ESPECTROSCOPIA MOLECULAR

Mg Q.F. DANILO BARRETO YAYA

INTRODUCCION A LA ESPECTROSCOPÍA MOLECULAR Y SU
DIFERENCIA DE LA ESPECTROSCOPÍA ATÓMICA
• EN EL CASO DE MOLÉCULAS, CUANDO LA ENERGÍA ES ABSORBIDA, PODRÍA
RESULTAR EN ROTACIÓN,VIBRACION O TRANSICIÓN ELECTRONICA. ASÍ
COMO LA ENERGÍA ELECTRONICA ESTÁ CUANTIZADA, LAS ENERGÍAS
ROTACIONAL Y VIBRACIONAL TAMBIEN ESTAN CUANTIZADAS.

• LOS NIVELES DE ENERGÍA ROTACIONAL, VIBRACIONAL Y ELECTRONICA DE

UNA MOLÉCULA SE LES LLAMA COLECTIVAMENTE NIVELES DE ENERGÍA
MOLECULAR. LAS TRANSICIONES DE ENERGÍA PUEDEN TOMAR LUGAR
SOLO ENTRE ESTOS NIVELES. EL RESULTADO ES UN ESPECTRO MOLECULAR.
 Espectroscopía de Absorción y de Emisión
• LAS TRANSICIONES PUEDEN TOMAR LUGAR DESDE NIVELES DE MAS
BAJA ENERGÍA HACIA NIVELES DE MAS ALTA ENERGÍA MEDIANTE LA
ABSORCIÓN DE ENERGÍA. A ESTO SE LLAMA ESPECTROSCOPÍA DE
ABSORCIÓN Y AL RESULTADO OBTENIDO DE ESTAS TRANSICIONES SE
LE LLAMA ESPECTRO DE ABSORCION.

• LA TRANSICIÓN PUEDE TOMAR LUGAR DESDE NIVELES DE MÁS ALTA

ENERGÍA A NIVELES DE MÁS BAJA ENERGÍA Y POR ESTO SE EMITE EL
EXCESO DE ENERGÍA COMO UN FOTON. A ESTO SE LE LLAMA
ESPECTROSCOPÍA DE EMISION Y EL RESULTADO OBTENIDO COMO
RESULTADO DE ESTAS TRANSICIONDS SE LE LLAMA ESPECTRO DE
EMISION.
 La Energía varía como una función de:
n – número cuántico principal y
l- momento angular

E= -13.6 eV Z2/n2

 Z 2 Z 2  hc
E = −13.6eV  2 − 2  =
 nb na  
Diagrama de niveles de energía, Hidrógeno
-0.85 eV
4
3 -1.51 eV

L -3.40 eV
2

 Z 2 Z 2  hc
E = −13.6eV  2 − 2  =
 nb na  

1 K -13.6 eV
 Efectos de la energía sobre una molécula
ESPECTRO ELECTROMAGNETICO
ENERGY 1.2 x105 1.2 x107 12000 310 150 0.12 0.0012
( kJ/mol)

e-

excitation
Electronic
FREQUENCY
(Hz) 1020 1018 1016 1014 1012 108

Cosmic γ x Ultra Radio

Infrared Microwave
visi
ble
rays rays violet waves
rays
WAVELENGTH 10-6 10-1
(m)
10-12 10-11 10-9 10-3
 Absorción Molecular
• Mas complejo porque el número de estados de
energía es grande en comparación a átomos
aislados
• Las interacciones con otras moléculas y con el
sovente también tienen un efecto

• La energía, E, asociada con las bandas

moleculares:
E = Eelectronica + Evibracional + Erotacional
 Absorción Molecular
• El resultado es un espectro en bandas
• En realidad hay muchas transiciones para distinguir con un espectrofotómetro
convencional
 El espectro de Absorción
Espectro de absorción: es un gráfico que muestra cómo varía A (є)
al variar la longitud de onda
 Espectros de absorción molecular
• Las absorciones UV , Vis e IR ocurren en rangos diferentes del espectro
electromagnético.
• Es decir para obtener información de UV se debe trabajar en el rango de
longitudes de onda correspondientes (≈ 200 – 400 nm), para el visible 400 –
700 nm, etc
 Espectroscopía UV-Visible
Radiación UV – Rango de longitud de onda 220 - 380nm

Radiación VISIBLE – Rango de longitud de onda 380 - 780nm

Sustancias pueden absorber variadas cantidades de radiación UV y/o

Visible a longitudes de onda particulares – compuestos coloreados
absorben energía tanto en regiones de UV como del visible del espectro
electromagnetico.

