2.3 Valid 0701 - 01 - Limite Conservadores Efudix

INFORME DE VALIDACIÓN
DE METODOLOGÍA ANALÍTICA DE PRODUCTO TERMINADO
RVM-PA.0701/01
DETERMINACIÓN DE CONSERVADORES
Efurix® / Efudix® Crema
Valeant Farmaceutica do Brasil Ltda.

Indaiatuba, SP, Brasil
11 de Mayo de 2016
Informe de Validación de Metodología Analítica
Código: RVM-PA.0701
Versión: 01
Efurix® / Efudix® Crema Fecha: 11/05/16 Página 2 de 37
SITUACIÓN DE APROBACIÓN
ELABORADO POR
Cintia Marciano 11/05/16 Firma

Control de Calidad Fecha Firma
REVISADO POR:
Eloisa Barel Filier 11/05/16 Firma

APROBACIÓN
Ana Margarida Pioltine 11/05/16 Firma

Patricia Viel 11/05/16 Firma

Aseguramiento de Calidad Fecha Firma
Versión: 01
HISTÓRICO DE REVISIÓN
No. de
Descripción Realizado por Fecha
Revisión
00 Emisión Inicial Eloisa Barel Filier 07/04/2014
Fue realizada una revisión para el parámetro de

Especificidad, porque, conforme se describe en el
Control de Cambios – CM-2016-0030V hubo un
cambio en la ubicación del sitio de fabricación del
API de Fluorouracilo proveniente del fabricante
01 Nantong Jinghua Pharmaceutical Co., Cintia Marciano 11/05/2016
concomitantemente a la alteración de la ruta de
síntesis, de acuerdo con el Expediente Maestro del
Fármaco DMF-FLU-2015-USP-00-O.
Cambio de la forma de las hojas de cálculo de
validación analítica, conforme CM-2015-0161.
Versión: 01
ÍNDICE
1. OBJETIVOS……………………………………………………………………….. 5
2. ALCANCE DEL ESTUDIO………………………………………………………. 5
3. RESPONSABILIDADES…………………………………………………………. 5
3.1 CONTROL DE CALIDAD…………………………………………………….. 5

3.2 ASEGURAMIENTO DE CALIDAD………………………………………….. 5
4. CONSIDERACIONES GENERALES…………………………………………… 6
5. EJECUCIÓN………………………………………………………………………. 6
5.1 MATERIALES NECESARIOS……………………………………..……… 6

5.2 DESCRIPCIÓN DEL MÉTODO ANALÍTICO PARA DETERMINACIÓN 7
5.3 ESPECIFICIDAD…………………………………………………………… 8
5.4 LINEALIDAD……………………………………………………………… 16
5.5 LÍMITE DE DETECCIÓN ESTIMADO…………………………………... 20
5.6 LÍMITE DE CUANTIFICACIÓN ESTIMADO………………………..….. 21
5.7 PRECISIÓN……………………………………………………………..….. 21
5.8 EXACTITUD……………………………………………………………..… 27
5.9 ROBUSTEZ……………………………………………………………….... 31
5.10 ESTABILIDAD DE LAS SOLUCIONES……...……………………….. 34
5.11 ADECUABILIDAD DEL SISTEMA………………...…………………. 36
6 CONCLUSIÓN …………………………………………………………………… 36
7 REFERENCIAS…………………………………………………………………… 37
8 ANEXOS…………………………………………………………………………… 37
Versión: 01
1. OBJETIVOS
Evaluar si los resultados obtenidos están de acuerdo con los criterios de aceptación
prestablecidos en el Protocolo de Validación del Método Analítico para la determinación de los
conservadores metilparabeno y propilparabeno en los productos Efurix® / Efudix® Crema (PVM-
PA.0701). La validación debe garantizar, a través de estudios experimentales, que el método
cumple con las exigencias de las aplicaciones analíticas, asegurando la confiabilidad de los
resultados.
2. ALCANCE DEL ESTUDIO
En este estudio fueron realizadas las pruebas de especificidad, linealidad (intervalo de

trabajo), precisión (repetibilidad y precisión intermedia), exactitud, robustez y estabilidad de las
soluciones. Los datos primarios, cromatogramas y las hojas de cálculo están anexadas en éste
informe.
En el control de versiones 01 de éste informe fue evaluado el parámetro de especificidad
realizando todas las pruebas descritas, utilizándose la materia prima fabricada en el nuevo sitio
del proveedor Nantong Jinghua.
3. RESPONSABILIDADES
3.1 Control de Calidad
Es responsabilidad de los empleados involucrados en la elaboración, revisión y

cumplimiento de éste informe. Es responsabilidad del Coordinador / Gerente del sector la
aprobación de éste informe.
3.2 Aseguramiento de Calidad
Es responsabilidad del Coordinador / Gerente del Sector la aprobación de éste informe.

Versión: 01
4. CONSIDERACIONES GENERALES
• Los cálculos fueron realizados con auxilio de la hoja de cálculo de validación encontrada
en la ruta: \\ Slaidtfs002 \ cq \ CQ2 \ CQ_VALIDAÇÃO DE MP E PRODUTOS \
PLANILHA CÁLCULOS VALIDAÇÃO, y anexadas las hojas de cálculo.
5. EJECUCIÓN
5.1 Materiales necesarios

• Equipo de HPLC con detector ultravioleta/DAD
• Balanza Analítica
• Baño de ultrasonido
• Centrífuga
• Frigorífico
• Columna: µBondapak C18, con 30 cm de longitud, 3.9 mm de diámetro interno y
un tamaño de partícula de 10 µm (marca Waters)
• Material de vidrio perfectamente limpio, seco y calibrado
• Tubos de centrifugadora de 50 mL, provistos de tapón de rosca
• Filtros de membrana de 0.45 µm de celulosa regenerada, jeringas y viales
• Agua ultrapura (Milli Q)
• Metanol grado HPLC
• Ácido Clorhídrico 1.0 N
• Hidróxido de sodio 1.0N
• Sulfato de cobre 0.5 M
• Peróxido de Hidrógeno al 3%
• Estándar farmacopéico de metilparabeno y propilparabeno
• Estándar secundario de metilparabeno y propilparabeno
• Lote de Efurix® Crema
• Placebo de Efurix® / Efudix® Crema conteniendo Fluorouracilo sin conservadores
Versión: 01
5.2 Descripción de Método Analítico para Determinación
Analizar conforme MET-MG.024 – Método General de Análisis para Cromatografía

Líquida de Alta Eficiencia.
• Fase Móvil: Sistema Gradiente de Metanol (grado HPLC) y Agua Milli-Q, en la

proporción descrita en la Tabla 01.
Tabla 01. Gradiente para Determinación de Metilparabeno y Propilparabeno

