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proceso de la 3ra IASME/WSEAS Int. Conf. sobre Energía, Medio Ambiente, Ecosistemas y Desarrollo Sostenible, Agios Nikolaos, Grecia, 24-26 de julio de 2007 sesenta y cinco

aceites esenciales derosmarinus officinalisL., efecto de las fechas de cosecha,

sustratos y fertilizantes
MG MIGUEL, C. GUERRERO, H. RODRIGUES, J. BRITO
Facultad de Ingeniería en Recursos Naturales,
Universidad del Algarve, Campus de Gambelas, 8005-139 Faro,
PORTUGAL

F. DUARTE, F. VENÂNCIO, R. TAVARES

INETI, IBQTA, Departamento de Tecnología para Industrias Químicas,
Paço do Lumiar Road, Códice de Lisboa de 1699,
PORTUGAL

Resumen: - Los efectos de la fecha de cosecha, los medios de cultivo y los fertilizantes sobre el
rendimiento y la composición química de los aceites esenciales derosmarinus officinalisL. mantenidas en
macetas fueron evaluadas. El mayor rendimiento de aceite se obtuvo siempre en junio, siendo mayor o
igual al 1 %. El mirceno fue el componente mayoritario presente en los aceites esenciales con
concentraciones siempre superiores al 20%, independientemente de los factores estudiados. También se
pudo detectar 1,8-cineol (8,0-12,2 %), α-pineno (8,8-16,5 %) y, en algunos casos, alcanfor (4,4-14,1 %) en
cantidades considerables, sin superar nunca los porcentajes de mirceno. Las cantidades de alcanfor
(4,4-8,5 %) siempre fueron inferiores a los niveles de 1,8 cineol (8,8-11,8 %) en el suelo arenoso local,
independientemente de la fertilización utilizada. En general, los niveles más bajos de mirceno y verbenona
se observaron durante enero y abril, mientras que las cantidades más altas de 1,8-cineol se observaron en
abril o junio.

Palabras clave: - Externalidades forestales, aceite esencial, planta medicinal, biodiversidad, conservación.

