COMPONENTE PRACTICO BIOQUÍMICA

MARIA PAOLA QUINTANA SISA

GRUPO: 151030_16

ROLANDO DIAZ
TUTOR LABORATORIO

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

BIOQUÍMICA
BUCARAMANGA – SANTANDER
ABRIL DEL 2019
 INTRODUCCIÓN

Dentro de muchos alimentos que consumimos cotidianamente encontramos moléculas orgánicas

esenciales para la subsistencia y funcionamiento de los seres vivos; dentro de esas moléculas
están los aminoácidos, proteínas, carbohidratos y ácidos grasos.
Los aminoácidos juegan un papel clave en casi todos los procesos biológicos y son la base de las
proteínas, los tejidos, enzimas, hormonas, anticuerpos y algunos neurotransmisores se forman
gracias a las proteínas siendo estas indispensables para la formación de huesos, músculos u otros
tejidos, los carbohidratos son la fuente más importante de energía inmediata y estructural para
los seres vivos y los ácidos grasos son utilizados por el organismo como fuente de energía y para
la absorción de vitaminas.
Durante esta práctica utilizaremos procedimientos experimentales en el cual mediante pruebas
químicas con algunas reacciones verificaremos que sustancias tienen presencia de aminoácidos,
proteínas, carbohidratos y ácidos grasos. Resaltando las propiedades que tienen cada una de estas
moléculas.
 OBJETIVOS

Objetivo General
Realizar pruebas experimentales para identificar la presencia de aminoácidos, proteínas,
carbohidratos y ácidos grasos en diferentes sustancias.

Objetivos Específicos
 Comprender e integral los conocimientos teóricos con los procedimientos experimentales.
 Adquirir conocimientos básicos sobre bioquímica que puedan ser llevados a la práctica
profesional.
 Realizar todas las practicas cumpliendo con las normas de bioseguridad.
 Realizar cada una los procedimientos experimentales, observando y diferenciando cada
una de las moléculas a estudiar con las reacciones propuestas.
 Adquirir los elementos necesarios para realizar pruebas químicas y posteriormente tener
la capacidad de interpretar y presentar resultados.
 1 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO

Referente teórico seguridad y normas de laboratorio

Se entiende la práctica de laboratorio, como la estrategia pedagógica que facilita la consolidación
del aprendizaje y el desarrollo de competencias disciplinares. La práctica de laboratorio puede
desarrollarse en una sesión o en varias sesiones de acuerdo a las indicaciones que se den en la
programación de cada periodo académico.
En el laboratorio se realiza, para el caso del curso de bioquímica, prácticas experimentales: en
donde se aprenden a manipular equipos, reactivos químicos, conformándose pequeños grupos de
trabajo para el desarrollo de la actividad. Para llevar a cabo las prácticas de laboratorio se
requiere que el estudiante tenga un conocimiento teórico básico sobre el tema y lea
detenidamente la guía de laboratorio.

1.1 NORMAS PERSONALES

La vestimenta deberá ser apropiada y cómoda, que facilite la movilidad para la actividad que se
desarrolla en los laboratorios. Debe cubrir áreas considerables de la piel con pantalones (jeans),
blusas con mangas, la bata y guantes.
Use calzado cerrado que cubra completamente el pie. El alumno debe portar en todo momento
Bata blanca de Laboratorio.
Nunca ingerir alimentos, beber o masticar chicle dentro del laboratorio, igualmente evitar tocar
partes del rostro y llevar las manos a la boca o introducir lapiceros u otros en boca nariz y oídos.
Asistir puntualmente en la fecha y hora programada, igualmente al entrar a las instalaciones del
laboratorio se recomienda que se haga cuando esté presente el docente encargado de la práctica,
así como no ausentarse antes de terminar la práctica.
El área del laboratorio es exclusivamente para realizar el trabajo de la práctica; cualquier tipo de
acción social como cortejar, charlas ajenas a la práctica e igual que las bromas pueden causar
pérdida de tiempo y posibles incidentes de alta gravedad.