Tiempo (minutos) Metanol grado HPLC (%) Agua Milli-Q (%)
0.0 30 70
8.0 90 10
10.0 90 10
10.5 30 70
16.0 30 70
• Solución diluyente: Preparar una mezcla de Metanol y Agua Milli-Q, en una

proporción 60:40.
• Solución estándar (preparar por duplicado): En un matraz volumétrico de 25 mL,

pesar con exactitud 25.0 mg de estándar de metilparabeno y 15.0 mg de estándar
de propilparabeno. Adicionar cerca de 20 mL de metanol y agitar en baño de
ultrasonido hasta la completa solubilización de los estándares. Esperar hasta que
se enfríe a temperatura ambiente y completar a volumen del matraz con metanol.
Homogeneizar la solución. Transferir volumétricamente, una alícuota de 2.0 mL
de ésta solución a un matraz volumétrico de 100 mL y completar a volumen del
matraz con diluyente. Homogeneizar la solución. Filtrar parte de la solución a
través de una membrana de celulosa regenerada de 0.45 µm para vial de HPLC.
La concentración de metilparabeno y propilparabeno en la solución estándar es
respectivamente de 0.0200 mg/mL y 0.0120 mg/mL.
• Solución muestra (preparar por duplicado): En un tubo de centrífuga de 50 mL

provisto de tapa, pesar con exactitud 2.0 g de muestra. Adicionar
volumétricamente 25 mL de diluyente y agitar en baño de ultrasonido por 10
minutos. Posteriormente agitar manualmente por 5 minutos. Centrifugar a 3000
rpm por 20 minutos y filtrar parte del sobrenadante a través de una membrana de
celulosa regenerada de 0.45 µm para vial de HPLC.
Versión: 01
• Condiciones Cromatográficas
• Columna µBondapak C18 con 30 cm de longitud, 3.9 mm de diámetro y

tamaño de partícula de 10 µm (marca: Waters).
• Razón de flujo de la Fase Móvil: 1.0 mL/min
• Detector: ultravioleta con longitud de onda ajustado en 254 nm
• Temperatura de columna: 30°C
• Volumen de inyección: 20 µL
• Análisis
• Inyectar, por separado y por duplicado, las soluciones muestra y estándar.

Registrar los cromatogramas.
• La desviación estándar relativa entre la relación (señal analítica/concentración)
obtenidos en las diferentes inyecciones de la solución estándar debe de ser ≤
2.00%
• La desviación estándar relativa entre los resultados obtenidos en las diferentes
inyecciones de la solución muestra debe de ser ≤ 2.00%
• Tras el análisis, reinyectar una de las soluciones estándar (comprobación del
estándar) y comparar su recuperación con la de la inyección inicial. La
recuperación debe estar entre el 98.00% al 102% con una desviación estándar
relativa ≤ 2.00%
5.3 Especificidad
• Diluyente (preparado por duplicado): Parte de la solución diluyente fue filtrada a

Las soluciones fueron analizadas conforme al método analítico descrito para
determinación, punto 5.2.
• Fase móvil: Fue analizadas la fase móvil conforme al método descrito en el

método analítico para determinación (punto 5.2.), inyectándose un volumen de
0µL
• Placebo de Efurix® / Efudix® Crema (preparado por duplicado): En dos tubos

diferentes de centrífuga de 50 mL provistos de tapa, se pesaron 2.0100 g y 2.0003
Versión: 01
g de placebo. Se adicionaron volumétricamente 25 mL de diluyente en cada uno

de los tubos. Se agitó en baño de ultrasonido por 10 minutos y posteriormente se
agitó manualmente por 5 minutos. Se centrifugaron las soluciones a 3000 rpm por
20 minutos. Parte de los sobrenadantes fueron filtrados a través de una membrana
de celulosa regenerada de 0.45 µm para vial de HPLC. Las soluciones fueron
analizadas conforme a lo descrito en el método analítico para determinación,
punto 5.2.
• Solución de Metilparabeno (preparada una vez): En un matraz volumétrico de 25

mL, se pesaron con exactitud 25.9 mg de estándar farmacopéico de
metilparabeno. Se adicionaron cerca de 20 mL de metanol y se agitó en baño de
ultrasonido hasta la completa solubilización del estándar. Se esperó a enfriar a
temperatura ambiente, se completó a volumen del matraz con metanol y se
homogeneizó. Se transfirió volumétricamente, una alícuota de 2.0 mL de ésta
solución a un matraz volumétrico de 100 mL y se completó a volumen del matraz
con diluyente. La solución fue homogeneizada. Se filtró parte de la solución a
La concentración de metilparabeno en la solución estándar es de 0.0207 mg/mL.
• Solución de Propilparabeno (preparada una vez): En un matraz volumétrico de

25 mL, se pesaron con exactitud 15.5 mg de estándar farmacopéico de
propilparabeno. Se adicionaron cerca de 20 mL de metanol y se agitó en baño de
temperatura ambiente, se completó a volumen del matraz con metanol y se
homogeneizó. Se transfirió volumétricamente, una alícuota de 2.0 mL de ésta
solución a un matraz volumétrico de 100 mL y se completó a volumen del matraz
con diluyente. La solución fue homogeneizada. Se filtró parte de la solución a
La concentración de propilparabeno en la solución estándar es de 0.0124 mg/mL.
• Solución Estándar (preparada por duplicado): En dos diferentes matraces

volumétricos de 25 mL, se pesaron exactamente, 25.9 mg y 25.8 mg de estándar
farmacopéico de metilparabeno y 15.5 mg y 15.5 mg de estándar farmacopéico de
ultrasonido hasta la completa solubilización de los estándares. Se esperó a enfriar
a temperatura ambiente y se completó a volumen de los matraces con metanol.
Las soluciones fueron homogeneizadas. Se transfirió volumétricamente una
alícuota de 2.0 mL de éstas soluciones a dos diferentes matraces volumétricos de
Versión: 01
100 mL. El volumen de los matraces se completó con diluyente y las soluciones
fueron homogeneizadas. Parte de las soluciones fueron filtradas a través de una
membrana de celulosa regenerada de 0.45 µm para vial de HPLC. La
concentración de metilparabeno en las soluciones estándar son respectivamente,
0.0207 mg/mL y 0.0206 mg/mL. La concentración de propilparabeno en las
soluciones estándar es de 0.0124 mg/mL.
• Solución muestra (preparada por duplicado): En dos diferentes tubos de

centrífuga de 50 mL provistos de tapa, se pesaron exactamente, 2.0736 g y 2.0487
g de muestra de Efudix Crema. Se adicionaron volumétricamente 25 mL de
diluyente en cada uno de los tubos y se llevó a baño de ultrasonido por 20
minutos. Posteriormente se agitó manualmente por 5 minutos. Las soluciones
fueron centrifugadas a 3000 rpm por 20 minutos. Parte de los sobrenadantes
fueron filtrados a través de una membrana de celulosa regenerada de 0.45 µm para
vial de HPLC. Las soluciones fueron analizadas conforme al método analítico
para determinación, punto 5.2. Después de las inyecciones de las soluciones, fue
reinyectado, por duplicado la primera solución estándar y se comparó con las
inyecciones iniciales. La solución estándar se presentó estable, con una
recuperación dentro de lo especificado, de 98.00% al 102.00% con una DER ≤
2.00%
• Resultados
Tabla 02. Cuantificación de Metilparabeno
METILPARABENO
Contenido Contenido Contenido medio Contenido medio

