Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann

Facultad de Ciencias – E.P Biología Microbiología

Bacteriología

BACILOS FORMADORES DE ESPORAS

GÉNEROS: BACILLUS Y CLOSTRIDIUM

Copyright © 2021 - Dr. César Cevallos Columbus

 GÉNERO BACILLUS Y CLOSTRIDIUM
CARACTERÍSTICAS
GENERALES
GÉNERO BACILLUS
Bacterias en forma de bastón.
Gram positivas
Aerobios estrictos o anaerobios
facultativos
Beta hemolíticos, excepto B. anthracis
Forman endosporas (oval o cilíndrica)
Catalasa positiva
Se agrupan formando cadenas
Saprofitas: B. cereus y B. subtilis
Móviles (flagelos perítricos), excepto:
B.anthracis
Controlador biológico: B. thurigiensis
Presentan gran actividad bioquímica (ciclos
biogeoquímicos del carbono y nitrógeno).
GÉNERO CLOSTRIDIUM
1. Género Clostridium: integrado por más de 100
especies de bacilos anaerobios (excepto
C.histolyticum, C.tertium) y formadores de esporas.
2. Por lo menos 20 especies son toxigénicas
3. Organismos ubicuos: suelo, aguas residuales, flora
microbiana tracto gastrointestinal (animales y
hombre).
4. Patógenos: C. tetani (tétano), C.botulinum, C. baratii
(botulismo), C. perfringens, C. septicum, C.
histolyticum, C.novyi (mionecrosis), C. difficile
(diarrea y colitis pseudomembranosa).
5. Sintetizan y secretan exotoxinas muy potentes.
 GÉNERO CLOSTRIDIUM

Géneros: Clostridium (anaerobio)

Clostridium neurotóxicos Clostridium histotóxicos

C. tetani, C. botulinum C. perfringens, C. novyi
C. septicum

Clostridium enterotóxicos Clostridium piógenos

C. perfringens C. perfringens
C. difficile C. ramosum
 Bacillus anthracis

Cultivo
❑ B.anthracis: aerobio (anaerobio facultativo), forma cadenas
Bacilo voluminoso, de 4 a 6 m long.
serpentinas y largas.
Gram positivo, no móvil.
❑ Crece en pH entre 7.0 y 7.4. Se desarrolla en medios simples
Extremos cuadrados
❑ Colonias: pequeñas, opacas, color blanco grisáceo y duras.
Forma con
Bordes espora: central,
flecos oval,denoleón).
(melena deformante
❑ EsForman cápsula:
proteolítico y polipéptido formado por Ac. D-glutámico
fermentativo.
(antifagocítico)
Patogenia
En muestras clínicas: aparece como bacilo único o
❑ Factores de virulencia: Cápsula y Toxina
emparejado.
Vías de contagio
Tinción de Gram de B. anthracis, que muestra grandes
❑ Inoculación, inhalación o ingestión. barras Gram positivas con esporas elipsoidales sub
terminales en hemocultivo del paciente.
 B.anthracis: Productos extracelulares

❑ Cápsula (ácido poli-D-glutámico), codificada por un plásmido

❑ Toxina :
* Factor I o de Edema (EF)
* Factor II o PA (antígeno protector): inmunógeno
* Factor III o LF (Factor letal): efecto mortal
F-III + F-II: mortal , no produce edema. Inmunógenos
F-I + F-II + F-III: toxicidad máxima (provoca edema y necrosis
e incluso la muerte en animales. Inmunógenos.
 B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS
1. Ántrax cutáneo (pústula maligna)
La lesión o pústula suele ser única, indolora, necrosante, seropurulenta, ulcerosa y hemorrágica: La
escara negra es la base del término “carbunco”. La lesión está rodeada por una zona de edema
intenso, causado por exudado gelatinoso.
Cortesía: An. Fac. med. v.74 n.2 Lima abr./jun. 2013
 B.anthracis: PATOGENIA EN HUMANOS
2. Carbunco Pulmonar

Es mortal (100%), debido a la septicemia, que origina la

muerte temprana por toxina (a las 24 h). La tos no productiva
y los síntomas pulmonares vagos suelen originar un Dx
equivocado de “neumonía viral”.