1.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS

Cuando se tiene que hacer una reacción química se debe escoger el recipiente adecuado a la
cantidad que se va a usar. Los ensayos se hacen en tubos de ensayo o en placas de gotas, nunca
en vasos, matraces, etc.
No usar recipientes alimenticios para contener productos químicos e igualmente cualquier
recipiente que se utilice para la recepción productos es necesario rotular, brindando la mayor
información sobre la sustancia contenida.
De los materiales de laboratorio No utilice vidrio agrietado, el material de vidrio en mal estado
aumenta el riesgo de accidente. No deben utilizarse para pipetear jeringuillas provistas de aguja
hipodérmica o aspirar con la boca pipetas de vidrio. Compruebe la temperatura de los materiales
antes de cogerlos directamente con las manos.
Si cuenta con sistemas de extracción y renovación mecánica de aire activados, manténgalos
siempre en funcionamiento. Utilizar las campanas extractoras siempre que sean posible.
Para detectar el olor de una sustancia, no se debe colocar la cara directamente sobre el recipiente:
utilizando la mano abierta como pantalla, es posible hacer llega una pequeña cantidad de vapor
hasta la nariz. Los frascos deben cerrarse inmediatamente después de su uso.
Al momento de trabajar con ácido, para diluirlos vierta el ácido sobre el agua, nunca, al
contrario.
No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados. Nunca debe
sacar sustancias químicas del laboratorio sin autorización.

1.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN

Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza se utilizará un recipiente
adecuado.
Se debe mantener perfectamente limpio y seco el lugar dónde se encuentre situado cualquier
instrumento con contactos eléctricos. Leer las instrucciones de uso de los instrumentos.
Debe revisarse el material de vidrio para comprobar posibles fisuras, especialmente antes de su
uso a vacío o presión.

1.4 NORMAS DE EMERGENCIA

En caso de tener que evacuar el laboratorio, cerrar la llave del gas y salir de forma ordenada
siguiendo en todo momento las instrucciones que haya impartido el Profesor. Localizar al iniciar
la sesión de prácticas los diferentes equipos de emergencia en el correspondiente laboratorio:
Duchas y lavaojos, Botiquín, Absorbente para derrames, Alarma de emergencia, Salida de
emergencia y Recipiente para el vidrio roto.
Al finalizar la práctica, limpia el área de trabajo y entrega los materiales utilizados limpios y en
buenas condiciones. Por último, esperar las indicaciones para retirarse de las instalaciones del
laboratorio.
 2 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.
Los aminoácidos se denominan así por tener un grupo amino (-NH 2) y un grupo carboxilo (-
COOH).
Es posible agrupar los aminoácidos en clases principales basadas en las propiedades de sus
grupos R, en especial de su polaridad, o tendencia a interaccionar como el agua a pH biológico
(cerca del pH 7.0). La polaridad de los grupos R varía enormemente desde totalmente apolar o
hidrofóbico (insoluble en agua) hasta altamente polar o hidrofílico (soluble en agua).

2.1REACCIÓN CON LA NINHIDRINA

El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la ninhidrina: violeta
azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es primario, amarillo para la prolina
e hidroxiprolina y café para la asparagina que tiene un grupo amido en la cadena lateral.
Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino libres presentes en péptidos y proteínas.
 Materiales y Procedimiento
Tub Reactiv Cada tubo
Cantidad Procedimiento
os o
Preparar los tubos de ensayo. Agregar 2 ml de
con 1.5 mL de ninhidri solución de ninhidrina
1 
Glicina2% na (0.3%)
Agregue a cada tubo de ensayo
1.5mL de la solución
correspondiente.
con 1.5 mL de ninhidri 
2
Albúmina2% na
Para cada uno de los tubos de
ensayo añadir 5 gotas del
reactivo ninhidrina 1%. 1.5 ml de solución
con 1.5 mL de ninhidri
3 respectiva
Tirosina 2% na 
+
Tubos de ensayo en un baño de
agua hirviente por unos 10 Baño de agua hirviente
minutos. por 10 minutos.
con 1.5 mL de ninhidri
4
Gelatina 2% na 
Observar y tomar apuntes de los
cambios.
Para poder saber a cuantos equivale 2% de sustancia en gramos utilizamos la siguiente formula:
o Para la glicina:
gr∗Soluto
%¿ 1L 1000mL
V∗Solución( L)
X 20mL
Gr=%*V(L)
Gr=2%*(0,02) X=0,02

Gr=0,04 gr
Se realiza la misma formula para saber la cantidad en gramos de las otras sustancias.
o Medimos en la balanza analítica la glicina 0.04gr en un vidrio de reloj.