Muestras
(mg/g) (%) (mg/g) (%)
Muestra 1_1 0.2353 94.12
0.2353 94.10
Muestra 1_2 0.2352 94.08
Muestra 2_1 0.2349 93.96
0.2347 93.88
Muestra 2_2 0.2345 93.80
Media 0.2350 93.99 0.2350 93.99
% DER 0.15 0.15 0.17 0.17
Versión: 01
Tabla 03. Cuantificación de Propilparabeno
PROPILPARABENO
Contenido Contenido Contenido medio Contenido medio
Muestras
(mg/g) (%) (mg/g) (%)
Muestra 1_1 0.1363 90.87
0.1362 90.80
Muestra 1_2 0.1361 90.73
Muestra 2_1 0.1357 90.47
0.1356 90.37
Muestra 2_2 0.1354 90.27
Media 0.1359 90.58 0.1359 90.58
% DER 0.30 0.30 0.34 0.34
Tabla 04. Interferencias en la región del pico de Metilparabeno
INTERFERENCIAS
Interferencia Área del Estándar de Área de Interferencia
Metilparabeno* (mAu) Interferencia (mAu) (%)
Placebo – 1 4259408 0 0.00
Placebo – 2 4259408 0 0.00
Diluyente estándar – 1 4259408 0 0.00
Diluyente muestra – 1 4259408 0 0.00
Fase móvil – 1 4259408 0 0.00
Fase móvil – 2 4259408 0 0.00
*Media de las áreas de las soluciones estándar 01 y 02.
Tabla 05. Interferencias en la región del pico de Propilparabeno
INTERFERENCIAS
Interferencia Área del Estándar de Área de Interferencia
Propilparabeno*(mAu) Interferencia (mAu) (%)
Placebo – 1 2256187 0 0.00
Placebo – 2 2256187 0 0.00
Fase móvil – 1 2256187 0 0.00
Fase móvil – 2 2256187 0 0.00
*Media de las áreas de las soluciones estándar 01 y 02.
Versión: 01
Tabla 06. Resultados X Criterios de Aceptación
Elementos Criterio de Aceptación Resultados
Placebo, Fase Ninguna interferencia en la región No fueron visualizadas

móvil y diluyentes del pico de los conservadores interferencias
Metilparabeno: 93.99,
Cuantificación del 90.00% al DER: 0.17%
Muestra
110.00% con un % DER ≤ 2.00% Propilparabeno: 90.58%,
DER: 0.34%
5.3.1 Estudio de Degradación Forzada
Fueron realizados los estudios de degradación forzada bajo condiciones conforme

lo demuestra la Tabla 07.
Las muestras fueron preparadas conforme a lo descrito en el protocolo de
Validación PVM-PA.0701.
Tabla 07. Condiciones de Estrés
Agente estresante Descripción Frecuencia de análisis

Control Comienzo del análisis Inmediata
Calentamiento Estufa a 60°C 3, 7 y 10 días de exposición
Solución Ácida HCl 1.0 N 3, 7 y 10 días de exposición
Solución Básica NaOH 1.0 N 3, 7 y 10 días de exposición
Fotolítica UV-B Fluorescente 3, 7 y 10 días de exposición
Solución Oxidativa Peróxido de hidrógeno 3% 3, 7 y 10 días de exposición
Iones metálicos Sulfato de cobre 0.5 M 3, 7 y 10 días de exposición
• Análisis
- Las soluciones fueron analizadas conforme a lo descrito en el método analítico
para determinación, punto 5.2.
- Las áreas de las soluciones control fueron comparadas con las áreas de las
muestras después de la degradación y entonces fue calculada la recuperación.
Versión: 01
• Resultados
Tabla 08. Tasa de Recuperación de Metilparabeno durante el Estudio de

Degradación Forzada.
Recuperación (%)
Degradación Tercer día Séptimo día Décimo día
Hidrólisis ácida 103.74 103.94 103.59
Metilparabeno
Hidrólisis básica 103.21 101.91 101.68

Estándar
Oxidación 102.75 103.47 103.30

Fotólisis 104.74 105.60 105.84
Iones metálicos 104.97 105.79 105.56
Degradación térmica 99.34 99.59 99.07

Metilparabeno

Muestra
Oxidación 101.70 103.56 103.63

Fotólisis 102.41 103.84 103.77
Iones metálicos 102.64 105.52 105.36
Tabla 09. Tasa de Recuperación de Propilparabeno durante el Estudio de

Degradación Forzada.
Recuperación (%)
Degradación Tercer día Tercer día Tercer día
Metilparabeno

Estándar
Oxidación 104.52 104.68 104.81

Fotólisis 103.94 104.04 104.21
Iones metálicos 106.25 105.63 106.71

Metilparabeno

Muestra
Oxidación 100.82 102.31 102.70

Fotólisis 101.58 103.10 102.92
Iones metálicos 101.42 104.49 104.20
Versión: 01
Tabla 10. Pureza del Pico de las Soluciones Control
Pureza del pico

Soluciones
Metilparabeno Propilparabeno
Estándar 1.0 0.99
Muestra 1.0 0.99
Tabla 11. Pureza del Pico de las Soluciones Degradadas – Décimo día
Pureza del Pico

Soluciones Metilparabeno Propilparabeno
Estándar_1 1.0 1.00
Hidrólisis Ácida
Muestra_1 1.0 0.99
Hidrólisis Básica
Muestra_1 1.0 1.00
Oxidación
Muestra_1 1.0 0.99
Fotólisis
Muestra_1 1.0 0.99
Degradación Estándar_1 1.0 1.00
Térmica Muestra_1 1.0 0.99
Iones metálicos
Muestra_1 1.0 0.99
• Discusión de Resultados
- Para la condición de degradación por hidrólisis ácida, las recuperaciones de
metilparabeno y propilparabeno se mantuvieron prácticamente estables durante el
estudio, tanto en la solución estándar como en la solución muestra. Se observó el
surgimiento de picos secundarios con un tiempo de retención de aproximadamente
3.1 minutos. En el estándar de propilparabeno después de 10 días de exposición se
observó la presencia del pico con tiempo de retención de 7.2 minutos que es de
metilparabeno, es decir, al degradar el propilparabeno puede formar
metilparabeno.
- Para la condición de degradación básica, hubo una degradación de cerca del 6%
de propilparabeno en la solución estándar. Fue posible detectar el surgimiento del
pico secundario con tiempo de retención de aproximadamente 1.7 minutos y 7.2
minutos (metilparabeno).
Versión: 01
- Para la condición de degradación térmica, se observó que con el pasar de los días
hay degradación de metilparabeno y de propilparabeno, y fue posible detectar el
surgimiento del pico secundario con tiempo de retención de aproximadamente 1.7
minutos y 7.2 (metilparabeno).
- Para las condiciones de estrés por oxidación, fotólisis e iones metálicos, los
conservadores se mantuvieron estables durante el estudio. Sin embargo se detectó
la formación de picos secundarios con tiempo de retención de aproximadamente
1.7 minutos, 2.3 minutos, 6.7 minutos y 8.8 minutos.
- Fue evaluada la pureza del pico de metilparabeno y propilparabeno durante el
estudio de degradación forzada, mismo donde hubo aparecimiento de picos
secundarios, se obtuvo la pureza del pico entre 0.99 y 1.00 para los picos
correspondientes a los conservadores indicando que no existen coeluciones. La
resolución entre todos los picos fue mayor de 1.25 indicando que no existen
coeluciones.
• Criterios de Aceptación X Resultados
Tabla 12. Criterios de Aceptación X Resultados para el Estudio de Degradación

