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ANTE-PROYECTO
OBTENCIÓN DE ÁCIDO CÍTRICO A PARTIR DE ASPERGILLUS NIGER UTILIZANDO
MELAZA DE CAÑA DE AZÚCAR Y RESIDUOS CÍTRICOS COMO FUENTE DE
CARBONO.
CP-RG-07
Rev. 02
13-06-18
Av. Principal, Zona Industrial “Agustín Rivero”, La Independencia, Yaracuy. Aptdo. 100. Telefax: (0254) 231.33.92 -231.28.22-2319811-231.15.96 -
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I. DATOS GENERALES DEL PROYECTO
Fecha de Culminación
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Tiempo que dedicará al
Teléfono Fax Correo electrónico Tipo de participación
proyecto (%)
tgomez@ciepe.gob.ve
0254-2313807
0254-2313392 gomezthaisv@gmail.co coordinador 30
m
0254-2313807 Personal
0254-2313392 ggomez@ciepe.gob.ve
técnico 50
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0426-3550074 0254-2313807 mcaro@ciepe.gob.ve Personal
técnico 50
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Ingeniera PII
Tiempo que dedicará al
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proyecto (%)
thayzv@ciepe.gob.ve Participante 30
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Transferencias y Donaciones
Otros Gastos
Total Recursos Financieros 3.553.881.600
*Especificar el tipo de gasto requerido
Institución que
Monto a Transferir Institución que recibe Acción a Ejecutar
Transfiere
N/A N/A N/A N/A
Institución que
Monto a Transferir Institución que recibe Acción a Ejecutar
Transfiere
Ministerio de Adscripción Fundación CIEPE Obtener de ácido cítrico
a partir de Aspergillus
niger utilizando melaza
de caña de azúcar y
residuos cítricos como
fuente de carbono.
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refinado y purificado aplicando técnicas de proceso unitario hasta lograr un producto de alta
pureza, de esta manera se podrá colocar a la disposición el diseño tecnológico de un proto-
tipo para el estado o algún ente que pueda financiar y cristalizar a escala industrial el logro
alcanzado con este proyecto y que será de gran utilidad como insumo para la industria ali-
mentaria, farmacéutica y química por la versatilidad de su aplicación.
El ácido cítrico es muy utilizado como conservante y aditivo alimentario en la industria ali-
mentaria Nacional. Actualmente Venezuela pasa por una grave situación económica por el
bloqueo económico que se mantiene, por ello se ha generado el aumento progresivo de
precios y la disminución al acceso en el mercado, principalmente de productos importados
como es el caso de los insumos y reactivos químicos empleados en el procesamiento de
alimentos, provocando con ello que se dificulte la adquisición de estos por los altos cos-
tos. A nivel industrial, el ácido cítrico es uno de los insumos que con mayor frecuencia se
utilizan en diversos procesos tecnológicos, el cual es utilizado como conservante y aditivo
alimenticio, por sus propiedades antioxidantes, reguladoras de color, regulador de acidez
y potenciador del sabor. Gracias a la importancia del uso de este ácido en la industria, se
genera la necesidad de producción de este insumo para obtener acceso a este a un me-
nor costo, ya que los altos costos y la dependencia de importación de este insumo, atenta
contra la soberanía alimentaria y el desarrollo endógeno sustentable del país.
Obtener ácido cítrico a partir de Aspergillus niger utilizando melaza obtenida a partir de la
caña de azúcar y residuos generados del procesamiento de cítricos como fuente de car-
bono, para ser utilizado en la industria alimentaria.
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Fase I: Caracterización de materia prima a ser utilizada en la obtención de ácido cítrico a
partir del Aspergillus niger a nivel de laboratorio.
Fase II: Desarrollo del proceso de fermentación del Aspergillus niger para la obtención de
ácido cítrico a partir de melaza de caña y residuos cítricos.
Fase III: Desarrollo de los procesos unitarios para la purificación del ácido cítrico producido
por el Aspergillus niger.
Fase IV: Caracterización del ácido cítrico obtenido.
2.5 ALCANCE
Premisas:
Presencia de normas, leyes e instituciones que velan y promueven la evaluación,
aceptación y aseguramiento de la calidad e inocuidad de los aditivos y conservantes
alimentarios.
Personal formado en el área de biotecnología y en el procesamiento de alimentos,
para llevar a cabo el desarrollo del proyecto.
Infraestructura, cepa, equipos, reactivos con el que se puede ejecutar el proyecto
Restricciones:
Disponibilidad y tiempos de entrega asociados a la adquisición de materia prima,
insumos materiales, repuestos especializados para el desarrollo de la investigación.
El presupuesto disponible se vea afectado por la situación hiper inflacionaria existente.
Falla irreparable de algún equipo que pueda afectar el desarrollo de la investigación.
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2.7 ANÁLISIS DE RIESGOS
Para el desarrollo del siguiente proyecto se plantea utilizar técnicas apropiadas para la
obtención de ácido cítrico por vía fermentativa adaptadas a la disponibilidad de equipos de
los Laboratorios de la División de Frutas y Hortalizas y Microbiología Experimental de la
División de Biotecnología de la Fundación CIEPE, utilización de normas venezolanas e
internacionales, antecedentes relacionados al tema y para ello se plantean las siguientes
actividades:
Muestreo de la melaza a utilizar como materia prima para ello se harán los contactos y
muestreo para la adquisición de las mismas, las cuales se llevaran a los laboratorios de
análisis físico químicos para ser analizadas y determinar su composición en el contenido
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de azucares reductores, no reductores, minerales y otros componentes que pueden ser de
interés para el metabolismo del hongo en estudio, como es la presencia de fósforo, nitró-
geno, entre otros, para ellos se hará uso de los métodos analíticos utilizando las normas
COVENIN o la utilización de alguna otra norma internacional o en su defecto la contrata-
ción de algún laboratorio que nos pueda suministrar el servicio.
