teiis proteica al buscar los correspon-
dientes aminoácidos en el citoplasma
(existe por lo menos un tRNA paia cada
uno de los 21 aminoácidos que forman
Ias proteÍnas) y transportarlós hasta el
Fig.3-14. Dibujoesquemáticode ribosomas
unidos a membrana La subunidadmayorestá
en contactocon la membranade la cisterna,
mientrasque el filamentode RNA mensajerose
desplazapor una hendiduraentreambassubuni-
dades.La proteínareciénsintetizada(flecha)
atraviesala membranahaciala luz de la cisterna
Citoplasma
Luz de la c¡sterna
CAPITL
Fig. 3-15. Dibujoesque- ribosoma. El rRNA se incluve en el nú-
máticoque muestrael ini- c l e o c e l u l a rb a j o l a f o r m a d s r i b o n u c l e o -
cio de la síntesis protei- proteína (RNP), que compone las dos su-
ca en el c¡toplasmay la bunidades del ribosoma, cada una de
continuaciónde la sín- ellas se exporta al citoplasma por sepa-
tesis en el RER (véaseel
rado. donde Dermanecen aisladas hasta
texto para más detalles).
que se incorpbran al proceso de síntesis
oroteica.
La sínfesis proteica comienza con la de-
nominada fase de iniciación, en la cual

l-- Q,_, una molécula del mRNA que codifica la

proteína a sintetizar se fija por el extremo
anterior (el extremo 5') a la subunidad
menor de un ribosoma (fig. 3-15). Durante
la fijación se ubica el codón de inicio del
nRNA en la denominada posición de ca-
d e n a p e p t i d i c a o s i t i o P ( v é a s em á s a d e -
lante). El c;odón cle inir;io se r;ompone del
grupo de tres bases AUG (también es el
codón correspondlente al aminoácido me-
tionina) y representa una señal de co-
mienzo para la síntesis de la proteína, ubi-
cada cerca del extremo 5' del mRNA. Des-
pués de la fijación del nRNA se adosa
una subunidad ribosomal mayor, con lo
que el ribosoma está en condiciones de
comcnzar la síntesis proteica, es decir, fi-
naliza la fase de iniciación. Si la proteína
en cuesticin debe ser sintetizada por los ri-
bosomas ligados a membrana, cl mRNA
Luz del t i e n e e n s u e x t r e m o 5 ' l t n a s e t ; t t e n c i ad e
Canal Membranade RER
R E B translocador b a s c s ¿ r c l i c ; i o n aql .r r u r ; o d i f i c a l a d e n o m i -
de proteína nacla secuencia señal (conrptrestapor al-
r e c i e c l o cr l e 2 0 a m i n o á r ; i c l o s )L,a s e c u e n c i a
II serial es sintetizada primero y representa
una prolongación N-terminal de la "ver-
t dadera ploteína" a sintetizar. Una vez pro-
ducida la secuenr;ia señal, un complejo
RNA-proteína específico, denominado
partícula de reconocimiento de señal
(SRP) (ing. signal recognition particle) se
fija a la secuencia señal (en la SRP se en-
cuentra una scRNP, véase más sobre pe-
queñas partículas citoplasmáticas de RNP
en el caoítulo 4. en la sección de trans-
cripción de genes) y detiene momentá-
neamente la síntesis Droteica. La SRP
tienegran afinidad con un compeio pro-
teico denominado receptor SRP, una pro-
teína inteqral de membrana ubicada sobre
l a s u p e r f i c i ee x l e r n ac l e l R E R . E l r e c e p t o r
SRP también se denomina "proteína de
anclaje". En cuanto la SRP se fija a la se-
cuencia señal, se adosa también con el re-
ceDtor SRP v une así al ribosoma con la
su-oerficie externa de la membrana del
RER. El SRP se seDarade la secuencia se-
ñal después de li unión con el receptor
SRP y el ribosoma con la secuencia señal
se une a un complejo proteico (poco estu-
Péptidosintetizado diadol. denominado canal translocador
de proteína, que atraviesa la membrana
del RER. Se restablece entonces la síntesis
nroteica. con formación de la verdadera
oroteína a continuación de la secuencia

CAPITULO CITOPLASMA 63
 señal. Durante la formación, la cadena
peptídica atraviesa el canal hacia Ia luz
del retículo endoplasmático y, en cuanto
pasa la totalidad de Ia secuencia señal, és-
ta se separa por acción de una enzima li-
gada a la membrana, una señalpeptidasa.
Cuando finaliza la síntesis de Ia verdade-
ra cadena polipeptídica, ésta se libera a Ia
luz del retículo o permanece unida a la
doble capa lipídicá de la membrana del
RER, si se trata de una proteína integral de
membrana. En este último caso, la cadena
polipeptídica contiene, en algún sitio,
una secuencia de alrededor de 20 aminoá-
cidos hidrófobos, correspondientes a ia
porción transmembrana de la proteína.
que actúa como secuencia de detención
de transferencia; su función es detener la
transferencia de la cadena polipeptídica a
través del canal de proteínas y se cree que
la cadena peptídica abandona el canal por
difusión lateral y penetra en la doble capa
lipídica. La secuencia peptídica hidrófoba
pasa a ser la porción transmembrana per-
manente de la proteína de membrana v el
s i l i o d e a n c l a j e d u r a n t e l a s Í n t e s i sf i n a i d e
la proteína. Una vez finalizada, ya se trate
de una proteína luminal o una proteína de
membrana, se cierra el canal de proteínas
e n l a m e m b r a n a d e l R E R ,q u e s ó l o s e v u e l -
ve a abrir con la fijación de una nueva se-
cuencia señal.
Algunas proteínas no se sinúeúizan en
los ribosomas ligados a membrana, sino
en ribosomas Libres en el citosoL En este
caso, Ia síntesis está determinada por la
ausencia de la secuencia de bases de ini-
cio en el extremo 5', codificador del pép-
tido señal, en Ia molécula de mRNA que
codifica la proteÍna. Entonces el ribosoma
completo permanece en el citosol y pro-
duce allÍ la proteÍna. La proteína ya sinte-
tizada puede permanecer en el citosol o
ser transportada a Ias mitocondrias, Ios
peroxisomas o incluso al núcleo celular.
En consecuencia, el nRNA determina el
tipo de proteína producido por los riboso-
mas y su destino final, Los ribosomas son
idénticos desde el punto de vista funcio-
nal y el mismo riboioma puede intervenir
en algunos casos en la producción de una
proteína con secuencia señal, es decir, es-
tar ligado a la membrana, y en otro mo-
mento actuar como ribosoma libre y sinte-
tizar proteínas para el citosol o el núcleo
celular. Una vez finalizada la síntesis de
una proteína se separan las dos subunida-
des ribosomales, que sólo se vuelven a
unir para sintetizar una nueva proteína.
A menudo se denomina preproteínas a
las proteínas que poseen una secuencia
senal lnlclal.
Hasta este ilomento se han analizado
los procesos de la síntesis proteica según
se producen para un único ribosoma pero,
64 CITOPLASMA
Sitiode unión F i g . 3 - 1 6 .D ¡
de aminoácidos máticode la e
H una molécula
(RNA de tranr
er caso pfese
la transferenc
noácidofenila
oases espect
drouridina) y\
dina)son deri
base uracilo(|
Anticodón
como ya se describió, los ribosomas que
sintetizan proteínas se encuentran bajo Ia
forma de polirribosomas unidos a una he-
bra de mRNA, sin importar si se trata de
ribosomas ligados a membrana o aislados.
Durante la síntesis de la proteÍna el ribo-
soma se desplaza respecto a la hebra de
mRNA, por lo que se Iee un codón tras
otro, como se verá con mayor detalle más
adeiante. Esto se repite hasta finalizar Ia
cadena peptídica, es decir, cada ribosoma
sintetiza una copia de Ia misma cadena
polipeptÍdica, que se prolonga en direc-
ción perpendicular a la hebra de nRNA.
Por lo general, la cantidad de ribosomas
de un polirribosoma es proporcional a la
longitud de la hebra de nRNA, a su vez
proporcional a la longitud de la cadena
polipeptídica formada. Cuanto más larga
es la hebra de mRNA, más lugar habrá pa-
ra mayor cantidad de ribosomas. AsÍ, los
polirribosomas de los estadios iniciales
de los eritrocitos están constituidos por 5
r i b o s o m a s ,d a d o q u e l o s p o l i p é p t i d o s f o r -
mados, que componen la hemoglobina,
contienen alrededor de 150 aminoácidos.
Las células musculares embrionarias oro-
ducen la proteÍna miosina: en este cáso,
intervienen 56 ribosomas en cada nolirri-
bosoma, dado que la cadena polipeptÍdica
contiene más de 1.800 aminoácidos.
A continuación se estudiará con mavor
detalle lo síntesisde uno proteíno deilro
del ribosoma. Después de la fase de inicia-
ción, es decir, Ia unión del ribosoma y la
CAPITU
 fiiación del extremo 5' de la hebra de
nRNA a la subunidad menor en posición
lista para la lectura del codón de inicio
como-introducción al proceso de traduc-
ción, comienza la denominada fase de
prolongación, en la cual se encadenan los
aminoácidos mediante enlaces peptídicos
en la progresión especificada por la se-
cuencia de codones de la hebra de mRNA.
Los aminoácidos necesarios para cons-
truir la proteína se buscan en el citoplas-
ma, meáiante el RNA de transporte (tR-
NA). Como ya se describió, hay por lo me-
nos un IRNA para cada uno de los 21 ami-
noácidos utilizados. Cada molécula de tR-
NA se compone de una cadena de alrede-
dor de B0 nucleótidos, que adoptan la for-
ma de un trébol por apareamiento de las
bases de distintas porciones de la molécu-
Ia (fig. 3-16). Las dos "hoias laterales" del
trébol están formadas por dos asas latera-
les, mientras que en el extremo del "tallo"
se encuentra un sitio de unión para el
aminoácido específico de la molécula de
IRNA en cuestión. La porción final del ta-
llo está formada por el extremo 3' de la
molécula y termina con la secuencia de
bases CCA, en Ia cual el aminoácido se
une a la adenina final. Se logra la especi-
ficidad porque a cada IRNA le correspon-
de una aminoacil-tRNA-sintetasa especí-
fica, que fija el aminoácido correcto a la
molécula de IRNA correspondiente. Se
denomina aminoacil-tRNA al IRNA uni-
do al aminoácido. En la porción corres-
pondiente a la "hoja media" del trébol, es
decir, opuesta al extremo del tallo, se en-
cuentra un grupo de tres bases, denomina-
do anticodón, que es complementario al
grupo de tres bases correspondiente o co-
dón de Ia hebra de mRNA. El primer ami-
noácido transportado como aminoacil-
IRNA hasta el iodón de inicio del riboso-
ma es Ia metionina, dado que el codón de
inicio (AUG) también es el codón de la
metionina. En realidad, existen dos tipos
de IRNA para la metionina, debido a que
uno se especializa como codón de inicio,
y el consécuente comienzo de la síntesis
proteica, mientras que el otro reconoce
codones AUG "internos", es decir, dife-
rentes del codón de inicio. La unión del
extremo 5' del mRNA con Ia subunidad
menor del ribosoma se asegura mediante
la modificación de este extremo del mR-
NA por metilación para formar el denomi-
nado casquete 5'. Después de la fiiación,
la hebra de mRNA se desplaza sobre la su-
perficie del ribosoma hasta la aparición
del primer codón AUG, es decir, el codón
de inicio, y comienza la traducción de la
verdadera secuencia de nucleótidos codi-
ficadora. En realidad, la ubicación en el
ribosoma del aminoacil-tRNA para la me-
tionina ya se produce en la fase de inicia-
cAPíruto
ción, por lo que el primer aminoácido que
es transportado al ribosoma por su IRNA
correspondiente es el segundo aminoáci-
do de la cadena peptídica. El IRNA con la
metionina también se denomina RNA ini-
ciador y se fija al ribosoma en el denomi-
nado sitio peptidilo o sitio P, mientras
que el segundo aminoácido se fija al sitio
aminoacilo o sitio A (fig. 3-17).
Como va se vio. la unión de las molécu-
las de tRÑA se produce por apareamiento
de bases entre eI codón y el anticodón de
la hebra de mRNA y de la molécula de tR-
NA, respectivamente. De este modo, los
dos aminoácidos están enfrentados en el
extremo opuesto de las moléculas de tR-
NA y se forma entonces un enlace peptí-
dico entre ellos, proceso catalizado por
una peptidiltransferasa. Estudios recien-
tes demuestran que la actividad de catali-
zador de esta enzima está asentada en Ia
subunidad mayor del ribosoma, baio Ia
forma de una de las moléculas de rRNA
que la componen; también se utiliza la de-
signación ribozima. Una vez formados los
enlaces peptídicos el IRNA para Ia metio-
nina, es decir, correspondiente al sitio P,
queda separado de Ia metionina y abando-
na el ribosoma. A continuación, el riboso-
ma se desplaza la distancia de un codón
sobre la molécula de mRNA y, al mismo
tiempo, en el IRNA correspondiente al se-
gundo aminoácido pasa del sitio A al sitio
P, ahora desocupado. Entonces un nuevo
IRNA, con el tercer aminoácido adosado
se puede fijar al sitio A vacío, y la síntesis
oroteica continúa con la formación de un
nuevo enlace peptídico entre el segundo
aminoácido y el tercero. El proceso se re-
pite con la consiguiente prolongación de
la cadena peptídica, hasta que al sitio A
Ilega un codón de detención, sobre la he-
bra de mRNA. Son codones que no codifi-
can ningún aminoácido (existen 3 codo-
nes de detención, UAG, UAA y UGA).
Aquí se detiene la síntesis, porque no
existe ninsuna molécula de IRNA con un
anticodón-capaz de aparear sus bases con
el grupo de tres bases de un codón de de-
tención. En el sitio A se fiia un factor de
liberación al codón de detención y causa
la separación de la unión entre la cadena
polipeptídica y la última molécula de tR-
NA, por lo que el polipéptido se libera. De
este modo comienza la fase de termina'
ción, en la cual las dos subunidades ribo-
somales se separan entre sí y de Ia molé-
cula de IRNA y abandonan la hebra de
mRNA; más tarde pueden intervenir en
un nuevo ciclo de síntesis proteica.
Las proteínas sintetizadas en los riboso-
mas ligados a membrana sufren varias
modificaciones en el RER durante su for-
mación y después. Durante eI proceso de
síntesis a la mayoría de las proteínas se
CITOPLASMA 65
 les adosa un oligosaciírido (compuesto
por N-actilglucosamina,manosa y gluco-
sa) a los grupos amino libres del aminoá-
cido asparagina(cuando se encuentra en
una secuencia determinada dentro de la
proteína). EI proceso se denomina gluco-
silación ligada a N y es catalizadapor glu-
cosiltransferasasrelacionadascon la oor-
ción luminal de la membranadel RER.En
consecuencia,la mayoría de las proteínas
sintetizadas en el RER son glucoproteí-
nas. A menudo los péptidos recién forma-
dos también sufren escisiones,con forma-
ción de fragmentosmás pequeñoso la ex-
tirpación de secuenciasde aminoácidos
adicionales de los extremos del péptido.
Además, la proteína s;.Íre plegamientos
hasta adquirir la forma tridimensional fi-
nal o conformación, que está determina-
da, segúnse describióón el capÍtulo1. por
la secuenciade aminoácidos;por otra par-
te, el plegamientocorrecto se ve favoreci-
do por distintasproteínas.Así, una enzi-
ma catalizaIa formación de enlacesdisul-
furo entre moléculas de cisteína ubicadas
en distintos sitios de la cadenapeptídica,
por lo que el plegamientose producecon
mayor rapidez, si bien no afectala confor-
mación final. Además, el plegamiento es
estimulado por los denominados chape-
rones (fr. chaperon, dama de compañía)
que estabilizanlos pasos intermedios del
plegamiento. Los chaperonespertenecen
a las denominadasproteínas de shock tér- Polipéptidorecién
mico o proteínas de estrés, dado que su
síntesis aumenta con el incremento de la
temperaturau otras accionescausantesde
estrés(la mayoría de proteínas de este ti-
po son esencialespara la vitalidad de las
células,incluso en condicionesnormales,
por lo que también se producen sin la in-
fluencia de estrés). Las proteÍnas com-
puestaspor varias subunidadesadquieren
la conformación correctapor unión de las
subunidadesen la luz deiR¡R.
Como ya se vio, sólo los péptidos con
secuenciase-ño1 correspondienteal N-ter- f-
m i n a l s o n " d i r i g i d o s "6 a c i ae l R E Rp a r aI a
síntesisfinal y, en la mayoría de los casos,
son transportadosal aparatode Golgi para
recibir el tratamiento final y ser distribui-
das hacia los destinos determinados (se
verá con mayor detalle al estudiar el apa-
rato de Golgi). Esta dirección objetiva
(ing. targeting) de las proteínas dentro de
Ia célula comienza,entonces,desdela ini-
ciación de la síntesis (presenciao ausen-
cia de la secuenciaseñal)v continúa des-
puésen el RERy el complejode Golgi.Las
proteínas sin secuenciaseñal son sinteti-
zadasen el citosol, dado que el ribosoma
permaneceallÍ duranteia sÍntesis.La ma-
yoría de estasproteínaspermanecenen el Fig. 3-17. Dibujoesquemáticodel transcurso
citosol, por ejemplo, como proteínas di- de la síntesis proteica dentro del ribosoma
sueltas (p.ej., enzimas) o como compo- (véaseel texto para los detalles).

