Fif 11 1;; ;; ;; m111 ; 11 ttnr · :rt rrrnn::: me x nsunrrtsrtt'.

t str:ns , , 1nx:et:crr==

GUÍA ACTUALIZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC M~

·<;,.·rr.g.
~
d) Bandeado R: Los cromosomas son tratados con calor, y luego se tiñen con Gi emsa . El bandeado es
inverso al visto en el bandeado G o Q, esto _ _ _ ___
es. las bandas oscuras o bandas R (teñidas)
corresponden a las bandas claras de los
bandeados G y O. Se puede utilizar también
. - -- - - - - - - - - -~ - - - - - - .

¡· • l
cromomicina A3 , pero en este caso es
necesario usar microscopio

en los pares de nucleótidos G -C y C-G .

e) Bandeado N : Se tiñe con nitrato de

de
fluorescencia . Tiñe sectores del ADN ricos
B O~

~
~
\,
1

l
plata , por lo que se busca la presencia de
proteínas argentafines. . Las bandas N.
muestran sectores del ADN que contengan ~
organizadores nucleolares , es decir, las
constricciones secundarias en los
o
w
,-_ ¡;;;_·
cromosomas 13, 14, 15, 21 y 22. ~
,..J
w
8
¿CÓMO SE PUEDE ESTUDIAR
A LOS CROMOSOMAS? 2::::.
La obtención de cromosomas LJ
actualmente se hace por medio del cultivo· de
linfocitos de sangro periférica , aunque en si
se pude obtener de cualquier tejido. Para ello
se obtiene 1 mi de sangre heparinizada
(anticoagulada). Se la somete luego a cultivo,
en un medio esencial mínimo y 10% de suero, Mapa Standard de /Jandeado cromosómico de cada
junto a antibióticos para evitar que se cromosoma en el cariotipo humano. Tomado y modificado de
Alberts
contamine la muestra con bacterias. Luego se
le pone algún mitógeno (fitohemaglutinina) , las
cuales 'estimulan a los linfocitos a su transformación a linfoblastos en las primeras 24 horas. Luego , los
mismos linfocitos segregan lnterleukina 2 , que estimula su divi.sión . Es necesaria una temperatura de 37º C. Al
cabo de 3 día s, se agrega colchicina (inhibe la polimerización de microtúbulos, y por ende, la generación del
huso mitótico), por lo que todas las células que están en meta fase en ese momento, se detienen en es ta. fase.
Por último, se las somete a un "shock hipotónico" para separar bien los cromosomas entre si.
Una vez obtenido el material cromcisómico pueden hacerse varias cos as: o bien el bandeado, la hibridación
in situ o la fluorescencia .
Actua lmente se utilizan las dos últimas técnicas (hibridación in ~itu y fluorescencia) en una
técnica llamada HISYF (sigla de ambas). _Permite identificar una secuencia especifica de ácido nucleico,
detectada finalmente por una señal fluorescente (que obliga a usar el microscopio de fluorescencia). La
ba se del procedimiento consi ste en lograr que la secuencia buscada d el ADN se hibridice con una frecuencia
p reparad a in Vitre y formada por nucleótidos marcados con biotina o digoxigenina.

.. . ' L.~~::,~~Rlif.i.g~!Q,{:\;:~ii)trnlL~.~t~if9.iL ~ l rl}lf~7~_ ~,lli w~ce~.0 por ~ edi~ d ~Lc!-rn!.":s ~· Qb~i~nen.-·a pártir de Lina
·molécula , de ·ADN / ao s rmolécura s, n11a s/ de A DN idénticas entre s1. Su 1m portanc 1a radica en que las céldas
e ucariótícas tran sfi eren su inform_a ción genética a l~s c élulas l1ijas por medio ~:ie la . división celular de tal
m aner a que am bas C~!Wá.s'; hiJa's''.6?:r~1jg1íim~M9XR-.M.~J:fff; 1~ flliSrr)? i~f9~111-~c16rt g~n éticá '
El comienzo ·de la replic ac1on marc a el fin de la fase G 1 y c omienzo d e la fase S . Esta fase (llam a das
o Sintética) se carac teri za por sintetizar A DN e histonas . El fin d e la sintesis de amba s moléculas (ADN e
his ton as) marca el fin de la fase S y comienzo de la fas e G2.

La R eplicaci ón d el ADN nuclea r s e da s olamente en la f as e S, y dura aproxima damente 7 hora s .

CTO M EDICINA - Junin 8 8 9 - T el/fax : 0 1 1 5237-4 034 histo _argentina@c tomedlclna.com

- 22 -
•• GUÍA ACTUALIZADA DE. BIOLOCIA CELULAR BC .9.; r,Q,
/14•~~

•• CARACTERISTICAS DE LA
OUPUCACION DEL ADN
1) ES SE_MICQNS~8ILVA: Esto signific;:,

••
que al final de la dt.Jplicaci6n ffill~uuoJ.é.c.ula
~jja . teri:dra . uii.á' .·füOleGUla : . qfjgfr,~_l.. J __ _
~_t.)8
[1')0l~~uléLL~\';jenleménte•·sintétiiáda . De est;;i

-•
manera , al final de la rniiosis·, cada célula
hija recibirá una hebra original de 12 madre y
una recientemente sintetizada para C.!\DA
MOLECULA DE ADN .

•
2) ES A§.IMETRIGÁ: Como el AoN selee cíe 3 ·

--
ª-~· y-·exl'ste~- dos cadenas ·á-ntí°paraiélas,
a·quella cadena que va de 3 · , a 5 · SP.
sinté~iiará.. de manera ·continua;' mientrns
que la otra ·•cader:ia :·:-.lb deberá haéer por . _j

--
medio del uso i-de· ·, frpgtnentos de ADN
llamados Fragmeñtos· cié ókazaki.

3) ÉS BIDíBJ;C_t_Ló.NAL: El ADN. .· se puede

sinte!l?,ar tanto de 3 :. a $'· (sintes.is· coofüiuJ:i)
9omo· de 5 .a, 3 '7por ~meaio· Oel usoae- los

•• fragmentos ae .Okazaki
dig:ónti!:!_Ua). Es conveniente aclarar aquí
(slr:ij~_&_
i_s

--
que la síntesis no • arrahca desde los
extremos de la molécuia de ADN sino ··e n
múltiples sestor~~ \) iiLiy; élefinido~ llamados
Orígenes de·Replicación .

-- 4) ES Afilli_GB.QN.LdA: Cada uno de los

orígenes de replicaciór:, generan ól.l.rbuja~di=
~¡::¡licación , que son segmentos separad.os

--
de ADN . ~áriéioñ'.'éie...la:i_.Q1,.1t\:>Yiá.s....se.._da
eq~.9mentos : ' distintos. Nunca al • mismo
tíempo. De allí que se t,abla del
asincronismo de la duplicación , ya que las

--
burbujas no aparecen al mismo tiempo.

La duplicación del ADN es Semiconservativa, _,.

~Ai'
Bidireccional , Asimétrica Y Asincrónica ·t ~.
·' ) i]i.!

•• p AS DE; AON comienza a. · duRlicarse cuando

aparece el primer ORIG·er:t·~-~ -R~PLléACION . En .
:(;•'.'
•.

•..
el ADN , hemos dicho , existen múltiples Orf~enes de Nueva Antigua Antigua
ADN , a razón de 20 a 80 por cada lazo o bucle de
cromatina . Recordar que lo orí genes apare_c_en .e,n tie~ P9..~. Q_isti~tos ,(9.€! a,hi. su a~incr9n[a) .
Un órigen'·de··Repli~agiq.t í'.~~~!á,;f§(.a já~.C?, por:c_
i~r:ito~ei oa'sestcfd~::v~Han'Í~éfü:sü~s~lt_e'fioiá'entre un

•
origen y otrcf Si e~bargo, icfi:la~·'loif óríger\es pr'eséntar(sé'éue'ricías·'cons"erv~da~ di(12-í,úéleoffd6s llamados
ARS (Autonqmous Replication Sequence) . ' · · , · -'.• , ·', . ·

•• Los Orígenes de Replicación , al abrirse considerablemente (separando as[ a las hebras de ADN)
forman Burb~jas de Replicaciqn .. Su tamaño aurn~nta . ~ r:n,~didJ1 ,.qu_E! _se vari s~parando ,l¡¡¡s hebras. De esta
nera uno · efine ue · Cl\tftÍf•sURBUJA DE REPLlcJAC'fq_r?j:sf:Ál'·" p0~Mt{oA·,"pl1'1r:bo'~\:~oRóUiLLAS

•• ;: ~!=PL19.~,;J,9t-!,
y el tronco a 11.
JeJ8[{11,f.;~~ y
:,t~\f~,,Y,: -~~y~if dos br¡izd~'}t!B'r~i~m'JWa!i~'s'E~'d'~ñ-átcii'AoÑ'y~·-~~parádas .
doble hellce ~n v,as de separación .

Una Burbuja de Replicación está formada por dos Horquillas de Replica~ión

....
• - 23 .

.. CTO MEDICINA - Junin 889 - Tel/fax : 011 5237-4034 hls to _arge ntina@ctomedicina .e om
GUÍA i\.CTUALIZADA DE BIOLOGlA CELULAR BC .9-:;r;pl
/t,-1'~

Entonces , solo resta definir que cada origen de replicación está conformada por dos horquillas de
replicación, y tal cual se muestra en el esquema , desde un punlo la duplicación comienza hacia sentidos
dpuestos, J,mo ..bfü,!ª--~--_ g§_1ª_heºra a_@_g!Je estª .QIJ.Pli.cand.Q. Y..Q!rn _b.acia 5· de la misma,_hJ~pra. De esta
manera, CQr.!1pre~nªir:!J9 §_.9_!-!~.@ii:-rñL~f!lé!.. fi""ét>r~-·es !:¡ir:,(etizig~ "fiái;iá 3•" y"Háéiá:_5.:,-depéñd,endo ·de la horquilla
de replicadóñ en : la que se en~úeñfrf_- E~ c,:ór:,ven iente definir que ·e1: M:SmJfütqj de.-Aé:>t; r q!,I~ ; se sintet\za a
-p~rtir _d~·-v_,i\q~rjgerj·•o~~(~pll9~-~j~rt~~U~Pl ª ';B.~plicón:

Un Replicón es un segmento de AD~ -,,.Je sa sintetiza a p;;irti r de un origen de replicación

La separación . de \as hebras -9..'~LAQ~ .~e_9_~_P.9r. f:!l~Q~º el~_la:é!.C~[Q.!1 de la erJzima H~Ug_~ª• la cual va
separando .idás hebras· ar romper la_s,üñfonei·s -P';Jéntes de h1cffóge-nos--eñire lair bases cornpleme·ritarias . Para
evit~r que vuelvan a :unirse anibas: tíebras separadas , unas proteínas ácidas llamadas $5B (Single Strand
Binding proteins) se unen a cadª hebra evitando así su acople. Al unirse, sin embargo , dejan libres las bases
de las cadenas , y peíf!1_itef1 qu~ se ell,~9ª sintetizar la copia complementaria.
Dos erizinúis'~' ía T qp qisom ~ra~ ~ 1 y Topoisomerasa 11, acl~9...n_ imeidiendo el superenrollar:nli:mto que
se prod uc;;e_~ lif~~~illQ!lar Jªs'h'ebra~e:-AE}t:t:-uTriiJ_r1µye71acr asr ra·rensídñ·tors1onal que se proaucé·efriTa doble
0
hélice del ADN-·a1~~re12~r-~~érs '~ 0'.~~~iid,~'ri"as:1tor la· ~cción de la .Helicasá Esto se produce porque la forma en
que gira y se dispone en el espacio la molecula de ADN hace que al intentar separarlas , se produzca un
superenrollamiento cada vez mayor a medida que se va abriendo . Para evitarlo, amba$ enzimas actúan en
tres -pasos consecutivos: -
1) Cort~n. al ADN en segmentqs específicos,
2) , permiten su desenrollamiento,
3)" Luego las unen nuevamente . .,
· ·~ j

. La Top~~-~?."-1W~~rJ -~,~~~~~n~~-~~~- s_ola Y luego la une, y la Topoisomerasa 11 (llamada tambié~ ~saL

co~ amb~s- ~f:bras y'Tas v~~!~e· a llg_ar: : _

Las T~¡:,~i~9.m~~asas act9an P.!'!11_1erc:> 1:=omo Nuc_

l easas y I\-Je~o·éomo' L;jg~sas

Entonces , veamos un resumen de las.enzimas y proteínas que actúan hasta ahora:

1) Helicasa : Enzima que rompe las uniones puente de Hidrógeno que unen a ambas hebras de ADN , y
- permite el separado de las mismas ;
2) SSB : sigla de Single Strand DNA Binding , son protelnas que se unen a las hebras de ADN recién
separadas por la Helicasa , y que impiden que se unan nuevamente ;
3) Topoisomerasa 1: Enzima que corta una sola hebra de ADN , y que la vuelve a unir luego de permitir
su desenrollamiento. Por ello se define que tiene una función doble , ya que primero es Nucleasa
cortando una sola hebra de ADN , Y luego Ligasa al unir a la hebra cortada. · :
4) Topoisomerasa 11: T~mbién llamadaj}g_asa. Enzima que co~~ ambas _h ebras de ADN , y que la vuel;e
a unir luego de permitir su desenrollam1e_n to. Por ello se de11ne que llene una función doble, ya que
primero es Nuclea sa cortando a las 2 heb1as de ADt'-l , y luego L1gasa al unir a las hebras cortadas.

SINTESIS DE LA CADENA CONTINUA

La cadena continua ~~ -:;intetizá ,; una vez empezatlo sin interrupcione_s o cortes O segmentos . De ahí
su nombre. También se la llama ~D,M!,,..AN"f A0A pues es _la primera en empezar la siniesis en la horquilla ,
diferenciándose de la enfrentada dentro de la misma hor~u1lla_que se ll~ma RETRASADA por comenzar luego
de que la adelant ada haya comenzado. La retrasada se sIntetIza a traves de los fragmentos de Okazaki
~8 .
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 --
GUL<\ ACTUALlZADA DE lHOLOGIA CELULAR BC q _,[1';0.
/vf'~

-- La.:i;ao~CT~ ..q\J_~ _s~ sint~tiz~ de manera, continua es a~uell_ ci que iie.,;:me .. d~~-:r.:.a:ó;J<-,Y que se,..sintetiza ,
entonces d~ .$.. ª·3 . Es decir, la cadena original se lee de 3 a 5 , y la cadena que se sintetiza complementar,a
a e lla s e sintetiza de 5 · a 3 · . Los pasos son los siguientes: ... ---.