1. Introducción luego se cosecharon las plantas en diferentes períodos y se

Los países mediterráneos poseen condiciones climáticas y
de suelo adecuadas para el desarrollo de una flora
particular, a saber, las plantas aromáticas.rosmarinus
officinalisL., una planta aromática perteneciente a la labios
mayores, es endógena de Europa, Asia y África,
especialmente en las zonas que rodean el Mar
Mediterráneo [1]. Sin embargo, esta planta aromática
también se puede encontrar en otros países como
Argentina, Brasil, Uruguay, entre otros [2,3].
Varios países cultivan el romero ya que sus aceites
esenciales se pueden utilizar en las industrias de alimentos,
perfumería, cosmética y farmacéutica [2,3].
Varios estudios sobre la composición química de
los aceites esenciales deR. officinalisL. de
diferentes orígenes geográficos y demostraron
cierta variabilidad química [1,4-8]. El aceite de
romero portugués se caracteriza, por ejemplo,
por altas cantidades relativas de mirceno [1].
En este trabajo,R. officinalisL se mantuvo
en macetas en diferentes medios de cultivo y
sometidos a diferentes tipos de fertilización. los
comparó la composición del aceite.
2 Material y métodos
2.1 Material vegetal
Esquejes terminales de plantas maduras cultivadas en el
campo de rosmarinus officinalisL., ubicadas en Nave do
Barão (Algarve, Portugal) se recolectaron en diciembre
de 1996. Cada esqueje de 5 cm de largo se colocó en un
vivero alveolar de 0,05 L lleno con un 75% de turba no
fertilizada (fuente De Baat H2) con 25 % perlita gruesa,
pH de 5,8 a 6,5. Los esquejes se mantuvieron en
invernadero a una temperatura de 10-15ºC y 50% de
humedad y se rociaron con agua cada semana (1 L/
recipiente vivero). Después de 90 días sin fertilización, se
trasplantaron tres esquejes enraizados a macetas de 2,5
L y se colocaron al aire libre. La temperatura media
diaria del aire y la media mensual de horas de insolación
durante el período experimental (abril de 1997 a octubre
de 1998) se presentan en las Figuras 1 y 2,
respectivamente. las plantas eran
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distribuidas en tres grupos de dieciocho macetas cada a 180ºC a 3ºC.min-1. Temperatura de línea de transferencia,
uno según el tipo de material de sustrato utilizado: un 250ºC; temperatura de la trampa de iones, 220°C; gas portador
suelo arenoso local (LA), una turba fertilizada (De Baat helio ajustado a una velocidad lineal de 30 cm.s-1; relación de
N2, 20% turba negra y 80% turba blanca (rubia), pH de división, 1:100; energía de ionización, 70 eV; corriente de
4,8 a 5,2, fertilización N:P:K 1,0 kg.m-3, M. De Baat bv) (B) ionización, 60 μA; rango de escaneo, 30-400 amu; tiempo de
y una turba no fertilizada (Shamrock, 100% turba blanca, escaneo, 1 s. La identidad de los componentes se asignó por
pH de 4,8 a 5,0, Bord na Mona) (C). Cada grupo de comparación de sus índices de retención, en relación con C9-C21
material de sustrato se dividió en dos parcelas y se no-alcanos y espectros de masas con los datos
fertirrigó (200/ml de maceta) quincenalmente con dos correspondientes de los componentes de los aceites de
soluciones de fertilización diferentes: 5g.L-1de Hakaphos referencia.
15:05:30 con 2% Mg (F1) y Hakaphos 13:40:13 con 0,4% Los componentes considerados en el presente trabajo
Mg (F2). El ensayo tuvo seis tratamientos con nueve son aquellos cuyas concentraciones alcanzaron al menos una vez el
repeticiones (material de cultivo x solución de 1 %.
fertilización).
Durante los meses de cosecha (octubre de 1997,
enero, abril y junio de 1998), el material vegetal se
3 resultados
obtuvo cortando las partes aéreas de los arbustos de
Los mayores rendimientos de aceite se observaron
donde se obtuvieron los aceites esenciales como se
en junio con porcentajes mayores o iguales al 1 %,
describe a continuación. El ensayo se llevó a cabo en
independiente del sustrato o tipo de fertilización
el Campus de Gambelas, Algarve, a nivel del mar,
utilizado en el experimento (Cuadros 1 y 2). Los
longitud 7º58'31'' O y latitud 37º02'35'' N.
principales componentes de los aceites fueron
mirceno (21,6-30,0 %), α-pineno (8,8-16,5 %) y 1,8-
2.2 Procedimiento de aislamiento
cineol (8,0-12,2 %). En algunos tratamientos, los
Los aceites fueron aislados del material fresco por
porcentajes de alcanfor también se encontraban en
hidrodestilación, durante cuatro horas, utilizando un
cantidades relativamente altas, siendo similares o
aparato tipo Clevenger, según el procedimiento descrito
incluso superiores al contenido de 1,8-cineol. Tales
en la Farmacopea Europea [9].
datos fueron más evidentes en algunos de los aceites
Algunos datos no se muestran porque el material vegetal
esenciales obtenidos de las plantas mantenidas en
no fue suficiente para el aislamiento del aceite y el análisis
turba no fertilizada o fertilizada y en ambos tipos de
químico.
fertirrigación. Únicamente las plantas mantenidas en
suelo arenoso, independientemente del fertilizante
2.3 Análisis de los aceites esenciales
utilizado, tuvieron siempre mayores cantidades de
2.3.1 Cromatografía de gases
1,8-cineol (8,8-11,8%) que de alcanfor (4,4-8,5%). El
Los análisis cromatográficos de gases se realizaron
limoneno y la verbenona también se encontraban en
utilizando un cromatógrafo de gases Hewlett Packard 5890
niveles relativamente altos (1,0-8,8 % y 3,4-7,9 %,
Serie II equipado con un FID, un sistema de manejo de
datos y una columna de sílice fundida OV-101 (30 mx 0,25
El período de recolección del material vegetal.
mm; espesor de película 0,25 μm). La temperatura del
parece influir en los niveles de algunos componentes
horno se mantuvo a 70ºC durante 5 min y luego se
de los aceites esenciales. Exceptuando aquellas
programó a 220ºC a 2ºC.min-1. Las temperaturas del