66 CITOPLASMA CAPITU
 nentes estructurales (p. ej., filamentos
pertenecientesal citoesqueleto),pero al-
gunas son dirigidas hacia el núcleo celu-
lar, las mitocondrias o los peroxisomas.
La dirección objetiva se produce para las
proteínas nuclearcs por la presencia de
una corta secuencia de aminoácidos, la
secuenciade localización nuclear (NLS),
que es reconoci4a por las proteínas fija-
doras de NLS. Estas se unen a Ia NLS Y
transfierenentoncesla proteína a un poro
de la membrananuclear (véasecon mayor
d e t a l l ee n e l c a p .4 ) p a r as e r c a p t a d a p
s or
el núcleo.
La mayoría de las proteínasde las mifo-
condrias se sintetizan por los ribosomas
citoplasmáticos (un pequeño porcentaie
se sintetizaen las mitocondrias,como se
verá más adelante) y son dirigidos hacia
las mitocondrias de modo similar a las
nucleares,por tener señalesdirectoraspa-
ra distintas porciones de la organela.Las
proteínas dirigidas a los peroxisomas
(p. ej., la enzima catalasa)tiene como se-
cuenciaseñala un tripéptido C-terminal,
que determina su transporte hacia Ia or-
sanela.
- da oor la asociación v la disociación de
Laregulación de la síntesis proteicalie-
ne lugar en variospasos.Como se vetá en
el capítulo 4, la regulacióncomienzaya
en el núcleo celular,en partepor influen-
cia de moléculasde RNA funcionalesso-
bre la transcripción,en partepor la acción
ral por la síntesisde una proteína funcio-
nal. En algunos casosse aplica el término
sólo al procesode transcripciónpero, en
su sentido más amplio, incluye a Ia trans-
crioción v Ia traducción.
La reiulación de Ia traducción de la
síntesis-proteicaen el citoplasma puede
tener lugar, por ejemplo, cuando proteí-
nas citoplasmáticasespecíficasse fiian a
la molécula de mRNA e impiden así la tra-
ducción. Las variacionesde la vida media
del mRNA también influyen sobrela can-
tidad de proteína sintetizada por traduc-
ción de esemRNA. La vida media de las
moléculas de mRNA varía entre varias ho-
ras y algunosdÍas,y se prolongapor la ac-
ción de la hormona del crecimiento,entre
otros factores.
El proceso de traducción también pue-
de verseafectadopor otrasacciones,ade-
más de la influencia directa sobreIa molé-
cula de mRNA. Así, la fosforilación de las
proteínas necesariaspara ei proceso de
traducción puede estimular o inhibir la
velocidadde reacción.Por ejemplo,en al-
gunos casosla fosforilación de los deno-
minados factores de iniciación (requeri-
CAPITULO
das para que se produzca Ia reacción entre
el mRNA, el IRNA y la subunidad riboso-
mal menor en la iniciación de la síntesis
proteica) conduce a la inhibición de la tra-
ducción por inactivación, en otros casos a
la estimulación del proceso de traducción
por activación. Por último, ciertas investi-
gaciones sugieren la posibilidad de que Ia
composición y la cantidad variables de las
moléculas de IRNA en los distintos tipos
celulares pueden influir sobre la veloci-
dad del proceso de traducción.
Las modificaciones postraduccionales
en Ia estructura y Ia conformación de la
proteína sintetizada contribuyen a regular
la actividad bioiógica de la proteína y, en
consecuencia.determinan si el gen corres-
pondiente se expresará en la célula. Como
se vio antes, a menudo se produce la esci-
sión del péptido sintetizado en cadenas
más pequeñas, o la extirpación de secuen-
cias peptídicas excedentes terminales,
además de distintos plegamientos que
conducen a Ia conformación funcional fi-
nal de Ia proteína. La actividad biológica
de Ias proteínas también puede ser regula-
uniáades polipeptídiias y, por eiemplo,
por el proceso de fosforilación. La mayoría
de estas reacciones son reversibles, por lo
que permiten la regulación de la actividad
biológica de las moléculas proteicas de la
célula mediante distintos mecanismos.
Es obvio que la degradación de una
proteína contribuye en el mismo grado
oue Ia síntesis a determinar Ia cantidad de
lá proteína en cuestión presente en la cé-
lula y, en consecuencia, el grado de expre-
sión del gen correspondiente. La vida me-
dia de las proteínas varía entre unos po-
cos minutos y varias semanas. Las proteí-
nas seleccionadas para ser degradadas son
marcadas por la célula por la fiiación de
una pequeña proteína denominada ubi-
cuitina (IaI. ubiquitarius, ubicua). A con-
tinuación, Ia proteína es dirigida hacia los
proteasomas (grandes complejos protei-
cos que catalizan la degradación de nume-
rosas proteínas marcadas con ubicuitina
oue se verá con mavor detalle más adelan-
ü), donde son degiadadas.
Otro mecanismo de degradación de las
proteína, por lo general menos selectivo,
es Ia capatación por los lisosomas. Las
proteínas son degradadas por las enzimas
lisosómicas a través de un proceso deno-
minado microautofagia, que se verá al es-
tudiar los lisosomas. La degradación pro-
teica iisosómíca puede ser selectiva cuan-
do se relaciona con acciones estresantes
sobre la céluLa, en cuyo caso las proteínas
oue contienen determinadas secuencias
de aminoácidos, Io cual constituye una
marca, son captadas selectivamente y de-
gradadas en los lisosomas.
CITOPLASMA 67
 Retículo endoplasmático agranular (liso) F i g . 3 - 1 8 .l m
tículo endop
El retículo endoplasmático se encuentra liso de un he
tada con mic
en muchas células baio la forma de túbulos
electrónicoF
Iimitados por membranas a las que no se flechase obs
adosan ribosomas, por lo que se denomina siciónentre k
retículo endoplasmático agranular o liso endoplasmá
(R-EL).Es acidófilo y se tiñe con colorantes goso.Ademá
como la eosina, en consecuencia no se dis- teristicala es
tingue del citosol circundante en los prepa- ciónque exrs
rados para microscopia óptica, por lo que rosas partícu
geno.x52.00
recién se detecta después de la incorpora-
por A.B Mau
ción de la microscopia electrónica.
A menudo los retículos endoplasmáti-
cos rugoso y liso se continúan uno con
otro, pero la diferencia no radica sólo en
Ia presencia de ribosomas. Por lo general,
el retículo liso forma un denso reticulado
de túbulos anastomosados (fig. 3-18),
mientras que rara vez se observan cister-
nas. Además, en algunos tipos celulares
aparece casi con exclusividad uno de los
tipos de retículo. En las células glandula-
res secretoras de proteínas, casi ia totali-
dad es retículo rugoso. En cambio, en ias
células secretoras de hormonas esperoi-
des predomina la forma lisa. Las células
hepáticas representan una excepción, da-
do que se encuentran cantidades impor-
tantes de ambos tipos como expresión de El retículo endoplasmático liso tam-
las numerosas y variadas actividades de bién interviene en la síntesis de \ípidos.
e s t a sc é l u l a s ( f i g . 3 - 1 8 ) . Se sintetjzan colesterol y lipoproteínas,
En Ia actualidad se conocen las funcio- en el hígado mientras que en las células
nes del retículo endoplasmático liso en epiteliales absortivas de Ia superficie del
varios tipos celulares,-como se verá con intestino delgado se lleva a cabo la sínte-
mayor detalle en próximos capítulos, da- sis de triacilgliceroles (entre otros com-
do que aquÍ sólo se verán resumidas. En puestos) a partir de los componentes nu-
los hepatocitos a menudo se encuentran tricios absorbidos. En las células endocri-
partículas de glucógeno en estrecha rela- nas (productoras de hormonas) que sinte-
ción con el REL, cuyas membranas contie- tizan hormonas esteroides, por ejemplo,
nen varias enzimas importantes para el en los testículos, los ovarios y la corteza
metabolismo del glucógeno, en especial suprarrenal, el REL está muy desarrolla-
glucosa-6-fosfatasa. Esta enzima cataliza do, dado que interviene en la síntesis de
el último paso de la degradación del glu- hormonas esteroides a partir del coleste-
cógeno para dar glucosa libre, que des- rol. El REL también sinieliza fosfolíoidos
pués es transportada hacia el exterior de para la construcción de las memb'ronos
los hepatocitos, a la sangre. celulares, tanto alrededor de las organe-
EI REL hepático también está relaciona- las como del plasmalema. Las moléculas
do con Ia detoxicación de distintos com- de fosfolípido se sintetizanprimero como
ponentes endógenos (formados dentro del parte de la doble capa lipídica del REL,
organismo) y exógenos (incorporados des- donde se incluyen en la mitad interna
de el exterior), entre ellos algunos pestici-
das y fármacos. Por ejemplo, si se admi-
nistra un barbitúrico a animales de exoe-
r i m e n t a c j ó n , s e o b s e r v au n g r a n a u m e ñ t o
d e l a c a n l i d a d d e R E L e n l o s h e n a t o c i t o sv
l a s m e m b r a n a s d e l r e t í c u l o l i s o ' a i s l a d od ' e F i g . 3 - 1 9 .D i t
estas células muestra un aumento de la máticodel as¡
actividad de las enzimas detoxificadoras aparato de G
(pero no de la actividad p. croscopio óp
de Ia gluco-
"j., de los casos célula glandr
sa-6-fosfatasa). En la mayoría
una célula ne
la detoxificaciónse llevá a cabo por con- de acuerdocc
versión de los grupos hidrófobos a hidró- minaciónpor r
filos, por acoplamiento con grupos muy originalde Go
hidrófilos (-OH y -COOH). Le Gros Clark

68 CITOPLASMA CAPíT
Fig. 3-20. Fotomicrogra-
fía del tejidoconectivola-
xo de la mucosadel intes-
tino delgado.Se observan
variascélulas plasmáti-
cas con la denominada
imagen negativa de Gol-
gi. Corte coloreadocon
hematoxilina-eosina.
x660.
(orientadahacia el citosol)de la bicapali-
pÍdica. Las enzimas que intervienen pre-
sentansu porción catalíticaorientadaha-
cia el citosol, donde se encuentran los
componentesrequeridospara la síntesis.
La mitad interna de la doble capa lipídi-
ca se forma por desplazamientode algu-
nos fosfolípidosdesdeuna mitad hacia la
otra,procesocatalizadopor flipasasespe-
cíficaspara determinadosfosfolÍpidos,Io
oue causa Ia distribución asimétricade
estos últimos en las dos mitades de la
membrana. En consecuencia, se forma
nuevo material de membranapor amplia-
ción de la ya existenteen el REL. Más tar-
de se incorpora el material de membranas
recién formado a las membranasde otras
organelaso al plasmalema,como se verá
en las seccionessiguientes.
En las células del músculo estriadohay
REL, que aquí se denomina retículo sarco-
plasmático (gr. sorx, carne), relacionado
con la liberación y recaptación de iones
Fig. 3-21. Dibuioesque-
máticotridimensional que
muestrala conformac¡ón
ultraestructural del apa-
rato de Golgi en una cé- @
lula secretora. (Según Vesículasde
Ham.)
cAPíruto
calcio por contracción y relajación de las
fibras musculares.En muchos otros tipos
celulares el retículo Iiso también está en
condiciones de crear gradientes de con-
centración para iones calcio, lo cual tiene
gran importancia en los procesosde seña-
lamiento entre las células.
Aparato de Golgi
El aparatode Golgi (denominadoasí en
honor a su descubridor, el investigador
italiano Golgi) se encuentra en todos los
tipos celulares,pero no se tiñe en los cor-
tes histológicos comunes. Tiene capaci-
dad para reducir las sales de los metales,
por ejemplo,las de osmio y de plata,pro-
piedad en la que se basala determinación
según el método original de Golgi, o des-
pués de la fijación durante varios días con
tetróxido de osmio (fig. 3-19).A vecesse
detectala localizacióncelular en los cor-
tes histológicos comunes teñidos, por
ejemplo, como una pequeña zona clara
cercanaal núcleo celular, es decir, Ia de-
nominada imagen negativa del Golgi. Es-
to se observaparticularmenteen las célu-
las en las cualesel aparatode Golgi, no te-
ñido, contrastacon un citoplasmacircun-
dantebasófilo,por ejemplo,en osteoblas-
tos y célulasplasmáticas(fig. 3-20).
A menudo el aparatode Golgi se ubica
cercadel núcleo.En las célulassecretoras
se localizaentreel núcleo celulary el ápi-
ce, desdedonde se libera el producto de
secreciónde la célula(fig. 3-19a).En ot¡os
tipos celularessin actividad secretorapo-
larizada ouede formar una estructurareti-
culada alrededordel núcleo, segúnlo des-
cribió originalmente Golgi en las células
nerviosas(fig. 3-1Sb).
Con la microscopia electrónica se ob-
servannumerosascisternas aplanadas,li-
mitadas por membrana, dispuestascomo
pilas (figs.3-2Ly 3-22).Estaspilas por lo
general contienen 3-10 cisternas, cada
Fig.3-22.lmagendelaparatode Golgien una
captadaconmicros-
de intestino,
célulaepitelial
copioelectrónico.x21.600(CedidaporA.B.
Maunsbac'i¡.)
CITOPLASMA 69
 una de las cuales suele estar un poco dila- Haciala luz
tada en la periferia y adoptar una lorma
curva, por lo que Ia pila en conjunto pre-
senta una superficie convexa orientada
hacia el núcléo celular, denominada su-
perficie cis (lat. cis, de este ladoJ, y una
superficie cóncava hacia el exterior de la
célula, denominada superficie trans (lat.
f¡ans, sobre, a través, del otro lado). En co-
rrespondencia con la superficie cis se en-
cuentra un reticulado de túbulos y cister-
n a s a n a s t o m o s a d o sq , ue forman él deno-
minado reticulado ciJ de Golgi (fig. 3-23),
que se cree está relacionado con la primer
cisIerna verdadera. Esta última, forma
junto con las cisternas inmediatamente
adyacentes, la porción cis de la pila de
Golgi y se continúa en unas pocas cister-
nas, que forman la porción intermedia
(algunos autores la denominan porción
medial). Por último, las cisternas cercanas
a la superficie trans de la pila forman la
porción trans; en realidad se cree que es-
tá relacionadacon un reticulado ánasto-
mosado denominado reticulado trans de
Golgi. Por lo general, la luz de la cisterna
está más dilatada en dirección a la oor-
c i ó n 1 r a n s .E n c o r r e s p o n d e n c i ac o n I a s u -
o e Q Vesículasde transporte

perficie cis se observa gran cantidad de

pequeñas vesículas, denominadas vesÍcu-
las de transporte, que se Iiberan de las zo-
nas libres de ribosomas de las cisternas
del retÍculo endoplasmático rugoso y se
transportan a la porción lisa a través de
las cisternas comunicantes. Las vesículas
de transporte migran con su contenido de
proteínas hacia el reticulado cis de Golgi,
c o n e l c u a l s e f u s i o n a n ;d e e s l a m a n e r a i e
unen los contenidos de las luces, mientras
que la membrana de la vesícula se incor-
pora a las membranas del reticulado cis
de Golgi. Como se vio antes, ésta se conti-
núa con Ia primera cisterna de la porción
cis de Golgi de la pila, a la cual se incor-
pora el contenido vesicular. A Io largo de
l o s b o r d e s l a t e r a l e sd e l a s c i s t e r n a s [ a m -
bién se observan numerosas vesÍculas pe-
quenas que, se supone que son responsa-
bles del transporte del contenido de las
cisternas de una a otra, en sentido cis-
trans. Sobre la superficie trans de Golgi se
detectan vesículas de secreción, algunas
s o n b a s t a n l ep e q u e ñ a sy o l r a s g r a n d J s ,s o -
bre todo en células especializadas en la
secreción y se denominan vacuolas de
condensación. Contienen producto de se-
c r e c i ó n m á s o m e n o s c o n d e n s a d ov r e D r e -
senlan los esladiosprevios de loig.átru-
los de secreción maduros, también de
gran tamaño, que contienen un material
denso y homogéneo (véase con mayor de-
talle más adelante).
Las investi[aciones histoquímicas y los
análisis bioquímicos de ios homogenatos
o b t e n i d o s p o r u l t r a c e n t r i f u g a c i ó nh a n d e -
Fig. 3-23. Dibujoesquemático que muestralos
distintos componentesdel aparatode Golgi
y su función en el ciclo secretor.
mostrado la presencia de varias activida-
des enzimáticas diferentes en las membra-
nas de las cisternas, en distintas subpor-
ciones del complejo de Golgi. como ex-
presión de que allí tienen lugar variados
procesos; esto precisamente constituye el
fundamento de la división en subnorcio-
nes distintas.
A continuación se analizaráan con ma-
yor detalle Ias distintas funciones del apa-
rato de Golgi. Como ya se describió, en el
retículo endoplasmático se realiza la sín-
tesis de proteínas luminaies e integrales y
de lípidos incluidos en el material de
membrana recién formado. Las proteínas
y el material de membrana deben ser
transportados desde el retículo endoplas-
m á t i c o h a c i a l o s d i l e r e n t e sd e s t i n o s c e l u -
lares, y la primer estación de su viaje es el
aparato de Golgi. El transporte se realiza a
través de pequeñas vesículas de transpor-
le que se liberan de la porción lisa dei re-
tículo y se desplazan hasta la porción cis
del complejo de Golgi, donde se fusionan

70 CITOPLASMA CAPITI
 con Ia membrana. En apariencia, estas ve-
sículas de transporte no son selectivas,
dado que parecen transportar al aparato
d e G o l g i c u a l q u i e r p r o t e í n a s i n t e l i z a d ae n
el retículo, siempre que presente el plega-
miento y las uniones correctas [en caso
contrario. la proteína permanece en el re-
tícuio endoplasmático, donde se degrada).
Sin embargo, algunas proteínas contienen
una señal de retención RE, que es recono-
cida por el reticulado cis de Golgi; estas
proteínas se incorporan nuevamente a
una vesícula de transporte, que las de-
vuelve al retículo endopiasmático. Las de-
más proteínas pasan desde el reticulado
cis de Golgi a la porción trans de Ia pila de
G o l g i y l u e g o s o n t r a n s p o r t a d a sd e u n a
cisterna a otra dentro de las pequeñas ve-
sículas relacionadas con las cisternas. Es-
tas vesículas se liberan de una cisterna pa-
ra fusionarse con la inmediatamente su-
perior y, al igual que las vesículas de
transporte, no parecen ser selectivas.
Durante el pasaie a través de las porcio-
nes cis, intermedia y trans, las proteínas
sufren distintas modificaciones quÍmicas,
catalizadas por las enzimas de las mem-
branas de iás cisternas. Las cadenas de
oligosacáridos ligados a N adosados a la
mayoría de las proteínas en el RER por
glucosilación ligada a N, se modifican por
unión v eliminación de distintas molécu-
Ias de ázúcares,por lo que se forman pro-
teínas unidas a diferentes estructuras de
oligosacáridos ligados a N. Además, otras
elucosiltransferasas catalizan Ia denomi-
ñada glucosilación ligada a O, por la cual
se unen oligosacáridos al átomo de oxíge-
no de ios grupos hidroxilo de determina-
dos aminoácidos. Para algunas proteínas,
Ia glucosilación unida a O puede ser muy
amplia; esto es especialmente cierto para
los proteoglucanos, compuestos por una
columna vertebral proteica a la que por
glucosilación ligada a O se le fiian largas
cadenas de glucosaminoglucanos (polí-
meros no ramificados de disacáridos), por
ejemplo, condrointinsulfato y queratan-
sulfato. Los proteoglucanos son importan-
tes comDonentes de la sustancia funda-
mental del teiido conectivo (los proteo-
glucanos se verán con mayor detalle en el
cap. B), pero algunos tipos de estos com-
puestos también forman parte de la cu-
bierta hidrocarbonada externa del plasma-
lema. Estos hidratos de carbono ligados a
membrana se filan en el aparato de Golgi
a ia superficie iuminal de las proteínas in-
tegrales de La membrana de la cisterna (lo
mismo ocurre con la síntesis de glucolípi-
dos en la membrana) y, po. último, son
transportados por las vesículas de secre-
ción hasta el plasmalema donde, tras un
proceso de exócitosis, pasan a la superfi-
cie externa (véase más adelante).
CAPITULO
Las enzimos lisosómicos sufren una
modificación especial de las cadenas de
oligosacáridos ligados a N: en la porción
cis del compleio de Golgi se fosforilan a
manosa-G-fosfato las moléculas del hidra-
to de carbono manosa de la cadena de oli-
gosacáridos ligados a N (es probable que
la enzima fosforilada tenga Ia capacidad
para identificar las proteínas lisosómicas
por su conformación, por lo que sólo ellas
iufren la fosforilación a manosa-6-fosfa-
tol. Como se verá más adelante, la mano-
sa-6-fosfato actúa como molécula señal
oara la selección de las enzimas lisosómi-
ias y el transporte hacia los lisosomas (en
la próxima secci.ónse estudiarán los liso-
somas).
Salvo el caso de los proteoglucanos y
las enzimas lisosómicas se desconoce
porqué casi todas las proteínas luminales
sufren glucosilación con transformación
a glucoproteínas. Pero se sabe que ciertos
oligosacáridos ligados a proteínas inte-
grales de membrana y a lípidos del plas-
malema tienen importantes funciones en
los procesos de sañalamiento y adhesión
celulares (véase con mayor detalle en
c a p s .o y / 1 .
Además de modificar los grupos carbo-
, i aparatode
h i d r a t o l i g a d o s a p r o l . e í n a se
Golgi también se relaciona con la síntesis
de polisacóridos. Una excepción impor-
tanie es el glucosaminoglucano hialuro-
nano, sintetizado en adyacencia al plas-
malema Dor enzimas relacionadas con és-
ta (r,éasecap. B).
Una de las importantes funciones rela-
cionadas con el aparato de Golgi es la se-
lección de las proteínos. Cuando las pro-
teínas llegan al aparato de Golgi tienen
distinto destino dentro de la célula. La se-
Iección se lleva a cabo mediante proteínas
receptoras específicas de Las membranas
d e l c o m p l e j o d e G o l g i q u e r e g i s t r a nd e t e r -
minadas moléculas señal en las proteínas
y entonces las incorporan en el tipo co-
rrecto de vesícula. Como se vio antes, pa-
r a a l g u n a s p r o t e í n a se s t o o c u r r e e n 1 a p o r -
ción cis del Golgi, desde donde estas pro-
teínas son devueltas al retículo endoplas-
mático. El resto de las proteínas se divi-
den en el reticulado trans dei Golgi, don-
de son incorporadas a vesículas. El conte-
nido de estas vesículas puede ser trans-
portado a los lisosomas o secretado por
exocitosis, es decir por fusión de la mem-
brana circundante de la vesícula con la
membrana celular, por io que se vuelca el
contenido al exterior de la célula y, al mis-
mo tiempo, se incorpora el material de
membrana al plasmalema (fig. 3-2a). Co-
mo se vio antes, la señal para la selección
de las proteínas que vuelven al retículo
endoplasmáticoconsiste de una secuen-
cia péptídica señal de retención en el retí-
CITOPLASMA 71
 culo endoplasmático, mientras que para Secreciónregulada
Secreción
las enzimas lisosómicas es manosa-6-fos- constitutiva
fato. Las demás proteínas, que no tienen
"código postal" bajo la forma de molécula
señal, permanecen en la porción trans del
Golgi y son incorporadas a vesículas de
secreción que se desplazan hasta el plas-
malema, al que se fusionan para liberar el
contenido hacia el exterior.
t
Se verá ahora el papel deI aparato de
Golgi en el ciclo secretor. Como se vio en
el capítulo 1, una breve definición de la
secreción podría ser Ia capacidad de la cé-
lula de transformar pequeñas moléculas
absorbidas en un producto específico, que
después es eliminado como secreción. Ya
se vio el ciclo de secreción, desde Ia sín-
tesis inicial en el retículo endoplasmáti-
co, las diversas modificaciones en el aoa- \_t
ral-ode Golgi y la incorporación a las vésÍ-
culas de secreción del reticulado trans de
Golgi, hasta la eliminación final de la se-
creción por exocitosis del contenido de
las vesÍculas. Se ha demostrado que el
transcurso del ciclo secretor puede adop-
tar 2 formas distintas, denominadas secre-
ció n c o n stitufivo (lat. c on stituti o, disposi-
ción, aquí en Ia acepción fundamental) y
secreción regulada, respectivamente.
La secreción constitutiva se observa en co C
casi todas las células v presenta caracte-
rísticas de proceso coniiñuo, en el cual el
t
material sintetizado atraviesa el compleio
de Golgi y se elimina mediante la incorpo-
ración a pequeñas vesículas de secreción
que se fusionan con el plasmalema, vuel-
can entonces el contenido hacia el exte-
rior y se produce la fusión de los materia- Fig.3-24. Dibujoesquemáticode la clasifica-
Ies de membrana (fig. 3-24).El vaciamien- ción de las proteínas en el aparato de Golgi.
to de las vesículas no requiere estímulo
externo. La secreción constitutiva se em-
plea para la secreción no regulada de fac-
tores de crecimiento, enzimas v compo- secreción (designación original debido al
nentes de la sustancia basal exiraceluiar, aspecto al microscopio óptico de este tipo
además de suministrar material de mem- de gránulos, antes de la incorporación del
brana recién sintetizado al plasmalema. ME). Los gránulos de secreción se acumu-
Durante la secreción conslitutiva, las vesí- lan en el citoplasma (fig. 3-25) y sólo se
culas se recubren por la denominada cu- vacían como reacción a una señal esoecí-
bierta coataméricá (compuesta por pro- fica. Durante la separación, desde el reti-
teínas coataméricas), que no tienen fun- culado trans del Golgi, de las vacuolas de
ción selectora para el contenido de las ve- condensación, éstas recubren la superficie
sículas y no se elimina hasta que la vesí- citoplasmática con una cubierta compues-
cula se vacíapor exocitosis. ta por la proteína clatrina. Se cree que la
La secreción regulada sólo se observa clatrina contribuye al proceso de separa-
en células especializadas en la secreción ción y que la cubierta de clatrina se elimi-
de productos específicos, por ejemplo, las na poco después de formada la vesícula.
células exocrinas del páncreas, que secre- Esto se verá en la próxima sección, referi-
tan enzimas digestivas. En estas células se da a los lisosomas, donde Ia separación de
produce una concentración de la secre- las vesículas relacionada con lá lormación
ción en la porción trans del aparato de de una cubierta de clatrina es característi-
Golgi, que continúa en grandes vesículas ca de la formación de vesículas con un
de secreción, las vacuolas de condensa- contenido selectivo (mediado por recepto-
ción antes mencionadas (fig. 3-Za). Éstas res de la membrana de la vesícula). En
se transforman así en vesÍculas de secre- consecuencia, es muy probable que las
ción maduras, denominadas qránulos de moléculas secretadas por secreción regu-