3. Carbunco Intestinal
Enfermedad poco frecuente en el humano, pero 100% fatal. Síntomas
clínicos variables: adenopatías mesentéricas y ascitis hemorrágica.
 Diagnóstico Bacteriológico
1. Examen directo (frotis) y cultivo de sangre en Muestras (clínica)
individuos sospechosos de carbunco.
2. Lesiones cutáneas: examen directo con Wright
(alternativo Gram)
3. Cultivo: en medios selectivos o agar sangre con
inhibidores.
4. Tinción con Ac específicos marcados con
fluoresceina puede confirmar sospecha clínica de la
enfermedad.

B.anthracis: Tinción Gram (AS) B.anthracis: tinción Wrigth presencia de cápsula

 Bacillus cereus
CARACTERÍSTICAS GENERALES
Espora: central, forma elipsoide.
Crece entre los 10 - 48ºC, la temperatura óptima es entre 28 - 35º C.
Generalmente son móviles con flagelos perítricos.
Poseen antígenos somáticos y flagelares y de esporas.
Se puede aislar: alimentos naturales e industrializados, alimentos: pasteles con
crema, carnes y verduras, sopas, salsas, ensaladas, arroz y cereales.
pH = 4,9 - 9,3; Aw = 0,93 - 0,95.

Tinción Gram: B. Cereus hemocultivo en paciente con infección por catéter.

 Bacillus cereus

FACTORES
PATOGENIADE VIRULENCIA
Y CLÍNICA
1. PATOGENO
PODER Lecitinasa (fosfolipasa): Produce efectos necróticos de células intestinales.
2. emética
Toxina Hemolisina: produce la lisis
o vomitoxina de termoestable:
(toxina glóbulos rojos120°C/1h).
3. diarrogénica
Toxina Factor letal: produce la muerte deProteína
(Toxina termolábil): conejos decuando por vía endovenosa
peso molecular 38-50 Kd. Inactiva a 56ºC/5 minutos,
es termolábil.
4. Factor de permeabilidad vascular: alteraciones permeabilidad de los vasos sanguíneos.
CUADRO CLINICO
5. Toxina necrótica: produce necrosis de las células del epitelio intestinal.
Síndrome emético:
6. Toxina nauseasproduce
emética: y vómitos se producen
vómitos. al cabo ade 126ºC/90
Toxina estable 1-5 hs, laminutos.
diarrea Estable
no es tan frecuente.
a pH 2 y 11
durante
Síndrome 2 horas, puede
diarreico: períodosobrevivir en los alimentos.
de incubación de 8 a 10 horas, dolor abdominal y diarrea, la clínica
desaparece a las 12-24
7. Factor horas.ileal de conejo: origina diarrea y salida de líquido en experimentación.
del asa
 B. cereus: DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
El aislamiento e identificación de B. cereus en el laboratorio clínico bacteriológico a partir de coprocultivos no es
rutinaria.

En las muestras clínicas (heces) de los pacientes durante la fase aguda de la enfermedad dan la confirmación de
que B. cereus está involucrado en el brote.

El análisis del alimento es de fundamental importancia para poder confirmar el agente etiológico.

B. cereus en AST
B. cereus en agar sangre
 BACILLUS THURIGIENSIS
Movilidad: flagelos perítricos
Anaerobio facultativo y quimioorganótrofo.
Forman una inclusión parasporal (espora): son
tóxicos para distintos invertebrados. Proteína
de toxicidad: CRY (del inglés, Crystal).
B. thuringiensis se clasifica en 84 serovares
mediante serología del antígeno flagelar H.

Coloración
M. de contraste Gramen fresco
de fase,
 GÉNERO CLOSTRIDIUM

Clostridium perfringens Clostridium difficile Clostridium tertium

Clostridium difficile Clostridium tetani C. sporogenes

 CLOSTRIDIUM TETANI
CARACTERÍSTICAS GENERALES: PRODUCTOS EXTRACELULARES (TOXINAS)
1. Bacilo Grampositivo Tetanolisina (lisis de los glóbulos rojos y neutrófilos)
2. Bacilo delgado, de 3 a 5 m long./0.3 a 0.7 diámetro. Tetanopasmina (neurotoxina soluble y termolábil)
3. Móviles: flagelos peritricos ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
4. Forman esporas terminal, esféricas y deformante del cuerpo bacteriano. 1. Antígenos: somático (Ag. O) y flagelar (Ag. H)
5. No capsulado. Anaerobio obligado y débilmente proteolítico. 2. Serotipos (10) con un solo tipo de toxina tetánica
CLOSTRIDIUM TETANI