-- 1) Síntesis del Primer: El Primer o Cebadar e5__1Jn~~R'll:Ll!f[~!?!'!P'~ ~;AR-N:})le 10 nucleótidos_p_e longitud

complementario al ADN, Este cebador es ~intetizfüo·pOf1uniFeflzimá::namada.,,tl(@N Primasa (que es
una ARN polimerasa especifica) . ' · ·· -·- -- .....,.....,.- -~--- -..--"• ···· · ·•· ... .. .. · .. -- -·

-•
2) Agregado de desoxirribonucleótidos A continuación del primer comienza-;i a agregarse
desoxirribonucleótidos (dATP, dTTP , dGTP , dCTP) complementarios a los nucleótidos de 1a ·cadena
madre . Esta función es producida pcr In enzima ADM Pdlim_erasa.,P,¡0 Del.ta, qtJe va :•agregando a los
nucleótidos _en el _extremo 3 · de la c::1de11.; que se esf.á sintel'tiza11do. Estó continúa hasta llegar al
extremo del replicón .

•• La cadena continua requiern de un único cebador

La enzima ADN Polimerasa O es una enzima de naturnleza ácida . Por eso, es comprensibie que se
tJ primer

..••
tienda a separa~ dE:!jª·-h13b~a del ADN que está leyendo para sintetizar su hebra complementaria . Ello no ocurre
P~_E:s.. _
~isté'.''t 1n:;,,farjiJ!,q,1,;,~i,9l~J#J;i~fü;:i~,~1_
ig,;¡!,',:.adi:,·iAR:t:J.,,8.9,U,t0,$:i,ti1,~?'.~l?~~:¾t_ai)i![Wi6ra1r;!lli.Plé!~M,€U~so:;·seP.aración;'· y
permitiendo asi· la ·siñfes1s~·de ·maneraconlinua-cfü'lacadei1aauelaritáda~<:té'AON.' Este anillo' protéi~o. llamado
\?CNA) (Proliferating Cell Nuclear Antigen) está compuesta por 3 subunidades que al e'h~amblárse forman un

.. anillo deslizante que permiten que se mueva pero impiden su deslizamiento .

:.._\,._ .

La ADN polirnéras~ -□ no se separa de la c..idena c;onlin_lici grii~ias a la acción de fa PCNA

...-. 5'
-Cadena Adelantada
_WN Polirnerasa D

.... Helicasa _
Topois01nernsa

-.-. ' ¡'

ADN Primasa
. Cebador __ , -_ /:
1 ¡.
. ...,.~-~ '';¡{¡ ' 1 • '',1~'<~•••,.
lf~'((1 . ;. ·=::

.....
s· · ¡ i~ ••

'· 1 - ::r / . . s:m

:· - F~omento

......
ADN Polimerasa Alfa de Oka:zald

.... SINTESIS_DE LA CADENA DISCONTINUA

La cadena discontinua se sintetiza , una vez empezado con interrupciones o cortes o con la formación
de segmentos ~ fragmentos llamados Fragmentos de 0kazáki. De ahl su nombre . También se la llamn

....
RETRASADA pues debe esperar a que la moléculél de ADN se abra y la ADN Polimerasa O sintetice la
cadena continua ., diferenciándose de la enfrentada dentro de la misma horquilla que se llama ADELANTADA
por comenzar primero. ~a re~ras~da se sinteti~a a t~avés de los fragrr,,em?s, d: Ok~z?kL . -· , . . . . .
La cadena que se ,s1ntet1za de maner~, ?1scon t1nua es _aqu~ll_a que se l!;!e):te ,5., ~ ...3., '.' ql.le se__ ~mtet1za ,

.....
entonces de j _- a-p ·. Es decir, la cadena or191nal se lee de 5 a 3 , y la cadena qu_ e se sintetiza complementaria
a ella se sintetizá de 3· as ·. Los pasos son los siguientes:
1 ) Síntesis d_e ~n-~~b_,y;iQr:.,,_,~ste cebador no se ubica en el extrem? inidal ?el replicqn; sino que lo hace
a 2oo · nucleótidos ~ada ;r; De esta manera quedi:! un segmento de ADN expuesto entre el extremo

.....
cléi-~·¡:)1iéóñ y·e¡··Prímero Cebador; es sintetizado por la l\f:2t,t f?rJn:H!Sé?_¡>·
2) Síntesis del segmento de ADN existente entre_.~! ef\r_~!l78,i'.1~¼f.~P,licóríW::J~Le:~.P..asiJ>J.. ~l>.lo. .lo..ha c~.l;:i
enzima ~PJi:if~-1in;~r~.§~.._A o Alfé'.i. Esta en~in,a _16·hacei· arrnnc ando ;~1~~ \3!1_}t~~~q~~~~ c[9,)I
e;,:tr.eJJ).Q___g&.,í~E~c,2.n_; De esta manera , term_ina leyendo ~1-~b-~,'-~?e ~ -~:.::'_;· ~~~ :?':
-.F,~fül~o:'~~~ -Qt:!.

....
sintetizado es llamado~F:ragrnento .de k1. La ADN Pohmer'as~·Atfa ha t1ehe anillo proteico PCNA.

- 25 -
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 -•
--
,2 .-rr .a,
GUÍA ACTUALIZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC /f/1"~><,&t,

-
por lo que luego de un tiempo se separa de la cadena madre de ADN , y sintetiza asl al fragmento de
Okazaki. ·
3) l-)1Ú1~v.ez...t~rrqinada...d,e.~inletizar·el segmento de ADN lnterp\Jesto entre el p~irn~r c ebador Y el extre m o
5 ' de la' 1·horqGilla, u11 ~~gumt9 primer es sfntetlz_;do a 200 nucle.ó tidós' haéia '3 ' , quedando a hora un
espacio entre el prinier cebador y el segundo recién sintetizado. (ífJ
4) Nueva sintesis de un fragmento de Okazaki entre los dos cebadores.
5) Y asi continua hasta llegar al replicón contiguo.
~
DESTINO DE LOS CEBADORES ~
Todos los cebadores o prirners son fragmentos complementarios de ARN , y corno ta l no pueden estar
en la molécula nueva de ADN . Por esto , deben ser removidos . Este trabajo lo lleva la ADN Polimerasa Beta o w,a
ADN Polimerasa B . Los pasos del reemplazo son los siguientes :

"'
1) ~~-~g.<:l~ge lg_~_cebadores por parte de una·J:!y~~i!!H!..rnmmicirna ·
2) Sihtésis .del espacio !ibr~ por parte de la ADN Polimerasa B o Bet~
~

--
3) Acción de la ADN Ligasa para unir todos los fragmentos separados de las distintas partes de ADN
• sintetizado de manera discontinua.

ENZIMAS Y PROTEINAS PRESENTES EN LA SINTESIS DE ADN

1) ENZIMAS
►

►
Helicasa: Enzima que rompe las uniones puente de Hidrógeno que unen a ambas hebras de ADN , y
permite el separado de las mismas;
Topoisomerasa 1: Enzima que corta una sola hebra de A.DN , y que la vuelve a unir luego de permitir
su desenrollamiento . Por ello se define que tiene una función doble , ya que primero es l'lucleasa
cortando una sola hebra de ADN , y !uego ligasa al unir a la hebra cortada .
--
wP
.,.
w=-
► Topoisomerasa 11: También llamada ligasa . Enzima que corta ambas hebras de ADN, y que la vuel'le
a unir luego de permitir su desenrollamiento . Al igual que la Topoisomerasa, tiene la doble función de
Nucleasa (corta ambas hebras en este caso) y Ligasa (tas une):
w='
►
►
ADN Primasa . Sintetiza el primer o cebador, que es un fragmento de ARN complementario;
ADN Polimerasa Delta : Sintetiza la cadena continua de ADN ;
tlF
►
►
ADN Polimerasc1 Alfa : Sintetiza los fragmentos de Okazaki;
Nucleasa reparadora : Remueve a todos los cebadores ;
wa
► · A□ N Polimerasa Beta : Sintetiza el ADN que reemplaza a los cebadores; ~
► ADN Ligasa: Une todos los segmentos sintetizados por todas las ADN Polimerasas.
íiP=
2) PROTEINAS
►

►
SSB: sigla de Single Strand DNA Binding, son proteínas que se unen a las hebras de ADN rec ién
separadas por la Helicasa , y que impiden que se unan nuevamente;
PCNA: Anillo proteico que se une a la ADN Polimerasa Delta e impide su separación del AON molde 0
patrón .
...
ÍIP'

íF
ADN TELOMERICO
--==
En la cadena discontinua a nivel del telómero se produce un evento muy significativo oara el
envejecimiento celular. Al llegar al extremo del . telómero, la .A_ON Polimerasa Beta no puede sintetizar el
--=
segmento de ADN que queda luego de_la emoción del ~rimer removido por la nucleasa reparadora. De esta

--=
--..--
manera , queda un hueco que debe cubrirse pues qLJedana acortado el telómero.
Para evit~r el acortamiento prematuro en cada ciclo celu_lar, un complejo multienzimático llamado
Tt½P~J~~AS.f) .~!me,~,-~~ ~I .~~gme~t:;i :f¡:¡_ltan~e-.y• !pego la ADN Pollmerasa °-~'~ªt~intetiza ·1a ,bebra continua
complementaria a·la d1s·cont1nua rec1en .s1ntet1zada por la Telomerasa .
Es conveniente aclarar que existe un juego entre lo ·q ue ·no se sintetiza inicialmente por la ADN p .
. o 1rmerasa.
Beta y lo que rec upera
. la Telomerasa, de tal manera que siempre , al
. final , el Telómero se acorta en ca d a crc
. o
1
un poco . Esto es importante pues se ha demostrado una relación muy fuerte entre el acort • t d
· · · · t 1 am1 e n o e1
telomero y el enveJec 1m1en o ce 1u ar.
aii
DATO: La eucrom atina se replic a tempranamente en la fase S, mientras que la heterocromatina I0 h á
· ·
tardi amen t e. Asrmrsmo , 1as b an d as R se rep1rcan
· en 1a primera
· ·
mitad, ·
mientras que las bandas G lo h am s
ace (a ¡
durante la segunda mitad. YO cen
DAT02 : Las histonas se sintetizan en la fase S . (-
(ali
o
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(-
hlsto_ argentlna@ctomedicina.com
' (aa
 GUIA ACTUALIZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC ·$ 'T,&,-
/14_,ecc,r,c,,e.

DATO3: La energla necesaria para la unión de los nucleótidos entre si proviene de la hidrólisis de los
desoxinucleótidos trifosfato cuando se Linen .

Constantemente el ADN se ve expuesto a agentes que produzcan algún daño o mutación, de algún
nucleótido en la secuencia . Para ello, existen vari os mecanismos reparadores que evitan que el ADN
finalmente quede dañado.

" ADN POLIMERASA

z■ . Presenta una ªftlvid~d llamada LECTURA .□ E PRUEB.A . Esta e~.f irr,.~,,~s:¡t:ap:3:t: de reconocer un ~rror
al 111sertar _eqlJLv9cadc!m,ent~ .a. un nucleótido. Cuando esto sucede, d~li!:f0~ l~',~l,hf(isis;·:~etrélcede, y a partir de
una actividadi éxonüdeotidicá;;cotta el nucleótido erróneo e inserta el"i:l'ófrec!lB:·'' . .

■ ·-o· NUCLEASA REPARADORA

La misma nucleasa que remueve los cebadores es capaz de reconocer un error en la secuencia de
nucleótidos que escapó al control de la ADN Polimerasa . l;:sta ,e nzima 1 r.e.lJ1_\!~Y~!~~L.c;i..l~s::.1:1.ucle.◊ U!::los
■
C;!q',JiY.ocado_s. Luego, la ADN Polimerasa Beta sintell..:a el segmento ·f_:1ltante; y,_ñnalmer:ite la !\DN Ligasa los
une a los segmentos.

DESAMINACION Y APURINIZACION .... ·f::. .... ...

Sabemo~~ªu~e~~~~m~:=~ªe~ª ;~~~~i~i~:¡
~i~.ép~~i~\~~É?s j1 :
1
!~~~:1
f * f ¡ ~ e J ~ t J /~ f ! i 1 i ~ ~s~
llevada a cabo por una enzima llamada•ADN'J~.1J~;toJ~!L~l1t, que corta la unión entre la dJsi:ixir'ribósa y la
base nitrogenada , y remueve as! a la ba'sé 'anóm.ala, dejando al nucleótido sin su base. De igual forma , otra
ADN GLICOSILASA remueve las hipoxantinas surgidas al desaminarse las adeninas.
Como consecuencia de todo lo explicado, quedan nucleótidos sin su correspondiente base. Estos
sitios se los reconoce como SITIOS AP (por APurinicos o APirim ld icos) . que son removidos de la cadena por
una enzima llamada AP ENDONUCLEASA que cc·rta el extremo 3 · del . sitio AP , y luego una
j E FOSFODIESTERASA corta el sitio 3 ·. Finalmente. la ADN Polimerasa Beta sintetiza el nucleótido correcto, la
ADN Ligasa une los extremos separados .
¡ E
¡
,..
E NUCLEASAS DE LOS DIMEROS DE TIMINA
. Existen mutaciones donde se producen Dlmeros d&· Timina . En ella , dcn~f:\P!A.1l~9 ~f.ficit . vec;inós ' de
Timina se: unen .entre .sL de ~fo rma · covalent~¡ impidiendo la unión comp:ementaria con la cadena enfrentada .
'
' •· : :·,· ,:. . · •,·: ,;,. ,:).-.-·");,i.:' ~"7;y ,:;:,,'(i,.{•.,'·.J, ;, . . . ..... • •' ' - •

E~ ~o habitual e~ qué e_ sta ·m ut~c1órj: J ~r.qdu~c~peF •fa.;aGo~:}.~

7 b~-~;8 :'1C.~Y-•.~~~ta¡~ L_a _r~ji:laración es ll~vada a
cabo por varias enzimas: pnmerq qos enzimas .NUC.LEA':5~Jq□~\9.~ílafl:-Un ;,S egm é rita ;H~, 2~ nucleó.t1dos, en
J donde se encuentra el. dlrnero, c:te-Timimr·t:t!ego--la-:-J,'l't,N} Helicas~4 ~ep~_ran ~ ';:dicho., segmento, 1.a ADN
J E -~IJ.tti_~t ii.sa sintetiza el segmeiiló fáitante, y finalmente iªJlga~.~~Úrie lo§ 'éxtrerrios sepífrádos'. .

