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◥ (10) (Figura 1). Debido a que las colinas de arena son

ARTÍCULO DE INVESTIGACIÓN geológicamente jóvenes y ecológicamente distintas, se
espera que las poblaciones de ratones ciervos que
habitan en el área hayan evolucionado recientemente y se
EVOLUCIÓN GENÉTICA hayan adaptado fuertemente a este entorno. Un ejemplo
de tal adaptación es la pigmentación. Las capas dorsales
de los ratones ciervo están correlacionadas con el color
Vincular una mutación a la supervivencia en del sustrato, y los ratones claros ocupan las colinas de
arena claras (11). La hipótesis principal de este cambio

ratones salvajes fenotípico es la selección de cripsis contra depredadores

aviares (11-13). Las diferencias de pigmentación entre los
tipos de hábitats están asociadas con múltiples
Rowan DH Barrett1 *†, Stefan Laurent2† ‡, Ricardo Mallarino3,4†§, Susanne P. Pfeifer5,
mutaciones en Agutí (14, 15), un locus que media en la
Charles CY Xu1, Matthieu Foll6, Kazumasa Wakamatsu7, Jonathan S. Duke-Cohan8,
producción de pigmento amarillo (feomelanina) en
Jeffrey D. Jensen5, Hopi E. Hoekstra3,4 *
vertebrados (16, 17)
y ratones ciervo, específicamente (13). Así, los ratones ciervo de
La evolución adaptativa en entornos nuevos o cambiantes puede ser difícil de predecir porque las conexiones
Sand Hills y el Agutí locus son un sistema útil para probar
funcionales entre genotipo, fenotipo y aptitud son complejas. Aquí, hacemos estas conexiones explícitas
directamente los mecanismos ecológicos y moleculares
combinando experimentos de campo y de laboratorio en ratones salvajes. Primero estimamos directamente la
mediante los cuales las variantes de secuencia específicas
selección natural en los rasgos de pigmentación y un locus de pigmento subyacente,
alteran el fenotipo y, en última instancia, la aptitud.
Agutí, mediante el uso de recintos experimentales de ratones en diferentes colores de suelo. A continuación, mostramos

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cómo una mutación enAgutí asociado con la supervivencia provoca un color más claro del pelaje a través de cambios en Selección divergente sobre pigmentación en
sus propiedades de unión a proteínas. Juntos, nuestros hallazgos demuestran cómo una variante de secuencia altera el recintos experimentales
fenotipo y luego revela las consecuencias ecológicas resultantes que impulsan cambios en la frecuencia de los alelos de
Para probar explícitamente la selección que favorece los
la población, iluminando así el proceso de evolución por selección natural.
fenotipos de pigmentos adaptados localmente, recolectamos

A
Aunque un número creciente de estudios
genómicos han identificado genes que
contribuyen a la evolución fenotípica (1-3), a
menudo, los mecanismos ecológicos que impulsan
la evolución de los rasgos siguen sin ser probados.
Por otro lado, los estudios de campo han documentado la
acción de la selección natural sobre los rasgos (4-6), pero
los mecanismos moleculares subyacentes generalmente
se desconocen. Combinamos un experimento de campo
de manipulación a gran escala con pruebas genéticas y
bioquímicas de laboratorio para identificar los
mecanismos ecológicos y moleculares subyacentes.
adaptación de rasgos en un vertebrado salvaje. Forjar
estas conexiones mecanicistas ayudará a
comprender las consecuencias evolutivas del cambio
ambiental en las poblaciones naturales (7, 8).
Aprovechamos las poblaciones de ratones ciervo de
colores crípticos que han evolucionado recientemente (
Peromyscus maniculatus) investigar las consecuencias
genéticas de la selección natural divergente. Las colinas
de arena de Nebraska se formaron a partir de cuarzo de
color claro hace ~ 8.000 a 10.000 años (9). Este hábitat de
dunas se diferencia del hábitat circundante en
propiedades físicas, sobre todo en el color del suelo.
481 ratones silvestres del ancestral "oscuro" y derivado
"luz" sitios. Luego, introdujimos de 75 a 100 individuos en
proporciones iguales sobre la base del sitio de captura (es
decir, oscuro versus claro) a cada uno de los seis recintos
de campo (tres en cada hábitat) que medían 50 m por 50
my estaban desprovistos de ratones nativos y
depredadores terrestres. pero abierto a los depredadores
aviares (Fig.1) (18). Entre estos individuos fundadores,
identificamos diferencias significativas en cinco rasgos de
pigmento (brillo dorsal, croma dorsal, brillo ventral,
croma ventral y patrón de cola) entre ratones capturados
en sitios oscuros versus claros (todos los rasgos: P <
0,001) (fig. S1). Fenotipos de pigmentos

Fig. 1. Sitio experimental y variación ambiental en la región de Sand Hills de Nebraska.