Tetanopasmina: se fija a gangliósidos (GT1) en membranas sinápticas y

actúa en las sinapsis inhibidoras de nervios. Bloquea la función del
transmisor inhibidor (GABA, Glicina e incluso noradrenalina). La toxina
se transmite vía axónica en sentido retrógrado: parálisis espástica.
TÉTANO: PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO
MEDIDAS QUIRÚRGICAS
Tratamiento no siempre satisfactorio, por lo tanto
es más importante
Desbridamiento quirúrgicolaesprevención:
importante, ya que retira el tejido
necrosado en el cual pueden proliferar más microorganismos.
▪ Inmunización activa con toxoide.
ANTIBIÓTICOS
▪ Atención apropiada de heridas contaminadas
coninhibe
Penicilina tierra.
el crecimiento de C. tetani y detiene la producción
Empleo profiláctico de la antitoxina.
de ▪toxina.
▪ Administración de penicilina.
TOXOIDE TETÁNICO
 Clostridium botulinum
Reservorio: aire, tierra y polvo (agua).
Espora oval, subterminal y deforma al bacilo.
Movilidad: flagelos perítricos.
Antígenos: somático, flagelar, esporas y
endotoxinas.
Cepas: 4 (I a IV) y producen 7 toxinas
serológicamente diferentes (A, B, C, D, E, F y
G).
Enfermedad: Botulismo una toxiinfección
alimentaria (Toxinas: A, B y E).

SINTOMATOLOGÍA
ORIGEN DEL BOTULISMO
La intoxicación se adquiere por ingesta de:
Alimentos enlatados contaminados
Conservas caseras contaminadas
Carne contaminada mal cocida
Periodo de incubación: 12-72 h y hasta 8 días
Flacidez muscular, cansancio y lasitud
Vértigo y estreñimiento
Diplopía, Disfagia y Disfonía
Parálisis flácida hasta en músculos de la cara
Atelectasia (Disminución del volumen
pulmonar)
Paro respiratorio
 Clostridium botulinum

ACCIÓN DE LA TOXINA

La toxina es transportada a los nervios periféricos hacia el

SNC donde se fija a los terminales presinápticos de los
nervios colinérgicos, bloqueando la liberación de acetil-
colina, produciendo parálisis total de los impulsos nerviosos.
 Clostridium difficile
Características Generales

❑ Es ubicuo.

❑ Coloniza el intestino de una pequeña proporción de individuos sanos (menor al 5 %). (infección
endógena).

❑ Puede actuar como un germen hospitalario. (enfermedad nosocomial).

❑ Esporas ingeridas, pasan por el estómago ilesas por ser ácido-resistentes. Evolucionan a su forma
vegetativa en el colon, donde se multiplican.
Factores de virulencia

❑ Toxina A (Enterotoxina): Produce quimiotaxis; induce la producción de citocinas con hipersecreción de

fluido; produce necrosis hemorrágica.
❑ Toxina B (Citotoxina): Induce la despolimerización de la actina con la pérdida del citoesqueleto celular.
❑ Factor de adhesión: Interviene en la unión a las células colónicas humanas.
❑ Hialuronidasa: Facilita la expansión de la infección por medio de tejidos sensibles a la misma .
❑ Formación de endosporas: Permite la supervivencia del microorganismo durante meses en el medio
hospitalario.
 Clostridium difficile
Ribotipo 027 (R027) epidémico: hipervirulento

La fluorescencia de color verde-amarillo de Clostridium difficile inoculado en

placas de agar cicloserina-cefoxitina-fructosa (CCFA) (Fotografía cortesía del CDC)
 C. perfringens: ORIGEN DE LA PATOGENIA
Cl.perfringens, de tipo A, es el agente más frecuente de mionecrosis gaseosa. El tipoA (alfa) produce
aumento de la permeabilidad vascular con hemólisis masiva y hemorragia, destrucción tisular, toxicidad
hepática y disfunción miocárdica. La toxina beta es responsable de la enteritis necrozante. Enterotoxina:
producida mayormente por las cepas tipo A, pero también por las cepas tipo C y D.
 C. perfringens: ORIGEN DE LA PATOGENIA
La gangrena gaseosa es provocada por la bacteria Clostridium perfringens. Su causa principal son las
heridas traumáticas. En algunos casos puede ser provocada por estreptococos del grupo A.