Jf
•• Es un s_~tt~&Jl~l/ í.(l~t[~f~ R.~,,i.'!~.m ,.~W!?f~.11~. ~ue puede ~er único o múltiple, visible o invisible , y
que esta en ·relac1on·'d1réctá"'al' estaclo metabólico y func1onal_cd_e:J~) ~~l1)la. Ya veremos que cuando una célula
sintetiza proteínas , el nucleolo es evidente.
Ullraestructuralmente consta de dos grandes componentes :
· ·· ·· ··

► Asa Cr'ó'.ITI atínicar1c::i:,rtMp9_nc;te,.ª'· ADN que forma la,,c;:ror¡;,~tillé;l' de':!as

los cr.ófn'ó'sófu'aii :t.:f(+MHt 1f y 22 · ,. · · ·· " ·,.is•,;,, ,. · '1•· ' ·' ;constricciones
.,,. ' ., ·•· · •
secundarias 'de
· ·

-- •• ►

►
Ri!gió~ ·,¡:rBi=ll'~f~•l trHm ~'a¡j¡'::&W ~1 'ci:ntro , donde ~,e_~~\r!~\iz: ., - .. - ,~ 4 5.;,4S. (transcripto primario de lo s
AR Nr) . Tien_e l_ugc1,r_.f.H~}}?.~.~-ién !os) 5timer~s P,á_~qs~~~t ~ · ;a~íetifüt;_q-ofüieHJ!}.;:¡\l~rn~~es que
codific~n 'ál ~ RN ''.45' S/ m61~f.~las de _ARJ\Jr( fá ctorei; :d e:ff~r;ls~r:T~~(6füt/~~N.:.!R_9 lti;ñ~Jjh \:~Jf
Re~ión qran~lar: De . ~~~,a.~j~~ ,:_g~~f,~r,ic:a, Aq~I, ,~~?1;.e t\~O'e}TI~~'.};11.tr .i~*~}~~~~~/\~cp~qr:n_~les.r,'i!n
>

-- •• ►
di~~!,11t0S ~~tª}/lq~1e';l:;V,• procesamiento. Hay tamb1en 'AF.{~·2asprocesahcl~~ .
Matriz Amorfa nucleolar

CTO MEDICINA - Junin 889 - Tel/fax : 011 5237-4034

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hlsto_argentlna@ctornedicina.com
- 27 -
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<S,-T....:,.O,
GUÍA.ACTUALIZADA DE BIÓLOGIA CELULAR BC ,;IC4~

Es conveniente saber que los ·genes que transcriben al ARN 45 S se encuentran en el A.DN de las
constricciones secundarias de los cromosomas 13, 14, 15, 21 y 22 . Cada uno de estos grupos de genes se
llama Reglón Organizadora Nucleolar (u Organizador Nucleolar).

FUNCIONES DEL NUCLEOLO

t i'l~!~p-,,!n,~it?~i~,\~~~;t~i~,foQ ªJ~ü1ij~!s~~fi·a~ls~•i~~s9~a psroc!uce c~m.o trar!~fr;ip..\~.,P!i_~,ª,nq_~-~~,4ss
->:', " , u:9 .. e ~aI,\P.&1:1m ,.yc ·los, .· · ·. ,,.2 y .
►/\~~~l#\~l~J.~
. '· 1,., ,
.:f'.ª,;,Jr~z~1~,\.1::,•, ,· , :;iH~R~Rmili~
P.r... , .. ,Q~,. ;• -•!i:-,: ,,,.,;.,•m.,,,..,,·,,.•~~~·ca'dá~
c·on·••;;s'•··~'-o téf ' s''r"h'd'só ' ' ~;:¡ -
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n-'a"tfe ·ras s
· ubu idade
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:(~O ,s . y 4_9,J~). ~, ':l!* :t9:f ;y.9ff~~P.°'l~i~ntes A~!"r
.,,_., ...• . ., . ., ,. . : .. n. ._.,. s ,

DATO: Las subunidades ribosomales no salen ensambladas del núcleo, sino que salen separadas . Esto
puede conseguirse porque las subunidades salen inmaduras del núcleo, evitando así que se unan a un ARNm
a nivel nuclear.

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CTO MEDICINA - Junin 889 - Tel/fax : 011 5237-4034 histo_argentlna@ctomeói,~i , ,.a.com
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GUIA ACTUALIZADA
DE BIOLOGÍA CELULAR

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1
1 .

GUIA Nº 3
.,a¡
--=1

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,

Genes - ARN - Transcripción - 1

Procesamiento ·de los ARN _

·R egul~ción de lá transcrip·c ión
...
Mitosis y Meiosis - Ciclo .Celular
Contr.o l del Ciclo Celular · --..
lfl!

l...iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiii . .

--
11'!
 ,~TT;-:9;,
j GUÍA ACTUAIJZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC . ,,,r,recbor -

••
•• EIARN

Elqen
Tioos de ARN
4

•• Definición de qen
Cornoonentes
Transcripcion del ADN
4
4
5

•• Reauisitos para la síntesis de ARN

Características de la transcriocion del ARN
ARN mensaiero
Gen del ARNm
5
6
6

••
6
Factores de transcripcion 6
Procesamiento del ARNm 6
ARN 45S g -

••
Gen del ARN 45S 9
Factores de transcripcion 9
Procesamiento del ARN 45S 9
ARN SS

•• Gen dei ARN 5S

Factores de transcripcion qel ARN 5S n

••
•• Control de la ~~presió[l..;-Q_g._nica _;;·:. 10

•• Traduccion del ARNm

Consideraciones previas
Introducción a la síntesis proteica
13
13
13

•• Etaoas de la síntesis proteica

Chaperonas y oroteasomas. El rol de la ubiquitina
Destino de las proteínas
Antibioticos y toxinas
14
15
16
16

•• El ciclo celular
La interfase
La fase M del ciclo celular
17
17
18

•• La mitosis : El proceso de division de las celulas somaticas

En centrosoma v los centriolos
19
19
20

-•
Ciclo del centrosoma
Las fases de la mitosis 20
El huso mitotico 22
La meiosis : Division de celulas Qerminativas 22

-- Las fases de la meiosis 23

27
Consecuencias de la meiosis
27
Control del delo celular

--
--
at
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8f
histo_argcntlna@ctomedl cina .com
• 1-
 GUíA ACTUALIZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC
Finalmente , la tabla muestra que existen 3 codones que no codifican para ningun proteína , Y son
llamados codones STOP , SIN SENTIDO o DE TERMINACION . Ellos son UGA, UAG Y UAA.

Luego de lo antedicho, queda claro que :

► De los 64 codones, 3 no codifican para ningún aminoácido (UGA, UAA y UAG). •
► De los 61 restantes, dos codifican para un ¡iminácido cada uno solamente (AUG para Metionina , UGG

.
para Triptófano).
► Existen 20 aminoécidos esenciales en la naturaleza .

1('.~· r..
A partir de todo lo previamente expuesto, se saca en conclusión que quedan 59. codo~es para los 18
~mmoácIdos . u_~ .r,~~tan... . •
e ij . _'' · . ...;, .
. . - ~.,tiay. m.aygr_.~antidad de codones que de ammoác1dos, por lo que
~ . ·' '1-,"!ü imii°E8'~texceptuando o~viarnen,t; .,~. ~UG,-~. ~-)?,~ ,9~e
codifican para Mehonma y Tnptófano respectivamente). A esto se lo llama G~~~iltRAaí®~iiifüf~codones
t,i,•t~•u.m.~,Ji:!J1,m~)¡~Hn:én.imi~-
sa define como degeneración a la posibilidad de un aminoácido de ser codificado por más de un
codón. Por ello se dice que el código ge_nético es degenerado.

Ya veremos más adelante que el ARNm se sintetiza inicialmente como "transcripto primario" y
luego, como veremos en detalle, sufre rearreglos formando el "ARNm maduro". Tanto la slntesis como el
procesamiento ocurren en el núcleo y luego es transportado al citoplasma para realizarse allí la síntesis .de
protelnas . ···
Como características sobresalientes del ARNm, resta decir que:
Se trat~ d~ un eollmero monocatenario de ribonucleótidos
En el liiÑÍre~ muestra un ~ ~ m e l i l<i'gi1ancisiha , llamado í~ , Este capuchón protege al
ARNm de las enzimas ~iiküiaás;
En el E:,:dteftfd~ pre~erita una semIftft@Ntamente r~p,~tida,'41e;;'¡:¡ualeólidos1de.,Adeniria, llamada P<'Dl:l·'A · su
función es darle e~tabilidat.,a,l.,.meléeutatdeARNPh.
En eg§ii!jQftles, eI "-?M,_ llevá . la información par~ la sintesjs;..~.sala~pCQteioa, osea que es
M@NfJft!fijfi{¡!elIC O

ARNr (RIBOSOMAL)
Existen varios ARN ribosomales (ARNr) de diferentes
tamal'los que, como su nombre lo indica, forman parte de los
ribosomas. Los ARNr se denominan (según el coeficiente de
sedimentación en gradiente de sacarosa) como: ARNr 5S;
ARNr 5,8S; ARNr 18S y ARN 28S . Se encuentran en los
ribosomas, y representan el 50% de la masa ribosomal. Los

~=t=~~!~ln:FrAW~~~~~
~ilá!' Estos ARNs no son meramente
estructurales sino que cumplen roles catalíticos importantes en
la síntesis de proteínas.

Los ribosomas son . organoides ciloplasmálicos

compuestos por dos subunidadt;!S, llamadas Subunidades
Ribosomales Mayor y Menor. Están compuestas por:
► Subunldad Mayor: ARNr 28S , 5S y 5,8S y· 50
proteínas llamadas L 1 a L59 (por Large) ;
► Subunldad Menor: ARNr 18S y 34 protelnas llamadas
S1 a S34 (por Small).

Todas las proteinas ribosomales , tanto las S como las L,

son sintetizadas en el citosol en polirri!:)osomas libres . Un
péptido sel'lal marca su destino en el núcleo, y son llevadas al
núcle~\para ser ensambladas junto con sus respecti.vos ARNr
para armar ~ las subunidades ribosomales. Dicho a~pJJ¡j_ g;·de·
181f"~i,.á!!re?t'Heisifr1pt"'ódl'Itf~~1eti~.

86
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 GUÍA ACTUALIZADA DE BIOLOGlA CELULAR BC

Los ARNr tienen dos orlgenes:

,e J ► Del ADN nucleolar: Corresponde a lo:-; ARN 28S , 1BS y 5,BS;
► Del ADN extramicleolar: Corresponde ni ARNr 5S.
E
1';!1~-= ========:i.=~:/r-~:~
it~;:~,K~
J\:~~,~-~f.,~~~
ARNt (DE TRANSFERENCIA) ó.Zl-oH'
Son moléculas de ARN pequeñas de 70 ·i.1
a !.-.t.. ....
" .
a 90 nucleótidos de longitud que funcion an S' ,:: . .... ,.,
r;

...' •
como adaptadores en la síntesis de proteínas . 1
Presentan una característica forma de trebo! de '{-: ro
-:,¡
11 .4 hojas , donde cada hoja se llama Loop o As8. !•CJ"•
1
Ellas son: . ),.;ir, ...:\-:i, \1
1) Asa O: Contiene dihidrourid:nas
J,Jcafon.
tü ,.,..,...
,'-;✓ • Se,ónu,-t.
ar1

2) Asa Anticodón : Contiene el '•iplele de ·..::~ _;•., "' }-_, . ;- : 1\:/C !c cp

ni.Jcleótidos llamado anticcdón. Es

1= ~
Cl locp ~ - ' - '·""-'- ü.Z:ll"t.l.'.":Jl,::..J.!~~-,-. .
1 . complemetario a un codón d~I ARNm
3) Asa T : Contiene ei trinucleótido Timina -
seudouridina - Citosina (T '-11 C)
4) Asa variable: Se llama asl porque es de ;- rJ

•
••
distinto tamaño en cada ARNt

El ARNt se une , por uno de sus "loops" 1

o asas, el loop anticodón , a un codón especifico ,
del ,A.RNm (compuesto por una secuencia de 3 ¡'
"--y-_.,.
.',J·. ;t:,;_trl-:.,, 1
Arrl'codcn f:,op

nucleótidos) y por et extremo 3 · de !a cadena, a i;;;;======================-!I

p un ar:ninoácido determinado, específico para
cada codón. De éste modo lós;P.,8,l}J3q~_r.lff:lr,J~[e~encia,lr.aducen-.e.km.~~!füJ.i.e~clesd~l'.·'A RN~a•1:.1Fr.:J;s;esaer:1cia,,Gie
p a rr;ij n9ácidos,,,.a lin.e."!9(),~~~"g-~~~p~~~áf~g]~~\'3.~~17:~c~~ric.~~'é:i;le" ~ñoommia~Cf'e Pf.'mtrn~l~'fb. As I fimcio na n como
adaptaclores entre el ARNm y 1os ammoac100s que rormarán .':!I pept1db o 12 prnte111a. A su vez, el.,extre;;m,•6'
p '·.: es:m$s··larg\:i',1'sobrers·a1iend0::el:,trnm.11::leolri:l'cr"tcA (el aminoácido se une el A-· ader.osina- del tr:nudeótido).
. Ca~~ :;1}~,tt.\i'-l' .~J,~lP.~::;_W1,9~l'l:F.i§~1/P'"~111 i !'1.9A9,í_gO~,',dj;'e:i¡epte:~i:;Ui!f.1'. füffülfi'i :i~ ;"prlfnt ña~f ·p"tfro-- i
01

di}:i~?,~,mirip~_i:=_i9_q) e: 1=9r.r~~~J?f!B.~1-~,<;?f!'~1.l11i;,imq;, ,upJ\f;\J,ít;, Así, '~ -mayor!? .ele los ~minoácidos dispar.e de
P ' varios ARNt. Esto se debe, como veremos 111as adG(a11le, a que e: cóo1go genet;co e::: ae,genetado.

wr. E:nron,;es el ARNt es ·una molécuia adapladora que r:onvierle la secuencia de nuc/eótídos del
-

-~
-~.
Pi ::, mensajero en la secuencfa de a1J:inaácidos que conforman la p roteína.