o Se mezcla con 20mL de agua en un vaso de precipitado. (Esto para sustancia a

preparar)
o Dispensar 1,5mL de cada sustancia en un tubo de ensayo.

o Añadir la Ninhidrina y calor al baño de agua hirviendo

o Observación final
  Análisis y resultado
Reactivo utilizado: Ninhidrina
Color: Violeta azulado.
Al hacer reaccionar las cuatro sustancias con la ninhidrina y colocarlas al calor la única que
cambio de color a violeta azulado fue la glicina lo que nos indica que hay presencia de
aminoácidos cuyo grupo amino es primario. Lo que se visualiza son la banda de separación
de aminoácidos. Mientras que los otros tubos su color permaneció casi igual por lo que no
había presencia de aminoácidos.
2.2REACCIÓN DE BIURET
Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a
la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos. El
reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se
une con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad
de color depende de la concentración de proteínas.
 Materiales y Procedimiento
Tub Cada tubo
Cantidad Reactivo Procedimiento
os
NaOH 10%
con 1.5 mL
+ Preparar los tubos de 1 ml de
1 de Glicina
ensayo.
2% 0.5% CuSO4 NaOH 10%
(sulfato cúprico) 
+
NaOH 10% Agregue a cada tubo de
con 1.5 mL 3 gotas de solución de
ensayo agregue 1 ml de
de + sulfato cúprico al 5%
2
Albúmina2 NaOH 10% de la solución
0.5% CuSO4
% correspondiente.
(sulfato cúprico)

NaOH 10%
con 1.5 mL Agregue 3 gotas de
+
3 de Tirosina solución de sulfato cúprico
2% 0.5% CuSO4 al 5% a cada tubo de
(sulfato cúprico) ensayo. 5ml de solución
respectiva
4 con 1.5 mL NaOH 10% 
de Gelatina
+ Agite cada tubo de ensayo
2%
 
0.5% CuSO4
(sulfato cúprico) Observar y tomar apuntes
de los cambios.

Para poder saber a cuantos equivale 2% de cada sustancia en gramos utilizamos la siguiente
formula:
Para poder saber a cuantos equivale 10% de sustancia en gramos utilizamos la siguiente formula:
Para la glicina:
gr∗Soluto
%¿ 1L 1000mL
V∗Solución( L)
X 20mL
Gr=%*V(L)
Gr=10%*(0,02) X=0,02

Gr=0,2 gr
Para el sulfato cúprico:
gr∗Soluto
%¿ 1L 1000mL
V∗Solución( L)
X 20mL
Gr=%*V(L)
Gr=5%*(0,02) X=0,02

Gr=0,01 gr CuSO4 (3 gotas)

Se realiza la misma fórmula para saber la cantidad en gramos de las otras sustancias.
o Medimos en la balanza analítica la glicina 0.04gr en un vidrio de reloj

Lo mismo hacemos con las otras sustancias

o Dispensar 1,5mL de cada sustancia en un tubo de ensayo.

o Agregar 1mL de NaOH a cada tubo de ensayo

o Agregar 3 gotas de solución de sulfato cúprico al 5% a cada tubo de ensayo

 o Observación final

 Análisis y resultado
Reacción utilizada: NaOH (Hidróxido sódico) + CuSO4 (Sulfato cúprico)
Color: Violeta
Al hacer reaccionar las sustancias con el reactivo se observa un cambio de color inmediatamente
en la gelatina, siendo la gelatina una proteína, compuesta por muchos aminoácidos con la
presencia de enlaces péptidos. Lo que hace la reacción es liberar los aminoácidos de los enlaces
péptidos, cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas. Se basa en la
formación de sales complejas de color violeta al añadir sulfato cúprico en solución alcalina. El
reactivo Biuret sólo funciona para detectar la presencia de proteínas, mas no incluye
aminoácidos, puesto que el Biuret reacciona con enlaces peptídicos formados por la unión de
aminoácidos propios de las proteínas.
2.3REACCION DE MILLON
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio a pH
ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina y las proteínas
que la contienen.
 Materiales y Procedimiento
Tub Cada tubo
Cantidad Reactivo Procedimiento
os
Agregue 5 gotas del
Reactivo de Millón
con 1.5 Preparar los tubos de ensayo.
Reactivo de
ml de +
1 Millón 
solución
de agregue 5 gotas del Reactivo
Tirosina de Millón a cada tubo de
2% ensayo