(A) Mapa de Nebraska que muestra la región de Sand Hills (color claro) y la ubicación del experimento del recinto. (B)
Mapa de los recintos replicados (cuadrados) y ubicaciones de muestreo para los ratones introducidos en los recintos
(estrellas) utilizados en el experimento (tabla S8). Los asteriscos de color azul claro indican los seis recintos utilizados; no
introdujimos ratones en el cuarto recinto en ninguno de los sitios. (C) Los recintos se muestran en el sitio de luz en el
hábitat de Sand Hills (camión por báscula). (D y MI) El hábitat típico se muestra en Sand Hills (D, hábitat claro) y frente a
Sand Hills (E, hábitat oscuro); los recuadros muestran un sustrato de suelo típico.

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eran en gran medida independientes, con correlaciones débiles recinto único, no se detectó una selección direccional [~ 1% de tasas de ataque; (14)]. Además, los búhos son
y en su mayoría insignificantes entre los rasgos [coeficiente de significativa en ningún otro rasgo que no fuera el depredadores altamente efectivos de ratones y pueden
determinación (R2) < 0.06 para todos los rasgos] (tabla S1), lo brillo dorsal (tablas S2 y S3). Tampoco hubo evidencia discriminar entre diferentes morfos de color incluso bajo
que sugiere que estos rasgos pueden estar sujetos a una de selección cuadrática o correlacional en los datos condiciones de luz de la luna (12). Durante nuestro
selección independiente. Utilizando un enfoque de marcado- (tablas S4 y S5). Por lo tanto, la selección natural experimento de campo, observamos búhos cazando en los
recaptura, hicimos un seguimiento de la supervivencia de divergente probablemente actuó sobre el brillo sitios experimentales (ocho observaciones durante 70 noches).
estos individuos introducidos durante cinco períodos de dorsal entre los dos tipos de entornos. El trabajo Debido a que los recintos excluyen en gran medida a otros
muestreo de 2 semanas durante 14 meses, momento en el cual previo con ratones modelo de plastilina sugiere depredadores, sugerimos que la asociación significativa entre
la mortalidad alcanzó el 100% en la mayoría de los recintos que la depredación aviar es alta en esta región el brillo dorsal y la supervivencia
(Fig.2, A y B), similar a las tasas de mortalidad en lo salvaje (19).
Debido a que el error de muestreo es inversamente
proporcional al número de sobrevivientes, enfocamos nuestros
análisis en una comparación entre las poblaciones
colonizadoras (punto de tiempo 0) y los sobrevivientes
presentes en el punto de tiempo 1 (~ 3 meses después del
inicio del experimento), cuando las tasas de supervivencia
promedio eran 45%. Independientemente del origen o el
fenotipo de la muestra, las tasas de supervivencia fueron dos
veces más altas en recintos oscuros en comparación con
recintos luminosos (60% frente al 30% en el punto de tiempo
1). Los ratones introducidos en recintos que coincidían con el

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tipo de hábitat en el que fueron capturados originalmente
tuvieron una mayor supervivencia que los ratones no locales
(Fig.2, A y B, y tabla S2) (18), sugiriendo la adaptación local de
las poblaciones de cada tipo de ambiente.

Para probar explícitamente si la pigmentación puede

estar contribuyendo a la adaptación local, probamos los
cambios en la distribución de los rasgos del pigmento a lo
largo del tiempo. Documentamos una selección
significativa sobre la pigmentación, principalmente
manifestada a través de una mayor supervivencia de
ratones con pigmentación dorsal localmente críptica [95%
intervalos creíbles bayesianos para el efecto de la
interacción entre el brillo endorsal y el tratamiento
experimental sobre la supervivencia no contienen cero (
18)] (Fig.2, C a F y tablas S2 y S3). En recintos ligeros, los
ratones supervivientes eran, en promedio, 1,44 veces más
claros en color dorsal que el ratón promedio en las
poblaciones fundadoras, mientras que en recintos
oscuros, el ratón promedio era 1,98 veces más oscuro.
Los gradientes de selección lineal para el brillo dorsal
fueron positivos en los tres recintos de sitios claros y
negativos en los tres recintos de sitios oscuros (unilateralt
prueba de gradientes de selección lineal en recintos
claros frente a oscuros: t =-6.079, gl = 2.518, P =0,015)
(tabla S3). Con la excepción del croma ventral en un