Forzada
Elemento Criterio de Aceptación Resultado

Estudio de El método debe de ser capaz de separar Conforme
Degradación Forzada con especificidad y resolución (R ≥ 1.25)
adecuados, todos los productos
secundarios provenientes del estudio de
degradación forzada
Pureza del Pico Informativo Entre 0.99 y
1.00
• Conclusión
Conforme a los resultados obtenidos, el método de determinación se presenta
específico para la cuantificación de metilparabeno y propilparabeno en los productos
Efurix® / Efudix® Crema.
Versión: 01
5.4 Linealidad
Fue avaluado un intervalo con niveles de 80%, 90%, 100%, 110% y 120% de la
concentración del método.
• Preparación de la solución estándar stock de metilparabeno (preparar una sola

vez): En un matraz volumétrico de 25 mL, se pesaron exactamente 20.3 mg de
estándar farmacopéico de metilparabeno. Fueron adicionados 20 mL de metanol y
se agitó en baño de ultrasonido hasta la completa solubilización del estándar. Se
esperó hasta que se enfrió a temperatura ambiente y se completó a volumen del
matraz con metanol. La solución fue homogeneizada. La concentración de
metilparabeno en la solución estándar stock es de 0.8112 mg/mL.
• Preparación de curva de linealidad de metilparabeno: Se transfirieron

volumétricamente alícuotas de la solución estándar stock de metilparabeno para
diferentes matraces volumétricos, conforme a lo indicado en la Tabla 13, y el
volumen de los matraces fue completado con diluyente. Las soluciones fueron
homogeneizadas. Parte de las soluciones fue filtrada a través de una membrana de
celulosa regenerada de 0.45 µm para vial de HPLC
Tabla 13. Curva de Linealidad
Concentración de
Alícuota Solución Volumen Final
Solución (%) Metilparabeno
Estándar Stock (mL) (mL)
(mg/mL)
80 1.0 50 0.0162
90 1.0 45 0.0180
100 1.0 40 0.0203
110 1.0 35 0.0232
120 1.5 50 0.0243
• Análisis
- Las soluciones fueron analizadas conforme al método analítico descrito para

determinación (punto 5.2), pero con tres inyecciones de cada una.
- Los resultados fueron registrados y fue trazado el gráfico: Respuesta (Área) x
Concentración (mg/mL).
Versión: 01
• Evaluación estadística
- Una evaluación estadística fue efectuada por regresión lineal, método de

mínimos cuadrados.
- Coeficiente lineal (intersección Y)
Intersección en el eje y x 100 ≤ 10.00% (valor deseado)

área del estándar al 100%
106559 x 100 = 2.12%

5144597
• Resultados
Tabla 14. Resultados para la Linealidad – Metilparabeno

Alícuota de
Concentración
Solución Estándar Volumen
Solución de Área
Stock de Final % DER
(%) Metilparabeno Media
Metilparabeno (mL)
(mg/mL)
(mL)
80 1.0 50 0.0162 4043889
90 1.0 45 0.0180 4559997
100 1.0 40 0.0203 5019174 1.00
110 1.0 35 0.0232 5633518
120 1.5 50 0.0243 6058760
• Gráfico de Respuesta X Concentración

Versión: 01
• Desviación Estándar de Regresión Lineal: 60174.7047

• Pendiente de la recta: 241885381.4
• Preparación de la solución estándar stock de propilparabeno (preparada una

sola vez): En un matraz volumétrico de 60 mL, se pesaron exactamente 14.8 mg
de estándar farmacopéico de propilparabeno. Fueron adicionados cerca de 50 mL
de metanol y se agitó en baño de ultrasonido hasta la completa solubilización del
estándar. Se esperó hasta que se enfrió a temperatura ambiente y se completó a
volumen del matraz con metanol. La solución fue homogeneizada. La
concentración de propilparabeno en la solución estándar stock es de 0.2467
mg/mL.
• Preparación de curva de linealidad de propilparabeno: Se transfirieron

volumétricamente alícuotas de la solución estándar stock de propilparabeno para
diferentes matraces volumétricos, conforme a lo indicado en la Tabla 15, y el
volumen de los matraces fue completado con diluyente. Las soluciones fueron
homogeneizadas. Parte de las soluciones fue filtrada a través de una membrana de
celulosa regenerada de 0.45 µm para vial de HPLC
Tabla 15. Curva de Linealidad
Concentración de
Alícuota Solución Volumen Final
Solución (%) Propilparabeno
Estándar Stock (mL) (mL)
(mg/mL)
80 1.0 25 0.0099
90 1.5 35 0.0106
100 2.0 40 0.0123
110 2.0 35 0.0141
120 1.5 25 0.0148
• Análisis
- Las soluciones fueron analizadas conforme al método analítico descrito para

determinación (punto 5.2), pero con tres inyecciones de cada una.
- Los resultados fueron registrados y fue trazado el gráfico: Respuesta (Área) x
Concentración (mg/mL).
Versión: 01
• Evaluación estadística
- Una evaluación estadística fue efectuada por regresión lineal, método de

mínimos cuadrados.
- Coeficiente lineal (intersección Y)
Intersección en el eje y x 100 ≤ 10.00% (valor deseado)

área del estándar al 100%
73226 x 100 = 2.86%

2559953
• Resultados
Tabla 16. Resultados para la Linealidad – Propilparabeno

Alícuota de
Concentración
Solución Estándar Volumen
Solución de Área
Stock de Final % DER
(%) Metilparabeno Media
Propilparabeno (mL)
(mg/mL)
(mL)
80 1.0 25 0.0099 2052209
90 1.5 35 0.0106 2183788
100 2.0 40 0.0123 2559953 0.60
110 2.0 35 0.0141 2943911
120 1.5 25 0.0148 3105418

Versión: 01
• Desviación Estándar de Regresión Lineal: 10767.3173

• Pendiente de la recta: 214239109.8
Tabla 17. Criterios de Aceptación X Resultados

Criterios de Resultados
Parámetro
Aceptación Metilparabeno Propilparabeno
Coeficiente de
Mínimo 0.99 0.9980 0.9998
correlación (r)
% DER ≤ 1.50% 1.00% 0.60%
• Conclusión
Conforme a los resultados obtenidos, el método se presenta lineal para la
cuantificación de metilparabeno y propilparabeno en los productos Efurix® / Efudix®
Crema.
5.5 Límite estimado de detección

• El cálculo del límite de detección fue basado en la desviación estándar de
respuesta y la pendiente de la recta conforme al cálculo de abajo:
3 x desviación estándar de la regresión lineal

Pendiente de la recta
• Éste cálculo fue realizado a través del programa Excel siguiendo los pasos
definidos en el protocolo.
Tabla 18. Resultados para el Límite Estimado de Detección – Metilparabeno