72 CITOPLASMA CAPíTI
 lada contengan una señal de selección
(p. ej., en algunos casos es una corta se-
cuencia peptídica), si bien por el momen-
to no se ha demostrado la presencia de es-
te tipo de señales. Por el contrario, como
se vio antes, se piensa que la secreción
constitutiva no es selectiva.
Muchas enzimas y hormonas secreta-
das por el mecanismo de secreción regula-
da se sintetizan como precursoras inacti-
vas, denominadas proénzimas o prohor-
monas. Estos compuestos después sufren
escisiones, por ejemplo, con eliminación
de partes de la cadena peptídica. En el ca-
so de las enzimas pancreáticas,la escisión
ocurre recién en la luz intestinal, es decir,
después de que la enzima es liberada por
secreción. Por el contrario, se ha demos-
trado oue la insulina es sintetizada como
el estadio previo inactivo proinsulina, y
Gránulosde
Fig. 3-25. lmagende una
célula glandulardel
páncreas, captadacon
microscopioelectrónico.
La porciónapicaldel cito-
plasmaestá ocupadopor
gran cantidadde gránu-
los de secreción.
x11.500 (Cedidapor J P.
Kroustrup.)
CAPITULO
sufre escisiones en los gránulos de secre-
ción inmaduros, mientras que los gránu-
los maduros contienen la molécula de in-
sulina orocesada.
Mediante la microscopia electrónica y
los métodos de fraccionamiento celular y
radioautografía se pudo observar el papel
de las distintas organelas celulares en el
ciclo secretor y se investigó especialmen-
te la secreción regulada de la célula exo-
crina del páncreas. La secuencia de los
procesos y las relaciones temporales se
demostraron mediante la técnica de ra-
dioautografía. Después de la inyección
por vía intravenosa de un aminoácido tri-
tiado, por eiemplo, leucina, en un grupo
de animales y el sacrificio a distintos in-
tervalos de tiempo, las imágenes electro-
microscópicas radioautográficas del pán-
creas muestran la localización de la leuci-
CITOPLASMA 73
 na marcada incorporada. Calculados a Endocitosis Exocitosis Fig. 3-26. Di
partir del momento de la inyección, se ha- máticoque ilu
pel del apara
llaron gránulos de plata sobre el retículo
en la renova
endoplasmático rugoso a los 5 minutos plasmalema
(como expresión de que el aminoácido ya
era incorporado en la proteína recién sin-
tetizada), a los 15 minutos, sobre el apara-
to de Colgi, y a los 45 minutos. sobre los
gránulos se secreción en el ápice de la cé-
Iula.
No se tiene certeza de la forma en oue
el aparato de Golgi distingue entre las pio-
teínas que deben ser incorporadas en las
vesículas para las secreciones constitutiva
y regulada, respectivamente. Hasta el mo-
mento ha sido imposible demostrar algu-
na forma de molécula señal acoplada a al-
guna proleÍna secrelora. cal, mientras que la liberación continua
Como se vio antes, la liberación final de de las vesículas de secreción constitutiva
la secreción se lleva a cabo mediante exo- hacia el espacio extracelular, por ejemplo,
citosis, proceso por el cual se produce una los cclmponentes integrantes cle la lámina
fusión de la membrana que rodea la vesí- basal, se produr;e en la superficie basola-
cula de secreción y la membrana cellrlar, teral celular. Se r;rereque el transporte cle
y el contenido se vuelca al espacio extra- las vesículas es favorecido por los nric;rr-¡-
celular (fig. 3-26). En la secreción consti- túbulos del citoesqueleto (r'(rasem¿isacle-
tutiva, la exocitosis es espontánea pero, l a n t e e n c i t o e s q u e l e t o )E
. s posible que es-
c o m o y a s e v i o , e n l a s e c i e c i ó n r e g u l a d a ta estructura contribuva así a dirigir las
es causada por una señal externa. Esta vesículas hacia el cloniinio correcto de la
suele ser un mensajero químico, bajo la membrana.
forma de una hormona o un neuroüans- Relacionado con el proc;eso de exocito-
misor, que se fija a un receptor del plas- sis se produce un flujo de material de
malema. Entonces, se produce un aumen- membrana adicional hacia el plasmalema,
to transitorio de Ia concentración de los cuya superficie aumenta. Al mismcl tiemp<t
iones calcio libres en el citosol. por libera- hay un constante flujo retrógrado de nate-
ción en el retículo endoplasmáiico liso o rial de metnbrano bajo la forma de vesícu-
p o r c a p t a c i ó n d e s d e e l e s p a c i o e x t r a c e i u - las que se invaginan y se liberan del plas-
lar, a través de los canales del calcio. En el malema; de este modo vuelven al aparato
citoplasma los iones caicio se unen a un de Golgi, con el que se fusionan (fig. 3-26),
tipo de proteínas fijadoras específicas,las Por último, se verá cómo distintas vesí-
anexinas, que favorecen la fusión de las culas ligadas a la membrana buscon y se
vesículas ligadas a la membrana con el fusionan con la ntenbrana objetivo co-
plasmalema.
- rrecta. Se cree que esto ocurre del siguien-
Además de los iones calcio, la exocito- te modo: la fr-rsiónde las membranas en la
sis requiere Ia presencia de los nucleóti- célula sólo es posible si, al mismo tiempo,
dos ATP y GTP. En apariencia, el papel de aparece en el citoplasma una proteína so-
estos últimos se relaciona con Ia Dresen- luble denominada proteína de fusión sen-
c i a d e u n g r u p o d e p r o t e í n a s f i j a d o r a s d e sible a N-etilmaleimida (NSF), Iigada a
GTP, designadas proteínas Rab, que son distintos tipos de proteínas de fijación de
GTPasas y controlan Ia fijación correcta NSF (SNAP) (ing. soluble NSF affocñmenú
de la vesícula a la membrana, a través de proteins). Por su parte, la especificidad
la hidrólisis del GTP. Se demostró oue
e x i s t e n m u c h o s t i p o s d e p r o l e í n a sR a b , r e -
Iacionadas con las membranas de las dis-
tintas vesículas del cilco secretor y el sis-
t e m a d e e n d o c i t o s i s .p o r l o q u e l a J p r o t e í -
nas Rab intervienen en orros Drocesos
f u n c i o n a l e s d e l a s v e s Í c u l a s ,a d e m á s d e l a
exocitosis. Fig. 3-27. Dib
Las vesículas de secreción liberadas del máticoque mL
reticulado trans de Golsi se caracterizan mo las distin
las unidas a r
por volcor su secreción por exocilosis en
se acercan a
una superfici.e celular determinada. En pondienteme
una célula glandular exocrina típica [véa- objetivo y se
se con mayor detalle en el cap. 7) la secre- con ella (véas
ción regulada ocurre en Ia superficie api- para los detall

74 CITOPLASMA CAPITL
 I
a ,l.
{r
)r.

Fig. 3-28. lmágenesde lisosomasde célulastubularesrenales,captadascon microscopioelectró-

nico.Amboslisosomasestánrodeadospor una membranatrilaminarsimple.a es un lisosoma pri-
x58.000.(Cedidapor A.B.Maunsbach.)
mario, con interiorhomogéneoy electrondenso. b es un li-
sosoma secundarioque contiene,entreotroselementos,restosdiferenciablesde una mitocondria;
es decir,es un autofagosoma.x40.000.(Cedidapor Maunsbach)

del proceso de fusión no se debe al com-
pleló NSF-sNAR sino a los receptores de
SNAP o SNARE, que se adosan a las
SNAP durante la filsión de ias dos mem-
branas (fig. 3-27). Se cree que todas las ve-
sículas celulares contienen un v-SNARE
(receptor SNAP vesicular), que coincide
específicamente con el correspondiente
t-SNARE (receptor SNAP del objetivo).
Este último sólo se encuentra en la mem-
brana objetivo correcta (ing. fargef, obieti-
vo, blanco). Es posible que la vesícula en-
cuentre la membrana correcta, que contie-
ne el t-SNARE adecuado, mediante el mé-
todo de "prueba y error", por el cual la ve-
sicula intenta unirse a varias membranas
celulares hasta que encuentra el receptor
correcto.
guen como vesículas más o menos redon-
deadas limitadas por una membrana trila-
minar (fig. 3-28). El tamaño promedio es
de 0,5 pm, pero el tamaño y, especialmen-
te, el aspecto son muy variables. Algunos
presentan forma iisa redondeada y un as-
pecto denso y homogéneo, otras son más
irregulares y el contenido es diverso, lo
membrana que \os rodea es el único com-
ponente estiuctural común para todos los
lisosomas. En consecuencia, la identifica-
ción de los lisosomas sólo sobre la base
del aspecto es bastante insegura. En cam-
bio, se utilizan determinaciones histoquí-
micas o inmunohistoquímicas de alguna
de las hidrolasas ácidas, en especial la fos-

Lisosomas y endocitosis Fig. 3-29. lmagende célulastubularesrenales,

captadacon microscopioelectrónico,en las que
Los lisosomas representan la porfe se ha realizadola determinación histoquímica
esencial de un sistema digestivo intrace- de la enzima fosfatasa ácida El precipitado
1ular, muy relacionado en estructura y oscuro,que representala localizaciónde la en-
función con el sistema de endocitosis de zima, se encuentrasólo en los dos lisosomas
de la imagen.x36 000.(SegúnMaunsbach )
la célula. En conjunto forman un comple-
jo de vesícu.las y túbulos limitados por
membrana. oue constantemente intercam-
bian materiales entre sí y con el aparato
de Golgi y el espacio extracelular. Se estu-
diarán orimero los lisosomas.
Los lisosomas son o.rgonelas limitadas
por membrana que contienen hidrolasas
ócidas (gr. /ysis, ruptura; somo, cuerpo),
es decir, enzimas hidrolíticas activas a pH
ácido. Los lisosomas se encuentran en ca-
si todas las células animales, pero la can-
tidad varía con la función del tipo celular.
Con el microscopio electrónicose distin-

CAPITULO CITOPLASMA 75
 rk
ib,e* tn,

l
a

Fig. 3-28. lmágenesde lisosomasde célulastubularesrenales,captadascon microsc

nico.Amboslisosomasestánrodeadospor una membranatrilaminarsimple.a es un lisc
mario, con interiorhomogéneoy electrondenso x58.000.(Cedidapor A.B' Maunsbach)
de una r
sosoma secundario que contiene,entre otros elementos,restosdiferenciables
es decir,es un autofagosoma.x40.000.(Cedidapor Maunsbach.)

del orocesode fusión no se debe al com- guen como vesículas más o meI
ple¡ó NSr'-SNAP,sino a los receptoresde deadas limitadas por una memt
SNAP o SNARE, que se adosan a las minar (fig. 3-28),El lamaño pr
SNAP durante la fr.rsiónde las dos mem- de 0,5 ¡rm. pero e1tamaño y, es¡
branas(fig. 3-22).Se creeque todaslas ve- te, el aspecto son muy variablet
sículas celularescontienenun v-SNARE oresentan forma lisa redondead
( r e c e p t o rS N A P v e s i c u l a r )q, u e c o i n c i d e pecto denso y homogéneo, otra
específicamentecon el correspondiente irregulares y el contenido es d
I-SNARE (receptor SNAP del objetivo). membrana que los rodea es el t
Esteúltimo sólo se encuentraen Ia mem- ponente estiuctural común part
brana objetivo correcta(ing. forgef,obieti- lisosomas. En consecuencia, la
vo, blanco).Es posibleque la vesículaen- ción de los lisosomas sólo soh
cuentre la membranacorrecta,que contie- del aspecto es bastante inseguri
ne el I-SNARE adecuado,mediante el mé- bio, se utilizan determinacione
todo de "pruebay error",por el cual la ve- micas o inmunohistoquímicas
sícula intenta unirse a varias membranas de las hidrolasas ácidai, en esp(
celulares hasta que encuentra el receptor
correcto.

Lisosomasy endocitosis Fig. 3-29. lmagende célulastubula

captadacon microscopioelectrónic
L o s l i s o s o m a sr e p r e s e n t a n1 a p o r l e se ha realizadola determinación hi
esencial de un sistema digestivo intrace- de la enz¡mafosfatasa ácida. El pn
/ular, muy relacionado en estructura y oscuro,que representala localizaci
zima,se encuenirasóloen los dos I
función con el sistemade endocitosisde
de la imagen.x36.000.(SegúnMau
ia célula. En coniunto forman un comple-
jo de vesícuias y túbulos limitados por
membrana,que constantementeintercam-
bian materiales entre sí y con el aparato
de Golgi y el espacioextracelular.Se estu-
diarán primero los lisosomas.
Los lisosomas son organelaslimitadas
por membrana que contienen hidrolasas
ócidas (gr. lysis, ruptura; somo, cuerpoJ,
es decir, enzimashidrolíticas activasa pH
ácido.Los lisosomasse encuentranen ca-
si todaslas célulasanimales,pero la can-
tidad varía con la función del tipo celular.
Con el microscopio electrónico se distin-