1 Museo y Departamento de Biología Redpath, Universidad McGill,

Montreal, Canadá. 2Facultad de Ciencias de la Vida, Ecole
Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL), Lausanne, Suiza. 3
Departamento de Biología Organísmica y Evolutiva, Museo de
Zoología Comparada, Universidad de Harvard, Cambridge, MA, EE.
UU. 4Departamento de Biología Molecular y Celular, Instituto Médico
Howard Hughes, Universidad de Harvard, Cambridge, MA, EE. UU. 5
Facultad de Ciencias de la Vida, Centro de Evolución y Medicina,
Universidad Estatal de Arizona, Tempe, AZ, EE. UU. 6Agencia
Internacional de Investigaciones sobre el Cáncer, Organización
Mundial de la Salud, Lyon, Francia. 7Departamento de Química,
Fig. 2. Mortalidad y cambio fenotípico en las poblaciones experimentales. (Ay B) Mortalidad en recintos agrupados en
Facultad de Ciencias de la Salud de la Universidad de Salud de Fujita, sitios claros (A) y oscuros (B) durante cinco episodios secuenciales de selección (18). Las barras representan el número de
Toyoake, Japón. 8Departamento de Oncología Médica, Instituto de individuos supervivientes (independientemente del color del pelaje) en cada momento. Las líneas negras representan la
Cáncer Dana-Farber y Departamento de Medicina, Facultad de proporción de individuos supervivientes que fueron capturados originalmente en el tipo de hábitat opuesto al tipo de
Medicina de Harvard, Boston, MA, EE. UU.
recinto en el que fueron colocados (ratones de hábitat oscuro en recintos claros y ratones de hábitat claro en recintos
* Autor correspondiente. Correo electrónico: rowan.barrett@mcgill.ca oscuros). Se muestran ratones de colores llamativos sobre un sustrato típico en cada sitio experimental. Los cuadros
(RDHB); hoekstra@oeb.harvard.edu (HEH)†Estos autores contribuyeron discontinuos indican el período de tiempo utilizado en los análisis de selección. (C y D) Distribuciones del brillo dorsal en
igualmente a este trabajo. ‡Dirección actual: Departamento de Desarrollo el punto de tiempo 0 (azul) y el punto de tiempo 1 (rojo) en los sitios claro (C) y oscuro (D). (mi y F) Visualizaciones de
Comparativo y Genética, Instituto Max Planck de Investigación en
selección en el brillo dorsal en los sitios claros (E) y oscuros (F) entre el tiempo
Mejoramiento Vegetal, Colonia, Alemania. §Dirección actual: Departamento
de Biología Molecular, Universidad de Princeton, Princeton, Nueva Jersey, EE. los puntos 0 y 1. Los gráficos de splines cúbicos se generan a partir de los valores predichos. Las líneas continuas representan el el ajustado
UU. spline y las líneas punteadas representan ± 1 SE bayesiano.

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es probable que sea impulsado por tasas más altas de
depredación aviar en ratones con pigmentación conspicua.
Las consecuencias genéticas de la selección sobre
la pigmentación.
Para investigar cómo la selección en el brillo dorsal
afecta las frecuencias alélicas en el Agutí locus,
generamos datos de polimorfismo con secuenciación
enriquecida de (i) una región de 185 kb que abarca
Agutí y todos los elementos regulatorios conocidos y
(ii) ~ 2100 regiones no vinculadas de todo el genoma, cada una
con un promedio de 1,5 kb de longitud [siguiendo (20)], para
controlar los efectos demográficos. En resumen, secuenciamos
a los 481 individuos y, después de filtrar, identificamos 2442 y
53,507 sitios variables de alta calidad en o cerca delAgutí gen y
en todo el genoma, respectivamente. A partir de estos datos,
observamos mayores cambios en la frecuencia de los alelos en
Agutí con el tiempo en los recintos con luz que en los oscuros,
consistente con una mayor mortalidad en recintos con luz
(Wilcoxon rank sumtest:W = 3.497.200, P <0,001) (fig. S2A). Para
determinar si los cambios en la frecuencia de los alelos enAgutí
procedimiento para determinar cuántos SNP se esperaría
que mostraran cambios significativos solo por casualidad.
En los recintos de luz, los patrones de frecuencia alélica
cambian enAgutí Los SNP no pudieron distinguirse de la
neutralidad (Fig. 3C), probablemente debido a la
reducción del poder estadístico causado por el bajo
número de supervivientes. Por el contrario, en los
recintos oscuros, nuestros resultados rechazan la
hipótesis nula, lo que sugiere que el número de cambios
significativos en la frecuencia de los alelos es
incompatible con un modelo estrictamente neutral (Fig.
3D). Por lo tanto, en los recintos oscuros, encontramos
cambios de frecuencia alélica en elAgutí locus consistente
con la selección y, por tanto, los patrones a nivel genético
son paralelos al cambio observado a nivel fenotípico.
Debido a que no hay recombinación entre loci en una
sola generación, probamos además si la gran cantidad de
sitios con cambios significativos de frecuencia de alelos
en los recintos oscuros podría explicarse por respuestas
correlacionadas en loci vinculados a un número limitado
de SNP bajo selección (18). A partir de los resultados de
siete SNP también exhibieron altos niveles de
diferenciación entre ratones capturados
originalmente de hábitats claros y oscuros (Fig. 4B y
tabla S6). Además, un SNP regulador y elDSer se ha
asociado con señales históricas de selección positiva
en poblaciones de Sand Hills (14, 15).
Para probar si la selección en cada una de estas variantes
candidatas podría explicar el número observado de SNP con
frecuencias genotípicas sesgadas en los supervivientes,
recalculamos las distribuciones nulas asignando a cada
candidato individualmente como nuestro único sitio objetivo
seleccionado. Después de la corrección para múltiples pruebas,
cada uno de los siete podría explicar el cambio observado en
las frecuencias de ingenotipo en los supervivientes (Fig. 4C).
Por el contrario, un modelo que utiliza el SNP del conjunto de
datos de control de todo el genoma con el cambio de
frecuencia de alelos más significativo no puede explicar los
patrones observados (fig. S2B). Los análisis de desequilibrio de
ligamiento (LD) de las siete variantes candidatas identificaron
tres bloques de ligamiento (fig. S2C): dos conjuntos de tres SNP
reguladores físicamente próximos y elDSer, este último