Concentración menor de
Parámetro Resultado
la curva de linealidad
Límite Estimado de
0.0162 mg/mL 0.000746 mg/mL
Detección
Tabla 19. Resultados para el Límite Estimado de Detección – Propilparabeno

Límite Estimado de
0.0099 mg/mL 0.000151 mg/mL
Detección
Versión: 01
5.6 Límite estimado de cuantificación
• El cálculo del límite de cuantificación fue basado en la desviación estándar de la

respuesta y en la pendiente de la recta conforme al cálculo:
10 x desviación estándar de la regresión lineal

Pendiente de la recta
• Éste cálculo fue realizado a través del programa Excel siguiendo los pasos
definidos en el protocolo:
Tabla 20. Resultados para el Límite Estimado de Cuantificación –

Metilparabeno
Límite Estimado de
0.0162 mg/mL 0.002488mg/mL
Cuantificación
Tabla 21. Resultados para el Límite Estimado de Cuantificación –

Propilparabeno
Límite Estimado de
0.0099 mg/mL 0.000503 mg/mL
Cuantificación
5.7 Precisión
5.7.1 Repetibilidad
• Solución estándar: En dos diferentes matraces volumétricos de 25 mL, se

pesaron exactamente 25.9 mg y 25.1 mg de estándar farmacopéico de
metilparabeno y también 15.4 mg y 15.2 mg de estándar farmacopéico de
propilparabeno. Se adicionaron cerca de 20 mL de metanol y se agitó en baño
de ultrasonido hasta la completa solubilización de los estándares. Se esperó a
enfriar a temperatura ambiente y se completó a volumen de los matraces con
metanol. Las soluciones fueron homogeneizadas. Se transfirió
volumétricamente una alícuota de 2.0 mL de las soluciones para dos diferentes
matraces volumétricos de 100 mL. Se completó a volumen de los matraces
Versión: 01
con el diluyente y se homogeneizó. Parte de las soluciones fueron filtradas a

través de una membrana de celulosa regenerada de 0.45 µm para vial de
HPLC. Una concentración de metilparabeno en las soluciones estándar es
respectivamente de 0.0207 mg/mL y 0.0201 mg/mL. La concentración de
propilparabeno en las soluciones estándar es respectivamente de 0.0123
mg/mL y 0.0122 mg/mL.
• Solución muestra (preparada por sextuplicado): En seis diferentes tubos de

centrífuga de 50 mL de polipropileno provistos de tapa, se pesaron
exactamente 2.0241 g, 2.0012 g, 2.0067 g, 1.9986 g, 2.0007 g y 2.1747 g de
muestra de Efurix® Crema. Se adicionaron volumétricamente, 25 mL de
diluyente en cada uno de los tubos. Se agitó en baño de ultrasonido por 20
fueron centrifugadas a 3000 rpm por 20 minutos. Parte de los sobrenadantes
fueron filtrados a través de una membrana de celulosa regenerada de 0.45 µm
para vial de HPLC. Las soluciones fueron analizadas conforme a lo descrito en
el método analítico para determinación, punto 5.2. Se reinyecto por duplicado,
a cada dos muestras, una de las soluciones estándar y alternándolas entre sí,
comparándose con las inyecciones iniciales. Las soluciones estándar se
presentaron estables, porque las recuperaciones están dentro de lo
especificado, de 98.00 a 102.00% con una DER ≤ 2.00%.
Tabla 22. Resultados obtenidos para Repetibilidad – Metilparabeno
Contenido Contenido Contenido

Muestras Contenido (%)
(mg/g) Medio (mg/g) Medio (%)
Muestra 1_1 0.241 96.4
0.241 96.4
Muestra 1_2 0.241 96.4
Muestra 2_1 0.239 95.6
0.239 95.6
Muestra 2_2 0.239 95.6
Muestra 3_1 0.239 95.6
0.239 95.6
Muestra 3_2 0.239 95.6
Muestra 4_1 0.239 95.6
0.239 95.6
Muestra 4_2 0.239 95.6
Muestra 5_1 0.239 95.6
0.239 95.6
Muestra 5_2 0.239 95.6
Muestra 6_1 0.235 94.0
0.235 94.0
Muestra 6_2 0.235 94.0
Media 0.239 95.5 0.239 95.5
% DER 0.79 0.79 0.82 0.82
Versión: 01
Tabla 23. Resultados obtenidos para Repetibilidad – Propilparabeno

Contenido Contenido Contenido
Muestras Contenido (%)
(mg/g) Medio (mg/g) Medio (%)
Muestra 1_1 0.143 95.3
0.143 95.3
Muestra 1_2 0.143 95.3
Muestra 2_1 0.142 94.7
0.142 94.7
Muestra 2_2 0.142 94.7
Muestra 3_1 0.141 94.0
0.141 94.0
Muestra 3_2 0.141 94.0
Muestra 4_1 0.142 94.7
0.142 94.7
Muestra 4_2 0.142 94.7
Muestra 5_1 0.141 94.0
0.141 94.0
Muestra 5_2 0.141 94.0
Muestra 6_1 0.139 92.7
0.140 93.0
Muestra 6_2 0.140 93.3
Media 0.141 94.3 0.141 94.3
% DER 0.82 0.82 0.85 0.85
5.7.2 Precisión Intermedia
Fue realizada por la analista Cintia Marciano, tres días después del análisis de
repetibilidad:

ultrasonido hasta la completa solubilización de los estándares. Se esperó a enfriar
a temperatura ambiente y se completó a volumen de los matraces con metanol.
Las soluciones fueron homogeneizadas. Se transfirió volumétricamente una
alícuota de 2.0 mL de éstas soluciones a dos diferentes matraces volumétricos de
100 mL. El volumen de los matraces se completó con diluyente y las soluciones
fueron homogeneizadas. Parte de las soluciones fueron filtradas a través de una
soluciones estándar es respectivamente, 0.0122 mg/mL y 0.0119 mg/mL
Versión: 01
• Solución muestra (preparada por sextuplicado): En seis diferentes tubos de

centrífuga de 50 mL de polipropileno provistos de tapa, se pesaron
respectivamente 2.0415 g, 2.0005, 2.0030 g, 1.9930 g, 2.0473 y 2.0213 g de
Efurix® Crema del mismo lote utilizado en la prueba de Repetibilidad. Se
adicionaron volumétricamente 25 mL de diluyente cada uno de los tubos. Se agitó
en baño de ultrasonido por 20 minutos. Posteriormente se agitó manualmente por
5 minutos. Las soluciones fueron centrifugadas a 3000 rpm por 20 minutos. Parte
de los sobrenadantes fueron filtrados a través de una membrana de celulosa
regenerada de 0.45 µm para vial de HPLC. Las soluciones fueron analizadas
conforme al método analítico para determinación, punto 5.2. Fue reinyectado en
duplicado, a cada dos muestras, una solución estándar, alternándolas entre sí y se
compararon con las inyecciones iniciales. La solución estándar se presentó
estable, porque las recuperaciones están dentro de lo especificado, de 98.00 a
102.00% con una DER ≤ 2.00%
Tabla 24. Resultados obtenidos para la Precisión Intermedia - Metilparabeno
Contenido Contenido Contenido Contenido