CAPITULO CITOP
 proceso de degradación. Los lisosomas y
muchas de las vesículas que pertenecen al
aparato de endocitosis (se verá con mayor
detalle más adelanteJ, contienen en sus
membranas una bomba de protones de-
pendiente de ATP, que bombea los iones
de hidrógeno hacia el interior de la vesí-
cula para acidificar el contenido (dismi-
nuir el pH), hasta alcanzar un pH de alre-
dedor de 5, óptimo para las enzimas liso-
sómicas. Debido a esta disminución del
pH, las enzimas lisosómicas rompen la
unión con los receotores de manosa-6-fos-
tato y se solubilizan en ia luz vesicular,
donde una fosfatasa lisosómica separa el
f o s f a t od e l a m a n o s a e i m p i d e u n a n u e v a
unión a los receotores. Estos últimos se
vuelven a formar cuando se liberan las ve-
sículas que regresan al aparato de Golgi,
donde se fusionan con la membrana Dara
ser reutilizadas (una interpretació., uit".-
nativa postula que ios lisosomas prima-
rios no contienen la bomba de protones,
por lo que Ia liberación de los receptores
recién tiene lugar después de la fusión del
Iisosoma primario con otra vesícula limi-
tada por membrana, con un pH ácido
equivalente, por ejemplo, un endosoma
tardío, véase más adelante). A continua-
ción, del endosoma tardío se liberan vesí-
culas que contienen los receptores de ma-
nosa-B-fosfatoen las membranas, y vuel-
ven al aparato de Golgi) AsÍ, los lisoso-
''depósito"
mas primarios representan un
listo de hidrolasas ácidas acumuladas
que, ante la fusión con una vesícula o rra-
cuola que contiene material para degradar
(una vacuola de autofagocitosis, un fago-
soma o un endosoma tardío, véase más
adelante) forma un lisosoma secundario.
En algunos tipos celulares, también se
produce una secreción, por exocitosis, del
contenido enzimático de los lisosomas
primarios, por ejemplo, en ciertas células
óseas (osteoclastos,véase cap. 12).
A diferencia de las condiciones de la
autólisis, se puede producir una degrada-
ción más controlada de las estructuras
propias de la célula mediante el sistema
digestivo lisosómico, por ejemplo, como
oarte de Ia transformación normal de las
órganelas celulares dañadas o "enve)eci-
das". Este mecanismo se aplica también
p a r a e l i m i n a r l o s c o m p o n e n t e sc e l u l a r e s
que se encuentran en cantidades superio-
res a las necesarias en el momento. Los
componentes en cuestión, identificados
mediante una marca para su destrucción,
se incorporan a una vesícula compuesta
por una o varias capas de membrana del
retículo endoplasmático rugoso. De este
modo se forma una vacuola de autofago-
citosis que, tras la fusión con lisosomas
primarios, se transforma en un autofago-
soma, en el que tiene lugar la degrada-
CAPITULO
ción (figs. 3-2Bb y 3-30). Esta degradación
normal de los componentes propios de la
célula se denomina autofagia y puede dar
lugar a la formación de restos no digeri-
bles, que permanecen dentro de estructu-
ras limitadas por membranas y se deno-
minan cuerpos residuales (lat. ¡esiduus,
resto). Con la edad se acumulan bajo la
forma de pigmento lipofuscina, en espe-
cial en ios tejidos cardíacos y nerviosos.
También se ha demostrado exocifosis de
estos restos no digeridos, cuando un
cuerpo residual se fusiona con el plasma-
lema y vacía el contenido en el espacio
extracelular.
Además, se puede producir autofagia
cuando las oroteínas disueltas en el cito-
sol son incórporadas a lisosomas prima-
rios por invaginación de la membrana,
por lo que pequeñas vesículas con proteí-
na son captadas por el lisosoma y degra-
dadas. Este oroceso se denomina mi-
croautofagia y es relativamente no selec-
tivo, dado que su objetivo primario parece
ser suministrar un fluio constante de ma-
terial de construcción oara la sÍntesis de
n u e v a s m o l é c u l a s p r o t é i c a s .N o o b s t a n t e ,
el proceso se puede transformar en selec-
tivo, por ejemplo, en ayunos prolongados,
cuando sólo se degradan las proteínas in-
dispensables para la céluia y que tienen
determinadas secuencias señal en las ca-
denas peptídicas. De esta manera, la célu-
la tiene la capacidad de impedir la degra-
dación demasiado temprana de proteínas
imoortantes. como enzimas críticas o fac-
tor-esde resulación.
Ahora sJanalizará con mayor detalle Ia
función de los lisosomas, relacionada con
ia endocitosis, denominación común para
cualquier proceso por e) cual una célula
incoroora material del medio circundante
en vesículas limitadas por membrana,
que se liberan del plasmalemo. Como se
vio al estudiar plasmalema, éste represen-
ta una efectiva seoaración entre el interior
celular y el espaóio extracelular, que sólo
permite transportar en forma controlada
moléculas pequeñas a través de la mem-
brana, mientras que es impermeable para
macromoléculas. Todas las células euca-
riotas pueden captar macromoléculas por
endocitosis, incluso partículas grandes y,
en casos especiales, células enteras. De
acuerdo con el material incorporado se di-
ierencia enlre fagocitosis (gr.'phogein, co-
mer), donde vesículas de gran tamaño
captan partículas grandes, como bacte-
rros, y pinocitosis (gr. pinein, beber), y ve-
sículas de menor tamaño captan líquido
con eventuales moléculas disueltas.
Como se mencionó antes, Ia fagocitosis
es Ia captación de partícu1as por endoci-
fosis, proceso presente en una cantidad li-
mitada de células especializadas, funda-
CITOPLASMA 77
 mentalmente macrófagos y leucocitos
neutrófilos (véanse caps. B y 10J, que cap-
turan y destruyen microorganismos inva-
sores por fagocitosis. La denominación
común para estas células fagocíticas "pro-
fesionales" es fagocitos. La fagocitosis de
una partícula, por ejemplo una bacteria;
comienza cuando moléculas de la suoerfi-
c i e d e l a b a c t e r i as e u n e n a l o s r e c e o t o r e s
de la superficie del fagocito(fig. s-ir). La
unión desencadena modificaciones en el
citoesqueleto dentro del ectoplasma (véa-
se más adelante, en este capítulo) y se ex-
tienden prolongaciones desde la superfi-
cie celular, Ilamados seudópodos (gr,
pseudes, falso; podes, pies), que rodean la
bacteria y por último se fusionan, por lo
que se forma una vesícula limitada por
membrana, Ilamada fagosoma, que contie-
ne la bacteria. El fagosoma se une con li-
sosomas primarios que vacían en él el
contenido de enzimas hidrolíticas v se
transforman en lisosomas secundários
(fig. 3-30). Las enzimas matan y degradan
la bacteria, v después ei destino final del
fagosoma cóincide con el descrito antes
para los autofagosomas.Esta degradación
intracelular dei materiai endocitado se
denomina heterofagia (a diferencia de la
autofagia, que degrada los componentes
propios de la célula). Desde el fagosoma
se pueden separar pequeñas vesículas que
contienen los receptores del plasmalema
con la correspondiente membrana circun-
dante. Estas vesículas vuelven al olasma-
Iema y se fusionan con ella. por ló que se
reutilizan los receptores. Los fagocitos
tienen numerosos tipos de receptores de
superficie especializados que realizan la
fagocitosis al unirse con partículas. Se ha
demostrado la presencia de receptores Fc,
capaces de fijar anticuerpos (véase con
mayor detalle en cap. 16). Los anticuerpos
circulan por la sangre y el líquido extrace-
Iular y se fijan selectivamente a partículas
extrañas como, por ejemplo, bacterias y
virus. Esta cubierta superficial de molécu-
las de anticuerpo facilita la fagocitosis de
las partículas, dado que los anticuerpos se
fijan a los receptores Fc de los fagocitos.
Estos últimos también tienen receptores
para el complemento. El sisfemo del com-
plemento está compuesto por varias pro-
teínas que circulan por la sangre y los lí-
quidos extracelulares, y que se unen a
partículas extrañas, cuando están unidas
a anticuerpos o tienen determinadas pro-
piedades "extrañas" en Ia estructura hi-
drocarbonada de la superficie. De modo
similar a Ia fiiación cón anticuerpos. el
sistema del complemento favorece la fa-
gocitosis de Ias partículas, dado que el
complemento fijado se une a los recepto-
res conespondientes en los fagocitos. Este
"recubrimiento" de las partículas para fa-
78 CITOPLASMA
Bacteria Fig. 3-31. D
máticoque r
sarrollo de I
sis. La bacte
da sufrióops
prevrapor ur
culasde ant
superficieba
CITOSOL
+
+
cilitar su fagocitosis se denomina opsoni-
zaciólr (gr. opson, sal, condimento) y las
sustancias capaces de desencadenar este
tipo de cubieita superficial, por ejemplo
anticuerpos y complemento (en especial
el factor C3 del complemento) se denomi-
nan opsoninas (véase con mayor detalle
en el cap. B).
Los macrófagos también pueden fagoci-
tar los componentes propios del organis-
mo, por ejemplo, restos de células degra-
dadas o células enteras,lo cual ocurre con
los eritrocitos "envejecidos", con el fin de
reciclar el contenido de hierro (véaseam-
pliado en cap. 10), véase la figura 18-80.
Gran parte del macrófago está ocupado
entonces por ei fagosoma, cuyo tamaño
obviamente depende del material capta-
do. v es muv variable.
C-omo se hescribió antes, la pinocitosis
es la captación de líquido con eventuales
moléculas disueltas, incluso macromolé-
culas, por endocitosis. Casi todas las célu-
Ias eucariotas realizan constantes pinoci-
t o s i s .p o r m e d i o d e l a s c u a l e s c a p t a n c a n -
tidades considerables de líquido v de ma-
t e r i a l d e m e m b r a n a ( e n a l g u n o s c á s o sh a s -
ta el equivalente al volumen celular al ca-
bo de una hora, p. ej., las células dendríti-
cas del tejido linfoide) pero al mismo
tiempo se produce una exocitosis cons-
tante, por Io que la cantidad de líquido en
Ia célula y Ia superficie del plasmalema se
regula dentro de márgenes fijos. La pino-
citosis se divide de varias maneras, de
acuerdo con el tamaño de ias vesículas
formadas, Ia selección del material capta-
do y el mecanismode captaciónen sí.
Mediante J.amacropinocitosis se sepa-
ran vesículas de mayor tamaño (hasta de
CAPIT
Fig. 3-32. lmágenesde
una fosita recubierta (a)
y de una vesícula recu-
bierta (b), captadascon
microscopioelectrónico
La cubiertase compone
de la oroteínaclatrina.
x200.000.(Cedidaspor E.
llso Christensen )

Cubiertade clatr¡na Cubiertade clatr¡na

varios ¡rm de diámetro, siempre visibles al c e p t o r e s .P o r e s t e p r o c e s o p r i m e r o s e u n e

microscopio óptico), que contienen líqui- l a m o l é c r r l aq u e s e q t t i e r ec a p l a r .o l i g a r r -
do, c;on el rer;eptor en el plasmalema,
d o r ; o n m o l é r ; u l a s d i s t r e l t a ss i n s e l e r ; r ; i o -
l u e g o e l c o m p l ej o r e c e p t o r - l i g a n d o s e
n a r . L a n r a c r o o i n o c i t o s i ss ó l o s e o l t s e r v a
en determinadas céltilas. entre ellas los r;oncentra oor clifusión lateral en cleter-
macrófagos que presentan lrn borde festo- r . n i n a c l a zs ó n a s d e l p l a s m a l e m a , d e n o m i -
neado (ing. ruffled border), compuesto naclas fositas recubiertas (figs. 3-32 y 3-
por plegamientos v prolongar;iot.tesdel 3 3 ) . S e t r a t a d e p e q u e ñ a sf o s a s e n e l p l a s -
plasmalema, donde octtrre la separación malema (ing pit, cueva, cavidad), que en
de las vesículas Las vesículas de macro- l a s u p e r f i c i e c i t o p l a s m á t i c a p r e s e n t au n a
oinocitosis se encuc'ntran en los macrófa- cubierta compuesta por la proteína cla-
gos de la circulación lisosómica-endosó- trina (lat. clathratus, enrejado). Las mo-
mica (véasemás adelante). Parte del líqr.ri- léculas de clatrina están disueltas en el
do y del material de membrana se elimina citosol pero, al unirse el ligando con los
por exocitosis. Es muy posible que la fina- receptores, son reclutadas para unirse a
lidad de la macropinocitosis sea captar la superficie citoplasmática de las molé-
muestras deL líouido extracelular circun- culas receptoras, con eslabones interme-
dante para contiolar la presencia de antí- dios denominados adaptinas (moléculas
8enos, oroteicas también disueltas en el cito-
El término pinocitosis se utiliza con iol). La unión de la clatrina con los re-
fiecuencia para designar la captación no ceDtores lleva a la concentración de estos
selectiva de iÍquidos con moléculas di- úliimos en las fositas recubiertas, tras lo
sueltas en pequeñas vesículas (no visibles cual las moléculas de clatrina se polime-
con el microscopio óptico) y, a diferencia rizan y forman la cubierta, qr-representa
de la macropinocitosis, tiene distribución un aspecto tridimensional de entreteiido.
universai en casi todos los tipos celulares. A los pocos segr-rndosde haberse forma-
L a s v e s Í c rl¡a s d e p i n o c i l o s j i s e f u s i o n a n do una fosita recubierta, ésta se libera co-
con lisosomas primarios y se incorporan mo vesícula recubierta (se distingue con
entonces a la circulación lisosómica-en- facilidad de las vesículas de macropino-
dosómica. citosis y de pinocitosis, que tienen su-
En la actualidad se utiliza el término perficie externa lisa). La cubierta de cla-
endocitosis mediada por receptor para irina se elimina rápidamente y las vesí-
designar la forma de pinocitosis en la culas se fusionan para formar un endoso-
cual determinadas macromoléculas son ma temprano, al que vuelcan el conteni-
incorooradas selectivamente a Ia célula. do. Los endosomas tempranos son es-
Se conocen los receptores para más de 50 [ r u c t ur a s l i m i t a d a s p o r m e m b r a n a q u e
proteínas diferentes, entre ellas hormo- forman un reticulado continuo de túbu-
nas y factores de crecimiento, que son los y vesículas. Al igual que los lisoso-
captadas por endocitosis mediada por re- mas, los endosomas tempranos poseen

CAPíTUtO CITOPLASMA 79
 ESPACIOEXTRACELULAR

Fositarecubierta

Receptor Plasmalema
Adaptina

Vesícularec

A*

FÉ x{
CITOSOL

una bomba de protones dependiente de proceso tiene lugar cuando la bomba de F i g . 3 - 3 3 .D

ATP en la membrana que los rodea, que protones dependiente de ATP acidifica máticoque n
capta iones hidrógeno para disminuir el aún más el contenido de las vesículas; el formación dr
pH hasta un valor cercano a 6. De este contenido del endosoma tardío tiene un recubierta y
modo, algunas proteínas receptoras mo- pH que alcanza un valor aproximado de sícula recub
difican la conformación y liberan el li- biertaestá cc
5. El endosoma tardío se fusiona con Ii-
la proteínacl
gando, tras lo cual las vesículas que con- sosomas primarios y ios ligandos y los eliminadapo
tienen los receptores se liberan de las eventuales receptores son degradados de la formac
porciones tubulares dei endosoma tem- por las hidrolasas ácidas, tras lo cual los sícularecub
prano y vuelven al plasmalema (fig. 3- productos de la degradación son exporta-
30). En otros casos se liberan las vesícu- dos al citosol. Es posible que el endoso-
las que contienen el complejo receptor- ma tardío se transforme en una estructu-
ligando, que pueden volver al mismo si- ra secundaria más típica, similar a un li-
tio del plasmalema en el cual se produjo sosoma, después de Ia fusión con lisoso-
la endocitosis, o pasar al lado opuesto de mas primarios, pero no está claro el con-
la célula (en las células que tienen dos cento.
s u p e r [ i c i e s e n f r e n t a d a s ) .D - ee s t e m o d o s e Las células tienen otras aplicaciones
puede transportar el ligando de un extre- poro lo endocitosis mediodo por recep-
mo al otro de la céluia. Droceso denomi- tores. La selectividad y la notable con-
nado lranscilosis. El material captado centración (en algunos casos alcanza a
p o r e n d o c i l o s i s r e s t a n t e- l i g a n d o s l i b e r a - 1.000 veces) del Iigando captado por en-
dos y complejos ligando-receptor no de- docitosis permite la incorporación de
vueltos al plasmalema- es entonces cantidades importantes de susfoncias
transportado en pequeñas vesículas libe- nutricias especTficas, incluso cuando és-
radas del endosoma ternprano a una es- tas se encuentran en concentraciones re-
l r u c i u r a l i m i t a d a p o r m e m b r a n a su b i c a - lativamente bajas en el líquido extrace-
da en la profundidad de la célula, deno- lular. Tiene especial importancia la cap-
minada endosoma tardío (fig. 3-30). Este tación de las lipoproteínas de baia den-

80 CITOPLASMA CAPIT
 Incertidumbres referidas al compleio lisosómico-endosómico
Muchas de las relaciones referidas al
complejo lisosómico-endosómicono se
han aclarado en su totalidad, lo cual
también se expresaen una terminología
variada. Algunos autores consideran a
los lisosomasprimarios como meras ve-
sículas de transporte para las hidrolasas
ácidas, sin capacidad para acidificar el
contenido. Según esta acepción, esteúl-
timo procesorecién tiene lugar en las ve-
sículaslimitadas por membranapertene-
cientes al sistema endosómico (fagoso-
mas o endosomastardíos) o autofagoso-
mas. Así, no se distingue entre lisosomas
primarios y secundarios.Otro punto en
cuestión es la relación entre vesículas
endocíticasmediadaspor receptores,en-
dosomas tempranas, endosomastardías
y lisosomas.La interpretación adoptada
en estetexto es denominadapor algunos
autores "modelo de trónsito vesiculaf'y
considera a los endosomastempranos y
tardÍos como estructuras permanentes
que se comunican mediante intercambio
de vesículas,por lo que se mantiene un
equilibrio din¡ímico en lo referido a as-
pecto morfológicoy a composiciónquí-
mica. Una acepciónalternativa,denomi-
nada "modelo de maduración" conside-
ra a los endosomastempranoscomo for-
mados por fusión de cierta cantidad de
vesículas de endocitosis mediadas por
sidad (LDL) unidas a colesterol, que las
células emplean para la sÍntesis de
membranas y, en ciertos casos, para la
síntesis de hormonas esteroides lse verá
LDL con mayor detalle en el cap. 18, re-
lacionado con el hígado, y en hormonas
e s t e r o i d e s ,e n c a p s . 2 1 y 2 2 ) .
La endocitosis mediada por receptores
también se utiliza para el transporte de se-
ñales hacia la célula, cuando una molécu-
la señal extracelular, por ejemplo, bajo la
forma de una hormona, se fija a un recep-
tor del plasmalema y luego es captada por
la célula mediante endocitosis. En algu-
nos casos el ligando permanece unido al
receptor, y ambos son degradados en el
sistema lisosómico, lo cual produce la
disminución de la cantidad de receptores
e n e l o l a s m a l e m a .l e n ó m e n o d e n o m i n a d o
reguláción hacia abajo (véase rnás sobre
el tema en el cap. 7).
Peroxisomas
Los peroxisomas son organelas cito-
plasmáticas redondeadas, limitadas por
CAPITULO
receptores,seguida por una transforma-
ción gradual del endosomaprimario en
endosomasecundarioy por una madura-
ción de éste hasta forma¡ un lisosoma
(secundario),tras la fusión con lisoso-
mas primarios.
Las dificultades para aclarar estos
problemas radican en parte en proble-
mas técnicos de investigación, en espe-
cial los relacionados con la limitación
de las distintas subetapasde la vía en-
docitótica. Los experimentos efectua-
dos mediante captación de ligandos
marcados por endocitosis mediada por
receptoresdemuestranque los ligandos
aparecen primero en las vesículas cu-
biertas, después en los Iisosomas tem-
pranos y por último en los endosomas
tardíos. Sin embargo, las migraciones
de las moléculas marcadas no siempre
son sincrónicas, por lo que es difícil se-
guir la progresión a través de Ias distin-
tas secciones limitadas por membrana.
Además estasúltimas a menudo no son
fáciles de distinguir por su morfologÍa
con el microscopio electrónico, debido
a la compleja composiciónque presen-
tan, en especial,Ios endosomastempra-
nos. Por último, los endosomasson or-
ganelasen extremo dinámicas, cuya es-
tructura se remodela constantementea
gran velocidad.
membrana, con un diámetro promedio de
0,5 ¡rm. En un principio se denominaron
"microcuerpos", pero esta designación
descriptiva inespecífica ha sido reempla-
zada por la de peroxisoma, porque se ha
demostrado el contenido de enzimas que
intervienen en el metabolismo del peróxi-
do de hidrógeno.
Los peroxisomas se encuentran en casi
todos los tipos celulares (Ia mayoría se ob-
serva en las células hepáticas y renales),
pero el aspecto varía de un tipo celular a
otro v de una especie animal a otra. El
contenido presenia una granulación más
o m e n o s f i n a y , e n a l g u n a s e s p e c i e s .a n i -
males (no en el hombre) aparece una es-
tructura cristaloide electrondensa caracte-
rística, denominada nucleoide (véase fig.
3-54), compuesta por la enzima uratoxida-
sa [uricasal).
Los peroxisomas se pueden aislar por
centrifugación con gradientes y el análisis
bioquímico demostró que contienen nu-
merosas enzimas, entre ellas, catalasa,
uratoxidasa y distintas aminoacidasas. La
comnosición enzimática varía en los dis-
CITOPLASMA 81
 Enfermedades por almacenamiento lisosómico
Un hito importante para las denomi-
nadas enfermedades oor almacena-
miento lisosómicofue ei descubrimien-
to de oue todas se deben a un deficien-
cia congénita de alguna de las enzimas
Iisosómicas,como consecuenciade un
defecto genético que, en la mayoría de
los casos,es hereditarioautosómicore-
cesivo.Debido a la carenciaenzimática
se acumulan cantidades excesivasdel
sustrato de la enzima en determinados
tipos celulares, con trastornos de las
funciones normales; en algunos casos
las célulasafectadasouedantotalmente
destruidas.Según cuál de los muchos
tipos de enzimaslisosómicasse ve afec-
tado se oroduce la acumulaciónde dis-
tintos tipos de moléculas.En la patolo-
gía por almacenamientolisosómicomás
frecuente, la enfermedad de Gaucher,
se produce la acumulación de glucoce-
rebrósido como consecuenciade ca¡en-
cia de la enzima beta glucosidoso.Esto
conducea hepatoesplenomegalia y des-
trucción progresivadel sistemanervio-
so central,Io que causaIa muerte antes
de los 2 años de edad. Otros ejemplos
son la enfermedad de Niemann-Pick,
en Ia que se acumula esfingomielino co-
mo consecuenciade la carencia de la
tintos tipos celulares y la única enzima
común a todos los peroxisomas c'sIa cata-
lasa, por Io que la determinación histo-
química de esta enzima se utiliza para la
d e l e c c i ó nc i e r t a d e l o s p e r o x i s o m a s .
Los peroxisomas tienen r¡arias li¡ncro-
nes, si bien se desconocenmnchos detalles
al resper;to.Así, se cree que tienen capar;i-
dad para destoxificar yodos s¿rsf¿rnciastó-
xicns, entre ellas metanol, etanol, fenoles v
formaldehído, lo cual está de acnerdo con
la abundante cantidad de estas organelas
en el hígado y los riñones, ambos con im-
portantes funciones detoxificantes. Los pe-
roxisomas también intervienen en la degra-
dación de lípidos, por ejemplo en Ia be-
taoxidación de los (tcidos grosos.
Los peroxisomas se /brmon únicamente
a partir de peroxisomas ya presentes, por
crecimiento y división, es decir, del mis-
mo modo que las mitocondrias (véase más
adelante en este capítulo). Todas las pro-
teínas de los peroxisomas se sintetizan en
los ribosomas libres del citosol y contie-
nen una secuencia señal C-terminal, que
dirige a las proteínas hacia los peroxiso-
82 CITOPLASMA
enzima esfingomielinasa y la enferme-
dad de Hurler, con acumulación de glu-
cosaminoglucanosdebido a la falta de
la enzima alfa-L-iduronidasa.
La principal consecuenciadel cono-
cimiento sobre la basebiomolecular de
estaspatologíasgraveses que posibilita
el tratamienfo, aún en estadio de inves-
tigación, sobre la base de enzimotrata-
miento directo por invección de la en-
zima faltante af torre.rte sanguíneo; se
han obtenido resultados oromisorios
en oacientescon enfermedad de Gau-
chei. Además, los avancesen tecnolo-
gía génica posibilitan, en parte, la ob-
tención de oroteínas enzimáticasefec-
tivas desdeél punto de vista clínico en
las cantidadesnecesariasDara el trata-
miento por suslitucióny, en parte,
abren la posibilidad de introducir ge-
nes lisosómicosnormalesen las células
de los pacientes afectados.Así, para
muchos geneslisosómicosse ha obteni-
do y caracterizadoel cDNA (DNA com-
plementario para una molécula defini-
da de mRNA) y los experimentosen ra-
tones con cDNA humano para glucoce-
rebrosidasason promisorios en lo que
respecta al tratamiento de la enferme-
dad de Gaucher.
Casquete19S (reconocelos conjugados
de proteÍnay ubicuitina)
/
Proteasoma20S
(proteasas)
Casquete19S
Fig.3-34. D
máticode la
ción molecr
Proteasoma265 proteasoma
CAPIT
 Enfermedades relacionadas con los peroxisomas