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se explican mejor por selección o neutralidad (es decir,
mortalidad aleatoria), calculamos, para cada Agutí sitio
variante independientemente, la probabilidad de que la
distribución de frecuencias de genotipo observadas en los
supervivientes represente una muestra aleatoria de la
población inicial (18). Después de 3 meses, los ratones
supervivientes mostraron frecuencias genotípicas no aleatorias
a 353 y 549 polimorfismos de un solo nucleótido (SNP) en los
recintos claros y oscuros, respectivamente (Fig. 3, A y B). Para
tener en cuenta la gran cantidad de pruebas involucradas,
utilizamos un remuestreo
nuestra selección fenotípica, a priori planteamos la
hipótesis de que los SNP asociados con el brillo dorsal
deberían estar experimentando una selección directa. Por
lo tanto, para cada uno de los 31
Agutí SNP asociados con el brillo dorsal (15), comparamos
las frecuencias de los genotipos en un modelo con y sin
selección (18). De estos, siete SNP, incluidos seis SNP en o
cerca de las regiones reguladoras de Agutí y una deleción
de un solo aminoácido de serina en la posición 48 del
aminoácido en el exón 2 (DSer), tuvo un cambio de
frecuencia alélica que no pudo explicarse únicamente por
muestreo aleatorio (Fig. 4A y tabla S6). Cuatro de estos
presenta un LD bajo con todos los demás SNP candidatos (Fig.
4D). Estos datos sugieren que cada uno de estos tres bloques
de ligamiento alberga variantes que responden directamente a
la selección en el brillo dorsal. Por tanto, la selección de un
número limitado de dianas genéticas en elAgutí
es probable que el locus sea suficiente para impulsar cambios en la
frecuencia de los alelos y cambios rápidos en el fenotipo.
Los efectos funcionales y ecológicos de
una mutación por deleción en Agutí
Para probar el vínculo funcional entre una de las
variantes en Agutí asociado con la supervivencia y la
pigmentación, además de descubrir el mecanismo
molecular causal, nos centramos en la mutación de
aminoácidos DSer en Agutí. Elegimos esta variante
porque el DSer estaba fuertemente asociado con el
brillo dorsal (R2 =0,11, P <0.001) (Fig. 5A), mostró una
firma de selección en las poblaciones del recinto (Fig.
4A) así como en una población natural mezclada (15),
y mostró el nivel más alto de diferenciación genética
en todo el Agutí
locus entre ratones que fueron capturados originalmente
del hábitat claro y oscuroFST = 0,34) (Fig. 4B y
tabla S6). Para determinar si elDSer
mutación sola tiene un efecto sobre el color del cabello in vivo,
generamos líneas coincidentes de ratones de laboratorio
transgénicos (C57BL / 6mice, una cepa sin endógenos
Agutí expresión) que lleva el tipo salvaje (WT) o el DSer
Peromyscus Agouti ADNc, impulsado constitutivamente
por el promotor Hsp68 (Fig. 5B). Usamos elFSistema de
integrasa C31, que produce integrantes de copia única en
el H11P3 locus en el cromosoma 11 del ratón para medir
directamente el efecto de la
Agutí DSer al mismo tiempo que evita la variación causada por el
número de copia, el sitio de inserción o la orientación de la
construcción (21) (higo. S3, A y B). Usando un espectrofotómetro para