Calentar con cuidado los tubos
de ensayo al baño de María y 1.5 ml de solución
luego colóquelos en la gradilla. respectiva
con 1.5 Reactivo de  +
mL de Millón
2
Albúmina Observar y tomar apuntes de Baño de agua hirviente
2% los cambios. por 10 minutos
+
Dejar enfriar.

o Dispensar 1,5mL de cada sustancia en un tubo de ensayo.

o Agregar 5 gotas de reactivo millón a cada tubo de ensayo

o Colocar los tubos al calor al baño de agua hirviendo

o Observación final
  Análisis y resultado
Reacción utilizada: Reacción de millón
Color: Rosado
Al hacer reaccionar la tirosina y la albumina con el reactivo millón y exponerlo al calor, la
tirosina cambio de color inmediatamente a rosado mientras la albumina siguió del mismo color,
por lo cual la tirosina tiene presencia de aminoácidos fenólicos, que es lo que busca la reacción
de millón específica para grupo fenólicos por cual da positivo para la tirosina dejando en
evidencia que tiene dicho grupo, mientras que la albumina no es un aminoácido fenólico.

Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNA

Las proteínas son uno de los principales componentes de todas nuestras células. Los aminoácidos
(compuestos orgánicos) son los ladrillos de construcción de las proteínas. Los aminoácidos se
agrupan de acuerdo con su comportamiento químico. La síntesis de las proteínas ocurre mediante
la unión entre sí de las cadenas de aminoácidos. Los distintos aminoácidos imparten diferentes
comportamientos químicos en la estructura de las proteínas. Debido a la presencia de diferentes
aminoácidos en las uniones peptídicas las proteínas reaccionan con una variedad de compuestos
formando productos coloreados.
Los aminoácidos tienen tres tipos de reacciones químicas importantes: (1) reacciones debido a la
presencia del grupo carboxilo (COO-), (2) reacciones debidas al grupo amino (NH), y (3)
reacciones debido al grupo R.
Las reacciones debidas al grupo carboxilo y al grupo amino son generales y se dan para todos los
aminoácidos. Las reacciones del radical R son reacciones específicas; por ejemplo, cisteína da
una reacción para azufre, triptófano da ciertas reacciones de color debido a que su molécula
contiene el grupo indol, tirosina da otras reacciones de color debido a su grupo fenólico, etc.
Existen reacciones de coloración que son específicas para aminoácidos de esas proteínas y son
importantes tanto para la detección como para el dopaje de aminoácidos y proteínas. Existen
también reacciones generales porque sirven para caracterizar grupos comunes a todas las
proteínas como grupos amino o uniones.
3.1REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS
Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa
esta reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual, al
reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.
 Materiales y Procedimiento
Tubo Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo
hidróxido Preparar los tubos de ensayo. 2 ml hidróxido
sódico sódico

con 3 mL de + +
1 Añadir 2 ml de solución de
Glucosa 2% acetato de hidróxido sódico al 20%. solución de
plomo acetato de plomo
 al 5%
Añadir 10 gotas de solución de +
hidróxido acetato de plomo al 5%
sódico

con 3 mL de +
2 Calentar el tubo hasta
Leche 2% acetato de ebullición.
plomo

Observar y tomar apuntes de
los cambios.
hidróxido con 3 mL de
 solución
sódico
con 3 mL de respectiva
solución de +
3 El precipitado de color +
Albúmina de acetato de
huevo 2% negruzco indica que se ha Calentar el tubo
plomo formado sulfuro de hasta ebullición.
Plomo, utilizándose el azufre
de los aminoácidos

o Preparar las sustancias

o Colocar las sustancias en los tubos de ensayo y añadir 2mL NaOH

o Añadir 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5% a cada tubo y calentar a