Los peroxisomas han adquirido gran Otra patologíagraverelacionadacon los

interés clínico desdeque se ha demostra-
do que varias enfermedadesmetabólicas
hereditariasgravesse relacionan con los
peroxisomas.Esto vale para la adreno-
leucodistrofia, patología recesiva rela-
cionadaal sexo (la madre porta la predis-
posición, pero sólo padecen la enferme-
dad los hijos varones)y se debe a un de-
fecto en una única enzima relacionada
con la beta-oxidación de los ácidos gra-
sos. Esto provoca el almacenamientode
lípidos en las células de la cortezasupra-
rrenal (ing. adrenal gland, glándula su-
prarrenal) y del sistemanervioso central
y causa demencia progresiva e insufi-
ciencia corticosupranenal.
peroxisomases el síndrome de Zellwegers
(síndrome cerebrohepatorrenal), que se
cree es hereditario recesivo y se debe a un
defecto en la incorporación de proteínas
por los peroxisomas (en un tipo de la en-
fermedad se ha demostradouna mutación
del gen que codifi.cael factor 1 de ensam-
blaje de peroxisomos, una proteína ínte-
gral de la membrana del peroxisoma).Es-
to causa disminución de la cantidad de
peroxisomas(en los hepatocitos desapare-
cen) y acumulaciónde ácidos grasos,en-
tre otros compuestos. Los graves hastor-
nos hepáticos,cerebralesy renalesprodu-
cidos suelen causar la muerte dentro de
los primeros 6-12mesesde vida.

mas. AIIí Ia secnencia señal se reconoce espacio central del proteasoma, donde se
por un receptor en la superficie citoplas- degradan a péptidos peqtreños debido a la
mática de la membrana del peroxisoma, lo actividad de proteasa dependiente de
que r;onclucea la incorporación de la pro- ATP. En consecuencia, la degradación de
teína por el peroxisoma. las proteínas eu los proteasomas es Lrn
proceso regtrlaclov nlry selectivo qtle, en
Proteasomas oarte elimina las proteínasauormaiesde
ia célula v en parte r;ontribttve a la regula-
Los proteason¿rsson grandes r;on-rpleios r ; i ó n d e i n p o r t a n t e s p r o c e s o s t ; e l u l a r e s .
con mirltiples snbuniclacles.den.tostraclos Esto se obsen'¿l,por ejemplo, en el control
e n t o d a s i a s c é l n l a s e u c a r i o t a se s t u d i a d a s del ciclo celular, dado que los proteaso-
hasta el momento Actúran conto r,rnidades mas degradan ciclinas específicas (véase
que degradan proteÍnas (las proteasas son cap 4) r'regula los procesos meiabólicos a
enzimas que degradan proteínas), con la trar,és de la degradación, mediada por se-
fbrma de pequeños irilindros siu menbra- ñales, de enzimas clave y de proteínas re-
na circundante (fig. 3-34). Cada proteaso- guladoras. Por Írltimo, la degradación de
ma se compone de ltn cilindro de alrede- proteínas por los proteasomas también
dor de 15 nm de largo con Lln canal cen- parece intervenir en la presentación de
tral (el "proteasoma 20S"), que consiste antígenos (véase con mayor detalle en
de proteasas con sus sitios proteolíticos presentación de antígenos, cap. 16).
orientados hacia la unidad del cilindro
En cada extremo del cilindro se encuentra Mitocondrias
un complejo proteico que forma un cas-
quete 19S (el proteasoma 20S más los dos Los distintos tipos de trabaio realizados
casqr-retes 19S componen en coniunto ltn por las células vivas requieren energía. El
"proteasoma 265"), que posee actividad principal asiento de producción de ener-
ATPasa y puede reconocer coniugados de gío es un conjunto de pequeñas organelas
proteína y ubicuitina. denominadas mitocondrias (gr. rnifos, fi-
Como se vio antes, los proteasomas tie- lamento; chondros, grano). Tienen forma
nen la función de degradar las proteínas de grano, bastón o fiiamento, apenas visi-
(como se mencionó antes en este capítulo, bie con el microscopio ópiico (fig. 3-1), El
también se degradan proteínas en la luz tamaño de las formas granulares alcanza
del retículo endoplasmático liso y en el hasta 1 pm de diámetro, mientras que Ia
sistema lisosómico-endosómico). Ya se longitud de las mitocondrias filamentosas
explicó en la sección sobre síntesis protei- es variable. hasta 10 um.
ca que en el citosol se marcan con ubicui- Las mitocondrias se encuentran en casi
tina las proteínas destinadas a ser degra- todos los tipos celulares dado que, por lo
dadas en los proteasomas, que tienen ca- generai, un tipo celular determinado con-
pacidad para reconocer estas proteínas tiene una cantidad característica de estas
marcadas mediante el casquete 19S. AsÍ organelas, relacionada con los requeri-
se seleccionan las proteínas, que pasan al mientos energéticos de la célula. Los gló-

CAPITULO 3 CITOPLASMA 83
 Mitocondrias
Fig.3-35. Fotomicrografía de un corte de tejido
renal,en el que se efectuóla determinación
histoquímica de la enzima citocromoox¡da-
sa. Esta se encuentrasólo en mitocondrias,
que por ello se d¡st¡nguen intensamente co-
loreadas. En las célulastubularesrenalesore-
sentadaslas mitocondriasse localizan,como
en la parte basal del citoplas-
es caracterÍst¡co,
ma x660.
bulos rojos carecen por completo de mito-
condrias, debido a que la energÍa se pro-
duce sólo por glucólisis (véase más ade-
lante). Por lo general, las mitocondrias
presentan una distribución uniforme den-
tro del citoplasma, pero en algunas célu-
las se concentran en las zonas con mayo-
res requerimientos energéticos, por lo que
adoptan una relación característica con
determinadas estructuras celulares. En
consecuencia, es típico que en las células
en las cuales hay transporte activo (es de-
cir, que requiere energÍa) de material a tra-
vés del plasmalema, éste forme plega-
mientos densamente ocupados por mito-
condrias (figs. 3-35 y 3-36).
En los cortes para microscopia óptica se
suelen detectar las mitocondrias sobre la
base del contenido de fosfolÍpidos de las
membranas que las rodean, por ejemplo
por tinción con fucsina ácida. Además,
las mitocondrias se oueden detectar me-
diante tinción histoquímica por sus enzi-
mas, por ejemplo la citocromooxidasa
(fig. 3-35). También es posible observar las
mitocondrias en células vivas, mediante
el método de contraste de fase (fig. 2-3),
en especial, después de la tinción supra-
vital con verde Jano, por elemplo. La cito-
cromooxidasa es exclusiva de las mito-
cond¡ias y mantiene oxidado el verde Ja-
no, es decir, visible. Por el contrario, en el
resto del citoplasma se reduce a un com-
puesto incoloro. En estos preparados se
observa que las mitocondrias sufren fre-
cuentes modificaciones morfológicas y microscopio electrónico.
varían su localización dentro de la célula.
Con la microscopia electrónica, la mito-
condria muestra una estructura interna
84 CITOPTASMA
Fig. 3-36. In
tocondrias r
bularesrena
con mrcrosc
co. En este c
racterísticoq
condriasest
das en los pl
del plasmale
(SegúnMau
característica, rodeada por 2 membranas
(figs. 3-36, 3-37 y 3-38), denominadas
membrana externa y membrana interna,
respectivamente. Ambas presentan el ha-
bitual aspecto trilaminar. Las 2 membra-
nas transcurren casi paralelas, pero la
membrana interna forma, además, nume-
rosos pliegues que se extienden con repi-
sas en el interior de la organela. Los plie-
gues se denominan crestas (lat. c¡isfa,
peine) y aumentan la superficie de la
membrana interna. La cantidad de crestas
por mitocondria es mayor en las células
con grandes requerimientos energéticos,
por elemplo, las células musculares car-
díacas, en las cuales atraviesan la totali-
dad del ancho de la mitocondria, mientras
que hay relativamente escasas crestas en
las células con menor actividad metabóli-
ca, por ejemplo los macrófagos, donde,
además, las crestas son cortas. Se obser-
van crestas con formas tubulares especia-
les en las células productoras de hormo-
nas esteroides
EI espacio entre las membranas externa
e interna se denomina espacio intermem-
branoso y suele medir sólo 10-20 nm de
ancho (fig. 3-36). La membrana interna
marca el límite externo del espacio de la
matriz, algo mayor, en el cual se observa
una matriz mitocondrial con finas granu-
laciones en las imágenes obtenidas con el
La membrana interna tiene una estruc-
tura complicada, dado que sobre su super-
ficie interna se encuentran pequeñas par-
CAPIT

