Técnica de la hematina ácida de Baker

Ir a la navegaciónIr a la búsqueda
La hematina ácida de Baker es una técnica histológica para evidenciar la
presencia de fosfolípidos. El método fue creado por J.R. Baker en 1946, y se cree
que se fundamenta en la reacción de la hematina con el radical fosfato, aunque no
está totalmente demostrado. Resulta útil en el estudio histológico do cerebro, así
como en estudos hematológicos.

Índice

 1Fundamento
 2Tejido control y diana
 3Fijador óptimo
 4Grosor de corte
 5Reactivos
 6Procedimiento
o 6.1Preparación de la muestra
o 6.2Método de tinción
o 6.3Resultados
 7Véase también
 8Bibliografía

Fundamento[editar]
Los tejidos, para obtener resultados óptimos, deben fijan en formol-calcio de Baker
para prevenir la disolución de los fosfolípidos. Los tejidos son entonces cromados
con lo que los fosfolípidos y otras sustancias ácidas no lipídicas, forman complejos
de quelato.
La especificidad tintorial para fosfolípidos ha sido cuestionada. Si las técnicas de
hemateína ácida se utilizan en tejido cerebral, se aprecia una diferencia entre la
materia gris y la materia blanca, aunque los análisis químicos de ambas muestran
que hay una pequeña diferencia en la cantidad de fosfolípidos y lípidos no
saturados entre la materia gris y blanca. Algunos estudios indican que el
componente de fosfolípidos no es tan importante como la cantidad real de lípidos.
La mielina presente en grandes cantidades en la materia blanca es una estructura
multilaminar, y se cree que esta configuración puede agarrar a los iones cromo en
una estructura estable y tridimensional, que es resistente al paso de
diferenciación.
Los eritrocitos también se tiñen con métodos de hematina ácida, y fue
formalmente asumido que esta tinción se atribuía al contenido fosfolípido del
eritrocito. El hecho de que la tinción de eritrocitos estuviese presente incluso
después de procesos de extracción de lípidos significa que el fosfolípido presente
estaba fuertemente sujeto al tejido de la proteína. Análisis bioquímicos han
revelado que menos del 1% del peso seco es fosfolípido, y trabajos posteriores
demostraron que la hemoglobina presente es el componente responsable para la
coloración positiva con métodos de hemateína ácida. Esto indica que las pruebas
tales como la hemateína ácida de Baker no son ni sensibles ni específicas para
fosfolípidos.

Tejido control y diana[editar]

El tejido que se debe utilizar para esta técnica es el tejido adiposo, que es el que
tiene mayor concentración de fosfolípidos.

Fijador óptimo[editar]
El fijador ideal para este tipo de técnica es una solución de formol-calcio.
Se debe aclarar que la formalina neutra estabilizada tiende a eliminar los
fosfolípidos de los tejidos. Sin embargo el formol-calcio, cuando es usado después
de la formalina neutra, puede preservar los fosfolípidos. A veces los fosfolípidos
pueden ser demostrados en secciones de parafina fijadas en formalina neutra.
Para su preparación se mezclan (para 100cc):

1. 10 cc de formaldehído al 40%
2. 10 cc cloruro anhídrido de calcio al 10%
3. 80 cc de agua destilada

Grosor de corte[editar]
El material que se utilice deberá tener un grosor de 6 a 12 micras y se realizarán
los cortes sobre tejido congelado.

Reactivos[editar]
1. Dicromato de potasio al 5%
0. 5 g dicromato potásico
1. 1 g cloruro de calcio
2. 100 cc agua destilada

1. Hematina ácida:
0. 0,05 g Hematoxilina
1. 1 cc yoduro de sodio al 1%
2. 1 cc ácido acético glacial
3. 48 cc agua destilada
Preparación: conservar la hematoxilina y el yoduro de sodio en un matraz; añadir
el agua y calentar hasta ebullición; enfriar; añadir ácido acético. Usar una única
vez ya que la solución no es estable.
 1. Solución diferenciadora (es estable, pero
debe guardarse en oscuridad):
0. 0,25 g bórax
1. 0,25 g ferrocianuro potásico
2. 100 cc agua destilada

Procedimiento[editar]
Preparación de la muestra[editar]
La muestra requiere preparación previa:

1. Fijar las pequeñas piezas de tejido en

formol-calcio durante 6 horas. Este tiempo
puede prolongarse.
2. Introducir en la solución de dicromato y
cloruro de calcio durante 18 h a
temperatura ambiente.
3. Introducir los bloques en la solución de
dicromato fresca, durante 24 h a 60 °C
4. Lavar el tejido en agua durante 6 horas
5. Obtener secciones por congelación de 6 a
12 micras
Método de tinción[editar]
La técnica de tinción es como sigue:

1. Colocar las secciones en la solución de

dicromato y cloruro de calcio durante 1 hora
a 60 °C
2. Lavar en agua corriente durante 5 minutos,
enjuagar con agua destilada
3. Colorear las secciones con la hematina
ácida durante 5 horas a 37 °C
4. Enjuagar las secciones con agua destilada,
2 cambios y diferenciar con la solución de
ferrocianuro de borax 18 h a 37 °C
5. Lavar en agua corriente durante 10 min;
enjuagar con agua destilada
6. Montar en gelatina de glicerol
Resultados[editar]
1. Fosfolípidos: azul-negro
2. Fondo: marrón-amarillo
3. Nucleoproteínas: azul-negro
 Véase también[editar]
 Hematoxilina eosina
 Técnica de Papanicolau
 Técnica de Romanowsky

Bibliografía[editar]
 Sheehan, Dezna; Hrapchak, Barbara (1980).
«Theory and practice of Histotechnology». The
C.V. Mosby Company (2 Ed edición).
 Baker, J.R. (1964). «The histochemical
recognition of lipine». Science, 87: 441-447.
 ARP, ed. (1992). «Métodos
Histotecnológicos». Instituto de patología de
las Fuerzas Armadas de los EEUU (AFIP).

s Wikimedia

s: Q9090836
Categoría: 
 Tinciones
Menú de navegación
 No has accedido
 Discusión
 Contribuciones
 Crear una cuenta
 Acceder
 Artículo
 Discusión
 Leer
 Editar
 Ver historial
Buscar
Buscar Ir

 Portada
 Portal de la comunidad
 Actualidad
 Cambios recientes
 Páginas nuevas
 Página aleatoria
 Ayuda
 Donaciones
  Notificar un error
Herramientas
 Lo que enlaza aquí
 Cambios en enlazadas
 Subir archivo
 Páginas especiales
 Enlace permanente
 Información de la página
 Citar esta página
 Elemento de Wikidata
Imprimir/exportar
 Crear un libro
 Descargar como PDF
 Versión para imprimir
En otros idiomas
 Galego
Editar enlaces
 Esta página se editó por última vez el 14 sep 2019 a las 20:21.
 El texto está disponible bajo la Licencia Creative Commons Atribución Compartir Igual 3.0; pueden aplicarse
cláusulas adicionales. Al usar este sitio, usted acepta nuestros términos de uso y nuestra política de privacidad.
Wikipedia® es una marca registrada de la Fundación Wikimedia, Inc., una organización sin ánimo de lucro.
 Política de privacidad

 Acerca de Wikipedia

 Limitación de responsabilidad

 Versión para móviles

 Desarrolladores

 Estadísticas

 Declaración de cookies