Muestras
(mg/g) (%) medio (mg/g) medio (%)
Muestra 1_1 0.238 95.2
0.238 95.2
Muestra 1_2 0.238 95.2
Muestra 2_1 0.236 94.4
0.236 94.4
Muestra 2_2 0.236 94.4
Muestra 3_1 0.236 94.4
0.236 94.4
Muestra 3_2 0.236 94.4
Muestra 4_1 0.233 93.2
0.234 93.4
Muestra 4_2 0.234 93.6
Muestra 5_1 0.232 92.8
0.232 92.8
Muestra 5_2 0.232 92.8
Muestra 6_1 0.233 93.2
0.233 93.2
Muestra 6_2 0.233 93.2
Media 0.235 93.9 0.235 93.9
% DER 0.93 0.93 0.97 0.97
Versión: 01
Tabla 25. Resultados obtenidos para la Precisión Intermedia - Propilparabeno
Contenido Contenido Contenido Contenido

Muestras
(mg/g) (%) medio (mg/g) medio (%)
Muestra 1_1 0.143 95.3
0.143 95.3
Muestra 1_2 0.143 95.3
Muestra 2_1 0.142 94.7
0.142 94.7
Muestra 2_2 0.142 94.7
Muestra 3_1 0.142 94.7
0.142 94.7
Muestra 3_2 0.142 94.7
Muestra 4_1 0.140 93.3
0.140 93.3
Muestra 4_2 0.140 93.3
Muestra 5_1 0.139 92.7
0.139 92.7
Muestra 5_2 0.139 92.7
Muestra 6_1 0.140 93.3
0.140 93.3
Muestra 6_2 0.140 93.3
Media 0.141 94.0 0.141 94.0
% DER 1.05 1.05 1.10 1.10
• Consolidación de resultados
- Fueron confrontados los resultados obtenidos en la Repetibilidad con aquellos

obtenidos en la precisión intermedia.
Tabla 26. Consolidación de Resultados – Metilparabeno
Contenido Contenido
Muestras
Metilparabeno mg/g Metilparabeno %
1 0.241 96.4
2 0.239 95.6
3 0.239 95.6
Repetibilidad
4 0.239 95.6
5 0.239 95.6
6 0.235 94.0
1 0.238 95.2
Precisión 2 0.236 94.4
Intermedia 3 0.236 94.4
4 0.234 93.4
5 0.232 92.8
6 0.233 93.2
Media 0.237 94.7
%DER 1.22 1.22
Versión: 01
Tabla 27. Consolidación de Resultados – Propilparabeno
Contenido Contenido
Muestras
Metilparabeno mg/g Metilparabeno %
1 0.143 95.3
2 0.142 94.7
3 0.141 94.0
Repetibilidad
4 0.142 94.7
5 0.141 94.0
6 0.140 93.0
1 0.143 95.3
Precisión 2 0.142 94.7
Intermedia 3 0.142 94.7
4 0.140 93.3
5 0.139 92.7
6 0.140 93.3
Media 0.141 94.1
%DER 0.95 0.95
Tabla 28. Criterios de Aceptación X Resultados para Precisión
Criterios de Resultados
Parámetro
Aceptación Metilparabeno Propilparabeno
DER entre las
Repetibilidad DER: 0.82% DER: 0.85%
repeticiones ≤ 5.00%
DER entre las
Precisión Intermedia DER: 0.97% DER: 1.10%
repeticiones ≤ 5.00%
DER entre
Repetibilidad y DER ≤ 5.00% DER: 1.22% DER: 0.95%
Precisión Intermedia
• Conclusión
Conforme a los resultados obtenidos el método presentado es preciso para la

Crema.
Versión: 01
5.8 Exactitud

temperatura ambiente y se completó a volumen de los matraces con metanol. Las
soluciones fueron homogeneizadas. Se transfirió volumétricamente una alícuota
de 2.0 mL de éstas soluciones a dos diferentes matraces volumétricos de 100 mL.
El volumen de los matraces se completó con diluyente y las soluciones fueron
homogeneizadas. Parte de las soluciones fueron filtradas a través de una
soluciones estándar son respectivamente, 0.0123 mg/mL y 0.0156 mg/mL
• Solución placebo stock (preparada por triplicado): En tres diferentes tubos de

centrífuga de polipropileno con tapa, se pesaron respectivamente, 10.0489 g,
9.8799 g y 9.8387 g de placebo. Se adicionó volumétricamente una alícuota de 40
mL de diluyente en cada uno de los tubos y se agitó en baño de ultrasonido por 20
fueron centrifugadas a 3000 rpm por 20 minutos.
• Solución Stock de Metilparabeno (preparada por triplicado): Se pesó con

exactitud, respectivamente 20.2 mg, 20.3 mg y 20.6 mg de estándar de
metilparabeno y se transfirieron a tres diferentes matraces volumétricos de 25 mL.
Se adicionaron cerca de 20 mL de metanol y se agitó en baño de ultrasonido hasta
la completa solubilización del estándar. Se esperó a enfriar a temperatura
ambiente y se completó a volumen de los matraces con metanol. Las soluciones
fueron homogeneizadas.
• Solución Stock de Propilparabeno (preparada por triplicado): Se pesó con

exactitud, respectivamente 14.8 mg, 15.0 mg y 14.7 mg de estándar de
propilparabeno y se transfirieron a tres diferentes matraces volumétricos de 60
mL. Se adicionaron cerca de 50 mL de metanol y se agitó en baño de ultrasonido
hasta la completa solubilización del estándar. Se esperó a enfriar a temperatura
ambiente y se completó a volumen de los matraces con metanol. Las soluciones
fueron homogeneizadas.
Versión: 01
• Soluciones muestra: A partir de las soluciones placebo stock y las soluciones

stock de metilparabeno y propilparabeno, se prepararon 3 soluciones muestra
de cada nivel de concentración de analito (80%, 100% y 120%), conforme a la
tabla 29 y se diluyó con solución diluyente.
Tabla 29. Preparación de las Soluciones para Exactitud
Alícuota Concentración
Alícuota Sol. Alícuota Sol. Concentración
Sol. Volumen teórica de
Concentración Stock de Stock de teórica de
Placebo Final Metilparabeno
(%) Metilparabeno Propilparabeno Propilparabeno
Stock (mL) (mg/mL)
(mL) (mL) (mg/mL)
(mL)
80 0.5 1.0 6.7 25 0.0160 0.0097
100 1.0 2.0 12.8 40 0.0200 0.0121
120 1.5 3.0 19.8 50 0.0240 0.0145
• Análisis
- Las soluciones fueron analizadas conforme a lo descrito en el método

analítico de determinación, punto 5.2.
- Después del término del análisis de cada concentración, fue reinyectado
alternadamente una de las soluciones estándar, por duplicado y
comparándolas con la inyección inicial. Las soluciones estándar se
presentaron estables, porque las recuperaciones estaban dentro de lo
especificado, de 98.00 a 102.00% con una DER ≤ 2.00%
Versión: 01
Tabla 30. Resultados para Exactitud – Metilparabeno
Recuperación Recuperación
Muestra
Media (mg/mL) Media (%)
1 0.0164 100.9802
Concentración Baja 2 0.0166 101.4019
3 0.0167 100.8308
1 0.0205 100.7340
Concentración
2 0.0207 101.4631
Media
3 0.0209 100.9516
1 0.0248 101.8012
Concentración Alta 2 0.0252 102.9336
3 0.0255 102.6421
Media (%) 101.5265
DER (%) 0.78
Máximo 102.9336
Mínimo 100.7340
• DESVIACIÓN ESTÁNDAR DE REGRESIÓN LINEAL: 0.0001
• PENDIENTE DE LA RECTA: 1.0526