Repique y puesta en crecimiento la cepa de Aspergillus niger ubicada en el cepario del la-
boratorio de biotecnología.
Definir la curva de crecimiento del Aspergillus niger, a fin de determinar el tiempo en que se
alcanza un nivel de conidios de diez a la seis, diez a la ocho.
Estudio de diferentes concentraciones de melaza como fuentes de carbono utilizando con-
cha de naranja como inductor para la obtención de ácido cítrico por vía fermentativa.
Evaluación de los rendimientos que arrojan las diferentes concentraciones de fuente de car-
bono para la obtención de ácido cítrico por vía fermentativa.
Definir la tecnología de recuperación del ácido cítrico obtenido del metabolismo microbiano
del Aspergillus niger.
Evaluación de la calidad, física, química y microbiológica del producto terminado y deter-
minar los reajuste de la formulación.
Determinar los rendimientos de ácido cítrico obtenido.
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Etapa de fermentación
Para esta etapa se utilizará un biorreactor el cual consta de: un frasco de fermentación de
doble camisa de vidrio con una capacidad de trabajo de 2 litros, dentro del cual se
encuentra un agitador de aspas accionado por un rotor conectado a un regulador de
velocidad de rotación 35 (rpm), un dispositivo de aireación que se conecta a una de las
válvulas de entrada del equipo, el equipo además cuenta con un sistema de recirculación
de agua para el control de temperatura, que puede ser regulado a la disposición que se
requiera, adicional a esto, se dispone de un potenciómetro el cual consta de dos sondas
encargadas de la medición de pH y temperatura.
Para la fermentación se preparará una solución que actuará como sustrato para el desa-
rrollo del microorganismo, que consta de melaza de caña de azúcar y de agua destilada,
se acidificará con ácido fosfórico hasta llegar a un pH entre 3,5 – 4,5 y se agregara nitrato
de amonio como nutriente según la ficha técnica del microorganismo, se esterilizará en el
autoclave a 121 °C, 15 psi, 15 min, una vez enfriado se colocara en el fermentador previa-
mente esterilizado. Se realizará un raspado de esporas de acuerdo a la cantidad con que
se desee para el tratamiento, esto se inocula en la solución sustrato y se inicia la fermen-
tación en las siguientes condiciones: temperatura de 28 °C y 30 °C, 200 rpm y 250 rpm
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respectivamente, aireación, por un tiempo ≥ 6 días. La toma de datos se realizara cada 8
horas durante toda la etapa de fermentación.
3. Desarrollo de los procesos unitarios para la purificación del ácido cítrico produci-
do por el Aspergillus niger.
Etapa de recuperación del ácido cítrico.
Una vez terminado el proceso fermentativo se separa el ácido cítrico del resto de
componentes del caldo post-fermentativo. En primer lugar, se separa el micelio,
compuesto por células muertas de Aspergillus niger, del resto del caldo mediante un
proceso de filtración. En segundo lugar se realiza el llamado proceso cal-sulfúrico que
consiste en mezclar el caldo post-fermentativo con una lechada de cal, lo cual ocasiona
que se forme la sal de calcio del ácido cítrico, el citrato cálcico, que precipita y se separa
mediante otra filtración.
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La solución de ácido cítrico es purificada por decoloración y desmineralización, este paso
envuelve una filtración con carbón activado,
Variables a evaluarse:
pH.
Temperatura.
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PURIFICACIÓN
Tras el proceso cal-sulfúrico nos encontramos con el ácido cítrico ya separado de las
impurezas del caldo post-fermentativo, pero se presenta en dilución con gran cantidad de
agua. Para obtener el producto sólido de esta disolución se efectúa un proceso de
evaporación y cristalización mediante el cual la disolución de ácido cítrico pasa a un
evaporador de doble efecto que retirará el agua necesaria para que en el cristalizador la
disolución llegue al punto de saturación y se formen los cristales de ácido cítrico.
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III. OBJETIVO GENERAL, OBJETIVOS ESPECIFICOS, METAS Y ACCIONES
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IV. RESULTADOS ESPERADOS (BIENES O SERVICIOS)
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Productos o Servicios Indicador de Efectividad
Prototipo tecnológico desarrollado para la producción de ácido cítrico Tecnologías desarrolladas / tecnologías
planificadas
V. LOCALIZACIÓN POLÍTICO-ADMINISTRATIVA
Estado Municipio Centro Poblado
Yaracuy, Distrito Independencia, Yaritagua, Independencia, la Morita,
Federal Bolívar, Veroes, Cocorote, Yumare, Yaritagua
Caracas
VI. IMPACTOS
6.1) Efectos a futuro del Proyecto:
Disponibilidad de una tecnología propia para la producción de ácido cítrico a nivel de 10 litros de fermentación y un
rendimiento de producción de 7 gramos por litro de solución.
Científico Social
Ponderación Metas Relacionadas Ponderación Metas Relacionadas
6.2.1) INSTITUCIONAL
M1-M2-M3-M4-M5-
100% NA NA
M6-M7-M8-M9
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Beneficiarios del Proyecto:
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Pérez, O. Ley, N. Rodriguez, K. y Gonzalez, E. (2016). Oportunidades de producción de ácido cítrico por vía
fermentativa a partir de sustratos azucarados en cuba. Revista Centro Azúcar, Vol. 43, N° 2, Abril- Junio 2016,
pp 85-99. Cuba.
Pérez, M. (1984). Producción de ácido cítrico. Venezuela.
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