Substancias líquidas o sólidas pueden ser medidas con

instrumentos llamados ESPECTROFOTOMETROS o ESPECTROMETROS.
 ESPECTROSCOPÍA VISIBLE
Cuando una muestra solo absorbe luz de una sola longItud de onda los ojos ven los colores
COMPLEMENTARIOS.

Rango de λ Absorbido Color Absorb Color visto por Ojo

380 - 430 Violeta Amarillo - Verde
430 - 480 Azul Amarillo
480 - 490 Verde - Azul Naranja
490 - 500 Azul - Verde Rojo
500 - 560 Verde Purpura
560 - 580 amarillo - Verde Violeta
580 - 590 Amarillo Azul
590 - 610 Naranja Verde - azul
610 - 750 Rojo Azul - Verde
Espectroscopía de Absorción molecular – Análisis
cualitativo
• UV /Vis , IR
• La identificación de un compuesto se hace mediante comparación con
espectros de materiales de referencia.
• La técnica mas frecuentemente utilizada es IR pues se saca mucha
información.
• La técnica UV/Vis también brinda información aunque un poco mas
limitada (es útil para moléculas con insaturaciones).
 Absorción de radiación UV-vis por moléculas
• Las transiciones electrónicas en moléculas orgánicas implican la
absorción de radiación UV-vis por electrones situados en orbitales n ,
π o σ de las moléculas, lo que provoca su promoción a orbitales anti-
enlazante de energía superior (estado excitado *)
 Espectro de absorción UV de moléculas
• Cromóforo es un grupo de átomos (parte de la molécula) que tiende
a aumentar la absorción electrónica.
• Auxocromo es un sustituyente que contiene pares de electrones no
compartidos, tales como :OH: , H2N: , halógenos.
• Un auxocromo unido a un cromóforo con electrones π desplazará su
máxima absorción a logitudes de onda λ mas grandes, a esto se le
denomina un desplazamiento batocrómico .
 Espectrometría UV Visible – Especies absorbentes
La absorción de las moléculas orgánicas dependerá de forma directa
de los enlaces involucrados en dicha molécula

Alqueno Azo
 Especies Absorbentes
Compuesto max

H2O 167
CH3OH 184

CH3Cl 173
CH3NH2 215
(CH3)3N 227
Características de absorción de algunos cromóforos
orgánicos
Crómoforo Compuesto max (nm) є
Alqueno C6H13=CH2 177 13000
Alqueno conjugado CH2=CHCH=CH2 217 21000

Alquino C5H11≡C-CH3 178 10000

Azo CH3N=NCH3 339 5
Nitro CH3NO2 280 22
Nitrato C2H5ONO2 270 12
Características de absorción de algunos aromáticos
Compuesto Banda 1 Banda 2
max (nm) max (nm)
Benceno C6H6 204 256
Tolueno C6CH5 207 261
Fenol C6H5OH 211 270
Naftaleno C10H8 286 312
Estireno C6H5CH=CH2 244 282
Espectros de absorción Molecular
 Reglas de Woodward-Fieser
Un juego de las reglas de Woodward-Fieser para los dienos está indicado en la tabla 1.
Un dieno es cualquier homoanular con ambos enlaces dobles contenidos en un anillo, o
un heteronuclear con ambos enlaces dobles distribuidos entre los anillos.
Valor base para un dieno heteronuclear 214
Valor base para un dieno homonuclear 253
Incrementos
Enlace doble que extiende la conjugación + 30
Sustituyente alquilo o residuo de anillo +5
Enlace doble exocíclico double bond +5
grupo acetato +0
grupo éter +6
grupo tioéter + 30
bromo, cloro +5
grupo amina terciaria + 30
Tabla 1. Reglas para la longitud de onda de
absorción de dienos (en nanómetros)6
De V8rik de Wikipedia en inglés, CC BY-SA 3.0,
https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=7890788
Espectrometría de Absorción molecular – Análisis
cuantitativo
• La ley fundamental en la que se basan los métodos cuantitativos por
absorción es la relación de Lambert – Beer .
• Esta ley establece que la cantidad de luz absorbida por una solución
es una función exponencial de la concentración de la solución y de la
longitud de la muestra que es atravesada por dicha solución.
 ESPECTROSCOPÍA UV / VISIBLE - TEORÍA
LUZ INCIDENTE LUZ TRANSMITIDA
254nm 254nm
MUESTRA
Intensidad (I o ) Intensidad (I t )