Fig. 3. Cambio de frecuencia alélica en el Agutí lugar. (Ay B) Cambio de frecuencia alélica de la mortalidad durante el experimento en cuantificar las diferencias en el color del pelaje, encontramos queD

los recintos combinados de luz (A) y oscuridad (B). losX El eje representa el cambio en la frecuencia de los alelos entre las Los ratones Ser tenían un pelaje significativamente más ligero que los

poblaciones colonizadoras iniciales y los supervivientes muestreados después de 3 meses. losy El eje representa la probabilidad de ratones que llevaban el WT.PeromyscusAgouti

la distribución de frecuencias de genotipos observadas en los supervivientes, asumiendo un modelo neutral. Todos los puntos rojos ADNc (DSer versus WT, de dos colas t prueba; n = 5, P =
son significativos al nivel del 1%: los puntos rojos claros son significativos debido a un sesgo en la proporción observada de 0,001) (figura 5C). Por lo tanto, laAgutí DLa mutación
heterocigotos, mientras que los puntos rojos oscuros exhiben un sesgo en el número observado de homocigotos. (C y D) Ser por sí sola tiene un efecto medible sobre la
Distribuciones nulas del número de sitios que se espera que muestren un cambio significativo en la frecuencia de los alelos al nivel pigmentación y en la dirección esperada sobre la
del 1% en los recintos combinados de luz (C) y oscuridad (D). Las líneas rojas verticales representan el número observado de sitios base de los datos de asociación genotipo-fenotipo en
con un cambio significativo en la frecuencia de los alelos. Peromyscus poblaciones.

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Fig. 4. Variantes candidatas para la selección en Agutí.
(A) Mapa de la Agutí locus que muestra exones no codificantes
(1A / 1A' responsable de la pigmentación ventral; 1B / 1C para
pelos dorsales con bandas) y codificando los exones 2 a 4
(arriba); estadístico de prueba de razón de verosimilitud para
identificar la selección positiva enAgutí en los recintos de suelo
oscuro (datos agrupados, abajo). Los puntos amarillos indican
variantes asociadas con el brillo dorsal y su tamaño indica la
fuerza relativa de sus asociaciones [probabilidad de inclusión
posterior (PIP)]. La línea punteada representa la tasa de
descubrimiento falso (FDR)-umbral corregido para todos los sitios
asociados con el brillo dorsal. Las líneas verticales muestran la
ubicación
de El DSer mutación. (B) Específico de variante FS T entre
poblaciones de hábitats claros y oscuros utilizados para
colonizar los recintos del suelo oscuro. Las variantes asociadas con el brillo dorsal se indican como en el panel A. (C) El número esperado de sitios significativos (sig.) Cuando se
selecciona un solo sitio. Las distribuciones muestran el número de sitios con unPAG valor ≤ 0.01 cuando los sobrevivientes se vuelven a muestrear artificialmente asumiendo una
distribución de muestreo no central con pesos definidos por el genotipo en el sitio objetivo. Las distribuciones se muestran para los siete sitios candidatos en los recintos oscuros. La
línea vertical discontinua indica el número observado de sitios con cambios significativos, y el área de la distribución a la derecha de la línea discontinua indica la proporción de
conjuntos de datos remuestreados con al menos tantos sitios significativos como en los datos observados (elPAG valor). Ninguno de los sietePAG los valores son significativos después
de corregir para pruebas múltiples (FDR). (D) Mapa de calor LD para todos Agutí sitios en recintos agrupados en suelo oscuro. Sitios con una frecuencia de alelos menor≤ Se descartó el
10%.

