Universidad De San Carlos De Guatemala

Centro Universitario De Suroccidente

Técnico En Procesamiento De Alimentos
Bioquímica I

Lucila Ester Figueroa Rosales 201840764

Cuestionario
Practica de laboratorio No. 2
Separación e identificación de aminoácidos por cromatografía en capa fina.

¿Por qué se debe activar la capa de silica gel para la separación e identificación de
aminoácidos por cromatografía en capa fina?
Se debe activar para eliminar restos de humedad presente en la capa como parte de sus
propiedades de composición, al ser un material duro, rugoso y con buena resistencia al
desgaste, se mejora la eficacia en la separación de los aminoácidos de acuerdo al tamaño o
tipo de moléculas de composición, haciendo uso de los diferentes grados de adhesión de los
mismos sobre el material poroso a través del disolvente empleado. Se estabilizan sus
propiedades químicas para el proceso como la capacidad de deshumedificación, debido a su
amplia área superficial y estructura hidrofílica.

¿En qué tipo de aminoácidos no es posible la coloración púrpura y por qué?

Los aminoácidos que no se tiñen de color púrpura son prolina e hidroxiprolina porque son
aminoácidos secundarios y no poseen grupo amino libre sino un grupo imino (-NH-) por lo
tanto dan un color rojo que pasa rápidamente a amarillo, y el requisito para la coloración
púrpura o violeta es que los aminoácidos deben presentar un grupo amino y un grupo
carboxilo libre para manifestar la positividad de la reacción en color púrpura.

¿Cuántos aminoácidos de una muestra problema es posible detectar por medio de la

cromatografía en capa fina?
Se pueden detectar todos los aminoácidos que presenten características similares a los de la
muestra patrón, que se posicionen a cualquier distancia proporcional de la capa de sílicagel
marcada previamente en cm, pero solo pueden ser identificados aquellos que presenten un
RF idéntico o con variación 0.1 mayor o menor al de Referencia para asignar nombre a
cada aminoácido detectado. Los demás que no presentan RF similar a los de la muestra
patrón pueden ser identificados mediante otras técnicas de espectrometría, para ello, se
obtiene un cálculo semicuantitativo de la cantidad de componente presente al comparar el
área de la mancha con la del patrón. Los mejores resultados se obtienen si se raspa la
mancha de la placa, se extrae el analito del sólido que forma la fase estacionaria y se
determina el analito mediante algún método físico o químico apropiado. Otro
procedimiento consiste en usar un densitómetro de barrido que puede medir la
fluorescencia o la absorción de la mancha, influyendo en gran manera el peso molecular
que presentan los aminoácidos detectados.

¿En la industria de alimentos cómo se obtienen los aminoácidos para el análisis?

Para obtener aminoácidos libres para su detección e identificación se debe preparar la
muestra del producto que contiene proteínas para hidrolizarlas a enlaces de menor cantidad
y complejidad, ésta es una ruptura que puede ser se carácter química o enzimática de las
moléculas de proteína hacia péptidos de tamaños diversos hasta descomponerse a
aminoácidos libres, es decir, que presentan un grupo amino y un grupo carboxilo para
reaccionar con disolventes y materiales involucrados en el análisis. Para realizar la
hidrólisis química se pueden utilizar bases o ácidos fuertes y en la hidrólisis enzimática se
utilizan enzimas proteolíticas. La preparación de la muestra es de acuerdo a procedimientos
convenientes y establecidos.