Particularidades del ARNt: a diferencia de ios otros P,RNs, el A~~)lt:'1~•l?t:r~~t.í·~nociifü;aciones.>:?JlS"St-

tr.arrs~rjpc_i_c:in,~.L~s covalentas en al9unos nucle?lic!rJ~ c~nio redu.:ciones, metilé1cíón de bases, agregado de
p _L_ átomos de a2.u fre , etc .. Aig:.mas de éstas mod1fic@c1011es afectan el apareamiento ele bases del anticodón,
facil:tando el reconocimiento de! codón del AR/\!m apropiadrJ por l;:i molécula de ARNt.
lif_: Dent~o de las carncteri5ticas del ARNl, es conveniente recalcm que:
Presenta Un asa O, un asa Anticocón, un asa Vc,riable y un asa T;
., ¿:_
En el asa O prese:118. D!hidro:<iuridina ;
En el asa .Anticodón presenta un triple\e de nucleótidos especifico llamado Anticodón
I[ -~
--~-
Par a mantener la forma de hoja de tréboí el ARr-Jt se piiega y se mantiene gracias a la axistencia de
uniones covalentes complementarias entre bases enfreiltadas de la misma molécula ;

.:
El asa Variable es variable para cada ARf,~t;
►
11··:~. ►
En el asa T hay Ributimidina, Seudour:dina y Guancsina; _
►
En 3: presenta Ja: secuencia CCA. En este éxtferiió Une el'aminéiacloo se ARNlt éspecffltC~/,fcaaa
Deberían haber 61 ti~os distintos de AF!Nt _(un o por c~da codón con codificable del ARNm) . Sin
:d ~ embargo, ex isten 31 lipes distintos ?e ARNt en las celulas e~cariontes. Para paliar dicho déficit, varios ARNI
pueden reconocer a m.3s de un codon:· Esto se consigue gracias a que la primera base es capaz de unirse de

---
e■ manera no complementaria a una base del ARNm , volviéndose ADAPTABLE .
Finalmente, hemos dicho que el ARNt es el encargado de llevar un aminoácido especifico en 3 ·. A l
Y ' haber solamente 20 ·aminoácidos , existe una cantidad mayor de ARNI que de aminoácidos. De esta ma ne ra
existen ARNt que comparten el mismo aminoácido. '
lS!
M
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-3-

•P-
 ---
GUÍA AcruALIZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC

OTROS ARNs
1. ARNpn (ARN pe queñ o nuclear): como su nombre lo indica, son moléculas de ARN pequenas que se
a.c,e.utm!~~ >:!Lí!:-~1,~~~# forman parte de unas estructuras rlbonucleoproteicas complej_as llamadas
"Spliceosomas··, que son las encargados de realizar el splicing (eliminación de los intrones del
·transcripto primarioª). Son 13, y se las llama U1 a U3, por la cantidad de uracllos q fle contienen ;
2. ARNpc (ARN pequeño citoplasmático}: Componente de la F?'ªO[~!!l~~:~~i:;Qno.Címienfci>':l!fe:léi) S~~~I
(PRS)
3. A~N de la Telomerasa: La Telomerasa c:s un CQrnf3,~j1r ril:Jbot1cléopr'.Oteicd\lqu~t~e.-,encuf1n!\ ~f! -~ I .
nu'ªtéº' · · . . :·:-
Es importante dejar en claro un concepto importante: los procesos celulares como la duplicación del
AON, transcripción y traducción , están basados y dirigidos por el apareamiento de bases nitrogenadas
complementarias segun Watson y Crick.

l . -

-"\ f·
1,.
ELGEN f
1-

INTRODUCCION
l.,.g¡¡1Dfs;imis.áQ.lli1iB~iie.;filQ sis ~g g:~.P.!.2!1:i!1~~, Y-1~8N..§:,..:ruf¡ ;J:H~Jla~J;Q!;tlficada.I:.en::,el"" AD_N::· La
información en el genoma se encuent a organizada en genes. LD~ -!ltHl~$t$..QthlJOidad~~~transcripctonales
en las cuales ~~&®~81.r.~ f" . · <l?.íl(.a;~1c~.lflt~~i~.,1d
. e iR~s; es decir que cada uno tiene información
para una molécula de ARN los qu luego se traducen en proteínas y otros ARNs q1,1e participan en vad_9s
procesos biológicos como procesam_1ento del ARN mensajero y slntesis de protelnas.

(
DEFINICION DE GEN
·El gen es ~la regi.ón~•dei•Alll!ibqi.Je, control·a ··una caractertstica·.he·r.editaria-'discreta, habitualmente
,~rrespong!w.~ ,A,..Jl.tlA:,~o.liUl-12111ll@in.~ Jh..Yr.n.s.01P., ARN. Esta definición abarca la unidad funcional
completa, incluyendo las secuencias codificantes de ADN , las secuencias de ADN reguladoras, no
codificantes, y los intrones· (Alberts, Biología Molecular de La Célula, 2007).

COMPONENTES
Posee el segmento codificador, el prorno.t or, secuencias reguladoras y la secuencia de
terminación.
1) SEGMENTO CODIFICADOR / '• . __
Es el segmeriro;;~é'f..~ ~ J:9.f,Wye~·e~fºPiif::para: ~ar-·_~a _!llólé'cl.:ila;'dei AiéN ~:l;onliene a los intrones y a los
exones . Es decir que va a estar compuesto porsegmeñlos q·ue- var'ia' ser removidos (intrones) y aquellos que
van a conformar a la molécula madura (exones). ·
'
2) PROr,10TOR
S~_ñij~ ~~!ihq!Jé.,,QY!:.IJ:Alid.~!:b.e. ~gme_n;zar-:-a, tran:¡9ri'1!rie. y comieRza la transqipción . Se ubican
cereanos ·.-al 1•.ext,;ema Q.1.,-¿ d§M§.W:filao.1.\a:Jilt<Jif¡s~dor. En su interior se encuentran las -~as,--1:AI ~ (a~·?5
!WCleé\tdQir~rio11arriba. del primer nucleótido del segmento promotor) y_..QM~ .(a .l.5; n(1cleóHdos riQ:.arrlba del
primer nucleótido del segmento promotór). · - · '
Es donde se..ur:1en ,los. iaaifu.e.s..de, Transcripción Basales que permiten la unión de la AN Polimerasa
especifica para que se inicie la transcripción t,r·,,:
3) SECUENCIAS REGULADORAS
Son sec:~encias.td e.}~~N que ~e ub(can "corri~nte arriba" respecto del extremo 5 · del segmentp
codific~dor, ,ª m1le:. ?.:.
n~~c!_
E;~t~dos de d1stanc1a. Son_quien~ . '· · ·. -_',elil:mm -º·'ªP-~Urª'3.sc;rJQlr~e{y
.CUAN!,-A ~ ~"ie_ s:idel3éfffaeeiW. Pueden ser de dos tipos: 4_mphfii._atjQJ'. a.s:e .lmh1bid..o.r ,.Es <;lc;mqe se .v.nen los
Faétói"if'~r~rí!;~ñp'éió'n 1 ésp,e·e lfií!os. - - - - - - -- - · ·' · ·· · · · ·

4) SECUENCIA D E TERMINACION
! : M~r~~r e_
0
~ ~~~I d\~ 1~ ~~-~~~-c~:~c: t: ~ st=á, cercan~ ª:' -~xtremo_~. del.7_e;r '~~,~~ -~?d~.c~d_o r.
, l >. .

ero MEDICINA - Junin 889 - Tel/fax : 011 5237-4034 hlsto_a rgentina@ctomedlc lna.com
- 4 -
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-• ·//f]-úÍA
/
ACTUALlZADA DE BIOLOGIA CELULAR
______________________________________ BC · ·,p,'[f),
-.1.M~ 9 .
~-~..t.~r~c~~~

-• l,,_a__ARN, polirnerasa sintetiza el ARN usando una de las cadenas de ADN como molde. Dichi:1
cadena es llamada cadena "positiva-:· El ÁRN se sintetiza uniendo ii:is ríboiiucieóÜdos -A", ' U,-Cy G , según la

•
s~cuencia dictada por 1~ cadena de ADN moldP. que codifica el gen a ser transcripto. ~Jilos nucleólidos se

--
alinean en una secuencia a través de la 1,;r.:c_
'm transitoria con las bases complementari~s de la cadena molde
del ADN . Las bases A , U , C Y G se_aparean respectivamente con las bases T , A, G y C del ADN.
,;-':, La síntesis de ARN es dirigidc1 por una sola de !as cadenas de AON , aunque cada gen puede estar
codificad o por cualquiera de las dos caderias. ·

-• Dad_º :-~~:L ~C-<:,;~ d.,;~.'?J;~ ~~-~_éi--~9l D.S>., rppldees ~P!llPi~r:tJr-T'!ta.r.i!e~l •AR~,•-9ll.~,1..4;!~-~~'~i'rf;lqqc5h1~e,ti~a.do, ~s la·
cadena complementana' "ál 'molde lz. que llev.:: la·i11formación·•~~Ui.V:tlente-~n el AD~ y se denomrna
¡,;·_ ¡ 1··. , .' ' . , ' · '.r ._ , • 1 ¡;,:- ' . ,éa1~;~1g c~~fi?3in~ :i. 1 ,

--
1

Lq _('\RN PQ,l.\rrtSJ;.9.:;;,a,,~ir.i.t~!~~e~ :urta:sol<i direccióir; los nucieólidos se '{an agr~gando progresivamente

uno a uno construyeri<::!q 1~ moiéciJla de ÁRN d<=sde súextremci:5'-l iir3c'¡a1!5U::{Üffriffiff1r . ~': ·
(- La ARN polirnerasa s~ une..cÍ.é bilmentJ:-a-eualquie:--sectim~e-?\8f\h-sin-emb~1'9e-GYaAe!o-errcttentFa

--
i una ~e(?.uer:i_~i? espe~_ífi~a . ll~i:_nad_a promo lDi, que contie;nc el.Jugar_der..:Ínli::i.~ción::.pá raJ c1 ~~ínl&!;is -A~N , .:e
\ _ qu~da unid~_.!_u._e!:!emei)_t_~ - Luefüi:ct~ !a uriión, :a ARt·4. P.olii~era sa a.!:iJej i_i,~) egipii de 1á·aoble ·t1élic:e form2ndo
u~,-~u_r_!JuJa ~eaproximacíarnente 1 O pares de bases de modo que _qi.:ed_an expuestos lo_s nucleótidos cJe ambas
cadenas para comenzar la síntesis de ARN a partir d1; ribonucleótidos lrifosfalo , los cuales son unidos entre si
por la polimerasa a t;avés de ·una unión fosfodiesler (fig 1) _
la?1o~é~ul~Fde0 ARl':il:,potirrrerasa sé tnu':~e. P:qW~.~-i~_am,~nJ~t ~d1;r:l?.rg!<)_;, deh'J\1J;>N:.d esenrollanQ0 la;_h~li~e

--
la lo necesario .para expófier:•~tirii;:iJü.i.e .vtFregioñ·aecaaen'a'::mlJ@~, pª-i;_ªJ:~l'rél,®réámieri!q~d,~.\~ §.~~E1 proceso de
elongación de· la -cadena de ARN continua hasta que la polimerasa encuentra una secuencia de terminación
situad~ en el extremo 3_' é:iei_' gen:,- - - . .
Cabe aclarar que a__medida que la ,A,RN polimerasa avanza se abre por delante de ella una porción de

-.-.
la cadena de ADN mieniras que por detrás la doble hélice ·d e 'AbN vu-élve ·a armarse mientras que el ARN
reciéñ sir.tetizado se despega de la cadena molde de ADN . ·
La apertura de la doble hélice y su ensamblado luego de ia transcripción generan tensiones flsicas en
la doble hélice como cuando se intenta desenrollar un cable de teléfono, éstas tensiones stJn relajadas por la
acción de la Topoisomerasa que rompe un enlace fosfodieste;, desenrolla la cadena y vuelve a formar et
enlace .

.-, REQUISITOS PARA LA SÍNTESIS DE ARN .

~
►
Molde de ADN : Es la cadena (+) cíe /\ON;
Enzim¡:¡s : Ex,iste::n 3 tipos de ARN polimerasa. Esta,s son:

.-.
· r - --- · - · ---- -- ---- -- . . .. --- . ·-· - ---- . . -- - ------- ---- -- -- - - -- -·-- - - --- ---- -- - - - .

°T!AR~!-~~1:er~~-ª _'_ __ ___ ¡Sintetiza al.C..8N, 4 5S _ _ _ _. __ _ _ ... _ .•

_ _\ ¡,ARN ' polinier'asá !! T si~-t~tiza al ARNm j' lt1 tnayoi'ia'aiHós ARNph' . -:

..
-- , i___ 1 - - - · - · - - -- - -- - · - - --- - - - - - . _ . . _ _ _ _ _ ___ ,, _ ___ _ _ _ _ .: · 1

la _..; ,
'Í ARN coli~er~s~III- ----Ísintetiza al ARN 5S, ;~,s ARl'lt,; éÍ'ARN¡sty ,::ugur.ds:ARNprl
, . 1 , , -- - . - •
~1!:..1E2-1►. .i neac ..r, _ . . "~--•c.xu. it ~...~ ~ ~.P.7'"7.:'l'~lo'nt'."'-1''-~ . l ! t N~ ucwnna - EtH:u:.a.a._1,~F.S~..._~.,,..,.~-~-""""-.....ii

.•-. ·' ►
►

►
►
Ribonucleótidos: (A, G , C y U)
Factores de Transcripción Basales y Factores de Trnnscripción Específicos
Energia

..•
RNPpn (ribonucleoprotelnas pequeñas nudeares)

ESTRUCTURA DE LA ARN POUMERAS.A. PROCAR!OTJ-\.

La ARN polimerasa de E.coli está .:.:ompuest,, por dos subunidades ,e(üeta) , dos subunidades a(alfa) y
una subunídad a (sigma) . (fig 2) La enzima propiamente dicha está formada por las aubunidades o: y 13, la

-.-. subunidad a actúa como fac!or _a c_cesorio. .