Gránulosde la matriz
Esoaciode la matriz
Fig. 3-37. Dibujoesque- tículas (fig. 3-38), denominadas partícu-
máticoque muestraen las F, (o partículas elementales), con un
tres dimensionesla con- diámetro de alrededor de 10 nm y unidas
formación ultraestructu- a la membrana interna a través de un del-
ral de una mitocondria gado tallo que forma parte de un comple-
(SegúnDuPraw.) jo proteico integral de transmembrana. Es-
te se denomina Fo y fija F, a Ia superficie
interna de Ia membrana interna, Las partí-
culas F, aparecen a intervalos regulares de
unos L0 nm y se ha demostrado que el
complejo F,-Fo es el asiento de Ia síntesis
de ATP en las mitocondrias lvéase con
mayor detalle más adelante).
PartículasF,
Membranainterna
¿ escaso diámetro) y las moléculas que lo-
Membranaexterna - gran atravesarla requieren transportadores
DNA circular
..1¿
Gránulode
la matriz
Partículasde ribonucleoproteína
similaresa ribosomas
cAPíruto
Fig. 3-39. lmagencaptadacon microscopio
electrónico,de una moléculade DNA circular
aisladade mitocondriasoor fraccionamiento
(célulasdel tejidoconec-
celularde fibroblastos
tivo).x24.000.(SegúnNass)
La membrana externa de la mitocondria
es bastante permeable para Ia mayoría de
las moléculas pequeñas, por ejemplo, sa-
les, moléculas de azúcares y nucleótidos,
debido a Ia presencia de proteínas Ce
transmembrana denominadas porinas. Es-
tas son canales grandes inespecíficos que
permiten el pasaje de la mayoría de las
moléculas menores de 10 kd. En conse-
cuencia, el espacio intermembranoso tie-
ne casi las mismas moléculas disueltas
que el citosol, por lo que éste sólo se dife-
rencia, en principio, del espacio de la ma-
triz oor la membrana interna. Por el con-
trarió, Ia membrana interna es rmpermea-
ble a la mayor parte de las moléculas, in-
cluso las pequeñas (incluidos los iones de
específicos de membrana. Es probable que
la función de barrera aumente por la pre-
sencia de un lípido especial, denominado
cardiolipina. La membrana interna se ca-
racteriza, además, por su elevado conteni-
do de proteínas, lo cual se relaciona con Ia
presencia de varios complejos proteicos
que intervienen en el transporte de elec-
trones y la fosforilación oxidativa (véase
más adelante).
En la matriz se encuentran densos grá-
nulos de la matriz, de un diámetro de 30-
50 nm (fig. 3-36). La cantidad y el tamaño
de los gránulos aumenta con la acumula-
ción de iones calcio en las mitocondrias.
Sin embargo, no se ha demostrado la pre-
sencia de calcio en los gránulos de la ma-
triz de Ia mayoría de los tejidos, por lo
que en Ia actualidad se cree que estos grá-
nulos intervienen en la acumulación de
Fig. 3-38. Dibujoesquemáticoque muestrala
conformación ultraestructural de una mito-
condria. (SegúnBloomy Fawcett.)
CITOPLASMA 85
calcio en las mitocondrias de las células
de los huesos y de los cartílagos (véase
con mayor detalleen el cap. 12).
En las mitocondrias también hay DNA,
denominadomtDNA, en oposición a la an-
terior suposición de que sólo había DNA
en el núcleo celular. Este componente se
detecta en ocasionescomo filamentos en
las imágenespor microscopia electrónica
(fig. 3-38).Al analizar el DNA aislado de
Ias fraccionesmitocondriales se demostró
que poseíaestructurade moléculas circu-
lares bicatena¡ios,con una circunferencia
de alrededor de 6 ¡rm (fig. 3-39).Cadami-
tocondria contiene len las células anima-
les) entre 2O-3Oy varios cientos de molé-
culas de DNA, todas idénticas.En conjun-
to, el mtDNA representaalrededordel O,t-
1% de Ia cantidadtotal de DNA de ia cé]u-
la. La comoosiciónde lasbaseses diferen-
te del DNÁ nuclear.v el mtDNA carecede
histonas,por lo que no se agrupapara for-
mar nucleosomas (véasecon mavordetalle
enel cap.4).
Además, la matriz contiene pequeños
gránulos de un diámetro de alrededor de
12 nm, compuesto por ribonucleoproteí-
na. Correspondena los ribosomas,por lo
que las mitocondrias poseen el aparato
químico necesariopara la síntesisde pro-
teínas. El DNA mitocondrial codifica el
rRNA de los ribosomasmitocondriales,los
IRNA de las mitocondriasv los mRNA oa-
ra algunospolipéptidos d-ela membrána
interna (parte de la cadena respiratoriay
de los complejos de ATPsintetasa,véase
más adelante).En total. el mtDNA humano
contiene37 Benes,y alrededordel 5% de
las proteínas mitocondriales se sintetiza
Sobre mitocondrias
Fellow traveller
Speak softly? Deep inside our cells
A stealthy,alien spirit dwells;
Silently she weavesand bobs
performing needful household jobs:
Finding her special niche in
our fiery metabolic kitchen;
Keeping entropy at bay
By cranking cycles night and day.
Yet seldom does she ever burn us
Despite her all-consuming furnace.
Her origins?Germs,we suppose.
Her purposes?God only knows.
Her destiny's with ours entwined;
The endosymbioticbind.
Eukaryotesfancy themselvesadaptive
Regardingher as a slave - a captive;
While we evolved as truth-unravellers,
86 CITOPLASMA
por Ia organela. El DNA nuclear codifica el
resto de las casi 700 oroteínas distintas
que se encuentran en ias milocondrias y
que se sintetizan por los ribosomas en el
citosol. Todas estas proteínas poseen la se-
cuencia señal N-terminal, que las dirige
hacia el destino correcto en los diferentes
sectores mitocondriales v allí las fiia.
Las nuevas mitocondiias se forman oor
crecimiento y división de la! mitocon-
drias ya existentes, por un proceso similar
a Ia división de las bacterias. Las proteí-
nas se sintetizan mediante el proceso an-
L e sd e s c r i t o , m i e n t r a s q u e l o s l í p i d o s s e
producen en el retículo endoplasmático.
La vida promedio de Las mitocondrias es
corta, asl, por ejemplo, en las células he-
oáticas de ratón es de alrededor de una se-
mana, por lo que es necesaria la renova-
ción constante. Además, con la división
celular se oroduce una reducción de la
cantidad dé mitocondrias. dado oue estas
o r g a n e l a ss e r e p a r t e n e n c a n t i d a d e q u i v a -
lente entre ambas células hijas.
El singular mecanismo que utilizan las
mitocondrias y su contenido de DNA y
RNA característico de las células procario-
tas, como las bacterias,dio origen al postu-
lado de que quizá las mitocondrias repre-
sentan un tipo especial de simbiosis (gr.
symbiosis, vida en común; simbiosis signi-
fica la vida en común de dos organismos
diferentes, situación beneficiosa para una
o ambas partes, sin daño importante para
ninguna de ellas). En la actualidad se con-
sidera oosible oue las células eucariotas se
hayan generadó al principio de la historia
de la evolución como células anaerobias
(no consumidoras de oxígeno) que fueron
Potential astronautictravellers,
She and her cohorts used humanity
(Allowing us our hubric vanity),
They energizedour mind, and ran it
To exit from this dying planet,
And hiiacked us to be their taxi
Hitch-hiking to another galaxy:
Impelling us to wander on
The starship'Mitochondrion'.
Ourselvesthe vehicles, within
Which ride our organellarkin.
Thus, mankind's simply Nature'sway
To transmigrate mt-DNA
W.C. McMurray
Referencia
McMurray, W.C.: T¡endsBiochem. Sci,
9:382,1,994.
CAPiT
 invadidas por pequeñas bacterias que ha-
bían desarrollado la capacidad para utili-
zar el oxígeno, y que establecieron una re-
lación beneficiosa prolongada y mutua,
que significó un notable incremento de la
capacidad metabólica de la célula. Con el
tiemoo. Ia bacteria se habría convertido en
una brganela celular indispensable de Ia
célula eucariota.
Las mitocondrias tienen distintas /un-
ciones en la célula, de las cuales la más
importante es la producción de energía.
Se verán primero otras funciones relacio-
nadas con las mitocondrias, no relaciona-
das con el metabolismo energético. Las
mitocondrias contienen enzimas que cata-
lizan la síntesis de ácidos grasos y ami-
noáci.dos;es de particular importancia la
síntesis de hormonas esteroides que se
inicia con la separación de la cadena late-
ral del colesterol, catalizada por una enzi-
ma de la membrana interna mitocondrial
(la síntesis continúa en el retículo endo-
nlasmático lisol se verán más detalles so-
bre la síntesis de esteroides en el capítulo
2 1 . a l t r a l a r l a c o r t e z as u p r a r r e n a l ) .
La Junción mitocondrial mós inportan-
fe, como se dijo antes, es )a producción de
energía.Esta se genera por degradación de
g l u c o s a y d e á c i d o s g r a s o s .L a g l u c o s a e s
la fuente de energía más importante, pero
las células continúran con 1a degradación
de ácidos grasos si no hav suficiente glu-
cosa disponible. EI transportadot univer-
sal de enersía de la céh-rlaes un enlace ri-
co en energía denominado trifosfato de
adenosina, ATP. Esta molécula actúa co-
mo dador de energía en las distintas par-
tes de Ia célula al ceder a la otra molécula
uno de Ios gmpos fosfato de alta energía
terminales. De este modo se transforma en
difosfato de adenosina (ADP), pero puede
Acoplamiento quimiosmótico en las mitocondrias
Las partículas F, (partÍcuias elemen-
tales) se componen de un compiejo de
ATPasas que, como todas las enzimas,
catalizan una reacción quÍmica en ambas
direcciones, de acuerdo a las condicio-
nes del sistema; la ATPasa de las partícu-
las ATP catalizan la srnfesis normal de
ATP a partir de ADP y fosfato. El com-
plejo Fr-Fo es el asiento de la síntesis de
ATP oor fosforilación oxidativa. El com-
plejo F,-Fo se denomina también ATP-
sintetasa. En la cadena de transporte de
electrones de la membrana interna se
produce un bombeo de iones hidrógeno
desde la matriz mitocondrial hacia el es-
oacio intermembrana. Este bombeo de-
pende de la energía liberada por el trans-
CAPITULO
volver a formar ATP oor acción cle los sis-
temas productores de energía de la célula.
Esta regeneración de ATP tiene lugar en
varios de los pasos de ia degradación y la
oxidación de los nutrientes.
Después de ).acaptación por la célula, la
glucosa primero sufre una degradación
parcial, denominada glucólisis, a través de
una serie de pasos hasta formar ácido pirú-
vico, que da lugar a Ia formación de una
pequeña cantidad de ATP. El proceso tiene
lusar en el citosol v es anaerobio. El ácido
piiúvico atraviesa ias membranas de la mi-
tocondria y es captado por la matriz, don-
de se transforma en acetilcoenzima A, que
a su vez es degradada a CO, y agua por la
denominada vía del ácido cítrico [ciclo de
"Krebs"). También se forma acetilcoenzi-
ma A cnando los ácidos grasos son trans-
portados desde el citosol hasta Ia matriz,
donde son desradados a acetilcoenzima A
por el proceJo denominado beta-oxida-
ción (el cual, como se dijo antes, también
tiene lugar en los peroxisomasJ.
Durante el ciclo del ácido cítrico se libe-
ran los electrones que son transportados
por una cadena acoplada de reacciones de
oxidorredr,rcción, la denominada cadena
respiratoria, para finalmente unirse a pro-
tones v oxígeno, con formación de agua.
La energía de este proceso oxidativo t¡s
apror,echacloen tres sitios para la regene-
ración de ATP a partir de ADP y fosfato
inorsánico, la llamada fosforilación oxida-
tiva. Esta deeradación final en las mito-
condrias de l,os elementos nlttricios de la
dieta, con consumo de oxígeno, se deno-
mina respiración celular (lat. respirare).
La mayoría de las enzimas asociadas
con el ciclo del ácido cítrico se encllen-
tran disueltas en la matriz formando un
único complejo multi.enzimático (sólo al-
oorte de electrones a través de la cadena
iespiratoria. A continuación los iones hi-
drógeno bombeados vuelven al espacio
de la matriz a través del complejo F,-F,,.
La energía del gradiente electroquímico
(de la concentración mayor a Ia menor
de iones hidrógeno) se utiliza para la sín-
tesis de ATP, pues la porción Fn actúa co-
mo canal transmembrana a través del
cual fluyen los protones, lo cual se cree
qr-reprimero desencadena una modifica-
ción de la conformación de la ATPasa de
F, y que en la segunda fase sintetiza ATP.
Este modelo de fosforilación oxidativa
dependiente del gradiente electroquÍmi-
co de orotones también se denomina
acoplamiento quimiosmótico.
CITOPLASMA 87
 DNA mitocondrial y enfermedad
En 19BBse descubrióoue las mutacio-
nes de los genes del DNh mitocondrial
(mtDNA) son causa de varias patologías
gravesque afectanel sistemanervioso, de-
nominadas encefalomiopatías mitocon-
driales. La frecuencia de las mutaciones
es alrededor de 10 veces mavor para el
mtDNA respectodel DNA n,rclear,dado
que el primero carecede las histonas pro-
tectorasadosadasy del efectivo sistemade
reparación de DNA que poseeel DNA nu-
clear. Además, se observaun elevado gra-
do de exposicióndel mtDNA a los radica-
les librei originados en Ia fosforilación
oxidativa. En la actualidad se han demos-
trado mutaciones puntuales en cada gen
del mtDNA, causales de enfermedades,
dado que las mutaciones de IRNA predo-
minan esnecialmenteen las encefalomio-
patíasmiiocondriales.
El müNA presentaun patrón de heren-
cia materno(lat.mater,madre)no mende-
liano especial,debido a que el cigoto (cé-
lula huevo fecundada)casi exclusivamen-
te recibe su contenido de mitocondrias del
oocito, mientras que la contribución del
espermatozoidees muy escasa.De este
modo, todaslas célulasdel individuo (de-
sarrollado a partir del cigoto), contienen
mitocondrias generadasa partir del oocito
y derivan de la línea materna.
La misma célula ouede contener mito-
condrias normales (ion müNA normal) y
"enfermas"(conmüNA mutado),circuns-
tancia denominada heteropJosmio.Cuan-
gunasdeshidrogenasas estánrelacionadas
con la membrana interna). La cadena
transportadorade electronesse compone
de 4 complejosmultiproteicoslocalizados
sobrela membranainterna.
Laminillas anulares
Estasorganelascitoplasmáticas se com-
ponen de una pila de cisternasparalelas
en las cuales,a intervalosregulares,apa-
recen pequeñosorificios redondoso ani-
llos (lat. onulus) (fig. 3-a0) cerradospor
un delgado tabique o diafragma (gr.
diaphragma,tabique).Cada laminilla se
asemejaa una parte de la cisternaperinu-
clear(véasecon mayor detalleen cap.4) y
en las células sexualesde algunasespe-
cies animalespueden aparecerlaminillas
anularesen el nucleoplasma.
Las lamlnillas anularesse observancon
mayor frecuencia en las célu1nssexuales,
pero tambiénse ha demostradosu presen-
cia en muchos tipos celularessomáticos.
BB CITOPLASMA
do la célula se divide, cada una de las cé-
lulas hijas recibe una proporción aleatoria
de mitocondrias normales y enfermas,por
lo que la distribución tisular de éstasúlti-
mai mitocondrias puede sermuy irregular.
Los síntomas de patologíaaparecencuan-
do el porcentajede mitocondrias defectuo-
sas supera determinado umbral, Io cual
causadeterioro de la función celular debi-
do a falta de ATP. El denominado síndro-
me MELAS (encefalomiopatía mitocon-
drial con episodiossimil shock por lactaci-
dosis)y el síndrome de Kearns-Sayre,con
mutaciones de müNA más abarcativas
son ejemplos de encefalomiopatías.En
amboscasos,la observacióncon el micros-
copio óptico de biopsias muscularescolo-
readas con coloración tricrómica oermite
distinguir un patrón en armadurataracte-
istico, con cúmulos de mitocondrias,de-
nomi¡ado "raged-red fibe¡s" (del íng.rag-
ged, rasgado,andrajoso)o fibras rojas ras-
gadas.Con el microscopio electrónico se
distingue una gran cantidad de mitocon-
d¡ias aumentadasde tamaño y con estuc-
tu¡a modificada. Las patologíaspresentan
un cuad.roclínico muy variable con el sig-
no común de la encefalomiopatía,es decir,
hay un grado variable de severidad de
compromiso del encéfaloy el músculo que
comienza con debilidad muscula¡, en es-
pecial de los músculos oculares externos.
En el sÍndrome de Kearns-Sayrelos sínto-
mas comienzan en Ia infancia y conducen
a Ia demencia,entre otras patologías.
Parecenser más comunesen las células
q u e s e d i v i d e nc o n I r e c u e n c i ca o. m oc i e r -
tas célulasembrionariaso tumorales.
Aún se desconocela función de las la-
minillas anulares.
Centrosomay centríolos
En la parte ceniral de la célula se en-
cuentrauna zona con citoplasmaespeciali-
zado, el centrosomao centro celular, que
c o n t i e n eu n p a r d e p e q u e ñ o sg r á n u l o so
bastones cortos, los centríolos, de unos
0,15 pm de diámetroy 0,25-2¡-rmde largo
(fig. 3-f). Los centríolosdesempeñanun
papei imporiante en la formación de cilias.
Se demuestracon mayor facilidad la
oresenciadel centrosomamediantela tin-
ción con hierro-hematoxilina. Por lo sene-
r a l e l c e n t r o s o m sae e n c u e n t r am u y ó e r c a
del núcleo celular,a menudo en una hen-
didura del mismo, rodeadopor el aparato
de Golgi en la caramás alejadadel núcleo.
Sin embargo,la posición del centro celu-
CAPIT
Fig. 3-40. Dibujodel as- An¡llos
pecto al microscopioelec-
trónicode las laminillas
anulares en un oocito.El
marco rectangularen el
dibuloal microscopioópti-
;lt
co en el ánguloinferioriz-
quierdoseñalala parte
caotadacon el microsco-
pio electrónico.(Según
Krstió.)

Anillos
(corte
tangencial)

: .,, .q ' . ,
\).I

@o .,

Nucleolema

lar varía en los distintos tipos celularesy, Los centríolos suelen aparecer en gru-
por ejemplo, en las células epiteliales pos de a dos, denominados en conjunto
glandularesse encuentraubicada entre el diplosoma. Mediante microscopia elec-
núcleo celular y la superficie luminal. trónica se observa oue cada centríolo tie-
ne la forma de un cilindro hueco de unos
400 nm de largo por 150 nm de diámetro
(fig. 3-+r). Con el corte transversal se
descubre que la pared está compuesta
por 9 subunidades (fig. 3:42). Cada una de
ellas tiene a su vez 3 subunidades meno-
Fig.3-41. lmagende un res tubulares, denominadas microtúbulos,
par de centríolos que
que transcurren en dirección paralela a la
forman un diplosoma
orientación longitudinal del centríolo
captadacon microscopio
electrónico.Es caracterís- lvéanse más detalles sobre microtúbulos
tica la orientaciónperpen- en la siguiente sección). En cada una de
dicularde los centríolos las tríadas, el microtúbulo interior se de-
entre sí. x30.000.(Cedida nomina a y los dos externos b y c, respec-
oor U. Lucht.) tivamente. Con el corte transversal se de-

CAPITULO CITOPLASMA 89
tectan bajo la forma de 3 círculos en hile-
ra (fig. 3-1). El microtúbulo a de cada gru-
po está conectado con el microtúbulo c
del grupo siguiente a través de una con-
densación lineal.
Inmediatamente antes de la división ce-
lular se dunlica Ia cantidad de centríolos.
Cada nuevó centríolo se genera cerca de
una determinada zona del centríolo ya
existente (fig. 3-a3). Aquí se forma prime-
ro una condensación anular, de diámetro
similar al de un centríolo maduro, pero
sin los grupos microtubulares de la pared.
Este anillo se prolonga después hasta for-
mar Lln cilindro, el procentríolo, perpen-
dicular al centríolo maduro. Por debaio se
forma la pared con las 9 tríadas de micro-
tÍrbulos (por polimerización de la tubuli-
na, véase con mayor detalle en la próxima
sección).
Una vez finalizada la duplicación de
los centríolos, cada uno de los centríolos
originales migra con su centríolo hijo has-
ta los polos nucleares opuestos (véasecon
mayor detalle en la siguiente sección y en
el capítulo 4, en división celular).
Los centríolos también se encuentran
como cuerpos basales, que son los sitios
de formación de las cilias epiteliales (véa-
se con mayor detalles en el cap. 6).
Como se verá en la próxima sección so-
bre c;itoesqueleto, el céntrosoma funciona
como centro para el anclaje de microtúbu-
los, denominado centro organizador de
microtúbulos (COMT).
Fig. 3-42. In
corte transv
centríolo ca
croscopioele
x60.000.(Ce
U. Lucht.)
La microscopia electrónica demostró
que las fibrillaJestán compuestas por ha-
ces de estructuras aún más delgadas, de-
nominadas filamentos (lat. flum, hilo),
que individualmente son demasiado del-
gadas para poder ser detectadas mediante
el microscopio óptico. Además, la micros-
copia electrónica y los métodos histoquÍ-
micos han demostrado que los filamentos
tienen una distribución mucho más uni-
versal que ias fibrillas, dado que en mu-
chos casos se encuentran en menor canti-
dad y sin formar haces ordenados visibles
en los preparados habituales para micros-
copia óptica.
Gradualmente se lleeó a Ia conclusión de
que todas las células éucariotas contienen
un reticulado de delgados hilos que atravie-
san el citoplasma para formar el denornina-
do citoesqueleto. Este está compuesto por

citoesquereto
[:'".,;ffi
imm¿H?:,#
:H;:,'*1:
:fi5'*i:,:I"4t"mix'":#:,::;2:"2'
Mediante la microscopia óptica se de-
mostró en muchos tioos celulares la ore-
s e n c i a d e e s t r u c t u r a sÍ i l i f o r m e s d e n t r o d e l
;^^:_.:;.:_;:- F i g . 3 - 4 3 .D i b u j oe s q u e m á t ¡ cqou e m u e s t r al a
cllosol aparentemente oesestrucltlra,oo'
nebformaciónde centríolosantesde la divi-
Estas orgalelr.*_ se. denominaron.fibrillas sión celular.(SegúnFawcett.)
( d i m . d e l l a L f i b r o ) p a r a d i l e r e n c i a r l a sd e

l r D r r l l a s s o l o s e c l l s t l n E u e nc o n B r a n a u - o I o\\
mento con el microscopio óplico. Las [i- ,'\\ ./ "\"

90 CITOPLASMA CAPíT
Fig.3-44. lmagende los Filamentos
f ilamentos citoplasmáti- intermedios
cos en una célulamesan-
gial renal,captadacon
microscopio electrónico.
En la zona ectoplasmática
se observanhaces Para-
lelos de filamentos de
act¡na,mientrasque en
el endoplasma se ob-
servan filamentos inter-
medios más dispersos
x34.000 (CedidaPorJ.R.
Norgaard.)
Filamentosde actina
sorias, que unen los conPonentes v tienen
fundamental importancia para la funciór.r
del citoesqueleto.Como su nombre lo indi-
ca, este reficulado tiene por función formar gativo. Esto se demuestra mediante el mé-
un esqueleto celular interno, que conñere
rigidez y organiza al interior de la célula,
pero que además contribuye al desplaza-
miento de los compollentes intraceluiaresv
a la movilidad de la célula como unidad. El
citoesqueleto es una estructura mu¡r diná-
mica que constantemente sufre modifica-
ciones relacionadas con las distintas fun-
ciones, que se verán más adelante. En par-
te, Ias funciones pueden estar relacionadas
con uno solo de los componentes, en otros
casos. depender de una interrelación entre
varios de los componentes.
cariotas v antes se denominaban microfila-
mentos; ahora se llaman filamentos de ac-
tina, dado que sólo se pueden detectar por
inmunohistoquímica, mediante Ia utiliza-
ción de anticuerpos contra la proteína acti-
na. En un principio se demostró la existen-
cia de los iilu-entot de actina en las fibras
musculares, donde se encuentran en gran
cantidad y, junto con los filamentos de
miosina. componen la base de la contrac-
ción musculai 1véasecon mayor detalle en
el cap. 13).
Los filamentos de actina están consti-
tuidos por una proteína globular denomi-
nada actina G, que se polimeriza para for-
mar dos cadenas idénticas actina F ("fi-
bra"), que dan origen a una espiral doble,
la columna vertebral del fiiamento de ac-
tina (véase fig. 13-23). Frente a la necesi-
dad celular inmediata tiene lugar la for:
mación del filamento por acoplamiento
sucesivo de monómeros globulares al ex-
tremo de un filamento ya exi.stente y, por
el contrario, se eliminan monómeros de
los extremos en el caso de degradación
del filamento (en las células musculares
los filamentos de actina son estables).Los
monómeros de actina G se intercambian
con los de un pool soluble, dado que por
Io seneral sólo alrededor de la mitacl de la
actlna de una célula (que representa 1.0-
,1.5'lo la proteína total en la mayoría de
de
las células) se encuentra como actina F.
Los filanlentos de actina son polares,
con un extremo positivo y un extremo ne'
todo de las puntas de f)echa, de la si-
guiente manera: como se vio antes, Ias fi-

Filamentos de actina

Los filamentos de actina del ciotoes-

queleto tienen un diámetro aproximado
de 7 nm y una longitud variable [fig' 3-aa).
Se encuentran en casi todas las células eu-

Fig. 3-45. lmagende filamentosde actina

aislados captadacon microscopioelectrónico,
tratadoscon una soluciónde meromiosina pe-
sada La uniónde los fragmentos de merom¡o-
slnaa los filamentosde actinada lugara la for-
macióndel aspecto característicosimilar a
"puntas de flecha".x90.000.(Cedidapor J V
S m a l l)