baño maría

o Observación final
 Análisis y resultado
Reacción utilizada: NaOH + acetato de plomo
Color: Negruzco
Al hacer reaccionar la albumina de huevo, la leche y la glucosa con NaOH + acetato de
plomo y la presencia de calor, observamos que la albumina de huevo empezó a tomar una
tonalidad negruzca lo que hizo la presencia de calor es que los enlaces péptidos se
hidrolizaran, lo que nos permite deducir según la reacción de aminoácidos azufrados la
albumina de huevo es un aminoácido con presencia de azufre, es decir el precitado negruzco
que se forma es sulfuro de plomo. Mientras que la leche y la glucosa no presentaron un
cambio de color, lo que nos indica que no tienen presencia de azufre.
 3 Práctica 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS
Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre la superficie
terrestre, representando aproximadamente el 75 % de la materia orgánica existente. En
ocasiones, se denominan también carbohidratos, azúcares, sacáridos o glúcidos. Todos son
términos que hacen referencia a su sabor dulce, o a que poseen la composición Cn (H2O) n. Estas
moléculas usualmente contienen carbono, hidrógeno y oxígeno en una proporción de 1:2:1. Los
carbohidratos se clasifican como monosacáridos, disacáridos o polisacáridos, dependiendo del
tamaño y la complejidad de la molécula. Los monosacáridos se componen de una sola molécula
de azúcar. Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido, y cuando dos o más se
unen se produce un polisacárido.
En los animales los carbohidratos son esenciales desde el punto de vista energético, ya que
muchos órganos y células del cuerpo humano, como el cerebro y los glóbulos rojos, obtienen su
energía principalmente de la glucosa. Pero sus funciones no se restringen a ser únicamente fuente
de energía, sino que también pueden desarrollar funciones estructurales, de reconocimiento
celular y adhesión. Estructuralmente, un hidrato de carbono típico es una cadena hidrocarbonada
con varios grupos alcohol y un carbono más oxidado, en forma de grupo carbonilo. Este grupo
oxidado puede situarse en el extremo de la cadena (aldehído), o adyacente, en posición 2
(cetonas)

Ilustración 1 Clasificación de carbohidratos.

4.1PRUEBA DE BENEDICT
Es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato sódico)
utilizados hacen que este test sea más sensible y estable.
 Materiales y Procedimiento
Tub Cada tubo
Cantidad Reactivo Procedimiento
os
con 3 ml de
reactivo de
1 Glucosa al
Benedict Preparar los tubos de Agregue a cada tubo de
2%
ensayo. ensayo 2
con 3 mL de
reactivo de  ml de reactivo de
2 almidón al
Benedict Benedict
2% Agregue a cada tubo de
ensayo 2 ml de reactivo de +
con 3 mL de
Benedict.
jugo de reactivo de Baño de agua hirviente
3
cebolla al Benedict  por
2%
Tubos de ensayo en un baño 10 minutos.
con 3 mL de
reactivo de de agua hirviente por unos
4 Fructosa al 10 minutos.
Benedict
2%

Agite cada tubo de ensayo

con 3 mL de reactivo de
5
agua Benedict Observar y tomar apuntes de
los cambios. Positiva
3 ml de solución
aparece un precipitado
respectiva
rojizo, verde o amarillo.
o Preparar cada tubo de ensayo con la sustancia

o Colocar a cada tubo de ensayo 2mL de reactivo de Benedict

o Poner los tubos de ensayo a calor baño maría

 o Agitar cada tubo y observación final

 Análisis y resultados
Reacción utilizada: reactivo de Benedict
Color: Amarillo, rojizo
Al hacer reaccionar las sustancias con el reactivo de benedict y la presencia de calor, dio positivo
en el almidón y la fructuosa como azucares reductores. Lo que busca la prueba de benedict es
detectar la presencia de azucares reductores al entrar en contacto con el reactivo de benedict la
sustancia debe presentar un cambio de color a amarillo rojizo, lo que nos indica que es positivo,
sino presenta esa coloración es negativo. Por lo cual la glucosa, cebolla y agua salieron negativos
por lo que no son azucare reductores en esta prueba.
4.2REACCIÓN DE FEHLING

Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión Cu2+ de color azul a
Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo carboxilo.
 Materiales y Procedimiento
Tub Cada tubo
Cantidad Reactivo Procedimiento
os
Reactivo Fehling
con 3 mL A
1 de Glucosa Preparar los tubos de Añadir reactivo Fehling
al 2% Reactivo Fehling ensayo. A y reactivo Fehling B
B
 +
Reactivo Fehling
con 3 mL Añadir 1 ml del reactivo Baño de agua hirviente
A
2 de almidón Fehling A y 1 ml del por
al 2% Reactivo Fehling
 10 minutos.
B
Tubos de ensayo en un
con 3 mL Reactivo Fehling
baño de agua hirviente
de jugo de A
3 por unos 10 minutos.
cebolla al Reactivo Fehling
2% B 

