Cuestionario de práctica No.

02:
Esterilización

1
1. Complete la siguiente tabla sobre los métodos de esterilización de medios y materiales diferentes a los utilizados en la
práctica que comúnmente se usan en microbiología.

Material Método preferente Método opcional Condiciones o dosis

1. Material de acero inoxidable (pinzas) Calor seco Calor húmedo 160°C, 60 min

2. Medios de cultivo líquidos Calor húmedo Microfiltración 121°C, 15 lb/p2, 15 min

3. Gasas, vendas Calor húmedo Radiaciones ionizantes 121°C, 15 lb/p2, 15 mim

4. Residuos anatómicos/patológicos Incineración - 600 - 800°C

5. Superficies (gabinetes de bioseguridad) Formaldehido Radiaciones no ionizantes (Luz UV) 2%, 60°C, 3.5 h

6. Material de plástico (jeringas, tubos, Óxido de etileno Radiaciones ionizantes Ciclo frio: 37ºC, 5 - 5.5 h; ciclo caliente: 55ºC, 2 – 4 h.
pipetas) Humedad interior: 40 - 70%
7. Sustancias termolábiles Radiaciones ionizantes Microfiltración Radiaciones gamma

8. Gabinete de seguridad biológica Formaldehido Radiaciones no ionizantes (Luz UV) 2%, 60°C, 3.5 h
contaminado con esporas de hongos
9. Farmacéuticos (antibióticos, etc.) Óxido de etileno Microfiltración Ciclo frio: 37ºC, 5 - 5.5 h; ciclo caliente: 55ºC, 2 – 4 h.
Humedad interior: 40 - 70%
10. Ropa de cirugía Calor húmedo Óxido de etileno 121°C, 15 lb/p2, 15 min

11. Animales de experimentación Incineración - 600-800°C

12. Cajas de Petri de plástico Radiaciones ionizantes Óxido de etileno Radiaciones gamma

13. Sangre de desecho Incineración - 600-800°C

14. Sangre para reutilizar Recibir en material estéril - Bolsa recolectora de sangre en condiciones de
esterilidad
2
 2. Cada método de esterilización utiliza un microorganismo como control biológico específico, completa en la
tabla los nombres de las especies que se recomiendan como control biológico para cada tipo de esterilización.

Técnica Organismo control Referencia

Bacillus subtilis
1. Autoclave
Bacillus stearothermophilus
2. Horno de aire caliente Bacillus atrophaeus
3. Radiaciones ionizantes Bacillus pumilus
4. Óxido de etileno Bacillus atrophaeus
5. Filtración a través de Brevundimonas diminuta
membrana de 0.22 µm (Diámetro de 0.3 μm)
Patiño-Marín, N., Loyola-Rodríguez, J. P., y Tovar-Reyes, L. F. (2022). Uso y verificación con indicadores
biológicos en esterilizadores de cirujanos dentistas de San Luis Potosí, México. Salud Pública de México, 43(5),
455–458. http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0036-36342001000500009
ICT SL - Instrumentación Científico Técnica, S.L. - I.C.T,S.L. (2012). Indicador biológico de esterilización, tiras.
Ictsl.net. http://www.ictsl.net/productos/021b07961a0ad1e34/0000009ac80801c01.html
Hernández Lomelí, S., Alavez Rebollo, S., García Hernández, J., & Flores Luna, M. G. (2016). Monitoreo con
indicadores biológicos de rápida lectura de las autoclaves de CEYE de la Facultad de Odontología de la
Universidad Tecnológica de México. Revista Odontológica Mexicana, 20(2), 93–97.
https://doi.org/10.1016/j.rodmex.2016.04.004
ICT SL - Instrumentación Científico Técnica, S.L. - I.C.T,S.L. (2012). Indicador biológico de esterilización, tiras.
Ictsl.net. http://www.ictsl.net/productos/021b07961a0ad1e34/0000009ac80801c01.html
Burguet, N., y Sierra, N. (2012). Evaluación de una estrategia de conservación para Brevundimonas
diminuta. Vaccimonitor, 21(1), 10–13. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-
028X2012000100003

3
3. Para evaluar un equipo de esterilización industrial por calor húmedo nuevo se realiza un experimento donde se estimaron
las esporas de Geobacillus stearothermophilus que sobrevivieron a diferentes tiempos de funcionamiento del equipo. En la
siguiente tabla se muestran la población inicial y las esporas sobrevinientes a diferentes tiempos de tratamiento.

Tiempo de exposición a 115° (min) Sobrevivientes (UFC/mL)

0 1x106

5 2x105

10 1x103

15 100

Determine el valor del tiempo de reducción decimal a 115°C (D115) del microorganismo utilizado.
• Tiempo de reducción decimal a 115°C (D115) = 3.75 minutos

• Interprete el resultado:
Se necesita un tiempo de tratamiento de 3.75 minutos a 115°C para lograr que las esporas de Geobacillus
stearothermophilus se reduzca en un 90%.

A partir de una carga inicial de esporas de Geobacillus stearothermophilus, la población microbiana se reduce un 90% en un
ciclo logarítmico a 115°C durante 3.75 minutos.