La ·suburiidad d pertnité lá 't.inlóh dé la erizirria' ai prorr.otor:y,:definetque,ger\E! s sei'art UMst:~ij:ifos.
Luego de participar _en la iniciaci?n , _el factor e_ se disocla . del core central de la enzima permitiendo la
1
eíongación de las caaenas que estan siendo s1n.et1zadas .

is~
.,• CTO MEDICINA - Junin 889 - Tel/fax : Oi 1 5237-4034 hlsto_argenti na@ctomedicina.com
-5-
 GUÍA ACTUAUZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC

CARACTERISTICAS DE LA TRANSCRIPCIÓN DEL ARN

► Todo ARN se origina a partir del procesamiento de otro ARN gigante conocido como ARN Gran
Precursor o TRANSCRIPTO PRIMARIO ; ~ .· )
► Para cada tipo de ARN existe un Transcriplo Primario especifico; • \ .k \.
► Todo ARN Transcripto Primario debe ser modificado o procesador para obtener finalmente un -·AN"
maduro;
► La cadena (-t) de AON es la que se transcribe. Origina un Transcripto Primario; =
► E! 'íranscripto Pr'iniário.e~ ~omplementariQ a lé! cad~n;s (+) .d~. f.\PN·,·Y.:.~qyiv,él!l;!Ote a. !;;i cadena: (, ).
► El Transcripto Primario está compuesto por dos tipos de secuencias de nucleólidos , llamados
INTRONES y EXONES.
► Todo INTRON es removido durante el procesamiento, por lo que no existen en el ARN maduro
► Todo EXON es componente del ARN maduro, por lo que no son removidos durante el
proces.:imiento.

GEN DEL ARNm

Presenta varios sectores, a saber:
1. Promotor. Posee dos elementos: la secuencia TATA (a 25 nucleótidos hacia arriba de l primer
nucleótido codificador) y la secuencia CAAT (a 75 nucleótidos)
2. Secuencias Reguladoras : Amplificadores y reguladores
3. Segmento codificador: Aque encontramos tramos útiles (exones) e inútiles (intrones) Ambos se
transcriben, pero lo segmentos intrones transcriptos son luego removidos.
4 . Secuencia de terminación: No se ha identificado aún.

FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN
Son proteínas necesarias para ayudar a la ARN polimerasa II para la transcricpión. Pueden ser

Específicos o Basales.
1) Los factores basales son:
► TFIIO (tiene una subunidad llamada TBP -Tata Binding Protein- y una llamada T AF -TBP
Associated Factors); TBP permite la unión de este factor a la caja TATA del promotor, y TAF
interactúa con los otros factores de transcripción;
► TFIIB ;
► TFIIE ;
► TFIIF, etc ;

Los factores de transcripción basales trabajan en forma secuencial. Se inicia al unirse el TFIIO al
promotor a través de su sububidad TBP, produciendo un cambio en el AON que atrae a los factores de
transcripción basales y ~ la A~N polim~rasa 11. LJ1,Tf-Jlli, f9sf~fil¡a ª-~:~Bttsi.tllimerasl\y abre al AON (forma
la burbuja). La ARN pol1merasa necesita de Factores de Elongac1on llamados SIi S11I (o Elongina) para
alargar al ARNm .
,·, 2) Los factores específicos pueden ser Activadores o Represores. Se unen especlficamente a las
secuencias reguladora s

PROCESAMIENTO DEL ARNm

El ARNm recién sintetizado se denoimina TRANSCRIPTO PRIMARIO. A este ARN es necesario ha '
modificaciones posttranscripcionalees. Ellos son cer1e
~ 1) Cortes y empalmes: Una vez obtenido el transcripto Primario, se remueven los intron s d
1
/lG s cuencia por medio de cortes y empalmes del tr~ns_
7 c ripto primario. lo hacen ·ias~ IQ.t.iiJ~· ~
v (nbonucleoproteinas solubles nucleares) , que son la asocIac1ón de ARNpn y protelnas nuclea~ Lp
RNPpn se llaman U1 , U2 , U4, U5 Y U6 (la U por ser ricas en uridina) . Todas ellas se combina es. as,
·
T ranscnpto · y farman e I E sp1Iceosoma.
p nmano
· · , n con e

e;
.·) P<'}' •' l : •.1r , ; : : _r 1_;,-,,, , /.·' .~l •!"· .\~I r.l. / ; ,.. ' ¡;,_:, h,. i¡.•.),"' ,,_, I! !'¡\ ; ,. ., / ,, ..••' . J ,. , r 1 ' ·.
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•• GUÍA ACTUAUZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC cS?W-9 •

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••
••
•• Estabilización de TFII D

••
••
••
-•
--
--
--
--
--
-- . iIB.N
. Polirn.erasa II es fosforilada por TF Il H

-- ~ y se separa de ~-~-~ -~:omienza la. transcripr.ión

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,_;;----...., Transcripto Priinario

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,9.-r,;9,
GUÍA ACTUAI.JZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC fo'1', . d L ~

Poliadenilaclón : El extremo 3' del ARNm suíre el agregado de i50 Adeninas. Ello lo hace una
enzima llamada poli A Polimerasa, y depende de factores de poliadenilación (CPSF, CSTF, CFI Y CFII)
Capping: Es el agregado de un nucleótido ·metilado _en el extremo 5' (capuchón}. Dicho nucleótido es
la 7-metil guanosina. De esta~~~· -se-evita.,.ja-de§fadaeié~~~-t~ extremo de fosfatasas o
n~_c,~_
e !s~~- -~ste pro_~esamient~-Y~lqq . QQTR~~s't-Jal'fre°iQ!,~$~ liw::q.r1f!9Jli~~~~qW<~~ ,-va
Str:\t~"\iia-.~ti:A.ijtihJl}. ---· •···· ··· ··· . -~ -- ···: - - .••: ·.- ·,·•:;'..•.;.:1, :· •;•, , i·. , , ·. : ·-·
Met1laclón de bases : La mayorla de las Adeninas se melllan. Se produce ·lu-ego, de~~ffi.P.A!!!H~-/~;.~s
decir. s.w.u.-e~la~e~e'ifé's.

h:lís\ll:'ARN:ti-P:alini~ra"s-isi:tülünlfriotas.1, - r.equi~ren í;3ctares ~.tfán~c;riP.~iP_IJ~J~~ :, 9~!1.~rn~, s . La ARN

polimerasa II eucariota no puede iniciar por si sola la transcripción . necesita una serie de proteínas señuelo
llamadas "Factores generales de transcripción" para encontrar el sitio donde debe unirse antes de comenzar la
transcripción.
. En primer lugar los factores generales de transcripción tienen que ensamblarse formando un complejo
. sobre el promotor para poder reclutar a la ARN polimerasa a ese lugar. ·¡.:. ·:_; ; · - ···:-cr:•:) f :'""":-- r-
El proceso de ensamblaje se inicia con la unión de TFII D a la secuencia TATA (la secuencía
especifica es TATAAAA}, secuencia especifica que se encuentra 25 nucleótidos río arriba (esto sign/fié:a por
delante en sentido 5") del inicio de la transcripción en casi todos los promotores utilizados por la Poi 11. TFIID
está compuesto por muchas subunidades. la que reconoce la secuencia TATA se denominc:1 TBP (TATA
Binding Protein}. Una vez unido TFIID , se unen los demás factores de transcripción : TFIIB , TFIIF, TFIIE,
TFIIH secuencialmente y la ARN Poi 11.(fig 3)
Una vez que la ARN Polimerasa se unió al promotor es fosforilada por TFIIH y se liberan los factores
de transcripción permitiendo la elongación de las cadenas de ARN.

Las ARN polimerasas I y 111, también requieren una serie de factores generales de transcripción .
Excepto a TBP (que en éste caso no depende de la secuencia TATA), los demás factores son diferentes a los
necesarios para la Poi 1

.\cür.ulan:r
,. . Enhancer
j
¡'if.l
-,• Represores
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1 ~ -
1

~~.~- /
,. ,,
·, I •,

,·'·1~,r-;
:' , ---·~· Coditic~te

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Co activado.res
• ¡ - .
j Caja TATA .
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• · - - -- - Se:1nento Pron,otor ... '~.---L- ., _,

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FACTORES"BASALES

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GUtA ACTUALIZADA DE BIOLOGI.A. CELULAR
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. • ' • . ' 1" ' , .: ' • ' t •• • ' - '

·.. ··:~ · , . . . AªN45S

r~ · · . ·. · ¡· -~' •
Q1S's~~~Ñl'l~H~~"'fffi~~1f§'~~ tH~1~"V~YI)~ ~rU hlIra11·s~,1:/A~t?.¡&.~1!;11:~~!~~~ ti:tfitt~~ff.fá'~~
GEN DEL ARN 4,S.S..... ... . ·-.. •·-·-- . . · · ·~·:;,1_ 4 ,

.-...-..-·-· ...Esfe..neq_ S:~5lilo fGl·a·,~·~:las •:e'8 n's'iPiilci6n1es setu11d~ft~;f:8 ~:!1~~¡J~mtll~.?I~ ·t 3, i 4, 15, 2 1 y 22, s1:m!tt.1::l"JU·
~el.~~ -~1.t::(éf~!p . Cada'ctin-stricc ió n--~e~undaria tien e una(?~O copias· clE!rgen) y cada copia está separa da de otra
po r un spac12dor (segmento d e ADl'IJ que n o se tr-:1n sr.fil'Se·y-t¡ue·-cor1nenen el regulador ~'. gran parte de l ,-rlik- . ~
promotor)
1. Promotor: Se encuen tra,;i
=
·.,.- -- ., · ·
·:t.~ ~ ~.- ~tlrl?J~ ~ --
tjd<i>J/ cori'ie nte a~r.iba;-~~5,'....No.tler.i.e caja ATA r
. · 2 . Regulador: Ac túa como é!IT,1 ... ii\1 .. e encuentra 4 00,,,-m5t~]:~~-~~,t\~~l!I~~
3 . Segmento codificador: li · ... : . . n ds 'qlle ·dafah''á 'l'élsri;t,\;R~l'i\:illB.Sn S1llSf~¾·R fl$Jest:rm 0 separ~dos:pdr
~">1:t:trmi=.~ . __.. ,. · -·· .. ....... · - ·- ·- ... - · .. - .
P.. ' -~~~_.. ,,~ ,\~~ '. . :-· ~
4. Secuencia de term inaciórl!._-p ~.~~~t'Jtpl\l.iilrias·,l i,lmim=1:; ·segt1lltl:Js (Narlas T).
·- ' . . , .•

FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN
Son el SL 1 (se asocia al promotor) y UBF (se asocia al regulador) . Una vez reiacionados con e:
promotor y el regulador, s'é:-t~Q.r:n~r:iics.a nienln;r,'S'l'y •luego :cp11: la A8N1R.qlim!:!R~ ~-~I~

PROCESAMIENTO DEL ARN45S

1. Remoción de los Espaciadores : De esta manera, quedan conformados los Arnr 28S , 18S y 5 , 8S
2. Metilación: Las secuencias útiles se metilan previo a la remoción de los espaciadores (es decir, lo
hacen en el Transcripto Primario)
3. Asociación a protelnas : De esta manera, i:¡~~¡.l:!t,'lmrti"ll5l~l!'fro,ti,'§',a-1b11t°l>'ifflrt Lo hacen las RNPpi'UI
(pequel'\o nucleolar) que son las U3 , U8 y U'l3

GEN DEL ARN SS ...,,~ ,.. .. · ..

-----~-.
Este gen tiene una'.~-~000 <;opia~ separadas por ADN ·espac:fü:!dor. \NO está en el nucléol¿·_- ')

FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN
Son el TF 111- A , TF 111 B (es quien tiene TAF y TBP) y TF III C.

PROCESAMIENTO DEL ARN5S

Metilació_n : L~s ·s~cuencias útiles ~-~tmJ{t,i/Jq,.jt~~i~:~.¡~-;r~q}É:qfil~~ ~ (es decir, io hacen en el
Transcnµw Pnmarro) ~ - ~.,.,~

--- --·· ---

Asociación a proteínas : De esla manP.ra , se e,11~ap1bla ·r.1 H::Uú:ioüi'líUa'tJ:/rH:WB~,?'l81:i~~ffih1.
··, .
. ------·- - -

GEN DEL ARNt ~

Este gen tiene un~it.o-~ ..:l.OQ..G.Q ia por cada uno de los diferentes genes que codifican a los distintos
ARNt por ADN espaciadof~o-:estii e . cléCJ.lo._ . . ... ., . ..., , , , ., .-,;;, .
1 Promotor: sorn:lo s ~rH:t~ e·•nucleóhdds ' Sepaí'aaas, ambas ubftje11:llHl'~'tlé'f'i!fC,'•'tl~ ·1~F !!t!C1:Jet1cla
1 1
· codificé!nte . · Entonces , esta secuencia promotor, ~parte, de : €Umplir•-'t fü'fls\.l' fÜH&~~ ·'8~1·pfi:i~tito~. s·e
transc ñbé'n.
2. R·egulador: Nb se han deJ_r;.f/~ 31~~ -s.e,c uerrcias re gula~o,:"!S..PéJ.t~•.fos genes de los ARNt..
3. Segmento codificador: f.':!~c....':~-~~s!~..ex.oD.e.9.Ji~.P}?~adog,:pal!l.uni inltoi!>
4 . secuencia c:;fe terminación: presenta varlas ·T lll'llifai!l 'Se'Ou1B¿J§ (varias T), igual 'que el gen 45S .

FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN
Son el TF 111 B (es quien tiene T AF y TBP) y ~ ' ~ -

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 <:9.-;r,g.
GUÍA ACTUALIZADA DE BIOLOGIA CELUIAR BC /1-1'~

'i-aPROCESAMIENTO
J!: DEL ARNt
del transcripto primario, con rew.ru:i{ln,~.i:!,~ni~9.Jn.tróruc-P.egado:.d~Jos:,.d.E>Jhexones¡,,
·~aciones de los nucleósidos: varias U son reducidas a Dihidroxiuridinas, o metiladas a R1botIm Idmas , 0
.
. . . .

transformadas a Seudourldinas. •
Raemplilj.d.e ,Ja:ta~c1:umoia~1 é~• por! CCA .
Malila~~"n: L~;i~,~ ~rt~\8j .\~.W1:~~.metilan previo ,~.li;i rernoci\'ln. Q~-.!R~-~?P-é:!~iadores (es decir, lo hacen en e l
Transcnpto PnmanoJ

.. . •
_. . . CONTROL ce LA EXPRESION o 'ENICA
• f • •
_. :. _,-: - · ·~:
• ,,

Todas las células de un organis~o co~tienen el misn:'º -~ ~t~rial -~,: ~é.!~;~,

0
3~,;,.~;>~),~.c~ J?}J.}~
_J92,~~\f5
protel n~1.J. ~ol~<;ul<!s de- ~ ~N_s . n~c~~~nas , sin embargo ert~~aaa:<~célillléiiíSoíoli's ~expFesan~ es'pecffrdame!'1~e
l'iá~s'el~céfanitfl-~,'\¡ie~ él¡j~@fu~s!'ié'n l;ti[mg_g¡¡\i:;}~ ~~acio(entorno extracefular) y esto,réstá -; r,e.g.tJlá'do\ por
diferentes , · . · ·· · ! : ! ~ ~º -
El ~ f i'cfe firíioó p'ar el .momento especifico en el que se encuentra una célula y la neces idad de
una proteína determinada en el mismo. El espado está representado por fa ubicación de cada célula
perteneciendo a un tejido. Asl las células de un tejido expresaran genes que otras células de un tejido
diferente no lo hacen, logrando con ello la diversidad de la diferenciación cito-tisular.
Aunque muchos genes están muy finamente regulados según el requerimiento y tipo celular, muchos
otros genes esenciales para la célula como por ejemplo los genes de proteínas que intervienen en el
metabolismo, de protelnas estructurales como fa aclina, polimerasas , etc., se encuentran expresados en
forma constitutiva, es decir en constantemente sin ser regulados por seriales externas o internas y se
encuentran expresados en grandes cantidades en todos los tipos celulares.

·La expresión génica se L:JedE!_~ j ªr en muchas etapa~:_ ________

1. Regulando el_;~o--:·éim~ . Ée !ie:neia7s~.-tr~í.\~'::!!1;,~ íl,,. on trol trans cri cio~
2. Controlando ~ e . -. . ·. .11 tf ~ · . ¡~''·f ·¼l( cíé~~-lós,~'tc~n'~c;·rn~. · %f.-P1fill.li.ifi§.s., de ARN !Co~trol -d~
.- proces~!ctiieñfa de ma ~--"
3 . . ~~--ffl!f~~ajero's~n-fadCí[.QS'~que van a ser transportado al:i:'eítop(a-¡:i f.h a !!control d-~f
~~I oct.e.
d ~~ A~~ - · " t ··· - . ·t 1 · 1· .. . ~ ~ ,- t-d-:----,...._ ·--- . . . ~•~
4. "'eguan ~ a · · ..•"-' ·,. º~!H~~,filJ}J.:E(-;.~E,.:.~~~g_ !~~s con1ro ra ucc1on~. .. . . ....
5. Desestab1h~i3ndo . susce li5Ie a ~.tfilla\;.tQ~) selec va111e11ti=.JT'günas molé~t.Jlª~::~e>:mARN
c[¼lPJJ~miiliG1> ~ntrof de la degradación e / ~- --- ~--- · -

Además de ta expresión se puede regular la acli'✓iducl de las proteínas ya sintelizadas (control de la

i?Ctividad proteica).

MECANISMOS DE REGULACIÓN EN PROCARIOTAS

Antes de empezar con mecanismos particulares daremos aigunas pautas y patrones que se repiten en
diferentes sistemas .

Ac tivado res transcrip cionales

Vimos a~!e,~io: m.~-~~!': -~~e l_a _~~-('-1 p olirnerasa __ ~~~~e unirse a_l pr_
o motor e iniciar la transcripción. Sin em bargo
algunos ~ l@FéS'_'fia'0t:er.iaf.r~~!~ª e~~~,P<J_r _s.I mismos , estos promotores pUed.esa:.actqui(if.3M[lj3;
r ru:J1.i.9.~~~~ ~ ~~ ~-~~'ilqu.~~s ~~a n:~n ai_:tJn: 1ug a r.i próximaid'e~~~-lliN~or.trác.ta.ng.9;g;ga_ l-a
fW!¡jQn-,"'ff01.ij)A_k_
·4 8-Mr:R~!.ID.!tt ~ ~¡¡;{Qrrnaffl.Y~ e.íem:entam lahlr:anscnpc1on. Este modo ele regulación se denom ina contro l
positivo por que la fo~ma acl(va de la proteln_ a ~e unión al ADN activa los genes. Las protel n as que actúan de
éste modo se denominan act1vadores transcnpcIonales ·
Se tratarán un par de ejemplos para entender como funcionan en general éstos sistemas.

OPERÓN LAC
Este operón consta de tres g~ne.s q!,le codificas proteinas que intervienen en el metaboli smo de lactosa
(d is acárido formado por galactosa y glucosa) para su utilización como fuente de carbono:
1. Galactosido permeasa : es la encargada de transportar la lactosa al interior de fa bacteria.
2. ~-galactosidasa : rompe la unión entre fa galactosa y la glucosa.

____________ 74________________
3. Ga!actosido trjtnsacetila~a : su función en el metabolismo de la lactosa aún no está claro .
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• 1 ,· • . . /' . q · 1.- \ . I'·, l l.(.) (_ IJ'• f' . (,,.\, \,. t.( ' ' . ' " .. ' ' . \ ú •o1 1 r
¿, l ' . . " . ' , , . . . 1 .) /. .
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- 10 -
-- vUl(:\.. n..v 1 U.t\..Ll.LJ-U.Jf\. U!!, .tHULU(.;lA C~LULAR BC ,5U'TA1
frofih.; •

-- Estos tres genes están agrupados en un policistrón en el siguiente orden: ¡3-galactosidasa (/acZ) ,
galac_~~~¡_do perm~asa (/~e- Y), ~al?c_l~:~.~ lr~r,¡,~~ ~~~ ~-(!?r, A .
Ll~:-~ ~ ~ ~.a ¡er,1;1:, PP)!St~.t rn.t)J~q •desae •ut6'n 1cb· p~bl:n~~~-~'.~11 . ' . ' ~1-
.- ~ --
,,¡i:g➔ir~MMirm➔.C_~-- ,JlfflJ¾#
1·•-~r
--
, -~1~~'f,1.:9..t.2f.-.,--- - .., .. ,..·' . · -··· ··-··· ... · ·· ·-·•.• ------. .. .. ·····-- ·-- - -·-········ .. · ·-·· · .. -·-- - -
. ·:· El término pqJ1~1!J.fon deriva de ci_ s trón q ue es sinónimo de gen, entonces un mensajero policistrónico es
·a~uel.;queiGot1tie~·J ;:truatnr(~~:b?él ~Ui:{: ·•.\ 'él'' ·'1." 11 < ffifil' .
c'~ffif"é't~t-~JtiéW&"1tt r;~,gt(i3-~iti~''8et~ió~ \i ~b~~orr.a , de manera que cada uno puede s.e r traducido por un

--
ribosoma en forma independiente uno del otro.

Control negativo del operón lac .

5 .cr lac: ( formado por cuatro .subunidades idénticas) que manl.iena
Existe una proteína llamada r_ep_re_

--
a·I operón reprimido cuando se encuentra un ido al operador q~e está justo a la derecha del promotor. El
represor impide que la ARN polimerasa avance hacia las zonas codificantes de los genes del operón
bloqueando la transición de la polimera:;a de:;de el con~¡,lejo inicial de transcripción a !2 forma apta par¡;¡ la
elongación del trasncripto. . .. •. --~- __ =· ·
B:'lí·_-- - -
-•
E
~ n""á.useñ"'1 , ,. ;zi-ª·:m·-er
~ -·'"'f~,1:'iffl• '••;-,..-
,_a .- o~_a. _.., .,.~ :,. .,,~_.,,_.' f\-~,a:f!J~\!~
,&IJ,r~.;.\?Jl!"J'l:4; ~..~.~:.~~ -·,ij_~ :i;,~ 1_...
- ·. ,...,.,., · -~º J:':t·--:i.i - ,?-"9'1,?c
, .•
· ;i~nfi.JP:9P-';,!la.J!¡_.:ia--: ,_. "· ~
_ e nfü:m1i"e¡lrbso,"iñlfC:-a-i'ci . ~1.ifa:unnfiioL . . r. e ibr ,~ · 'ií1a ta
,,,~--= ~·~~... ,¡¡;, , ~··
· q9.~,•NJi:\h9\~P..Y, " _...:; , , . . . , . ,iJ},JJ Cuando !a f.1-aala..:iosidasa cliva la lactosa para producir ga18c tosa y
glucosa, también produce una pequena c;mtirfad de ,i!oladm;a_ (fig 6)

-.-. Pero ¿cómo es que S!:? produce aloiactosa en presencia de galactosa en el medio si :1ún no está
activado el operón y por lo tanto no habría g¿:lactosido permeasa? La respuesta es que la r epresión no e s
100 ,% eficiente y por 10 tanto hay una pequeña tra nscripciór. basal en todo momento. Entonces una pe~ueña
cantidad de permeasa permite la entrada de una pequeña cantidad de galactosa que por conversión a
alolactosa va a producir una pequeña inducción desrreprim iendo el operón de forma tal q u e se producen las

-..-- tres proteínas lo cual permite la entra da de mas lactosa y así el sistema se va induciendo por
retroalimentación positiva hasta !legar a los niveles óptimos para el catabolismo de la lactosa .

Control positivo del operón lac

....
La liberació_n_de! repres~r del operad_o r no es_~uf~i_: ,~~ ..,ra~~ ªftivar la transc[:i~ción de_l ~p ~rón, .si no exi~te~_
7 ri
control pos1t1vo el .operon no se activa _ ~pr._esenc12'•''1~f~t~&iMfM,,1 ~fmft~G,m~n4~1
rn_~i.q"~g_ e ~~y.ó~~~fill~~!¡t~llr.1$tdfi:["B-ºr que la bacteria metaboliza mas fácilmente la g lucosa que la
galactosa , entonces métabolii:af' · gc:ilactósa en estas condiciones sería Lin gasto de e nergía grande e

.,.,
innecesario . · _ ... ,,, .
Esto nos dice que tiene que existir una nicléqulá {JU.e \ éeiís1ª'1~.'.dispq~\e,V.\s!9J1:~ 1.;IJ?I-9J'!-SP~-~J~ @!;a sustancia €S u n
h.u.éleótido llarn2do A~_¡j.c~i; (cAMP). Cuandc la concentradón de glucosa baja, la de cAMP baja ,
R io arriba ele! promotor del ope[ó_ l L ~xiste un_~~l i ~ ~ f ' ~ J t W ~ - ~ ~ ·$1.}{~~lna
,C~B:lCat,a.q.c,l.it~,,_Ac~!v:~.t9~-~r°.t!J,in).o CRP_'~p;,:gJ¿;~?-~f'..~a!!.P~/ ~~~::~~'?J;~~l,~~1a9>.~-~ q?I~~~~
A~N :peilifií'era's a'·a 'unirse"al ·prómhtG~bs1stema cAIIIIP ;CAP· ta-m □1en interv,ene·err ltr activación de otros

..,-,
oi:>e ro "ñl~ s
, - ~;y.r,t•~=?,_,,.,~.,_,, ••· ,-.,.~ .-:.,Yi¡•
ef 1Jj:J. e_rpni.s?Jfaclfvft'e'ñ-pi:es éll e ia.de tjálác tosa ~so /ó'!s"t,l'j'¡'fj:nay ylutcf's°'a''e'n~-1in eoro.
Res u m ie ndo :._ • - . •• • \ ., •:' O I •

.. OPERÓN TRYPTOFANO
Este operóf!~ f . @~r
. amir.i6"á"tl'8ii~®'B~fá~vs.~M.t. ·:.. · -,,
_
":!;!!;!,~~CR,dlric,an l~s:.erizimas que ~'.fi'a í;te"f;~~,~-r .
:,;epfi'ñ;flél~ '.~~f~í.Wce1'l~ ~ cfifiijypfüf~-; .
nw~lmfaf.'i_@if
til~~~ :

.-.
¡i¿g?,~ (~Fí-S} sfrit~~ttffiithtffa' -Jt{dacíq~ es decir cµando la conce_n~~-~-~~~': ..?el mismo dentro de la célula es
.' .· : " . ,, -------.. ·- ·-"
b ªJª - . , ,· . , '
En la figura se muestra la estructura de! o~e_ron , est~-- ci ~W,~f,l.~qtfiUi'-?5flEr,Q..~ S):lue codi fica n las enzimas
que catalizan ~a__yonversión d~I _p~ecursor del Trp., ac,do chons;n1c_~YQ.tQfano-.--·

--
. . A ·diferencia del operón lac,-en el cua,l__el_9perador se encuentra adyacente al promotor, en és te caso
·,:~Ji9per~q.i?f ~~ncOeñffá•:aeñtr<Yl fel~fsmolfro m u:ór:
- .;.:. : . .
Me·~-; -nisrno de control : ·

-- En ausencia de tryptofano el represor se eni::uentra en forma inactiva como élporepresor. Cuando el

aporepresor se une a t,yptofano , cam~ia a una lc;onfo~_rT}i:IGi_q r!i S,.~.~~~-ID.ás___ afin al operador de
Otryptofano, llamada represor de trp, en este caso el.tr','.1?~?!~~~-e_
s la actuán?_C?_~?~~-C_?~,.i:ep~ Cuando hay
altas concentraciones de trp todas las moléc ulas de represores se eñcUITTi(ran en forma aclfva y el operón se

-- encuentra reprimido. Cuando la concentración tie éste Gminoácido baja, se disocia del aporepresor, el cua l
vuelve a la forma inactiva, se separa del ADN y el o~
5 se d_e_s_r_e_p_rim_e_,(_fi_g_1_0_)_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __

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- 11 -
 ,g,.·rr..p.
GUÍA ACIUAlJZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC y ...~
(!I
* Control de la transcripción en eucarlotas.
El control de la expresión en eucariotas es mas compleja, involucra mucho factores y secuencias
adivadoras e inhibitorias.
•
(1
La regulación de la transcripción en los eucariotas difiere de las .d e las bacteria,;; en dos aspectos
- fundame~tale~: p_rin:1.~.r~~i.~ -- ' ,-~ -~J:!f.i~·
-, no pueden iniciar la ~ra?~c~ipción por sf_ m~smas sin o
(1
que r.~~l{[~::9'Uitffl~fil{i~~~ . ~. ~<i!QF' El em;amble del compleJO 1n1c1al de transcripción consta (1
de varias etapas que pueden ser regu a as eñrespuesta a señales d~ regulación por protelnas reguladoras.
-En seguhdo lugar, muchas pr:, item·fil¡t11 e§'.illiati0'fa~A'elHl.áriat~1i-;l,o·iíede'11!/a'6foa? incluso cuando se encuentran
.,.th!W
ni..rlas
-- ,a}.
.. .m~ i ha¡·ªl!l!AWlffl..
iil''W '!fi / n'íilés{d'él'-,llw.1<

Et1hancers 1 secuencias activadoras a distancia.