CAPITULO J
CITOPLASMA 91
 bras de músculo esquelético contienen
B r u e s o sf i l a m e n t o s d e m i o s i n a , c o m p u e s -
tos por moléculasde la proteínamiosina,
además de los filamentós de actina. Me-
diante acción suave con la enzima triosi-
na es posible escindir las moléculas-de
miosina en dos fragmentos de distinto pe-
so molecular, meromiosina liviana (gr.
meros, parte) y meromiosina pesada. El
fragmento de meromiosina pesada se pue-
de fijar por un extremo a determinados si-
tios de unión en el filamento de actina. De
este modo, el fragmento forma un ángulo
con el filamento de actina v, cuando cier-
ta cantidad de sitios de unión están ocu-
pados por fragmentos de meromiosina pe-
sada aparece un aspecto característico si-
milar a "puntas de flecha" (fig. 3-a5). De
este modo es posible identificar filamen-
tos citoplasmáticos que contienen actina.
El extremo negativo del filamento de acti-
na corresponde al extremo hacia el cual
señalan las puntas de flecha. Si se prolon-
ga un filamento de actina por polimeriza-
ción crece el extremo positivo con mucha
mayor rapidez que el extremo negativo.
Cuando se contraen las fibras del mús-
culo esquelético se produce un acorta-
miento de las mismas por desplazamiento
de los filamentos de actina resDecto de los
filamentos de miosina (deslizamiento de
filamentos). Este deslizamiento tiene lu-
gar debido a que Ia miosina forma enlaces
cruzados con Ia actina, tracciona el fila-
mento de actina (por modificación de la
conformación de Ia molécula de miosina)
y a continuación interrumpe el enlace
cruzado. Por repetición de este ciclo (for-
mación de enlace-tracción-interruDción
del enlace) se desplazan ("se deslilan")
los filamentos de actina y de miosina en
dirección opuesta entre ií. como se verá
con mayor detalle en el capítulo 13. Por
su parte, el filamento de actina también
interviene en el movimiento de otras célu-
las, además de las musculares, como se
verá más adelante y, en la mayorÍa de los
casos, en estas formas de movimiento
también actúa Ia interacción entre actina
y miosina. En los casos de células no mus-
culares, Ia miosina no se encuentra como
filamentos detectables mediante la mi-
croscopia electrónica, dado que la con-
centración de miosina en estas células es
inferior a la de las células musculares. Sin
embargo igual se cree que la formación de
enlaces cruzados entre filamentos de acti-
na y moléculas de miosina (quizá bajo la
forma de filamentos muv cortosl es la ba-
se del movimiento.
La conformación de los filamentos de
actina como esqueleto estructural y la ca-
pacidad parir proclucir movimiento reci-
ben decisiva intluencia de una serie de
proteínas fijadoras de actina (PFA). Un
92 CITOPLASMA
grupo de ésIasinfluye sobre eI equilibrio
entre moléculasmonoméricasde actina G
y filamentos de actina F polimerizados, a
menudo a favor de las moléculas de acti-
na G: la profilina se une a las moléculas
monoméricasde actina G e impide su po-
limerización a filamentos de actina. La
brevina 0at. brevis, corto) se fiia al extre-
mo positivo de los filamentosde actina
existentese impide su prolongación por
polimerización subsecuente;la fragmina
y Ia gelsolina se unen a monómerosaisla-
dos de actina G en el filamento de actina
en sitios entre los extremospositivo v ne-
g a t i v o .D e e s t em o d o l a s m o i é c u l a sd - ea c -
tina G se separande las moléculasvecinas
y el filamento de actina se escindeen tro-
zos más pequeños. Esto contribuye a la
degradación de partes del citoesqueleto
de actina y a la regulación de la longitud
de los filamentos de actina. Además, Ia
fragminay la gelsulinapermanecenuni-
das a los fragmentosseparados,lo cual
impide un nuevo acoplamiento.
Otro grupo de proteínasfijadorasde ac-
tina no ocfúa sobreIa polimerización,sino
sobreeJacoplamientode los filamentos de
actinay, en consecuencia,sobre la forma-
ción estructuraldel citoesqueleto.Algunas
de ellas, entre ellas la espectrina,Ia fodri-
na y Ia ñlamina, unen filamentos de acti-
na existentespor los puntos de cruzamien-
to, por lo que dan lugar a la formación de
extensasredes que, de acuerdo a cuan tu-
pida es Ia trama-,puede presentarcaracte-
rísticas de gel muy laxo o muy espeso.En
el endoplasmaIa red de actina es bastante
laxa y la consistenciatiene características
de sol, mientras que en el ectoplasmala
cantidad de filamentosde actina es mucho
mayor, lo cual forma un gel (fig. 3-aa).
Aquí los filamentos de actina confieren
sostén mecánico a Ia superficie celular v
tambiénintervienenen lás modificacionei
de la forma y en distintas formas de movi-
miento. De acuerdo con el grado de poli-
merizacióny Ia cantidad de enlacescruza-
dos creadosentre los filamentosde actina,
el citoplasmapuede presentartransforma-
ción sol-gel local (generada,por ejemplo,
por filamina y alfa-actinina)o trarisforma-
ción gel-sol (generada,por ejemplo, por
gelsolina).A este grupo de proteínas fila-
doras de actina pertenecentambién Ia vi-
llina y la fimbrina, que unen filamentos
de actina de transcursoparalelo para for-
mar hacesrígidos, que en parte atraviesan
el endoplasmay confieren sosténmecáni-
co a ciertas zonas localizadasv en parte
formanu n haz que da rigideza evaginácio-
nes citoplasmáticasdenominadas micro-
vellosidades (véasecon mayor detalle en
el cap. 6). De estemodo se forma un tipo
especialde hacesde filamentos de actina,
las fibras tensionales o fibras de estrés.
CAPiTI
 que se observan en determinados tipos ce- pués de fijarse a Ia lectina para por último
lulares, por ejemplo células epiteliales y formar un agregado inmóvil denominado
fibroblastos. A menudo las fibras tensiona- casquete. Este fenómeno se denomina cap-
les se extienden por toda la longitud de la ping (ing. cop, Borro, casquete); después se
célula, con un extremo adosado a otros fi- acumulan filamentos de actina y proteínas
lamentos del citoesqueleto y el otro extre- fijadoras de actina sobre la cara citoplas-
mo unido al plasmalema, como una forma mática del casquete. Se cree que esto es ex-
de adhesión focal. Se trata de zonas espe- presión de que la difusión lateral de los re-
ciales de contacto, donde Ia célula se une ceptores de lectina baio el fenómeno de
a la matriz extraceluiar (véase con mayor capping es dirigido y orientado por los fila-
detalle en el cap. 6). mentos de actina, dado que se ha demos-
Se cree que la principal función de las trado que se interfiere en el proceso de cap-
fibras tensionales es mantener determina- ping si se expone Ia célula a la acción del
das conformaciones celulares, por ejemplo compuesto citocalasina, que se une a los
una forma alargada o plana característica extremos positivos de los filamentos de ac-
de distintos tipos de células epiteliales. tina e impide la polimerizacíón. Como se
Filamentos de actina distintos de los vio antes. se produce una difusión lateral
haces de filamentos de estrés también similar de las-moléculas receptoras con la
pueden estar ligados al plasmalema, por endocitosis mediada por receptor, en cuyo
ejemplo en las zonulas adherentes del caso es posible que intervengan los fila-
epitelio (véase cap. 6). Otras proteínas de mentos de actina de modo semeiante.
anclaje de este tipo son la vinculina y la Son ejemplos de la interacción entre ac-
alfa-actinina, que facilitan la unión con el tina y miosina en células no musculares la
olasmalema. formación de la denominada hendidura
Además, se debe considerar como pro- de escisión, relacionada con la división
teína fijadora de actina a la miosina, que del citoplasma en la división celular (véa-
pertenece al grupo de proteínas denomi- se con mayor detalle en el cap. 4). Esta
nadas profeín as motoras, y la proteína re- hendidura se forma por contracción de un
guladora tropomiosina, que regula la anillo de filamentoJ de actina localizada
unión entre ia actina v la miosina. inmediatamente por debajo del plasmale-
La actividad de lai proteínas fiiadoras ma. El anillo contiene también moléculas
de actina es reversible v en muchos casos de miosina, y tanto la miosina como la ac-
estd regulada por Io cóncentroción de io- tina son necesariaspara generar el entrela-
nes calcio de la célula. Se inactivan frente zado del anillo contráctil relacionado con
a las bajas concentraciones que por lo ge- la formación de la hendidura de escisión,
neral se detectan en el citoplasma, pero se posiblemente por interacción entre la acti-
activan frente a un aumento de la concen- na y la miosina, como ya se describió.
tración de iones calcio. La regulación por Los filamentos de actina contribuyen
los iones calcio puede ser un efecto direc- de modo similar a Ia modificación de Ia
to o mediado poi la proteína de control fi- morfología de la célula en el desarrollo
jadora de iones calcio calmodulina (véase embrionario, donde en algunos casos se
cap. 7). Los iones calcio también actúan forman anillos parecidos de filamentos de
como segundo mensajero en relación con actina. oue al contraerse varían al mismo
la activación de determinados receptores tiempo ia forma de grupos celulares, Io
de la superficie celular (véase con mayor cual puede causar, por ejemplo, plega-
detalle en el cap. 7), por lo que la organi- mientos de una capa de tejido.
zación de los filamentos de actina de la cé- Por último se verá el papel de la actina
lula recibe directamente la influencia de en relación con 1o motilidad de la célula,
señales provenientes del exterior. Esto es decir, eI movimiento de células comple-
también vale para otro mecanismo de re- tas resoecto al medio. Este fenómeno fue
gulación, ta fosforilación de proteínas fiia- descritb en principio para amebas unice-
doras de actina, mediada por proteinqui- Iulares y se denominó movimiento ame-
nasas fosforiladoras que también se acti- boide, pero en la actualidad se designa
van mediante receptores en la superficie desplazamiento celular. En los mamífe-
celular, como se verá en el capítulo 7. ros, esta actividad se observa,por ejemplo,
En aoariencia. Ios filamentos de actina en células embrionarias, leucocitos, ma-
ubicadós inmediatamente por debajo del crófagos, fibroblastos y células cancerosas
plasmalema parecen estar capacitados para (además de céluias cultivadas). En estos
influir sobre la posibilidad de difusión la- distintos tipos de células ei desplazamien-
teral de las proteínas de la membrana. Se to celular puede tener ciertas variaciones
ha demostrádo, mediante histoquímica en cuanto á forma de presentación y meca-
con lectina, que los receptores para la lec- nismo subyacente, pero básicamente son
tina. oue normalmente están distribuidos fundamentales los filamentos de actina.
en forma difusa por toda la superficie celu- El desolazamiento celular se inicia
lar, se juntan en zonas más pequeñas des- cuando .,.ñ lado de la célula emite seudó-

CAP¡TULO CITOPLASMA 93

Direccióndel desolazamlento
Seudópodo
Adherencias
podos (fig. 3-46) con elevado contenido
cle filamentos de actina. Por ejemplo, los
seudópodos pueden formar anchas evagi-
naciones en los fibroblastos y se denomi-
nan lamelipodios, o fiiros y delgados filo-
podios. Se cree que la formación del seu-
dópodo tiene lugar cuando los filamentos
de actina se prolongan por polimerización
en el extremo positivo, que crece hacia el
plasmalema y ejerce presión para formar
Ia evaginación. Al mismo tiempo ocurre
una despolimerización equiiibrada en el
extremo negativo del filamento de actina,
con el resultado neto de que el filamento
d e a c t i n a s e d e s p l a z ah a c i a e l i n l e r i o r c l e l
seudópodo. El slguiente estadio se produ-
ce cuando el seudópodo se fija a Ia super-
ficie y, en apariencia, pasa a ser dominan-
te, ya que Ia célula se desplaza ahora en
dirección de ese seudópodo. La fiiación
d e l s e u d ó p o d o o c u r r e e n p e q u e ñ a sz o n a s
localizadas denominadas adherencias fo-
cales, de alrededor de 1 um. Los puntos
de adhesión focal actúan como fiiaciones
d e l o s h a c e s d e f i l a m e n t o sd e a c i i n a , l a s
fibras tensionales. La fijación se produce
mediante receptores de fibronectina en el
plasmalema, que generan el anclaje del
plasmalema a las moléculas de fibronecti-
na en la matriz extracelular (véasecap. 6).
U n a v e z q u e e l p l a s m a l e m as e f i j a c o n
fuerza a la superficie medianle adhesio-
nes focales, en Ia dirección del desplaza-
miento se produce una contracción en zo-
nas locales del citoplasma que "traccio-
94 CITOPLASMA
Fig. 3-46. D
máticosque
desplazami
a presental¿
de seudópo
tras que b n
movimiento
citoplasma
brosey Eas
Nuevadireccióndel desolaza-
miento,con la correspondiente
modificaciónde la forma de la
célula
Direccióndel
desplazamiento
/
focales
nan" el extremo posterior de la célula ha-
cia adelante. Se ciee que el movimiento es
generado por interacción de filamentos de
actina y moléculas de miosina. El proceso
de emisión de seudópodos, adhesión fo-
cal y contracción citoplasmática se repite
a continuación, por lo que la céluia conti-
núa el movimiento.
La dirección del movimiento es deter-
minado por el fenómeno de quimiotaxia,
que define la capacidad de la célula de
desplazarseen dirección de un atractante
o de alejarse de un repelente. Por ejemplo,
los leucocitos son atraídos por las bacte-
rias invasoras, que en la síntesis de proteí-
nas excretan pequeños péptidos al medio
(p. ej., péptidos formilados que se adosan
a receptores sobre el plasmalema de los
Ieucocitos). Esta acción estimula rápida-
m e n t e l a [ o r m a c i ó n d e s e u d ó o o d o sé n e l
e x l r e m o d e l a c é l u l a m á s c e r c á n oa l a m a -
yor concentración de estos péptidos, Io
cual inicia el desplazamiento del leucoci-
to en esa dirección.
Microtúbulos
Como se vio antes, delqadas estructuras
t u b u l a r e sd e d i m e n s i o n é s l a n f i n a s q u e
sólo se detectan mediante el microscooio
e l e c l r ó n i c oi n t e r v i e n e ne n l a c o m p o s i c i ó n
d e l o s c e n t r i o l o s , l o s c u e r p o s b a s a l e sv l a s
cilias. Los microtúbulos también re
cuentran aislados en todas las células "tr- eu-
cariotas. A menudo estos microtúbulos di-
CAPIT
Fig. 3-47. Fotomicrografía
de fibroblastosde cultivo
de tejido,en los que se
efectuóla determinación
inmunohistoquímicade
microtúbulos citoplas-
máticos mediante el tra'
tamiento con anticuerPo
fluorescente contra tu-
bulina.Los núcleosse ti-
ñeroncon coloraciónde
contrasteazul x400. (Ce-
dida por H Hager)

Fig. 3-48. lmagende microtúbulosen una

/usos desaparecencon la fiiación de ia
muestra,incluso sólo con la refrigeración.
Tan sólo despuésde la incorporacióndel
glutaraldehídocomo fiiador para Ia mi-
é r o s c o p i ae l e c t r ó n i c aa, c o m i e n z o sd e l a
décadáde 1960, se descubrióla distribu-
ción mucho mayor de microtúbulos.Ade-
más,mediantelos nuevosmétodosinmu-
nohistoquímicos que utilizan anticuerpo
contra tubulina (véasecon mayor detalle
más adelante)es posible ahora demostrar
la oresenciade microtúbulos con la mi-
croicopia óptica (fig. 3-a7).
fa tubulina
tubulina
Protofilamento
Fig. 3-49. Dibujoesque-
máticode un modelo de
la estructuramolecular
de los microtúbulos ci-
toplasmáticos.(Según
Schmitt)
célula mesangial.captadacon m¡croscop¡o
electrónico.Es característicoel transcursorecto
o ligeramente arqueado.En el ánguloinferior
derechose puedecompararcon un haz de fila-
mentosde actina x1 10 000 (Cedidapor J R
Norgaard.)
Los microtúbulos citoplasmáticos a me-
nudo son rectos o ligeramente curvos (fig'
3-481. Poseen un diámetro externo de
unos 25 nm y al corte transversal se pre-
sentan como estructuras anulares de pare-
des electrondensas de unos 9 nm de espe-
sor y una luz más clara.
La pared del microtúbulo se compone
de 13 fibras lineaies denominadas protofi-
lamentos (fig. 3-a9), formadas por la pro-
teÍna tubulina. Esta a su vez está consti-
tuida por 2 polipéptidos diferentes, deno-
minados alfa tubulina y beta tubulina,
que se unen para formar heterodímeros
(llamados asÍ porque se componen de 2
subunidades distintas). Estos heterodíme-
ros se polimerizan extremo a extremo y
forman así Ios protofilamentos.
Se oueden encontrar microtúbulos en
todo el citoplasma. No obstante, parecen
-en hacia el centrosoma, donde ter-
converger
minan los denominados satélites, que
son pequeñas estructuras densas de mate-
rial granular cercanas a los centríolos. Es-
ta oorción del centrosoma contiene una
forma especial de tubulina denominada
gamma tubulina que, en Ia actualidad se
óree es el principal centro organizador de
microtúbulos (COMT). Los microtúbulos

CAPITULO CITOPLASMA 95
 citoplasmáticos son estructuras muy lábi-
les que se encuentran en equilibrio diná-
mico con un pool de dímeros libres. Se ha
demostrado que los microtúbulos tienen
un extremo positivo, capaz de crecer con
rapidez en longitud por agregado de hete-
rodímeros, y un extremo negativo, con
tendencia a perderlos si no está estabiliza-
do. Esto se bbserva con claridad cuando
se incluyen en el centrosoma. Así se ob-
serva un permanente crecimiento de gran
cantidad de microtúbulos desde el centro-
soma hacia afuera, en ocasiones hasta al-
canzar el plasmalema. Después se vuelve
a formar y a veces desaparece. De este mo-
do se modifican constantemente Ia canti-
dad y la longitud de los microtúbulos, for-
mando nuevos patrcnes de acuerdo con
las necesidades de la célula. Se interoreta
la velocidad de los procesos al consiáerar
que Ia vida media de cada microtúbulo es
de unos 10 minutos.
Además de la tubulina, los microtúbu-
los se componen de las denominadas pro-
teínas asociadas a microtúbulos (PAM),
que en la mayoría de los casos contribuyen
a e s t a b i l i z a re l m i c r o t ú b u l o a l d i s m i n u i ¡ l a
tendencia a la despolimerización. La poli-
merización de los microtúbu\os también
se ve afectada en grado importante por la
concentración de iones de calcio en la cé-
lula, por Io que un aumento de esta última
tiene efecto inhibidor sobre la polimeriza-
ción. ya sea directamenl.eo bajo la forma
de iones calcio fijados a calmodulina. La
acción de los iones calcio recibe qran in-
fluencia de las PAM, en especialiuando
los iones calcio están unidos a caimoduli-
na. La acción de los iones calcio oermite
que Ia regulación de la formación de mi-
crotúbulos se vea afectada por la unión de
las moléculas señal externas con los receo-
tores de superficie de Ia célula de modo
semejante a como se vio para los filamen-
tos de actina. La polimerización de los mi-
crotúbulos también requiere la presencia
de GTP, que se fija a loi heterodí^meros de
tubulina por el extremo positivo del mi-
crotúbulo, el denominado casquete GTP,
lo cual favorece la polimerización, dado
que el GTP estimula la tendencia de los dí-
meros de tubulina a unirse entre sí. El GTP
se escinde en GDP y fosfato, pero este pro-
ceso es más lento que Ia polimerización
durante el crecimiento del microtúbulo. Si
disminuye la velocidad de polimerización
( d e b i d o a m e c a n i s m o sr e q u l a d o r e sc e l u l a -
res o a disminución del Juministro de dí-
meros de tubulinal, la escisión det GTP en
el casquete GTP supera Ia velocidad de po-
l i m e r i z a c i ó n ,p o r l o q u e s e i n i c i a l a d e s p o -
limerización y retrocede la fo¡mación del
microtúbulo. Por ende, Ia fiiación del GTP
y la consecuente escisión desempeñan un
papel importante en la denominada ines-
96 CITOPLASMA
tabilidad dinámica de los microtúbulos,
sobrela que sebasanlos muy rápidos ajus-
tes en la cantidad de microtúbulos a fin de
adecuarsea las necesidadesfuncionales
instantáneasde la célula.
Además de las PAM con función regu-
ladoraexistenotrasque unen a los micio-
túbulos entre sí o con otras partes del ci-
t o e s q u e l e t od,e m o d o s i m i l a i a l a f u n c i ó n
que desempeñanmuchas de las proteínas
fijadoras de actina.
Los microtúbulos citoplasmáticos de-
sempeñan varias funcion'es celulares (se
verán con mayor detalle al estudiarla fun-
ción del huso mitótico en el cap. 4 v las
cilias en el cap. 6). Quizá debido a suma-
yor espesor,los microtúbulos son más rí-
gidos que los filamentos de actina y con-
tribuyen con el citoesqueletoal conferirle
rigidez y estabilidad a }a forma de Ia célu-
1o. Esto es especialmente importante
cuando la célula tiene una forma particu-
lar, como ocurre en los axones(lai largas
prolongacionesde las células nerviosas,
véasecap. 14), donde hacesparalelosde
microtúbulosunidos (aquí denominados
neurotúbulos) contribuyen a mantener la
forma alargada.Los microtúbulos de los
axonestambién desempeñanotra función
importante,dado que iorman la base del
denominado transporte axónico, por me-
dio del cual determinadasmoléculasy or-
ganelasse desplazanen una u otra direc-
ción del axón a gran velocidad (más de
100 mm por día). Se expresaasí otra de
Ias principalesfuncionesde los microtú-
bulos citoplasmáticos,a saber el despla-
zamientode organelosy otroscompoñen-
tes intracelulares dentro de la célu\a, ha-
cia destinos determinados. Esta función
de los microtúbulos citoplasmáticosfue
descubiertaal estudiar lós movimientos
de los cromosomasdurantela división ce-
lular, cuando los microtúbulos forman el
huso mitótico (véasecap.4), pero en mu-
chas otras organelas,entre ellas mitocon-
drias, lisosomasy distintostipos de vesÍ-
culas,se han observadomediantemicros-
copia óptica rápidos movimientos repen-
tinos interrumpidos por pausasde inmo-
vilidad, y es característiconotar que se
destacaespecialmente Ia densidadde mi-
crotúbulos en las regiones donde se pro-
ducen estosdesplazamientos. Medianteel
descubrimiento de que ciertos venenos
vegetales,en especial Ia colchicina y la
vinblastina, se pueden fijar a los dímeros
de tubulina e inhibir la polimerización
d e l m i c r o t ú b u l os e d e m o s i r óq u e l o s m i -
c r o t ú b u l o si n t e r v e n í a ne n e l m o v i m i e n t o
de los componentescitoplasmáticos. Así,
la colchicina puede inhibir la formación
del huso mitó1ico y bloquear la división
celular. El transporte axónico también es
i n h i b i d op o r l a c o l c h i c i n a .
CAPITU
Fig. 3-50. Dibuloesque- ATPasa)y una cola (fig. 3-50). La cola se
máticoque muestracómo fija a la organela que va a transportar,
los microtúbulos con las mientras que las cabezasse fijan al micro-
quinesinas y las dineÉ
túbulo y "se desplazan" por sobre su su-
nas citoplasmáticas
Quinesina perficie. La energíapara esteprocesopro-
desplazan los comPo-
nentes celulares Por el viene de la escisión del ATP. Se descono-
ce el mecanismo causal de este desplaza-
inter¡or de la célula
(véase el texto para los o o miento de una molécula de dineína o de
detalles). quinesina, pero se supone que tiene pun-
tos de semejanzacon el movimiento cícli-
co de las cabezasde miosina a lo largo de
un filamento de actina (véase cap' 13).
Además es caracterÍstico que las molécu-
las de quinesina siempre se desplazan ha-
cia eI extremo positivo del microtúbulo,
La capacidadque tienen los microtúbu- mientras que las moléculas citoplasmóti'
los de desplazarlos componentescelula- cas de dineína siempre se mueven hacia
res se relaciona con dos grupos de proteí- el exftemo negativo. En los axones los mi-
nasmotoras asociadasa los microtúbulos, crotúbulos siempretienen idéntica polari-
denominadas quinesinas y dineínas cito- dad con el extremo positivo en el extremo
plasmáticas (las dineínas citoplasmáticas terminal del axón, por lo que el transpor-
están muy relacionadascon la dineína ci- te axónico desde el cuerpo celular hasta
Iiar, también formada por proteínasmoto- allí (transporte anterógrado)depende de
ras, véasecon mayor detalle en el cap. 61. la quinesina, mientras que el transporte
Las dineínas citoplasmáticasy las quine- hacia el interior de la célula (transporte
sinas están formadaspor dos cabezasglo- retrógrado)dependede la colaboraciónde
bulares (que fijan ATP y tienen actividad la dineína citoplasmática.