Versión: 01
Tabla 31. Resultados para Exactitud – Propilparabeno
Recuperación Recuperación
Muestra
Media (mg/mL) Media (%)
1 0.0099 100.7408
Concentración Baja 2 0.0098 98.3936
3 0.0098 100.4016
1 0.0125 101.7584
Concentración
2 0.0125 100.4016
Media
3 0.0123 100.8114
1 0.0150 101.7584
Concentración Alta 2 0.0151 101.0710
3 0.0150 102.4506
Media (%) 100.8653
DER (%) 1.15
Máximo 102.4506
Mínimo 98.3936
• DESVIACIÓN ESTÁNDAR DE REGRESIÓN LINEAL: 0.0001
• PENDIENTE DE LA RECTA: 1.0540

Versión: 01
Tabla 32. Criterios de Aceptación X Resultados de Exactitud – Metilparabeno
Parámetro Criterios de Aceptación Resultados

Desviación Estándar Relativa (%DER) ≤ 2.00% 0.78%
Recuperación muestra 80% 97.00% a 103.00% 101.07%
Coeficiente de Correlación (r) Mínimo 0.99 0.9994
Tabla 33. Criterios de Aceptación X Resultados de Exactitud – Propilparabeno

Desviación Estándar Relativa (%DER) ≤ 2.00% 1.15%
Coeficiente de Correlación (r) Mínimo 0.99 0.9991
• Conclusión
Conforme a los resultados obtenidos, el método presentado es exacto para la

Crema.
5.9 Robustez
• Solución Estándar: Fueron utilizadas las soluciones estándar preparadas en el

parámetro de especificidad.
• Solución Muestra: Fueron utilizadas las soluciones muestra preparadas en el

• Análisis: Fueron efectuadas pequeñas alteraciones en el método analítico de

determinación (punto 5.2.), conforme a lo descrito en la tabla de abajo, y
realizado el análisis con las soluciones estándar y muestra, se inyectaron por
Versión: 01
duplicado. Después del término del análisis, las soluciones muestra de cada
variación, se reinyectaron, por duplicado, una de las soluciones estándar y se
compararon con las inyecciones iniciales. Las soluciones estándar se
presentaron estables, con una recuperación dentro de lo especificado de
98.00% a 102.00%, con una DER ≤ 2.00%
Tabla 34. Alteraciones para Robustez

Condiciones Variación 1 Variación 2
Flujo de Fase Móvil 0.95 mL/min 1.05 mL/min
Temperatura de columna 25°C --
• Resultados
Tabla 35. Resultados obtenidos en Robustez para variación de la Temperatura del

Horno – Metilparabeno
Temp. Horno 30°C Temp. Horno 25°C

Muestra Repetición
Contenido mg/g Contenido mg/g
1 0.236 0.236
1
2 0.236 0.236
1 0.235 0.235
2
2 0.235 0.235
Media 0.236 0.236
%DER 0.25 0.25
Media 0.236
%DER 0.23
Versión: 01
Tabla 36. Resultados obtenidos en Robustez para variación de la Temperatura del

Horno – Propilparabeno
Temp. Horno 30°C Temp. Horno 25°C

Muestra Repetición
Contenido mg/g Contenido mg/g
1 0.141 0.141
1
2 0.141 0.141
1 0.140 0.140
2
2 0.140 0.140
Media 0.141 0.141
%DER 0.41 0.41
Media 0.141
%DER 0.39
Tabla 37. Resultados obtenidos en Robustez para variación de Flujo de Fase

Móvil - Metilparabeno
Flujo 1.0 mL/min Flujo 0.95 mL/min Flujo 1.05 mL/min

Muestra Repetición
Contenido mg/g Contenido mg/g Contenido mg/g
1 0.236 0.236 0.236
1
2 0.236 0.236 0.236
1 0.235 0.235 0.235
2
2 0.235 0.235 0.235
Media 0.236 0.2355 0.2355
%DER 0.25 0.25 0.25
Media 0.236 0.236
%DER 0.23 0.23
Tabla 38. Resultados obtenidos en Robustez para variación de Flujo de Fase

Móvil - Propilparabeno
Flujo 1.0 mL/min Flujo 0.95 mL/min Flujo 1.05 mL/min

Muestra Repetición
Contenido mg/g Contenido mg/g Contenido mg/g
1 0.141 0.141 0.141
1
2 0.141 0.141 0.141
1 0.140 0.140 0.140
2
2 0.140 0.140 0.140
Media 0.141 0.141 0.141
%DER 0.41 0.41 0.41
Media 0.141 0.141
%DER 0.38 0.38
Versión: 01
Tabla 39. Criterios de Aceptación X Resultados para Robustez - Metilparabeno

Temperatura 25°C DER = 0.23%
DER ≤ 5.00% entre el
Flujo 0.95 mL/min DER = 0.23%
método con y sin alteración
Tabla 40. Criterios de Aceptación X Resultados para Robustez – Propilparabeno

Temperatura 25°C DER = 0.38%
DER ≤ 5.00% entre el
método con y sin alteración
• Conclusión
Conforme a los resultados obtenidos el método presentado es robusto para la

Crema.
5.10 Estabilidad de las Soluciones
• Solución Estándar: Fue utilizada la primera solución estándar preparada en el

• Solución Muestra: Fue utilizada la primera solución muestra preparada en el

• Análisis: Las soluciones estándar y muestra fueron mantenidas en el

refrigerador analizadas conforme a lo descrito en el método analítico para
determinación (punto 5.2) con una inyección de cada una, en los intervalos de
tiempo 0, 1, 4, 6 y 8 días.
Versión: 01
Tabla 41. Resultados de Estabilidad de las Soluciones en Refrigeración –

Metilparabeno
Periodo Área Media DER (%)

Inicio 4969218
1 día 4975798
Solución
4 días 4954300 4963312 0.18
Estándar
6 días 4957157
8 días 4960089
Inicio 4692489
1 día 4707520
Solución
4 días 4675051 4693284 0.33
Muestra
6 días 4681237
8 días 4710125
Tabla 42. Resultados de Estabilidad de las Soluciones en Refrigeración –

Propilparabeno
Periodo Área Media DER (%)

Inicio 2567743
1 día 2564173
Solución
4 días 2524455 2534416 1.17
Estándar
6 días 2506006
8 días 2509702
Inicio 2359347
1 día 2366434
Solución
4 días 2323009 2337014 1.04
Muestra
6 días 2310986
8 días 2325294
Tabla 43. Criterios de Aceptación X Resultados para Estabilidad de las Soluciones