Para caracterizar aún más los efectos fenotípicos de la
DSer variante, examinamos y luego cuantificamos el
pigmento en el pelo dorsal. El examen microscópico de
los pelos individuales reveló que el cabello deDLos
ratones Ser contenían un pigmento cualitativamente más
claro que el de los ratones WT (Fig. 5B). Luego analizamos
el contenido de feomelanina en el cabello mediante el uso
de productos de degradación química seguido de
cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) (22-25).
DSermice tenía cantidades significativamente más bajas
de feomelanina (tanto del tipo benzotiazina como del
benzotiazol) que el pelo de los ratones WT (DSer versus
WT, de dos colas t prueba; n = 5, P =
0.002) (Fig. 5C y Fig. S3C). Estos resultados indican
que elPeromyscus DSer provoca una disminución en
producción de feomelanina, que a su vez hace que el
cabello luzca más brillante en general.
los DLa mutación ser se encuentra en una región
altamente conservada del dominio N-terminal de la
proteína agutí, una región que se une directamente a
la atracción, un receptor transmembrana expresado
en las melanocitos y necesario para la función agutí (
26). Para comprender el mecanismo por el cual DSer
disminuye la producción de feomelanina, medimos
las interacciones de unión en tiempo real entre las
proteínas agutí y atracción mediante el uso de
resonancia de plasmón de superficie (SPR). En SPR,
una molécula (ligando) se inmoviliza en la superficie
de un sensor mientras se inyecta un socio potencial
de interacción (analito); el ángulo de reflexión de
La luz polarizada del sensor sirve entonces como proxy de
la fuerza de la interacción entre las moléculas. Para un
ligando, usamos la isoforma secretada de la atracción
natural humana (ATRNCE), y para el analito, usamos una
versión sintética del Peromyscus agouti WT o DSer
dominio N-terminal, una región conocida por retener la
actividad bioquímica completa y unirse a la atracción (26).
Aplicación del WT o DEl dominio N-terminal seragouti a
un chip recubierto de atracción produjo sensorgramas
característicos de una interacción biológica, acercándose
al equilibrio durante varios minutos y disminuyendo
durante el lavado a niveles por encima de la línea de base
(Fig. 5D). Sin embargo, encontramos que el dominio N-
terminal de WT mostró una mayor

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nivel consistente con predicciones basadas en los

efectos funcionales de la DVariante Ser.

Discusión
Conocer la fuerza de la selección en la naturaleza es
esencial para predecir las tasas de cambio adaptativo (4,
27-31). Ahora tenemos datos extensos sobre la fuerza de
la selección que actúa sobre los fenotipos (32-34)
y firmas estadísticas de selección histórica en el genoma (
35-38). Sin embargo, persiste la incertidumbre sobre la
magnitud y las causas de los cambios genéticos que
ocurren a medida que las poblaciones evolucionan bajo
nuevas condiciones ecológicas (39-42).
Nuestro diseño experimental imita la colonización
replicada y recíproca de hábitats divergentes por
poblaciones que portan variantes de secuencia que
causan cambios funcionales en un fenotipo adaptado
localmente. Demostramos que cuando se dispone de
una variación genética adecuada, la selección natural
puede resultar en un cambio evolutivo en escalas de
tiempo ecológicas (43). Cambios tanto en nuestro

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rasgo focal (brillo dorsal) como en los componentes
de su arquitectura genética subyacente (el DSer
mutación) eran predecibles a partir de ensayos
transgénicos y bioquímicos, así como los patrones de
variación fenotípica y genotípica existente entre los
tipos de hábitat. Juntos, estos resultados sugieren
que el conocimiento sobre las conexiones
funcionales entre genotipo, fenotipo y aptitud podría
ayudar a predecir la evolución futura en condiciones
ecológicas definidas.

Fig. 5. Efectos fenotípicos, moleculares y de aptitud de la deleción de serina. (A)Regresión lineal de DSer REFERENCIAS Y NOTAS