Reactivo Fehling Baño de agua hirviente

con 3 mL A por
4 de Fructosa 10 minutos.
al 2% Reactivo Fehling
B 
3 ml de solución
Reactivo Fehling Observar y tomar apuntes respectiva
con 3 mL A de los cambios.
5 de Lactosa
al 2% Reactivo Fehling
B
o Preparar cada tubo de ensayo con la sustancia

o Colocar a cada tubo de ensayo 2mL de reactivo de Fehling

o Poner los tubos de ensayo a calor baño maría

 o Agitar cada tubo y observación final

 Análisis y resultados
Reactivo utilizado: Reactivo Fehling
Color: Ladrillo
Al exponer las cinco sustancias al calor con el reactivo de Fehling dieron positivo como azucares
reductores la cebolla y la lactosa, presentando un cambio color ladrillo, por lo que podemos decir
que lo que se presentó en esta reacción fue que el grupo carbonilo de la cebolla y la lactosa se
oxida a grupo carboxilo. Mientras que glucosa, almidón y la fructuosa son negativas como
azucares reductores con la reacción de Fehling.

4.3PRUEBA DE MOLISCH

Para realizar esta reacción se utiliza lo siguiente:

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento

1 3 ml de de Molisch Preparar los tubos

Glucosa al 2% + +
H2SO4 Agregue dos gotas de reactivo de Molisch
+
2 3 ml de de Molisch Mezcle bien
Galactosa al + +
2% H2SO4 Incline el tubo y deposite 1 ml H2SO4
concentrado deslizándolo lentamente por la
3 3 ml de de Molisch pared del tubo.
 Fructosa al + +
2% H2SO4 No mezcle. Solo coloque el tubo en posición
vertical y observe la formación del anillo
rojo violeta que aparece en la zona del
contacto de los dos líquidos.

PASO 1

Se realiza el montaje de la reacción de Molisch donde se utilizan tres monosacáridos como son:
glucosa, galactosa y fructosa, donde se deposita 3ml al 2% de cada monosacárido en cada tubo
de ensayo correspondiente y se agrega dos gotas de reactivo de Molisch a cada tubo de ensayo.

PASO 2
Se observa que después de agregar las dos gotas de reactivo de Molisch a cada monosacárido se
coloca el tubo de ensayo en forma vertical y se empiezan a formar anillos de color rojo violeta en
este caso en la Glucosa y la Fructosa debido a la deshidratación del carbohidrato.
4.4 PRUEBA DE TOLLENS

Para realizar esta reacción se utiliza lo siguiente:

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento

1 3 ml de NaOH al 5% Preparar los tubos de ensayo

Glucosa al 2% + +
AgNO3 al 5% Añadir 2 gotas de una disolución de
NaOH al 5%
2 3 ml de NaOH al 5% +
Galactosa al + ml de disolución acuosa de AgNO3 al
2% AgNO3 al 5% 5%
+
3 3 ml de NaOH al 5% Agitar el tubo y añadir gota a gota y
Lactosa al 2% + con agitación NH4OH 2N, hasta que se
AgNO3 al 5% consiga disolver el precipitado de
AgNO
4 3 ml de NaOH al 5%
Fructosa al + +
2% AgNO3 al 5% No mezcle. Solo coloque el tubo en
posición vertical y observe la
formación del anillo rojo violeta que
aparece en la zona del contacto de los
dos líquidos.
PASO 1

Se realiza el montaje de la reacción de Tollens donde se utilizan tres monosacáridos y un

disacárido como son: glucosa, galactosa, lactosa y fructosa, donde se deposita 3ml al 2% de los
tres monosacáridos y del disacárido cada uno en un tubo de ensayo correspondiente y se agrega
dos gotas de NaOH (hidróxido de sodio al 5%) a cada tubo de ensayo y luego se agrega 1ml de
AgNO3 (Nitrato de plata al 5%) a cada tubo de ensayo.