– Metilparabeno
Parámetro Criterio de Aceptación Resultados

%DER entre los intervalos de tiempo
DER ≤ 2.00% 0.18%
para el estándar (refrigeración)
DER ≤ 2.00% 0.33%
para la muestra (refrigeración)
Versión: 01
Tabla 44. Criterios de Aceptación X Resultados para Estabilidad de las Soluciones

– Propilparabeno
Parámetro Criterio de Aceptación Resultados

DER ≤ 2.00% 1.17%
para el estándar (refrigeración)
DER ≤ 2.00% 1.04%
para la muestra (refrigeración)
• Conclusión
Las soluciones estándar y muestra son estables para el análisis dentro del periodo
de hasta 8 días después de preparadas, cuando son mantenidas en refrigeración.
5.11 Adecuabilidad del Sistema
• Fueron evaluados los cromatogramas de las soluciones estándar durante todo

el proceso de validación.
• Resultados
Tabla 45. Criterios deseados para Adecuabilidad del sistema

Resultados
Parámetro
Metilparabeno Propilparabeno
% DER entre el Tiempo
6.9 min, DER: 0.00% 8.8 min, DER: 0.00%
de Retención
Factor de Cola (T) 1.7 1.6
Factor de Capacidad 5.9 7.8
Número de Platos
16411 29853
Teóricos
Versión: 01
6. CONCLUSIÓN
A través de éste estudio se concluyó que el método propuesto se presentó específico,

lineal, preciso, exacto y robusto, lo que comprueba que el método analítico para la
determinación de metilparabeno y propilparabeno en los productos Efurix® / Efudix®
Crema está validado.
7. REFERENCIAS
• ANVISA – Resolución No. 899 – 29/05/2003 – Guía para la Validación de Métodos

Analíticos y Bioanalíticos.
• PVM-PA.0701: Protocolo de Validación de la Metodología Analítica para la
determinación de Metilparabeno y Propilparabeno en los productos Efurix® / Efudix®
Crema.
• RVM-PA.0701 versión 01: Informe de Validación de la Metodología Analítica para la
determinación de Metilparabeno y Propilparabeno en los productos Efurix® / Efudix®
Crema.
• POP-CQ.011: Procedimiento Normalizado de Operación para Validación de Métodos
Analíticos.
• POP-CQ.043: Procedimiento Normalizado de Operación – Utilización de Estándares
de Referencia, Secundarios y Normalizados.
• MET-MG.024: Método General de Análisis – Cromatografía Líquida de Alta
Eficiencia.
8. ANEXO
• Anexo I: Hoja Inicial

• Anexo II: Especificidad
• Anexo III: Linealidad
• Anexo IV: Precisión – Repetibilidad
• Anexo V: Precisión Intermedia
• Anexo VI: Exactitud
• Anexo VII: Robustez
• Anexo VIII: Estabilidad de las Soluciones
• Anexo IX: Adecuabilidad del Sistema
• Anexo X: Certificados de los Estándares

2.3 Valid 0701 - 01 - Limite Conservadores Efudix

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INFORME DE VALIDACIÓN

DE METODOLOGÍA ANALÍTICA DE PRODUCTO TERMINADO

Efurix® / Efudix® Crema

Valeant Farmaceutica do Brasil Ltda.

Cintia Marciano 11/05/16 Firma

Eloisa Barel Filier 11/05/16 Firma

Ana Margarida Pioltine 11/05/16 Firma

Patricia Viel 11/05/16 Firma

00 Emisión Inicial Eloisa Barel Filier 07/04/2014

Fue realizada una revisión para el parámetro de

2. ALCANCE DEL ESTUDIO………………………………………………………. 5

3.1 CONTROL DE CALIDAD…………………………………………………….. 5

5.1 MATERIALES NECESARIOS……………………………………..……… 6

2. ALCANCE DEL ESTUDIO

En este estudio fueron realizadas las pruebas de especificidad, linealidad (intervalo de

3.1 Control de Calidad

Es responsabilidad de los empleados involucrados en la elaboración, revisión y

3.2 Aseguramiento de Calidad

Es responsabilidad del Coordinador / Gerente del Sector la aprobación de éste informe.

5.1 Materiales necesarios

5.2 Descripción de Método Analítico para Determinación

Analizar conforme MET-MG.024 – Método General de Análisis para Cromatografía

• Fase Móvil: Sistema Gradiente de Metanol (grado HPLC) y Agua Milli-Q, en la

Tabla 01. Gradiente para Determinación de Metilparabeno y Propilparabeno

• Solución diluyente: Preparar una mezcla de Metanol y Agua Milli-Q, en una

• Solución estándar (preparar por duplicado): En un matraz volumétrico de 25 mL,

• Solución muestra (preparar por duplicado): En un tubo de centrífuga de 50 mL

• Columna µBondapak C18 con 30 cm de longitud, 3.9 mm de diámetro y

• Inyectar, por separado y por duplicado, las soluciones muestra y estándar.

• Diluyente (preparado por duplicado): Parte de la solución diluyente fue filtrada a

• Fase móvil: Fue analizadas la fase móvil conforme al método descrito en el

• Placebo de Efurix® / Efudix® Crema (preparado por duplicado): En dos tubos

g de placebo. Se adicionaron volumétricamente 25 mL de diluyente en cada uno

• Solución de Metilparabeno (preparada una vez): En un matraz volumétrico de 25

• Solución de Propilparabeno (preparada una vez): En un matraz volumétrico de

• Solución Estándar (preparada por duplicado): En dos diferentes matraces

• Solución muestra (preparada por duplicado): En dos diferentes tubos de

Tabla 02. Cuantificación de Metilparabeno

Contenido Contenido Contenido medio Contenido medio

Tabla 03. Cuantificación de Propilparabeno

Tabla 04. Interferencias en la región del pico de Metilparabeno

Tabla 05. Interferencias en la región del pico de Propilparabeno

Tabla 06. Resultados X Criterios de Aceptación

Elementos Criterio de Aceptación Resultados

Placebo, Fase Ninguna interferencia en la región No fueron visualizadas

5.3.1 Estudio de Degradación Forzada

Fueron realizados los estudios de degradación forzada bajo condiciones conforme

Tabla 07. Condiciones de Estrés

Agente estresante Descripción Frecuencia de análisis

Tabla 08. Tasa de Recuperación de Metilparabeno durante el Estudio de

Hidrólisis básica 103.21 101.91 101.68

Oxidación 102.75 103.47 103.30

Hidrólisis ácida 103.11 104.52 104.49

Hidrólisis básica 101.80 104.55 104.01

Oxidación 101.70 103.56 103.63

Tabla 09. Tasa de Recuperación de Propilparabeno durante el Estudio de

Hidrólisis básica 101.72 94.62 93.79

Oxidación 104.52 104.68 104.81

Hidrólisis ácida 101.59 101.73 102.44

Hidrólisis básica 101.83 104.22 103.65

Oxidación 100.82 102.31 102.70

Tabla 10. Pureza del Pico de las Soluciones Control

Pureza del pico