Dímero

Tetrámero
i COOH

cooH

Filamento
Fig. 3-51. Dibujoesque- intermedio
máticode un modelo de
la composición molecu-
lar de los filamentos in-
termedios.

CAPITULO CITOPLASMA 97
 Filamentos intermedios
Los filamentos intermedios tienen un
espesor de unos 10 nm (fig. 3-aa) y se los
denomina así porque el diámetro del fila-
mento es intermedio entre el de los fila-
mentos de actina y de miosina en las célu-
las musculares, es decir, el tipo celular en
el que se demoslraron por primera vez.
Más tarde se estableció su presencia en
c a s i t o d o s l o s t i p o s c e l u l a r e s ,c o m o c o t n -
ponente del citoesqueleto; son especial-
mente numerosos en las células exDuestas
a g r a n a c c i ó n m e c á n i c a ,d a d o q u e s u / u n -
ción principal es conferir fuerza mecóni-
co. En consecuencia, los filamentos inter-
medios son más fuertes que los filamentos
d e a c t i n a y l o s m i c r o l ú b ú l o s .d a d o q u e e s -
tán formado por proteínas fibrosas alarga-
das en lugar de proteínas globulares. Re-
presentan el componente más estable del
citoesoueleto.
A pésar de su aspecto unifbrme con el
microscopio electrónico, los filamentos in-
termedios representan un grupo bioquími-
co irregular, dado que se ha demostrado
que está compuesto por distintas proteínas
en los diversos tipos c;elulares,e incluso
en el mismo tipo celular en distinto grado
de diferenciación. No obstante. las oroteí-
n a s e s t á n r e l a c i o n a d a se n t r e s í v l a i o n l o r -
m a c i ó n b á s i c ae s u n i f o r m e . C a d a o r o t e i n a
está formada por 2 polipéptidos que for-
man una hélice alfa, y que además se en-
roscan entre sí para formar el denominado
"coiled coil" (resorte arrollado) (fig. 3-br).
Se crea así un dínero, con una porción
central alargada con fbrma de bastón, y
dos porcionesde colas lerminalesde lon-
gitr-rdvariable. Dos dímeros se ubican uno
junto al otro y ligeramente desplazado ha-
cia adelante para formar r.rn fefrrimero, que
se polimeriza extremo a extremo con otros
y da lugar a la formación de un protofila-
mento. Ocho de estas estructuras se unen
lado a lado y se arrollan para crear una es-
tructura cilíndrica que da origen al fila-
mento intermedio definitivo. Se cree oue 'so-
l a s d o s p o r c i o r r e sd e c o l a s t e r m i n a l e s
bresalen de la superficie de los filamentos
intermedios y contribuyen así a su fijación
en haces o a otras estructuras celulares.
Dado que durante la formación de los te-
trámeros los dímeros se ubican en disposi-
ción antiparalela (es decir, los terminales
C y N tienen orientación opuesta en dos
dímeros vecinos) el filamento intermedio
formado no está polarizado (no tiene ex-
tremos positivos y negativos).
En la actualidad se clasifican las proteí-
nas que conforman los filamenlos inler-
medios en 6 clases sobre la base de simi-
litudes y diferencias en la secuencia de
aminoácidos. Mediante la aplicación de
inmunohistoquímica con anticuerpos
98 CITOPLASMA
Fig.3-52. Fo
fía de un astr
célulade sos
ma nervtoso(
que se efectu
nación inmu
mica de filan
les mediante
de anticuerp
proteínaacíd
g l i a l( G F A P )
dida por E Va
Finsen.)
contra las distintas proteínas se ha demos-
trado la presencia de una serie de tipos cle
filamentos intermedios en los diversos ti-
oos celulares.
Los filamentos de queratina sólo se en-
cuentran en las células epiúe1io1es,donde
la [un m e c á l r i c ae s m u y n o l a b l e .A s í .
son es almente numerosos en las célu-
las de Ia epidermis (véase también cap.
l 7 ) . d o n d e a l r a v i e s a ne l c i t o p l a s r n ac o m o
un tejido, a menudo formando haces, que
c o n e l m i c r o s c o p i oó p t i c o s e d i s t i n g t i e n
bajo la forma de las denominadas fonofi-
brillas. A menrrdo los filamentos de oLie-
r a t i n a t e r m i n 0 r )e n d r , s m o s o m - "p. o i l o
que las células del estrato quedan unidas
por medios mecánlcos (rréaser;on mayor
d e t a l l ee n l o s c a p s .6 v 1 7 ) .
Los filamentos de vimentina se en-
cuentran en los fibroblastos v en otros ti-
pos celulores de origen Lnesenquitrtritico..
al igual que los filamentos de queratina
tienen la función de conf'erir apovo mecá-
n i c o a e s t a sc é l u l a s .
Los filamentos de desmina se encuen-
tran en los ú¡es tipos de céIulas muscula-
res (músculos esquelético, cardíaco y 1i-
so). En las fibras del músculo esquelético
t i e n e n p o r f u n c i ó n r e l a c i o n a rl o s d i s c o sZ
de las miofibrillas vecinas v fiiar los dis-
c o s Z d e l a s m i o f i b r i l l a s p e i i f é r i c a sa l s a r -
colema (véase con mavor detalle en el
c a p . 1 3 ) . L o s f i l a m e n t o sd e d e s n l i n as e e n -
cuentran en mayor cantidad en las células
musculares lisas, donde unen las conden-
saciones citoplasmáticas entre sí y con las
placas de adhesión del interior del plas-
m a l e m a .E n e s l ec a s ot i e n e n l a f u n c i ó n d e
distribuir las fuerzas de tracción dentro
de la célula en forma equilibrada durante
la contracción celular.
CAPITL
 Hepatocitos Gránulosde glucógeno
"i'
.¡
,.-riv
Fig. 3-53. Fotomicrografíade hepatocitosen
los que se ha efectuadola determinaciónhis-
toquímicade glucógeno medianteel método
de coloraciónde PAS El glucógenose distin-
gue como granoscitoplasmáticos rojooscuros
de tamañovariablex660
Los neurofilamentos se encuentran en
todas las partes de la neurona, por io que
confieren sostén mecánico. sobre todo en
el axón. Allí hay gran cantidad de fila-
mentos de orientación paraleia.
Los filamentos gliales se observan en
Ios astrocitos, un tipo de células gliales
(céiuias de sostén) del sistema nervioso
central, y tienen la misma función de con-
ferir rigidez que los neurofilamentos de las
células nerviosas. Los filamentos sliales se
componen de proteína ácida fibrilar glial
(PAFG) lo cual se demuestra mediante in-
munohistoquímica con antiPAFG, en es-
pecial en los astrocitos (fig. 3-52).
Por último cabe mencionar las laminas.
Son proteínas que forman parte de los fi-
lamentos intermedios y crean un reticula-
do sobre la cara interna del nucleolemma,
la denominada lamina nuclear (véase con
mayor detalle en el cap. 4). La fosforila-
ción de las laminas causa la despolimeri-
zación de la lamina nuclear. lo cual tiene
lusar al comienzo de la mitosis e induce
la degradación de la membrana nuclear,
como se verá en el caoítulo 4. Hacia el fin
de la mitosis disminuye la fosforilación
de las laminas, se regenera la lamina nu-
clear v se vuelve a formar la membrana
nuclear. Este mecanismo de reeulación de
la formación de los f-ilamentós interme-
dios mediante la fosforilación de las nro-
CAPITULO
teínas oue intervienen no es exclusivo de
Ias laminas. sino oue afecta también a
otros tipos de filamóntos intermedios, en
especial en tipos celulares inmaduros.
Inclusiones citoplasmáticas
Se entiende oor inclusiones a los com-
ponentes celulares no indispensables, que
pueden ser sintetizados por Ia célula o cap-
tados del medio, y que a menudo sólo per-
manecen en la célula por tiempo limitado.
No obstante, la denominación se aplica
principalmente a los depósitos de nutrien-
fes y a ciertos pignentos.
Depósitos de nutrientes
En las células animales. sólo los hidra-
tos de carbono v los líoidos se almacenan
bajo la forma de incluslones, mientras que
las proteínas celulares aparecen formando
narte de estructuras o disueltas en el cito-
sol. No obstante, en caso de necesidad, a
partir de esle depósito vital se pueden mo-
vilizar aminoácidos por degradación de
proteínas, por ejemplo, en casos de inani-
ción, dado que la célula prioriza el mante-
n i m i e n t o y l a s í n t e s i sd e l o s c o m p o n e n t e s
c e h r l a r e sm á s i n d i s p e n s a b l e s .
Hidratos de carbono. Las células ani-
m a l e s a l m a c e n a nh i d l a t o s d e c a r b o n ob a -
jo la forma de ghrcógeno. En especial al-
macenan glucógeno los hepatocitos y, en
menor grado, las células musculares, pero
s e e n c u e n t f a g l u c ó g e n o e n p e q u e ñ a st : a n -
tidades en el citoplasma de la mayoría de
los tipos celulares.
El glucógeno no se tiñe en los cortes
histológicos habituales, por lo que en los
extendidos tenidos con HE, por ejemplo,
se distingue como pequeños espacios irre-
gulares en apariencia vacíos dentro del ci-
toplasma de color rojo. Sin embargo, se
puede demostrar la presencia de glucóge-
no mediante la reacción de PAS o el méto-
do de carmín de Best, que colorean el glu-
cógenode rojo (fig. 3-53).
Mediante microscopia electrónica de
preparados con contraste con citrato de
plomo se distingue el glucógeno como
oartículas densas. de límites a menudo
irregulares, de un diámetro cercano a 15-
30 nm. Estas partículas pueden formar
grandes cúmulos en forma de roseta, en
especial en los hepatocitos (fig. 3-5a).
Lípidos. El almacenamiento de lípidos
se lleva a cabo principalmente bajo Ia for-
ma de triacilgliceroles en los adipocitos,
los componentes básicos del tejido adiposo
(véase con mayor detalle en el cap. 9). Sin
embargo, también otros tipos celulares a
menudo contienen líoido almacenado. Los
triacilgliceroles repr-esentan una reserva
CITOPLASMA 99
 Peroxisoma
Glucógeno
Fig.3-54. lmagende glucógeno en un hepa-
tocitocaptadacon microscopioelectrónicoLas
partículasde glucógenoformanfigurascaracte-
rísticassemejantesa rosetas x39 000 (Cedida
por A.B Maunsbach.)
energética, pero los ácidos grasos también
pueden ser utilizados por la célula para la
síntesis de componentes estructurales ri-
cos en lípidos, por ejemplo, membranas.
En los cortes histológicos habituales se
extraen los triacilgliceroles durante la pre-
paración por acción de los solventes, por
ende, se distinguen agujeros redondos va-
cíos en los sitios del citonlasma corres-
p o n d i e n t e sa l a s g o t a s d e l í p i d o ( f i g . 3 - 5 5 ) .
No obstante, se puede demotrar la presen-
cia de grasa mediante cortes congelados fi-
jados con formol y teñidos, por ejemplo,
con colorante de Sudón (fig. 2-30, p. 56), o
con fijación con osmio, lo cual permite ob-
servar las gotas de grasa como gotas redon-
deadas negras de distinto tamaño. En las
imágenes con microscopio electrónico de
células fijadas con osmio también se dis-
tinguen los lípidos como gotas redondas
de interior oscuro homogéneo (fig. 3-56).
Pigmentos
Por pigmentos (lat. pigmentum, color)
se entienden Las sustancias coloreadas
naturalmente. El tipo y la cantidad de pig-
mento de un teiido determinan su color.
lOO CITOPLASMA
Los pigmentos pueden ser exógenos, es
decir, provenientes del exterior del orga-
nismo, o endógenos, es decir, originados
en el organismo a partir de componentes
no coloreados.
Pigmentos exógenos. Los más importan-
tes son los carotenos y el polvo de carbón.
Los carotenos (lat. carofo, zanahoria)
son pigmentos vegetales amarillo rojizos.
Existen varios tipos de carotenos, que va-
rían de una planta a otra. Así, el caroteno
de la zanahoria es amarillo en su mayor
parte, mientras que la del tomate tiene
una tonalidad más rojiza. Los carotenos
son liposolubles y después de ser capta-
dos por el organismo se depositan en el te-
jido adiposo, lo cual determina su tonali-
dad amarillenta. El tono amarillento de la
piel se debe al depósito de carotenos en
los adipocitos de la epidermis y la dermis,
además de la caoa córnea.
El polvo de carbón llega al organismo
con el aire inspirado y es captado por las
células fagocíticas de los alvéolos pulmo-
nares De allí puede ser transportado por
Ias vías biliares. Por ende, con la edad los
pulmones y los ganglios linfáticos adya-
c e n t e sa d q u i e r e n u n c o l o r n e g r o .
El pigmento endógeno más importante
es la hemoglobino, cuyo producto de de-
gradación hemosiderino aparece como in-
clusión de pigmento en ciertas células.
Tal como se vio al estudiar lisosomas, en
la actualidad se considera que Ia ll'polus-
cina está compuesta por restos no digeri-
bles de actividad Iisosómica limitados por
m e m b r a n a s ,p e r o p o r t r a d i c i ó n s e c o n s i -
deran en este contexto. La melanina (el
pigmento pardo de la piel) se verá al estu-
diar el sistema melanocítico de la piel, en
el capítulo 17, dado que ya no se conside-
Agujerosen los sit¡os
a las gotas de lípido
correspondientes
Fig.3-55. Fo
de hepatocito
las vacías en
ma como cor
de la extracc
dos durantel¿
ción.Corteco
hematoxilina
CAPIT
Fig. 3-56. lmagende go- crófagos hepáticos, tímicos y de la médu-
tas de lípidos en una cé-
la ósea. En estas células se degrada la he-
lula intersticial
renal.cap-
tada con microscopio moglobina a los pigmentos hemosiderina
electrónicox60 000. (Ce- (rico en hierro) y bilirrubina.
dida por S -O Bohman.) La hemosiderino (gr. haima, sangre; si-
de¡os, hierro) es de color pardo dorado y
se encuentra bajo Ia forma de gránulos ci-
toplasmáticos en las células fagocíticas.
Es posible distinguir la hemosiderina me-
diante tinciones histoquímicas para hie-
rro. En las imágenes obtenidas por mi-
croscopia electrónica en las zonas pig-
mentadas se ve gran cantidad de partícu-
las de Ia proteína rica en hierro ferritina.
La bilirrubina es un pigmento rojo
amarillento que es liberado rápidamente
de Ios macrófagos,por lo que en condicio-
nes normaies no da orisen a inclusiones
de pigmento, Es elimjnaáo por las células
hepáticas de la vesícula biliar.
Lipofuscina. Este pigmento es pardo
(lat. /uscus, oscuro) y aparece como pe-
't' queños cúmulos en muchos tipos celula-
a.\ res, con mavor frecuencia en las células
de músculo cardíaco, nerviosas y hepáti-
cas. La lioofuscina da fluorescencia de co-
lor pardo dorado con luz ultravioleta y se
tiñe moderadamente con los colorantes li-
ra que los gránulos de melanina sean in- oosolubles.
clusrones. La cantidad de lipofuscina en las célu-
Hemosiderina. La hemoslobino es el Ias aumenta con la edad v se considera
c o l o r a n l er i c o e n h i e r r o d e l o s e r i L ¡ o c i t o s q u e e l p i g m e n t o e s u n p r o d u c t o t e r m i n a l
que condiciona su capacidad de transpor- d e l a a c t i v i d a dl i s o s ó m i c aL, a c é l u l ae s i n -
tar oxíeeno. La vida media normal de los c a p a z d e e l i m i n a r l o p o r e x o c i t o s i s ,p o r l o
e r i t r o c i t o se s d e u n o s 1 2 0 d í a s A 1 c a b o d e que se acumula con el tiempo bajo la for-
e s t e p e r i o d o s o n f a g o c i t a d o sp o r I o s m a - ma de cuerpos residuales.

Cuestionario sobre citoplasma

1. ¿Cómose denomina Ia porción del 7. ¿Cuálesson las funciones relaciona-

citoplasma donde se encuentranIas das con el retículo endoplasmático
organelasy las inclusiones? ruSoso?
2. ¿Cómoes el aspecto de una membra- 8. ¿Quéfactor condiciona que una pro-
na celular observadacon el micros- teína sea sintetizadaDor los riboso-
copio electrónico? mas unidos a membránay no por
3. ¿Cuálesson los dos componentesbá- los ribosomaslibres?
sicos del modelo de mosaico fluido 9. ¿Cómose denominan los tres tipos
de una membrana celular? de RNA que intervienen en la sínte-
a. ¿Quése entiende por difusión late- sis proteica?
ral? 10. Nombre algunos ejemplos de las
5. ¿Quées el glucocáliz? modificacionespor las que atraviesa
6. ¿Cuáles el aspectodel retÍculo endo- un péptido en el retículo endoplas-
plasmáticorugoso con el microsco- mático rugoso despuésde la sÍnte-
pio electrónico? sis.

CAPITULO CITOPLASMA 101

 11. ¿Qué organela está especialmente
desarrollada en las células oue sin-
Letizanhormonas esteroides?
12. Intente esbozar el aspecto del apara-
to de Golgi de Ia célula de una glán-
dula exocrina con el microscooio
electrónico,
13. ¡.Cómo se denomina ei hidrato de
carbono que se agrega a las enzimas
lisosómicas en el aparato de Goigi
para dirigirlas a transformarse en li-
sosomas orimarios?
14. ¿Qué se dntiende por fagocitosis y
por pinocitosis?
Lecturas adicionales sugeridas
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I02 CITOPLASMA
15. Intente decribir brevemente lo que
ocurre en Ia endocitosis mediada
por receptor.
16. ¿Cuál es Ia diferencia fundamental
entre los peroxisomas y los lisoso-
mas?
17. ¿Qué ocurre en los proteasomas?
18. ¿Cuál es el aspecto de una mito-
condria con el microscopio electró-
nico?
19. ¿Cuál es la función de las mitocon-
drias?
20. ¿Cuálesson los tres componentes
principales del citoesqueleto?
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