muestras en las que no hay aceite esencial, por falta
detector y del inyector se fijaron en 260ºC y 250ºC,
de material vegetal en cantidad suficiente para el
respectivamente. El gas portador fue helio y el flujo de
aislamiento del aceite, y los aceites aislados de
trabajo fue de 1 mL.min-1. La composición porcentual de los
plantas mantenidas en la turba no fertilizada
aceites se calculó mediante el método de normalización a
fertirrigada con el fertilizante F2, el contenido de
partir de las áreas de los picos de GC, se calcularon los
mirceno disminuyó a partir de octubre a enero o
valores medios de dos inyecciones de cada aceite sin utilizar
incluso abril, a partir de los cuales se detectó un
factores de corrección.
nuevo incremento (Cuadros 1 y 2). Aunque se había
observado un comportamiento similar para el α-
2.3.2 Cromatógrafo de gases-espectrometría de masas
pineno, se observaron algunas excepciones para los
Los análisis de GC/MS se realizaron con un cromatógrafo de
aceites aislados de las plantas mantenidas en la turba
gases Perkin Elmer 8320, equipado con una columna de
no fertilizada y fertilizada fertirrigada con el
sílice fundida OV-101 (30 mx 0,25 mm; espesor de película
fertilizante F2. Para el primer caso se detectó un
de 0,25 μm) e interconectado con un detector de trampa de
ligero aumento en las cantidades de α-pineno
iones Finnigan MAT 800 (ITD; software 4.1). ). ). La
mientras que para el segundo caso;
temperatura del horno se mantuvo a 70ºC y se programó
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Los niveles más altos de 1,8-cineol (8,8-12,2%) se
observaron en abril o junio. Para la verbenona, las
cantidades más bajas (3,4-5,3 %) se detectaron durante
enero y abril. El mayor porcentaje de este componente
se detectó en los aceites esenciales aislados de las
plantas mantenidas en la turba fertilizada y fertirrigadas
con el fertilizante F2, en octubre.
4. Discusión
Los rendimientos de aceite estuvieron de acuerdo con la
literatura para esta especie [4,5,10] así como sus variaciones
según la época de cosecha [11,12]. Los mejores rendimientos
de aceite encontrados en junio coinciden con el aumento de la
temperatura (Figura 1) y un fotoperíodo más largo (Figura 2).
Según algunos autores [11] estos resultados revelan que el
verano es la mejor época para explotar los aceites de romero.
Nuestros resultados, a pesar de la falta de análisis estadístico,
también fueron comparables con los obtenidos por Morettiy
otros. [13] quienes observaron que los tratamientos
agronómicos probados no afectaron mucho los rendimientos
de romero en contraste con el tiempo de cosecha.
El mayor porcentaje de mirceno presente en
los aceites esenciales de romero también son esenciales de
acuerdo con la literatura en la que los aceites de portugués
R. officinalisse refieren como pertenecientes al tipo mirceno
[1,14] en contraste con las muestras de aceite de Hungría,
España e Italia [4,10], que eran ricas en α-pineno, 1,8-cineol
y alcanfor, y las de Argelia constituida principalmente por
1,8-cineol [5]. Las diferencias cuantitativas de mirceno en
los aceites de romero detectadas en el presente
experimento y en función del momento de la cosecha
también fueron reportadas por Lawrence [14], aunque los
datos solo se refieren a las etapas de floración. A pesar de
que algunos autores han detectado variaciones
cuantitativas de α-pineno, 1,8-cineol y alcanfor para esta
especie en otros países [7,11,15] dependiendo del período
de recolección, nuestros propios resultados parecen sugerir
también que tal variación , en algunos casos, también
dependía de los tratamientos agronómicos. Estos factores
indujeron diferentes crecimientos vegetales, no
cuantificados en el presente trabajo, pero verificado como
productor de biomasa insuficiente para el aislamiento de
aceite en algunos medios de cultivo, así como en algunas
fertirrigaciones utilizadas. Algunos autores [11] también
detectaron diferentes signos macroscópicos de las plantas
de romero, así como diferencias cuantitativas en algunos
componentes del aceite según los tipos de suelo, aunque
dichas variaciones también dependían del período de
recolección.
Verbenona, un componente importante en los aceites
esenciales de alta calidad deR. officinalisL. [16], también se encontraba
en porcentajes relativamente altos en los aceites, dependiendo del
período de recolección. Se observó un comportamiento similar
67
por algunos autores [11] en plantas de romero mantenidas en
un suelo limo granítico o en un suelo altamente calcáreo. Cabe
mencionar que los porcentajes de verbenona que se
encuentran en los aceites esenciales de romero también
dependen de su origen geográfico 1,6,7,10]. Los porcentajes de
verbenona también parecen depender del tipo de aislamiento
del aceite porque los niveles de este componente encontrados
por Miguely otros. [17], utilizando el procedimiento de
destilación-extracción, fueron superiores, superando en la
mayoría de los casos el 10 %. Por lo tanto, la influencia del
procedimiento de aislamiento en la composición química de los
aceites esenciales también debe tenerse siempre en cuenta.
5. Conclusión
Las diferentes etapas del ciclo de vida de la planta se revelan
importantes tanto en el rendimiento como en la composición
química de los aceites de romero, especialmente en los
componentes mayoritarios. Sin embargo, en esta etapa de
nuestra investigación, queda por aclarar la influencia
predominante de los sustratos y fertilizantes utilizados en el
experimento sobre la calidad del aceite.
Expresiones de gratitud
Los autores desean agradecer el apoyo
financiero de FCT (Portugal) y CDCTPV
(Portugal) para este trabajo.
Referencias:
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romero (rosmarinus officinalisL.) de diferentes