genotipos y brillo dorsal; datos agrupados en los seis gabinetes. (B) Líneas emparejadas de transgénicos Mus ( 1. R. Mallarino et al., Nature 539, 518-523 (2016).
en C57BL / 6, un Agutí cepa knockout) expresando el WT (oscuro) o el DSer (ligero) Peromyscus Agouti alelo. Las 2. MA Ilardo et al., Cell 173, 569-580.e15 (2018).
3. D. Bradley et al., Science 358, 925-928 (2017).
imágenes en primer plano muestran la intensidad de la feomelanina en las capas dorsales y los pelos dorsales
4. JG Kingsolver, SE Diamond, AM Siepielski, SM Carlson,
individuales de ratones transgénicos. (C) Brillo dorsal (izquierda) y productos de degradación de feomelanina de Evol. Ecol.26, 1101-1118 (2012).
tipo benzotiazina (derecha) en los ratones transgénicos, medidos con métodos de espectrofotometría y HPLC, 5. O. Lapiedra, TW Schoener, M. Leal, JB Losos, JJ Kolbe,
Ciencias 360, 1017-1020 (2018).
respectivamente. (D) Interacción bioquímica de la atracción y el dominio N-terminal de la Peromyscus WT (azul)
6. SK Auer, CA Dick, NB Metcalfe, DN Reznick,
o el DProteína ser (roja) agutí. Los valores mostrados en unidades de respuesta arbitrarias se han corregido
Nat. Comun.9, 14 (2018).
para la unión inespecífica. (MI) Cambios en aDSer frecuencia de alelos en las tres poblaciones de recintos oscuros 7. RA Bay y col., Am. Nat.189, 463-473 (2017).
replicados. **P < 0,01 8. RD Barrett, HE Hoekstra, Nat. Rev. Genet.12, 767-780
(2011).
interacción con la atracción relativa a la DAlelo Ser entre los seis recintos, pero en promedio fue similar entre 9. DB Loope, J. Swinehart, Great Plains Res. 10, 5-35 (2000).
10. A. Sangrado, Atlas de las colinas de arena (Universidad de
(Fig. 5D). A continuación, estimamos la disociación recintos oscuros y claros (medio de recintos claros = 29,85
Nebraska, Omaha, 1990).
constantes (KD) mediante el análisis de Scatchard de los niveles ± 1,80% SE, medio de recintos oscuros = 25,79 ± 0,68% 11. Dados LR, Universidad de Michigan 15, 1-19 (1941).
de unión en equilibrio a diferentes concentraciones SE). Observamos cambios idiosincrásicos en la frecuencia 12. L. Dice, Universidad de Michigan 34, 1-20 (1947).
traciones y demostró que el dominio WT tiene un de los alelos en los recintos ligeros, con dos de tres 13. CR Linnen, EP Kingsley, JD Jensen, HE Hoekstra,
Ciencias 325, 1095-1098 (2009).
K casi dos veces más pequeñoD que la DDominio Ser recintos que muestran los aumentos esperados en elDSer
14. CR Linnen et al., Science 339, 1312-1316 (2013).
(4.25 × 10-7 frente a 6,94 × 10-7, respectivamente), con alelo, pero el grado de cambio fue menor en todos los 15. SP Pfeifer et al., Mol. Biol. Evol.35, 792-806 (2018).
coherente con el alelo WT que tiene una mayor afinidad casos (cambio de frecuencia de alelo promedio = 0,43 ± 16. M. Manceau, VS Domingues, CR Linnen, EB Rosenblum,
de unión a la atracción (fig. S3D). Juntos, nuestros 0,81% SE). Por el contrario, observamos disminuciones SE Hoekstra, Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci.365,
2439-2450 (2010).
experimentos genéticos y bioquímicos indican queDSer significativas en laDAlelo Ser en los tres recintos oscuros
17. Y. Chen, DMJ Duhl, GS Barsh, Genética 144, 265-277 (1996).
causa un cabello pigmentado más claro al disminuir la replicados (cambio de frecuencia de alelo promedio = 6.87 18. Ver materiales complementarios.
fuerza de las interacciones con la atracción, reducir la ± 19. RH Baker, Mamíferos de Michigan (Universidad Estatal de Wayne, Detroit, 1983).