• Si una longitud de onda particular de radiación UV o Visible puede ser aislada de su fuente y pasada
a través de una muestra la cual puede ABSORBER algo de la radiación entonces la intensidad de la
luz TRANSMITIDA (It ) será menor que la intensidad de la luz INCIDENTE (Io).
• La cantidad de luz transmitida con respecto a la luz incidente se llama TRANSMITANCIA (T),

T=
It

Io
• La muestra puede absorber todo o nada de la luz incidente por esto, la transmitancia
es frecuentemente expresada como un porcentaje:
It
% T= X 100
Io
Cuando un rayo de luz monocromática con una intensidad I0 pasa a través
de una solución, parte de la luz es absorbida resultando que la luz
emergente I es menor que I0
Luz incidente (I0) Luz absorbida Luz emergente (I)
a = absortividad
a

I0 I
c = concentración.
(número de partículas por
cm3)

b
Longitud del medio absorbente
o ancho de la celda
 Absortividad (a)
• a es una constante de proporcionalidad que comprende las
características químicas de cada compuesto, o molécula y su
magnitud depende de las unidades utilizadas para b y c.
• Cuando se expresa la concentración en moles por litro y la
trayectoria a través de la celda en centímetros, la absortividad
se denomina absortividad molar y se representa con el símbolo e .
• En consecuencia cuando b se expresa en centímetros y c en moles
por litro.
• A = e bc
• Donde A representa la absorbancia del compuesto
 ESPECTROSCOPÍA UV / VISIBLE
UNIDADES DEL COEFICIENTE DE EXTINCION MOLAR E ()
• CONCENTRACION (c) - Moles/ litro
• LONGITUD (l) - cm

A = εcl Entonces ε= A
cl
ε = 1 ˛
mole litre-1 x cm
ε = mol-1 litro x cm -1
Pero 1 litro = 1000 cm3
ε = 1000 mol-1 cm3 x cm -1
Entonces ε = 1000 cm2 mol-1
Las Leyes de Lambert y Beer
 Leyes de Lambert – Beer
Ley de Lambert: cuando un rayo de luz monocromática (I0) pasa a
través de un medio absorbente, su intensidad disminuye
exponencialmente (I) a medida que la longitud del medio
absorbente aumenta
I = I0e-ab

I0 I I0 I
I0 I

1 cm. 2 cm. 3 cm.

Ancho de la celda
Ley de Beer: Cuando un rayo de luz monocromática pasa a través de un medio absorbente,
su intensidad disminuye exponencialmente a medida que la concentración del medio
absorbente aumenta

I = I0e-ac

I I
I0 I I0 I0
Lo que significa que combinando ambas leyes se crea la Ley de Beer-Lambert donde
la fracción de luz incidente que es absorbida por una solución es proporcional a la
concentración de soluto y al espesor de la sustancia atravesada por la luz. La relación
entre la luz incidente (I0) y la reflejada (I) dará una idea de la cantidad de radiación
que ha sido absorbida por la muestra.
Ley de lambert Beer:

I= I0e-abc

Si despejamos: I/I0 = e-abc

Al cociente de las intensidades se denomina
Transmitancia

T = I/I0 = e-abc
Sacando logaritmos:
Loge I/I0 = abc

Convirtiendo a log10:
Log10 I/I0 = 2.303 abc
Log10 I/I0 = abc

Absorbancia = Log10 I/I0 = abc

La Transmitancia (T) es la relación entre la
intensidad de luz transmitida por una
muestra problema (I) con la intensidad de
luz incidente sobre la muestra (Io):

T = I / I0

Se expresa como % T
La absorbancia es directamente proporcional a la longitud
del recorrido b a través de la solución y la concentración
c del color absorbente. Estas relaciones se dan como:

A = a·b·c

• A menudo b es dada en términos de cm. y c en gramos por litro, entonces la

absortividad tiene unidades de l·g–1·cm–1.
 ¿Qué relación guardan la transmitancia y la absorbancia?

De acuerdo a las características de la sustancia analizada, la

luz que no se absorbe atraviesa la solución

LUZ
A
B
S Luz transmitida
O

I0 R
B
I
I
D
A
 Por lo tanto la absorbancia es reciproca de
la transmitancia
Absorbancia contra concentración (comportamiento lineal)

Absorbancia

Concentración
% Transmitancia contra concentración (pendiente con signo negativo y
comportamiento exponencial)

% Transmitancia

Concentración
 Absorbancia
De lo anterior se desprende que la Absorbancia (A) o luz
que es absorbida por la muestra es igual al logaritmo en
base diez del recíproco de la transmitancia (T) o bien al -
log10 de la transmitancia, en el que el disolvente puro o
(“blanco”) es el material de referencia; esto es:

A = log10 1/T = log101- log10 T = 0 – log10 T = – log10 T

A

mg
Obtención de TRANSMITANCIA utilizando valores de Absorbancia

Con base en la relación: T = 10-abc

y considerando que T se menciona en porcentaje (%)
%T = 10-abc x 100.
Aplicando logaritmos a la expresión anterior
log10 %T = -abc log 10 10 + log10 100
Invirtiendo términos
log %T = log10 100 -abc log 10 10 = 2 – abc * 1
log10 %T = 2 – abc
Como abc = Absorbancia = A
log10 %T = 2 – A.
log10 %T = 2 – A.
Ejemplo:
Una absorbancia de 0.6 ¿a que equivale en % T?
Log10 % T = 2 – 0.6 = 1.4
Log10 % T = 1.4
%T = 1 / Log10101.4
Aplicando antilog a
1.4 = 15 % de transmitancia
Obtención de absorbancia a partir de un valor de
% de transmitancia
RECORDANDO:
A = log10 1/T
Ejemplo de cálculo
%T = 30
T = 0.30
Sustituyendo (1/T) 1/0.30 = 3.33
Log10 3.33 = 0.523 de absorbancia
 Espectrofotometría como procedimiento analítico
Para la determinación de la concentración de un compuesto en
particular se indica una longitud de onda () específica a la que
hay que leer con el colorímetro o espectrofotómetro.
¿Porque leer a diferentes  (longitudes de onda) compuestos
parecidos pero diferentes?

La explicación radica en el hecho de que cada producto químico se

caracteriza por zonas del espectro visible o no visible en el cual
absorbe con mayor o menor intensidad conformando en su
conjunto el espectro de absorción de tal sustancia.
 Curva Patrón
• El razonamiento para el proceso de determinación de una
concentración desconocida es:
• A partir de concentraciones conocidas de las cuales también se
sabe su absorbancia (curva patrón), es posible interpolar
(intercalar) la concentración del problema sabiendo su
absorbancia (línea roja en figura siguiente)
 CURVA PATRÓN

0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 2 4 6 8 10 12

Concentración mg/lt
Con base en que la Absorbancia guarda una relación lineal con la concentración,
se comprende la existencia de una relación de proporcionalidad entre la
Absorbancia y la concentración:

A1 / A2 = C1 / C2
Donde:
A1 = Absorbancia del problema.
A2 = Absorbancia de un estándar de concentración conocida.
C1 = Concentración del problema.
C2 = Concentración del estándar.

Si despejamos C1 = Conc del problema

A1 (problema) * Conc estándar
Conc. (problema) =
A2 (estándar)
 ESPECTROSCOPÍA UV / VISIBLE

REGLAS PARA ANALISIS CUANTITATIVO

x

ABSORBANCE AT 300nm
At high concentrations the calibration curve may
deviate from linearity – Always ensure your
concentration of the sample falls within the linear range x
– if necessary dilute sample x
Absorbance not to exceed 1 to reduce error* x

CHOOSE CORRECT WAVELENGTH x

CONCENTRATION (moles litre-1 )
An analyte may give more than one absorbance
maxima (max) value. A
C max
0.6
B
Many compounds absorb at 220-230nm hence do not
use A

Need to choose wavelength more specific

to compound (SELECTIVITY) and if more
than one select one with highest absorbance
as this gives less error – hence use C 0
220 Wavelength (nm)380
Aplicación de Ley de Beer a mezclas
• La ley de Beer aplica a un medio que contiene más de un tipo de
sustancia absorbente. Si se asume que no hay interacción entre las
varias especies, la absorbancia total para un sistema
multicomponente es dado por:
• ATotal = A1 + A2 + … + An
= ε1bc1 + ε2bc2 + … + εnbcn
Donde los subíndice 1 , 2 .. N se refieren a los componentes de la
mezcla
 Análisis de Mezclas
Ejm: para analizar la mezcla, las absortividades para Cu y Zn primero son determinadas a la
longitudes de onda λ1, y λ2 con suficientes concentraciones de las dos soluciones estandar para estar
seguros que la ley de Beer es obedecida sobre un rango de absorbancia que comprenda la
absorbancia de la muestra.

Es deseable que las longitudes de onda

seleccionadas sean tales que las
absortividades molares de los dos
componentes difieran significativamente.
Así, a λ1 la absortividad molar del
componente M (Cobre) es mucho más
grande que el del componente N (Zinc).

La mejor exactitud se obtiene eligiendo

longitudes de onda a las cuales las
diferencias en absortividades molares sea
grande
LICENCIADA POR