25

20
Temperatura media diaria del aire (Cº)

15

10

0
Ene Feb Mar abr Mayo Junio Jul Agosto sep oct Nov Dic
meses

1997 1998

Figura 1. Temperatura media diaria del aire durante el período experimental.

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300

250
Insolación media mensual (h)

200

150

100

50

0
Ene Feb Mar abr Mayo Junio Jul Agosto sep oct Nov Dic
meses

1997 1998

Figura 2. Promedio de horas de insolación mensual durante el período experimental.

Cuadro I. Rendimiento de aceite y composición porcentual de los aceites esenciales aislados de las partes aéreas
de rosmarinus officinalisL. mantenido en tres materiales de crecimiento (suelo arenoso local-LA; turba fertilizada -
B, turba no fertilizadaC) y fertirrigado con una solución de 5g.L-1de Hakaphos 15:05:30 con 2% Mg (F1) y
recolectadas en diferentes épocas de cosecha.
oct- Janu- abril junio oct. Janu- Abril Junio Octubre- Janu- abril junio
ber ario ario ber ario
compuesto LA LA LA LA B B B B C C C C
α-pineno 15,4 13,1 12,8 15,8 15,1 13,4 13,1 16.5 15,5 11,8 12,3
canfeno 3.1 3.7 3.8 4.0 4,6 3,8 3,6 3,1 3.8 3.3 3.3
β-pineno 3,9 5,8 6,6 4,6 4,7 7,3 3,7 3,6 5.1 6.5 4.2
mirceno 30.0 25,8 23,2 25,9 21,6 24,6 27,5 29,9 27,7 24,0 29,9
α-terpineno 1.0 0.7 0.7 0.8 1.0 0.9 0.7 0.8 0.8 0.6 0.7
PAGS-cimeno 0.5 1.0 0.5 1.9 0.6 0.8 1,5 0,4 0.8 0.6 0.8
limoneno 4.8 5.3 6.0 3.6 1.0 5.1 5.4 5.0 6,9 5,2 6,8
1.8-Cineol 8.8 10,2 10,7 11.8 10.0 10,6 11,3 8,6 8,6 12,2 8,8
cis-Ocimeno 2.4 2,8 1,6 3,6 1,7 3,8 2,4 0,6 1.0 1.1 1.0
γ-terpineno 3.2 3.8 3.0 2.7 2,4 3,7 2,5 2,2 2.9 2.4 2.1
terpinoleno 1.2 1.1 1.0 0.9 1.1 1.0 0,9 1,2 1,2 1,0 0,9
linalol 1.3 1.0 1.1 1.0 1.2 1.0 1.6 1.8 1.1 1.1 1.4
alcanfor 4.4 7,6 8,5 7,4 11.0 7,4 9,4 9,2 8,9 9,8 12,2
Borneo 1.0 1.4 1.3 1.1 1.0 1.4 1.0 1.1 1,1 0,7 1,1
terpinen-4-ol 1.0 1.1 1.3 1.1 1,0 1,2 1,1 0,9 0.7 1.1 1.0
α-terpineol 1.4 1.3 1.6 1.3 1,4 1,5 1,5 1,4 1.1 1.5 1.5
verbenona 5.8 4.0 3.6 4.8 4.0 4,2 6,4 5,3 3,5 3,5 5,8
βCariofileno 1.1 2.0 3.1 0.8 2.0 1.8 0.7 1.0 1,4 3,0 0,5
cariofileno 0.4 1.0 1.0 0.6 1.1 0.7 0.5 0.3 0,5 1,3 0,5
oxidar

