PROTOCOLO DE LIMPIEZA

Introducción:

La contaminación de muestras suele deberse por varias fuentes contaminantes,

las cuales pueden ser muy comunes a la hora de la recolección de las muestras,
ocasionadas por el recolector como por ejemplo: suciedad en las manos del
mismo, manos contaminadas con productos del cuidado de la piel como cremas
de manos. También puede darse por la mala limpieza del equipo utilizado tanto
para extraer la muestra, como el utilizado para guardarla. Además, también puede
deberse a la introducción involuntaria de uno o más microorganismos como:
Bacterias (incluidas las bacterias termófilas) y micoplasma, Mohos y levaduras,
Virus (phcbi, s.f.).

Objetivo:

Establecer la técnica y procedimiento adecuado para la limpieza y desinfección

durante la recolección de las muestras de raíz de Pithecellobium, con el fin de
minimizar el riesgo de contaminación de las muestras.

Material y equipo:

 Jabón antiséptico.
 Toallas absorbentes.
 Agua
 Agua des ionizada.
 Bisturí.
 Yodo al 10%.
 Etanol al 70%.
 Rotulador negro.
 Cinta Masking Industrial.
 Tijeras.
 Microdyn
 Agua purificada
  Hipoclorito de sodio
 Bolsas de cartón.
 Balde

Equipo de protección personal:

 Guantes limpios de nitrilo.

 mascarilla.
 bata u otro tipo de ropa protectora.
 Lentes de seguridad.

Metodología:

 El personal debe lavarse las manos previas a la recogida del material

vegetal; para ello se usará un jabón antiséptico y bastante agua, los pasos
para una técnica correcta de lavado de manos según la OMS es la
siguiente:
 Mojarse las manos
 Aplicarse suficiente jabón para cubrir toda la mano
 Frotarlas manos entre si
 Frotar la palma de la mano derecha contra el dorso de la mano
izquierda entrelazando los dedos, y viceversa
 Frotar las palmas de las manos entre sí , con los dedos entrelazados
 Frotar el dorso de los dedos de una mano contra la palma de la
mano opuesta , manteniendo unidos los dedos
 Rodeando el pulgar izquierdo con la palma de la mano derecha,
frotarlo con un movimiento de rotación, y viceversa
 Frotar la punta de los dedos de la mano derecha contra la palma de
la mano izquierda, haciendo un movimiento de rotación, y viceversa.
 Enjuagar las manos.
 Secarlas con una toalla de un solo uso.
 Utilizar la toalla para cerrar el grifo

Como se muestra en la siguiente imagen:

 Figura #

 Una vez concluido lo anterior, colocarse guantes de nitrilo.

 Desinfectar el material a utilizar para la extracción de la muestra de raíz,
para ello el bisturí a utilizar se pasa por yodo al 10% durante 1min, después
a Etanol al 70% durante 1 min.
 Una vez cortadas las muestras se enjuagan con abundante agua del grifo
para eliminar los fragmentos de tierra.
 Se introducen a un recipiente con agua purificada que contenga 5 gotas de
microdyn durante dos minutos.
 Secarlas con toallas absorbentes y empaquetar por separado cada una de
ellas. (Empaquetar en bolsas de cartón o papel, se debe evitar las bolsas
de plástico, que condensan la humedad y favorecen la proliferación de
bacterias.) y etiquetar.
 Las raíces son sometidas a asepsia superficial en etanol al 70% durante 1
 Minuto.
 Posteriormente se introducen a hipoclorito de sodio al 2.5 % por 2 minutos.
 Luego nuevamente se pasan por etanol al 70 % durante 1 minuto
 seguido de eso se realizan dos lavados en agua destilada y esterilizada por
un minuto (Araujo 2002).

Bibliografía:

 AEMPI (15-10-2017) Los pasos para una técnica correcta de lavado de

manos según la OMS, recuperado de https://www.elsevier.com/es-
es/connect/actualidad-sanitaria/los-pasos-para-una-tecnica-correcta-de-
lavado-de-manos-segun-la-oms
 Organización Mundial de la Salud. (2009, Mayo). Como lavarse las manos?
[Digital image]. Retrieved September 27, 2017, from
http://www.who.int/csr/resources/publications/swineflu/gpsc_5may_How_To
_HandWash_Poster_es.pdf
 Araujo, W.L.; Marcon, J.; Maccheroni, W.Jr.; van Elsas, J.D.; van Vuurde,
J.W.L.; Azevedo, J.L. (2002). Diversity of endophytic bacterial populations
and their interaction with Xylella fastidiosa in citrus plants. Appl. Environ.
Microbiol. 68(10): 4906-4914.