4
 CÁLCULOS

Tiempo de reducción decimal Método gráfico del tiempo de reducción decimal

𝑡
𝐷115 = Tiempo de exposición N
𝑁 Log N
log 0 a 115°C (min) Sobrevivientes (UFC/mL)
𝑁𝑡
0 1000000 6
15 5 200000 5.30
𝐷115 =
1X106 10 1000 3
log
100 15 100 2

𝐷115 = 3.75 𝑚𝑖𝑛𝑢𝑡𝑜𝑠

7

4
Log N

3
1
𝐷115 =
0.286 2
y = -0.286x + 6.2204
𝐷115 = 3.50 𝑚𝑖𝑛𝑢𝑡𝑜𝑠 1

0
0 2 4 6 8 10 12 14 16
Tiempo de exposición a 115°C (min)

5
 EJERCICIOS EXTRA
A. Para evaluar un equipo de esterilización industrial por calor húmedo nuevo se realiza un experimento donde se estimaron
las esporas de Geobacillus stearothermophilus que sobrevivieron a diferentes tiempos de funcionamiento del equipo. En la
siguiente tabla se muestran la población inicial y las esporas sobrevinientes a diferentes tiempos de tratamiento.

Tiempo de exposición a 115° (min) Sobrevivientes (UFC/mL)

0 1x106

5 2x105

10 1x103

15 100

21.75 0

Determinar el valor del tiempo de exposición a 115°C (min) para inactivar al microorganismo utilizado.
• Tiempo de exposición a 115°C (min) = 21.75 minutos

• Interprete el resultado:
Se requiere de un tiempo de tratamiento de 21.75 minutos a 115°C para inactivar las esporas de Geobacillus
stearothermophilus.

6
 CÁLCULOS

𝑦 = −0.286𝑥 + 6.2204
Tiempo de exposición N
Log N
a 115°C (min) Sobrevivientes (UFC/mL) 0 = −0.286𝑥 + 6.2204
0 1000000 6
5 200000 5.30 −6.2204 = −0.286𝑥
10 1000 3
15 100 2 −6.2204
=𝑥
−0.286
7
𝑥 = 21.75 𝑚𝑖𝑛𝑢𝑡𝑜𝑠
6

5
Se añade una columna calculando el Log N,
4 donde N son los MO’s sobrevivientes; posterior
se añade una gráfica extrapolando (en el futuro)
Log N

3 la línea de tendencia de la gráfica para indicar la

intersección en el eje x (Tiempo de exposición)
2
y = -0.286x + 6.2204 y presentamos la ecuación del gráfico.
Teniendo la ecuación de la recta se despeja el
valor de x para obtener el tiempo de exposición
1
requerido para inactivar a las esporas de dicho
microorganismo.
0
0 5 10 15 20 25
-1
Tiempo de exposición a 115°C (min)

7
 EJERCICIOS EXTRA
B. Para evaluar un equipo de esterilización industrial por calor húmedo nuevo se realiza un experimento donde se estimaron
las esporas de Geobacillus stearothermophilus que sobrevivieron a diferentes tiempos de funcionamiento del equipo. En la
siguiente tabla se muestran la población inicial y las esporas sobrevinientes a diferentes tiempos de tratamiento.

Tiempo de exposición a 115° (min) Sobrevivientes (UFC/mL)

0 1x108

5 1x107

10 2x105

15 1x104

20 100

29.67 0

Determinar el valor del tiempo de exposición a 115°C (min) para inactivar 1x108 esporas de dicho microorganismo.
• Tiempo de exposición a 115°C (min) = 29.67 minutos

• Interprete el resultado:
A partir de una carga inicial de 1x108 esporas de Geobacillus stearothermophilus, se requiere de un tratamiento de 115°C
durante 29.67 minutos para inactivar dicho microorganismo.
8
 CÁLCULOS

𝑦 = −0.274𝑥 + 8.1301
Tiempo de exposición N
Log N
a 115°C (min) Sobrevivientes (UFC/mL) 0 = −0.274𝑥 + 8.1301
0 100000000 8
5 10000000 7 −8.1301 = −0.274𝑥
10 200000 5.30
15 10000 4 −8.1301
=𝑥
20 100 2 −0.274

𝑥 = 29.67 𝑚𝑖𝑛𝑢𝑡𝑜𝑠
9

7 Se añade una columna calculando el Log N,

donde N son los MO’s sobrevivientes; posterior
6 se añade una gráfica extrapolando (en el futuro)
la línea de tendencia de la gráfica para indicar la
5
intersección en el eje x (Tiempo de exposición)
Log N

4 y presentamos la ecuación del gráfico.

Teniendo la ecuación de la recta se despeja el
3 valor de x para obtener el tiempo de exposición
y = -0.274x + 8.1301 requerido para inactivar a las esporas de dicho
2
microorganismo.
1

0
0 5 10 15 20 25 30 35
-1
Tiempo de exposición a 115°C (min)

9
Barrera Barroso, L., Otero Abreu, I., Rodríguez Nápoles, D., y González Rodríguez, Y. (2005). Empleo de las
Radiaciones Gamma como Método de Esterilización en Biomateriales. Revista CENIC. Ciencias Químicas. ISSN:
1015-8553. https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=181620511035

Burguet, N., y Sierra, N. (2012). Evaluación de una estrategia de conservación para Brevundimonas
diminuta. Vaccimonitor, 21(1), 10–13. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-
028X2012000100003

Hernández Lomelí, S., Alavez Rebollo, S., García Hernández, J., & Flores Luna, M. G. (2016). Monitoreo con
indicadores biológicos de rápida lectura de las autoclaves de CEYE de la Facultad de Odontología de la Universidad
Tecnológica de México. Revista Odontológica Mexicana, 20(2), 93–97. https://doi.org/10.1016/j.rodmex.2016.04.004

López LP. Óxido de etileno, utilización como agente esterilizante y riesgos para la salud del personal sanitario. Rev
CES Salud Pública 2014; 5(2): 154-162.

Patiño-Marín, N., Loyola-Rodríguez, J. P., y Tovar-Reyes, L. F. (2022). Uso y verificación con indicadores biológicos en
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