't!lfinío~ . ~i:lii;,fo ; .. i Sr.r'l( '' . "fnotot.ñ "'e-:¡.; r.··NfaliY
f lii~JBr,JY.ªn!Jd?!P .. .,.... .. ..,~1!!.. ,JIR'it.N•..• •
•
Los ~~~ son r-g¡¡¡;;ja~~e.~ ~\fü!..~ oi3.9l':L~JI (incrementan: del inglés ent¡~nce) t ia - •
~~~~~gefr~~~ ! Estas secuencias aclivadeFaS-~Qhancers) actúan por medio de ;dnión de
factores de transc.~i[?,SÍ.Qíl.Q pro.t~Jt.aciivación.que.A!Íterac.~QA los factores generales de transcripción .•
o con la ARN Poi ubicados en el promotor _gen_que. s~cúi.íado-:). . v 'o 1 .1.... .·· • , ,

Los ~~fil)~~~~~,~L - · . • . {gg,tfü~prornofü're~l'e·rt::(ly~~actúan:iodependienlemente:.de :-la;,.póslción -r \7a

, cog, r~speclo¿eJ:1fJ e~: es decir que no es necesario que estén ubicados en una región en particu lar pa ra que ,· o
sean funcionales. Pueden encontrarse río arriba del gen, tanto cerca como lejos del p romotor; pueden también / , •
encontrarse rlo abajo del gen, e incluso dentro del gen (existe un ejemplo dentro de un intrón) . Estos
elementos también son independientes de la orientación , si se los invierte por ingeniería genética siguen •
funcionando. Generalmente se encuentran ria arriba del gen . Este fenómeno también ocurre en procariotas
aunque con menor frecuencia . •

Silencers
.Los enhancers no son los únicos elementos que pueden actuar a distancia modulando la transcripció n .
Los sil~ers también pueden hacerlo, pero como su nombre lo indica iQ!\l,1 l ; i r ~!1§..~JiP.gjgr:µ~J ldg~ ~,cle ••
~~~~ datos disponibles' indica,rqu e ·de· alguna forma éstos ~lementos_·~~~sa~-:n .~~peren.roll~~ ;~~~~- y
., -~esdea~_~ e;;t~e~á&l"U1W'·;:·"t'tfZís~~ec~sible~~'~. i-li~~J~i!1> .
..._ --
. -~~~.."~:" "~~:: ,t " - ! ~ ~ ~- -
-A-vese&-1:JR-a-m1sm1f"reg1on de ADN-pueae actuar corno enñancer o s1lencer seg ún que proteína se una ••
•
a él.
Además de los mecanismos tratados más ~rriba, también existan otros mecanismos de control génico
que consisten en modificaciones . estructurales de la cromatina como superenrol/amiento y
-condensación así como modificacion_ e s covale11tes como metifación, acetilación y fosforilación . Este
tema Jo trataremos en deta/fe cuando veamos estructura de la cromatina. ••
Motivos estructurales de unión al ADN en las proteínas de regulación génica.
Las proteínas de regulación génica poseen uno de entre una pequeña seri e de motivos estructurales
característicos que se unen al ADN y pueden leer secuencias específicas sin necesidad de abrir la doble ••
••
hélice . La mayorfa de éstas protel na~ pe unen al surco mayor del ADN . .
El motívo hélice-giro-hélice es uno de los motivos más comunes. Este motivo se encuentra en
centenares de proteínas tanto eucaríotas como procariotas . Consta de dos hélices conectadas por una corta
cadena de aminoácidos que forman el "giro".(fig 12) '

••
Aparte de ésta región héiice-giro-hélice, la estructura de las proteinas que contienen éste motivo varia
enormemente. Estas pro~eínas ~e .unen como_di meros _simétric_os a .secuencias de ADN que están formadas
por dos "medios- lugares muy s1m1lares, también organizados simétricamente ·

••
Dedos de zinc
Son formas estructurales acomplejadas con un átomo de _zinc que tienen el aspecto de un dedo
t ~n .9-!.~,ir;.ri\e ~, tiP,º.~,.,d:, ?ed~s de zinc, _el motivo más si~ple consiste en una,~q t hélice(/..)ii,una~~1
Exi_s_
13 ~;.,,ir,á,
fiiánteÁidás·•í'c,Ji4i~a~ po~li'.7ínc.(f1g 13) Este_ tipo de dedo de zinc se encuentra frecuentemen te agrupado con
otro dedos de ~me, organizados uno detras del otro de modo que la .:~tJ:l~l1ggSp\J.e.diJt'.(;Qfi\ac.ta11:~_GQm,.elisur.co
W.J ~,-,~~ AC:Hif,
·-
·
9J!;Q;tipf'J de dedos de zinc rull~i~te,.endas.-a .. héliaes·unidas.por,uni átom0;de zinc. ••
Aunque ambas estructuras de d~do_s _de zinc son diferentes, comparten dos rasgos Importantes:
@ (Bhas1MYtmm•1/.:r1,11tíilsWHl8ffl'NMINfl~il.fli6~mtlM~:'Y«ili~atr,,J;i~ .hjw;_g,pa1i~ntaonoeer'
~lllfiíiioJ~ ~ f J N. 6) p ••
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••
•• GUÍA ACTUALIZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC éfw~
.g;¡:,;_Q ,

••• '

Las estructuras de lámina 13 también pueden reconocer m·uchas secuencias diferentes de ADN .

Cierre o cremallera de leucinas

.

_Esta est~ctur_a está fqm:n.~~.~tP..?b 1,9~· g,.:;,p,~l]R~s. una de cada monómero, que contiene ona, fé~(fü1a
■' cada.-.,·s1e.te\\ ~tf\ll)P~.C!qos y se m.an\renen un.11a.~lWP,9,f¡\\~.~.rJ!l~~f!.~.~.!miJ.~1!W%~ªr:nlA@ác;:kl911~rvhldrOfól11CO's,

•• generalmente luecinas formando un corto enrollamiento.' (Fig 14) Las protélnas con éstos motivos se unen al
AON siempre como dimeros , formados por dos subunidades iguales (homodlmeros) o por subunidades
diferentes (he terodímeros) .

••
•• CONSIDERACIONES PREVIAS
Luego de la T ranscripción del ARN en los distintos subtipos , hemos conseguido casi lodo lo necesario
para la s ínte sis de proteínas . Es decir, hemos obtenido un ARNm (que es copia casi fiel - recordar el cambio
de uracilo por timina - del ADN) i los ARNI y ·1os ARN ribosomales. ·

•• ,
Ensambl e de los ribosomas
. •• ,, ~ : ___ : _~~ ~ . •_::. •--~~ n ~ ~=--=- =-~ •·:_:=~_•·_-:._ _~-,, -., .., . ,. _,
Vale recordar que los rib o somas están compues ios por dos subunidades :
~ •r"""' =-':" ~ ,.-.-,. •.:t r l'.'.'- .,,••;i _-, :'I r- ,_., =--1

•• F
::,1 1 i .. • ' i:- - • ., J.11 •-- ·

.d d M ÍContíene a los ARNr 28S , 5S y 5,8S y 50 protelnas distintas (llamadas L 1, L2 , '

ni a ayor )
: ~ ---- __ ___ e 1c . . . . -· . _ .
: 1 Subunidad Menor rContiene al ARN 188 y 33 proteínas distintas· (Ua_madas S1 ' .s2, etc)
•• Inserción del aminoácido específico a los distintos ARNt
. Los ARNt recién sintetizados carecen de_l aminoácido especifico que !levan hacia la síntesis proteica.
P ara poder adosarse esp~cíficamente a. ~n ª,~J~~-á,~!~.?.; necesitan de i'-1 , pr_~sencia oe
••
la 8111!1'~~ !,roQlf
~R.-~Q.S~ t~ a. ~-~ta ':~z1ma_,' éJ-~~~JJ~~8I!J~~!:~fü.~ I}' l ~ ~ ~-~pJ)1i~~~2'.~ ~,q~clf!co. Vale
aclarar que ex1sten t20211p_p_~g~~.tmf 9 ~ ,~ ~ ,:f.w•npac1l·f_J!;RN~;.S.1t1rnJ~iR.1:tg?,!PiR ~iJ!~~~~f'ml~aG1ao~·
. . 1 . . •

•• INTRODU.C CION A-LA SINTESIS PROTEICA .

La sintesis : proteica es. uh complejo metabólico que tiene como I función plasma'r en' forma de
p roteín as la in form'?ción que trae el ARNm del núcleo.\ Reco.rdemos qlle el ARNm .es un templado de un
segmento de una hebra de ADN . Dicha informacióil. se encvenlra en el ARNm en forma de codonés , donde
,

•• cada codón son tres nucleótidos. Se puede decir entonces .que la información que trae el ARNm se encue'ntra
en forma de nucleótidos que s~ agrur<;1n .en lripletes par.a ciar lygar a los codónes (y de ahl inferí~ que el ARl'Jm
es una secuencia lineal de co<;iones). En la slntesis proteica, el ribósoma• se aleja. ele 5' i¡ se acerca
decir, se corre par el ARNm desde. el extrem.o 5 '_ hapia 3' .. ·\
.. ' . ,:
3' . Es a

"•
:·• .
, . 1 ' •
Nucfo6tldl)

1
•• _n ..E:
c.....:
5.1
A. V
_ ~,
ffi~
G e e. A
~m ~ = : 1 . • 1 ..rLJ1¿u,J
IJ . u .G ó (3 A u
--
A ·G A A A

•1P Codónde
lniéfadóni
c;~~nd~
f.in~llzád6n

. ~-e•~;.-..,,......,·d>•r··1...... r........,...,,...,u.....
. 3'

••
Rr,oÍeLCª ·0.omienza cuando· en· W1 '·"ARNm•"-s·0 ,,•enern...,~,.
l .
51 t ·
Este cod¿n Ú~iff !¡- A~~tqt~ ·; ; -~-_t; ~~ ~- e~-s~· ~1~
~nti2Ba6 h~~rr~l&f~'til\c-c~g~~~;·~ta;~·~~c:~~::A~~
"¡ Dicho A RNt tendrá asociado el aminoac1do mehornna . • .

••DATO: En la s células eucariotas, el tripl~te AUG que se encuentra más cercara al extremo 5 ' dei ÁRNm será
el que m arca el inicio de la slntesis' proteica, Y se llamará por ende CODON DE INICIAClo'N .. Si'en el mismo
ARNm , y yendo hacia 3' aparece otro c6dón ~U~ (como podría suceder) , este nuevo codón no marca el inicio

9+- ,
de una nueva sl ntesis . sino que será una meuornl"la dentro de la secuencia de aminoácidos de la protelna que

•·-
se está sintetizando en dicho ARNm

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i ' · ·

- 13 -

•
histo_a rgentina@ctomedich\a.com
 . .. . ' , :1 . •
• • / t

,_s;.-rr;a,
GUÍA ACTUALIZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC fl'rcol'cce--:.

ETAPAS E LA SINTESIS PROTEICA

i!P.ª~ ~Qn. ~; . .!!"!!f!!!!'-:tQn., Al~rgamlento (o E!e>ng¡¡i:;i(m}. y_ Terminación. Cada etapa posee
l,,!!l!!
factores especificas que regulan los fenómenos que suceden en las mismas.

1 " I I

. . . .. . © 11'-!l~IAC~CJN __ . __ _ _ .... . .... .. . ___ . . __¡

r/¡t,,;_;=º~~::~~:,;;:•:"º~;:~:.,-r~-,-~ts.J#.~:2J~:~i:~n~~d:!~~~~;~~~u~~.iá~::
\_;J s~ ubica de !manera tal que el ..§ili9v-P- quede a la - ,e~.t~e. el CAP y ~I co~ón de m1c1ac1ón, C.!\J:q!i9';1!~912~f.Ji1(
· misma altura que el codón de iniciación AUG _ !.f-f.~m
Solo se unirá s1 al ARNm se le unto la proteína ¡
_ . __ _ _ _____ CEÍP (CAP Binding Protein) j '! .
(i°)'[ rse l'F2: ~l:>ic.ª .. a!_ .AR_Nt __con _m-etio~i~,?-~;JL. M!H _.,E.J ~e la 1·T,,.~: ~
reconoce- al codóñ- de iniciación AUG--én--el
: 1AR~~-- ______ -.- .________.______ __ : _ubu~1da_p_menor n~o.som!3l, ~g~~~d~~;r~.::_ ! 'i:::_ :··
~ El ARNt que lleva mebonma se une al codón a 1 - F r ;;· 21 , 7
@. través de su asa anticodón (UAC), y se coloca en ¡ IFJ: Junt~ al IF4, ubica _el exlrem_~ 5 del ARNm sobre la 1 .. !
1 , .,
' el sitio p del rJbosoma . .: cara del nbosoma que llene los s1110s P y A . ,:·. . _.
~ i - - -- ·-- ------- ···-- - ------ ·--·---= . ___·_ ,_ __ _ .::__ __::____ __:. . ________ . . .
_:( •_;íG! subunidad menor se une a la mayor, y se :~ . . j
1 .:·.V¡ conforma el ribosoma _¡ IF5; Une las dos subunidades nbosomales 1 .,..
""
'• l

DATO: Luego de 90 nucleólidos del ARNm (o lo que es lo mismo,_luego de 30 codones), se une un nuevo
ribosoma al códón de Iniciación. De esta manera se co~forman los. polirribosomas. _

;I --=----'-'--~-- • .T~R~.l~f'.CION _ -- _: __ _ .. ¡
:i-:----_----.. Event~s -~~le~ulares . . ---.---:-;-·-1 .. F~_c!~_i:e~ ~~- T~~~!:'~«:.i_ó!)_ ln-✓-~I~~~~~~ ~.-:1
~_llegªr._~! -~ho A ª --Yfl9. de l~§...J;Qdon~:i . de termmac1on ~ 1 . . -7
(llamados también m• ;.<i:::.---:,_
.._~ ·,¡ sentido) se termina. la slntesi~ eRF · (Factor Liberador E~cari_ó tico 1): '¡
, (al no existir un ARNc para estos codones. P.ueden_ser UGA, Reconoce al codón de finahzac1ón, y lo .
1
: UAA, UAG_(cu.alquiera de estos 3 termina la slntesis) · ocupa 1

~ d~~
: 1 .. re~~e e-;-~~-é tidg .dt;I ARNl del sitio P ·-.--:-- -- . ... - - ---- 11~-RF_J: 'fl~fü!ltallk~óli~~i~tiCkl"'l'Jel-:•ARNt
~-..°'._~ ~:"'-~~:}·;;S,J?~;; .;. ·•1o '"·.":_11;.'/., . "_,.,."€~~~:~-::___________ t~-~~l~ü~~~'ifori~rg·~f~!o:t!~~~JP _ .
i
¡
J

rse separa eU ílºQS.O.!'J'lª g~! AR--tl-'11, y sus_ subunidades se

1separan también .
,z:-•-~-=---,-----1 1

hlsto_argentina@ctomedlcin¡¡.com - •
14 -
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•• GUÍA ACTUALIZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC ,§."r,;._,r:,J.
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Esquema que muestra la rase de alargamiento dé la síntesis proteica. Tomado y modificado 'dé 'Biología Molecular de la
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Célula,', de Alberts

.. . ·'

...
DATO: Recordemos que el ARNt que se une al co.dón de iniciación siempre lleva metionina. Se podría inferir
que todas las proteínas, por ende, presentan a la rnetionina como primer aminoácido de la secuencia. Sin
embargo, no es asi , debido a que generalmente la metionina es removida .