Rendimiento de aceite (v/w) 0.5 0.4 1.2 1.3 0.5 1,0 1,4 0,5 0.6 0.7 1.4
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Tabla II. Rendimiento de aceite y composición porcentual de los aceites esenciales aislados de las partes aéreas de
rosmarinus officinalisL. mantenido en tres materiales de crecimiento (suelo arenoso local-LA; turba fertilizada -B, turba
no fertilizadaC) y fertirrigados con una solución que contiene Hakaphos 13:40:13 con 0,4% Mg (F2) y recolectados en
diferentes épocas de cosecha
Octo Enero- Abril Junio Octubre Enero Abril Junio Octubre Enero Abril Junio
Ber ario

compuesto LA LA LA LA B B B B C C C C
α-pineno 15,4 15,0 13.4 8.8 14,6 12,2 14,4 11.8 12.3 12.6
canfeno 3,5 4,2 3,7 2.5 4,0 3,8 3,8 2,4 3.0 3.5
β-pineno 3,7 5,7 7,4 2.0 4.2 6.3 4.3 3.2 5.1 5.8
mirceno 26,1 22,8 23.4 28.5 26,0 22,8 24,6 22.2 28.6 24.0
α-terpineno 0.8 0.8 0.7 0.6 0.9 0.7 0.6 0.4 0.7 0.6
PAGS-cimeno 0.6 1.0 0.6 1.1 1.0 0.8 1,2 0,8 0.6 0.5
limoneno 5.5 5.0 6.8 6.4 7.0 7.1 8.8 7.9 8.2 7.2
1.8-Cineol 9,6 10,7 9.5 9.6 9.0 10,8 10,0 8,0 8.8 11.4
cis-Ocimeno 2,6 2,7 1,8 0.6 2.2 1,2 1,1 0,6 1.0 1.0
γ-terpineno 2.7 3.0 2.7 1.8 2.9 2,7 2,6 2,0 2.8 2.1
terpinoleno 1.2 1.0 0.8 1.2 1.1 1.1 1.4 1.3 1.1 1.2
linalol 1,9 0,7 1.2 3.5 1.2 1.4 1.3 2.2 0.9 1.1
alcanfor 6,6 7,5 7,4 14.1 8.0 10.5 9.2 11.8 10.1 10.3
Borneo 1.1 1.2 1.4 1.4 1.1 0.6 1.0 1.1 1.1 1.0
terpinen-4-ol 1.1 1.0 1.0 1.2 1.0 1.1 0.9 1.1 0.9 1.0
α-terpineol 1.4 1.2 1.5 1.9 1.3 1.5 1.3 1.5 1.4 1.6
verbenona 6,7 4,6 3,9 7.9 5.3 5.1 4.5 4.8 3.4 4.6
βCariofileno 1.4 1.8 2.8 0.7 1.1 2.1 1.4 2.5 0.8 2.7
cariofileno 0.4 t 0.7 0.6 0.6 1,2 0,6 1,1 0.6 1.2
oxidar

Rendimiento de aceite (v/w) 0.5 0.3 0.9 0.6 0.6 1,0 1,0 0,7 0.7 0.7