PASO 2

Se observa que después de agregar las dos gotas de NaOH (hidróxido de sodio al 5%) 1ml de
AgNO3 (Nitrato de plata al 5%), se colocan los tubos de ensayo en posición vertical y se observa
que esta reacción quedo negativa no se forman los anillos de color rojo violeta por el hidróxido
de amonio (NH4OH 2N).
4.5 PRUEBA DE LUGOL
Para realizar esta reacción se utiliza lo siguiente:

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento

1 3ml de Glucosa al 2% Lugol Preparar los tubos de

ensayo
+
2 Agregar 5 gotas de lugol
3ml de Almidón de banano
Lugol +
al 2% Observar y tomar apuntes de
los cambios.
3 3ml de Jugo de cebolla Lugol

al 2%
Lugol
4 3ml de Almidón de papa al
2%

Lugol
5 3ml de agua

PASO 1
Se realiza el montaje de la reacción de lugol (yodo) donde se utiliza un monosacárido como
glucosa, luego almidón de banano, luego jugo de cebolla, almidón de papa y agua galactosa y
fructosa, donde se deposita 3ml al 2% de cada uno en un tubo de ensayo correspondiente a cada
uno y se agrega cinco gotas de reactivo de lugol a cada tubo de ensayo.

PASO 2
Se observa que después de agregar las cinco gotas de reactivo de lugol a cada tubo de ensayo y
se observa que esta reacción es positiva para el almidón de banano y para el almidón de la papa
ya que estos se colocan de color negro.

PRACTICA 5 CARACTERISTICAS DE ACIDOS GRASOS

5.1 PRUEBA DE ACIDOS GRASOS

Para realizar esta reacción se utiliza lo siguiente:

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento

 1 Preparar los tubos de ensayo
3 ml de aceite 4ml de agua +
vegetal destilada 4ml de Hexano
2 +
3 ml de aceite 4ml de hexano Agite los tubos
vegetal +
Deje reposar unos minutos
+
Observar y tomar apuntes de
los cambios

PASO 1
Se realiza el montaje de la reacción de ácidos grasos donde se utiliza aceite vegetal y se deposita
3ml en cada tubo de ensayo correspondiente.

PASO 2
Se observa que después de agitar cada uno de los tubos de ensayo y dejar reposar unos minutos
se observa que en esta reacción el aceite vegetal con el agua destilada es insoluble en cambio el
aceite vegetal con el hexano es soluble.
5.2 PRUEBA DE SAPONIFICACION

Para realizar esta reacción se utiliza lo siguiente:

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento

1 Prepara los tubos de ensayo

3 ml de aceite 3ml de NaOH +
vegetal (1N) Agregar 3 ml de solución de NaOH
2 (1N)
3 ml de aceite 3 ml de KOH +
vegetal Agitar
+
Baño de agua hirviendo por 10
minutos.
+
Dejar enfriar
+
Observar y tomar apuntes de los
cambios.
PASO 1
Se realiza el montaje de la reacción de saponificación donde se utiliza aceite vegetal y se
deposita 3ml en cada tubo de ensayo correspondiente, después se agrega 3ml de reactivo de
hidróxido de sodio (NaOH) en un tubo de ensayo que ya contiene aceite vegetal y en el otro tubo
de ensayo que también contiene aceite vegetal se agrega 3ml de reactivo de hidróxido de potasio
de (KOH) y se expone a un baño de agua hirviendo por 10 minutos.

PASO 2
Después de exponer estas reacciones al calor por 10 minutos se observa que estos triglicéridos al
mezclarse con bases fuertes como es el hidróxido de sodio y el hidróxido de potasio se formaron
grumos.

5.3 PRUEBA DE SUDAN III

Para realizar esta reacción se utiliza lo siguiente:

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento

1
3 ml de aceite Sudan III Prepara los tubos de ensayo
vegetal +
2 Agregar 3ml de aceite vegetal
3 ml de aceite Tinta roja +
vegetal Agregar 8 gotas de sudan III
+
Observar y tomar apuntes de
los cambios

PASO 1
se realiza el montaje de la reacción de sudan III donde se utiliza aceite vegetal y se deposita 3ml
en cada tubo de ensayo correspondiente, después se agrega 8 gotas de sudan iii en un tubo de
ensayo y en el otro se agrega tinta roja y se observar los cambios que tuvieron estas mezclas al
utilizar estos reactivos.

PASO 2
Después de mezclar estos reactivos con el aceite vegetal se observa que el sudan III si es soluble
y por lo tanto se disuelven las grasas en cambio la tinta roja no es soluble y por lo tanto no se
disuelven las grasas.