-··
•• -
\_:
CHAPERONAS Y PROTEASOMAS. EL ROL DE LA UBIQUITINA
Una vez. que emerge del· ribosoma, el polipéplido comienza a plegarse para adquirir su configuración
clásica. Para que suceda correctamente, es necesaria la acción de una familia de proteínas llamadas

.....
CHAPERONAS. ·

•..
Hay tres familias de Cliaperonas: H.SPG0, HSP70 y HSP90. El término HSP proviene de Heat Shock Protein
(Proteína del Shock Térmico), pues se vio que cuando aumenta la l~mperatura, y mientras la mayorla de las
proteínas se desnaturaliza, las H.SP aumentan su número y actividad. De !;!Sta manera, ayudan a las protelnas
~ que se están desnaturalizando a que se renaturalicen .

.. ~
~-.' Hs p10
1

..
·S,..,,,;¡:.,._ ...,,.,.l.¡,'ffl'lij~ér.1tirit!l'.Hla,Pnfé;.ºcfe·~-épti~o,·•:§"· ·--
! ...
'~
t:~f:~IJF~'Jr-:~ .\! t,JL~~~J.--~"",;.~¡. ~\.C,ITlMUr, ;.1'.~ :,t;:r1~~ ¡;il r'~fm:t:; •.- ...
· uinie...drnu...,~ralpa,unla........,t:tl"l!nffl'.tiT
'"~~d~~~~ -,...:'!t~ ~,:·+~~~•~f'-~
¡:i~,ist~fÍ9'i}jj~.i fW~É!:i:i~fl~.J.!?~ll!fas.\e::1t8soli¡,;¡;¡s~ s, a proteína va hacia la m,tocondna o hacia el ;
perox,soma, la llevan hacia las organelas . ·- - - - - - - - - - - -
@ft'.-~{f,l'
- ...

,
r · -:

-- ·
. ..=
.: r-HSPG0····1·¡_uegode.despr~nderse la HSP?O, sé-üñéaí;iprciteTria y la íH$lal!Cleli;tit~solV,-g;;i~n.~1n:t~O,,~..§J,~ u. '.

....
.-.:
·
.¡-HSP9o··
.
,
L.
~9,[..f,f:!~1,<;>Jel,~gé;j(f,,1/1:!ílto. . . . .
Tie~eci"ci~~fMpi.!~§l,.?~~~~~írfi!~las·f.\ip(0teln~s•,~qummn~oa!1.r:iú1;)~an~ier:t~t'fiii11n:iiv~s-8'.
r-E!r.1eptores~1-.c1t0soh_c.o.~:" d.e ,c.Hormonas ··•especlfioas- (Estero1des, T1ro1deas, Vitamina D, Acido
Retinoico). · . . .
. . - · • .. .

_
.

. .
_

.
. !

j
_..,, to. , e, J .!J..!!J ....., v.,.;cc.1..:,:5"' c;,.,,,~ ~ ~ ~ ~s-,,,;ien•.~ i r '.~ ~.. ,,,www :.,.,,.,,o.<l..:lmi: _• ,,m., .Q•Ai'I • • .

...-..~.. Ahora, :SR¡Y,li! , · · ~~~~"""1sJnesta~m,~1iY.~11~~J!J.l!flfflieJllfl'lcl~tl'é"~€t-il:l~~~tla. ·Para

.,..
~ :;, ello, se necesit~'"iii'íilla , .. .,_ . ,.,~\•'' -~
i_ ,l!Ai
c..,..,"'~º\..l.Ot.> ~ ~~"h~ol..,
:\,.~,...~c.-,..Q d.,_ .-4,,¡•¡......_.~-c.-..0(r ... •·,: ' )-l• ..:t•t'...0.

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CTO MEDICINA- Junin 889 - Tel/fax: 011 5237-4034

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GUíA ACTUALIZADA. DE BIOLOGIA CELULAR BC ·$!-:WS2·
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(protelna;76 am1nó~'ddos de longitud). La Ubiqultina se encuentra inactiva. P_ara activarse_Y pegar~e a la
protelna a degradar, requiere la acción de enzimas especificas en forma secuencial. Estas enzimas son .
1) E1: Activa a la Ubiquitina y la transfiere a la enzima E2 . ~
2) E2: Se pega a la Ubiquitina, y el complejo E2-Ubiquitina se una a la protelna a degradar.
3) E3: Actúa como ligasa·. Es quien une al complejo E2-Ubiquitina a la protelna .

¿Cómo hace la Ubiquitina para saber que debe se/osarse R µna protefna? . . .
•Se sabe, sobre todo en protelnas de vida corta, que la seilal para su degradación son secuencias de
aminoá¿idos llamados PEST (por Prolina - Ácido glutámico - Serina y Treonina}

DESTINO DE LAS PROTEINAS

Una proteina recién sintetizada puede tener varios destinos: el cilosol , el núcleo, el retículo
endoplásmico las mitocondrias o los peroxisomas. . .
Excepto las protelnas c;itos(>licas, el resto de las proteínas van a ir a su destino específico
dependiendo de la e:xistencia en dicha protelna de una secuencia especifica de aminoácidos llamada Péptido
Sei'\al. En las citosólicas no es necesaria la existencia de dicho péptido senal, pues al final de la s intesis se
liberan directamente en el citosol.

1) Destino: El retículo Endoplásmico

Para que un ribosoma se una al Reticulo Endoplásmico para conformar el Reliculo Endoplásmico
Rugoso (RER o REG), se necesita que en la protelna sintetizada se encuentre el Péptido Ser'lal específico
para el RE, ubicado en el extremo amino.
El P~ptido Sel'lal es reconocido por la PRS (Partlcula de Reconocimiento de la Señal), que se une al
péptido .emergente del ribosoma, deteniendo la slntesis proteica y llevando al ribosoma hacia el RE. Su unión
depende de la existencia en el RE .de las Riboforinas (receptor para el ribosoma). Una vez unido el ribosoma a
la Riboforina , la PRS se separa del PépUdo Sel'lal (volviendo al citosol) , reanudándose la slntesis proteica.
La ~RS es un ~omp~ejo Ribonucleopr~l<~J~~.;ºJTI~~.~~.?.. P.º~it~,1'.:!e_~JARN-~equeflo citoplasmt1tico) , y 6
protelnas d1ferentes.r f f i t 1 ñ e i ~ ~e~ 1far,etplffgam1ent'ó,1'empraaa&lfellias.1Jr.dtefnas.,.q ~ara~I-REG;'°,-.
~~~ (junto con el ribosoma)~rií'!tE. .
. Un vez en el RE,_ la pr~telna c o m l e n ~ . : mismo p~r medio de un tün_el proteico pres~!}!_ e en
la en la pared del RE. D1c;ha tunel se llama . . . Una vez ingresado, el pépt1do seflal es i:o~ado de
la protelna ingresante por medio de una enzima llamada peptidasa serial. · ···· ~·

2) bestlno: Membranas
Muchas protelnas van a enclavarse en . membranas, tanto la plasmática como el Sistema de
Endomembranas . Estas protelnas pueden se de Monopaso (atraviesan una sola vez la bicapa .lipldica) ,
Blpaso (pasan dos veces la bicapa) o Multlpaso (atraviesan más de una vez a la bicapa lipldica).
Por cada vez que atraviese la bicapa, la protelna emergente posee no solo 1 PRS;: sino también 1
Sei"lal de Anclaje (secuencia de aminoácidos especifica. presente en la pcoteina emergente) .. Veamos un
efemplo. Varias proteinas ,.como los receptores 7-TMS, atraviesan varias veces la bicapa lipldica (el sector de
la p.roteina que esta denlr~ de 1~ ~Jc~pa es hidrofóbico). En este caso, la protelna que se 1;stá sintetizando y
que será una 7 TMS tendra 7 P(!ptados ~ei'lales y 7 Seriales.

3},Destino: Mitocondrias
La mayoría de las protelnas mitocondriales , que deben ser sintetizadas en el citosol, deben cruza·r la
doble membrana lipídica que componen la pared mitocondrial (la MMI y la MME). Para ello, se asocian a las
HSP70 citoplasmáticas. .
La unión a la membrana mitocondrial ext~rna se ~ace a partir de un receptor especifico para el pépti~o
senal que está en la protelna que se desea 1ntroduc1r. Una vez reconocida,. es inlroyectada al interior
mit~~ondrial a través -~e una~ chaperon~s HSP70 mi!ocondr_iales, ubicadas en la;.iMertabran~.c.Milgggmjd.al
lliéif.ú, las cuales facilitan su ingreso. El Ingreso a la m1tocondr1a se hace en sectores especlficos en donde la
MMI y la MME toman contacto, y la pro!elna ingresa a través de canales proteicos llamados Transtocones
que conectan el citosol con la matriz mitocondrial, atravesando ambas membranas. Una vez en la matri¡
rnitocondrial, unas chaperonas de la familia HSP60 mitocondrial ayuda a la proteina a plegarse por medio de
una reacción que requiere gasto de A TP.

ANTIBIOTICOS.Y TOXINAS
Muchos antibióticos son capaces de interferir o la slntesis proteica: Algunos ejemplos son:

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GUÍA 4CTUALIZADA DE BIOLOGIA CELULAR BC

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91111 \ [ Tetracicliria . - i- Bloquea- law,lón Que act~an sol_ a nHmte en células procariontes
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tlill \ Í Estrépto~fcina -- !Bloquea la tran.slción de- iafasede Iniciación a Ía fa.se de É.lo~g~mlenlo

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'. 1 Rifarnpicin¡- ~-- , sié>q~~a sínte_
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cl~-r op·l~~ tos) son s-i~il~res''"a"1os r lb o~or~as~

procarróltcós respecto de sus sensibilidad a los inhlbidores precitados . Por ello, alguno de estos antibióticos '.
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: 1 Puromicina Causa la liberación premat~r~ - del.. ~~iipéplid;· -~a~iente ~~i~~-~ -~,-sitio- terminal de j -;1··
... crecim_ie!1to proteico ,

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Actinomlcina D

Í C;icloheximida
-nx..zu.:a,™"-,41.
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I
Se une al AON y bloquea ~I movimiento d.e la ARN. p~lí,,:,-~~~s~-
-------
~,~iesi~ -de· A-RÑ)··- j

Que actúan solamente en células eucariontes

lsiociueal a Translocación ribosomal
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.. f Anis~_micina
1 Alfa Á_rnanti_na _.. I_
f Bloquea la reacción de.la peptidil tr~n~ferasa
81~9~~-ª:1~ slnt~s_i~ de ARN~ ai u·nirs_~ ~~pe~lficament~ a ¡~-ARN_p9li~e-rasa 11

.-
La Toxina Diftérica (toxina presente en la bacteria Corynebacterium dlphteriae) anula al EF-2 y lo
JIA inactiva. Esto lleva a una muerte celular.

..•
A Todas las células del organismo se reproducen al duplicar su contenido, para luego dividirse en dos
células hijas. Luego , ambas células hijas cumplirán su runción dentro dE;I _tej!do en el qué se encuentren, para
luego reproducirse, conformándose de esta manera un Ciclo: E~~.l;!:Jn_
por lo visto previamente, por dos momentos:
m ,_lM.,llr. Dicho ciclo celular comprende,

-~
► l t j t ~ Es el periodo comprendido entre una división celular y la siguiente; su tiempo de d1.1~1Gión"
~ es muymffl_t:llE!.
► et~il!!Ll?,~,\9,tÁ~-r,;;p~~~~~~Nt: Normalmente d1;J_

--
ra:.1;:J:Ii¡,:m., aproximadamente.

--~
--:
_..,
Ya hemos visto de donde a_donde se extiende esta
fase . La interfase se subdivide , a su vez, en :
► ~ ( p o r gap, de d6t~"Pl.e!tt1Villi'ialille dependiendo
Dlvlslon Celular

-,,.~,
de la celuia) ;
..-,:, ► fa.se.::S (por sintesis , dt:ir,a~iiltWithfíi'~s); y
-~ d í'i)~..,.a,,Kor~s).
► ;{3se,.@2 (por gap, m:P.~!'-/~~~ -J~ .. ..
. . .. .. , 1
1111.: Los tiempos de cada fase son casi constantes en
todas las células del organismo, excepto la fase G1 , ~ue su
tiempo varia dependiendo de la c.élula que s~ estudia _ (de

,,.'.
l
tres horas hasta años) . Ciertas celulas se r~liran del ciclo
GO
•: ✓ celular (como los linfocitos o las neuronas), e ingresan a una

,.,_~
tase de G 1 llamada GO. _ _ •. r- u ,. . . ..,.,.. ,.,,·-,··,c--"•· ••-..1r
En la ffii.f:l"(.S,'f¡;;~s~tiai'f:l:i:•uuf;~~t.llu;o ·· pfucesu:s

•- ~
met~tfólfóds'~-pÍ'é)pifüs1;·qt1·.utl!'c lffiíi: absorción, secreción,

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