CAUSAS:
FACTORES DE RIESGO
DIAGNÓSTICO
SÍNTOMAS: La gangrena gaseosa es una emergencia médica. ❑ Heridas
Diabetes.que son muy profundas.
❑ Aire debajo de la piel. ❑ Lesiones
Enfermedades
musculares.
de vasos sanguíneos.
❑ Hemograma. ❑ Tejidos
Fracturas
aplastados.
abiertas.
❑
❑ Dolor.
Coloración Gram.
❑ Inflamación. ❑ Heridas
Cáncer decontaminadas
colon. con heces o suciedad.
❑ Cultivo y antibiograma para gérmenes aerobio y anaerobio. ❑ Lesión intestinal primaria en pacientes
❑
❑ Piel pálida (se vuelve gris, marrón rojizo o negra).
Gasometría.
❑ Ampollas con una secreción maloliente con burbujas de gas. cirróticos y diabéticos.
❑ Ionograma. ❑ Congelamiento.
❑
❑ Exudado
Bilirrubinahemorrágico.
elevada.
❑ Sensación crepitante cuando se toca la piel de la zona afectada. ❑ Contaminación en inyección muscular (aguja
❑ RX. contaminada).
❑
❑ Fiebre alta. Axial Computarizada de abdomen, pelvis, tórax y
Tomografía
❑ Sudoración. ❑ Amputación de extremidad conservadora.
cabeza.
❑
❑ Ansiedad.
Aislamiento de los gérmenes por inmunofluorescencia.
❑
❑ Frecuencia
Biopsia por cardíaca elevada.
congelación.
❑
❑ Vómitos.
Cultivos de sangre, líquidos y tejidos para verificar la presencia
❑ Piel y ojos amarillentos
de Clostridium (ictericia).
perfringens y otras bacterias.
 Diagnóstico Clínico
TÉTANO: El Dx del tétanos es clínico.
BOTULISMO: El Dx es clínico e epidemiológico.
MIONECROSIS: El Dx es clínico.

Diagnóstico BACTERIOLÓGICO
TRATAMIENTO GANGRENA O MIONECROSIS: Profiláctico, antibioticoterapia y quirúrgico.
EX. DIRECTO: Tinción Gram. Tétanos (tejido necrosado)
❑ Tratamiento inmediato (casos avanzados, comenzar el tratamiento antes de que estén listos
Mionecrosis (tejido necrosado)
los resultados de las pruebas).
❑ Extirpación quirúrgica del tejido muerto o infectado. Administrar dosis altas de antibióticos.
❑ En los casosCULTIVO:
graves, se debe sangre (C.
Agar amputar unatetani, y C. perfringens
extremidad ) que la infección se
para impedir
Agar yema de huevo para anaerobios (C. botulinum)
extienda al resto del cuerpo.
❑ De ser posible: utilizar oxígeno a alta presión (oxígeno hiperbárico) para incrementar la
cantidad de SEROLOGÍA:
oxígeno en laBotulismo. Detectar
sangre. Esta cepa
terapia y la toxina
se usa implicadas
para ayudar a que las heridas,
especialmente las heridas infectadas, sanen más rápido.
TRATAMIENTO: Profiláctico, antibioticoterapia y quirúrgico.

❑ Tratamiento inmediato (casos avanzados, comenzar el tratamiento antes de que estén listos los
resultados de las pruebas).
❑ Extirpación quirúrgica del tejido muerto o infectado. Administrar dosis altas de antibióticos.
❑ En los casos graves, se debe amputar una extremidad para impedir que la infección se extienda
al resto del cuerpo.
❑ De ser posible: utilizar oxígeno a alta presión (oxígeno hiperbárico) para incrementar la
cantidad de oxígeno en la sangre. Esta terapia se usa para ayudar a que las heridas,
especialmente las heridas infectadas, sanen más rápido.