producción de feomelanina y, en última instancia,
aumentar el brillo de un ratón.'s capa dorsal.
Cambios en el Agutí DSer alelo a
través del espacio y el tiempo
Después de verificar su papel funcional en la variación del
pigmento, a continuación medimos la frecuencia de la
Agutí DSer alelo a través de recintos y con el tiempo.
Para confirmar elAgutí DSer genotipo y para incluir
individuos con datos faltantes, genotipamos a todos
los individuos usando un ensayo de Taqman. La
frecuencia de inicio delDSer alelo variado
2,58% SE) (figura 5E). Este cambio en la frecuencia de los
alelos equivale a un coeficiente de selección medio de
0,32 (± 0,11 EE; unilateralt prueba de coeficientes de
selección en recintos claros frente a oscuros: t =
2.990, gl = 2.496, P = 0,037) (tabla S7). Como era de esperar
dada la selección fenotípica negativa observada en la
pigmentación clara en recintos oscuros, estos resultados
genéticos proporcionan evidencia de una selección negativa en
elDAlelo Ser asociado con pigmentación clara sobre sustratos
oscuros. Por lo tanto, al documentar el cambio de frecuencia
de alelos a lo largo del tiempo, demostramos una fuerte
selección en el nivel genético.
20. VS Domingues et al., Evolución 66, 3209-3223 (2012).
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INVESTIGAR | ARTÍCULO DE INVESTIGACIÓN
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46. S. Badion, S. Laurent, rsurvival-0.1.0, Versión 0.1.0, Zenodo
(2018); doi: 10.5281 / zenodo.1753895.
EXPRESIONES DE GRATITUD
Agradecemos a F. Baier, N. Bedford, A. Bendesky, J. Best, J. Chu,
C. Clabaut, J. Gable, E. Hager, G. Hood, E. Jacobs-Palmer,
Barrett et al., Science 363, 499-504 (2019) 1 de febrero de 2019
E. Kay-Delaney, E. Kingsley, J. Kwon, M. Manceau, N. Man in't Veld,
H. Metz, J.-M. Lassance, E. Lievens, C. Linnen, N. Rubinstein,
L. Schmitt, H. Wegener e I. Yen por asistencia sobre el terreno; C. Clabaut,
P. Muralidhar y K. Turner por su asistencia en el laboratorio; Z. Gompert,
B. Peterson y J.-M. Lassance para asistencia bioinformática;
S. Badion por su asistencia en programación; J. Demboski, B. Perrett,
M. Perrett, B. Peterson, J. Ramos, L. Ramos, B. Ward,
J. Wasserman, R. Wasserman y el Museo de Naturaleza y Ciencia de
Denver por su apoyo logístico; L. M'Gonigle por su ayuda con el
análisis de captura-recaptura; y J. Chupasko por su asistencia
curatorial. Agradecemos a G. Barsh, J. Losos, P. Nosil, D. Petrov,
D. Schluter y T. Thurman por sus comentarios sobre el manuscrito.
Fondos: RDHB contó con el apoyo de una beca posdoctoral Banting del
Consejo de Investigación en Ciencias Naturales e Ingeniería de Canadá, una
beca posdoctoral sobre cuestiones fundamentales en biología evolutiva y una
cátedra de investigación de Canadá. CCYX recibió el apoyo de una beca de
posgrado Vanier Canada del Consejo de Investigación de Ciencias Naturales e
Ingeniería de Canadá.
SL, MF y RM, así como el trabajo de laboratorio, fueron apoyados por una
subvención Sinergia de la Fundación Nacional de Ciencias de Suiza para
JDJ, HEH y L. Excoffier. El trabajo de campo fue financiado por la
National Geographic Society, Putnam Expedition Grants del Harvard
Museum of Comparative Zoology (MCZ) y Discovery Grant del
National Engineering and Research Council of Canada para
RDHBHEH es un investigador del Instituto Médico Howard
Hughes. Contribuciones de autor: RDHB concibe el estudio.
RDHB y HEH diseñaron y lideraron el proyecto. RDHB realizó
el experimento de campo con CCYXRDHB realizado
los análisis fenotípicos y los datos genómicos recopilados.
SPP y SL realizaron los análisis bioinformáticos. RDHB, SL,
MF y JDJ realizaron los análisis estadísticos. RM realizó los experimentos
funcionales, incluidos los experimentos de proteínas con JSD-C. y el análisis
de melanina con KWRDHB redactó el manuscrito con aportes importantes de
SL, RM y HEH. Todos los autores contribuyeron con revisiones y aprobaron la
versión final del manuscrito.Conflicto de intereses: Los autores declaran no
tener intereses económicos en competencia. Disponibilidad de datos y
materiales: Hemos depositado datos de muestreo, fenotipo y supervivencia
en el Repositorio Digital Dryad (44) y secuencia de datos en el archivo de
lectura corta de NCBI con el código de acceso principal SUB4114786.
El código R que implementa los análisis de captura y recaptura está
disponible en https://doi.org/10.5281/zenodo.1758243 (45). El código R que
implementa los análisis de distribuciones de genotipos está disponible en
https://doi.org/10.5281/zenodo.1758243 (46).
MATERIALES COMPLEMENTARIOS
www.sciencemag.org/content/363/6426/499/suppl/DC1
Materiales y métodos
Texto complementario
Higos. S1 a S3
Tablas S1 a S9
Referencias (47-64)
Descargado de http://science.sciencemag.org/ el 31 de enero de 2019
25 de septiembre de 2018; aceptado el 6 de diciembre de 2018
10.1126 / science.aav3824
6 de 6
Vincular una mutación a la supervivencia en ratones salvajes

Rowan DH Barrett, Stefan Laurent, Ricardo Mallarino, Susanne P. Pfeifer, Charles CY Xu, Matthieu Foll, Kazumasa
Wakamatsu, Jonathan S. Duke-Cohan, Jeffrey D. Jensen y Hopi E. Hoekstra

Ciencias 363 (6426), 499-504.

DOI: 10.1126 / science.aav3824

Cómo la selección natural afecta el color del pelaje del ratón

La evolución, en su esencia, implica cambios en la frecuencia de los alelos sujetos a selección natural. Pero identificar el objetivo de la
selección puede resultar difícil. Barrettet al. investigó cómo las frecuencias alélicas que afectan la pigmentación cambian con el tiempo (ver
Perspectiva de Pelletier). Ratones capturados en la naturaleza (Peromyscus maniculatus) fueron expuestos a depredadores aviares contra fondos

Descargado de http://science.sciencemag.org/ el 31 de enero de 2019

oscuros o claros que ocurren naturalmente. La selección natural produjo cambios en la coloración debido a variantes genéticas en el color del pelaje
del ratón.Agutí gene.
Ciencias, este número p. 499; ver también p. 452

HERRAMIENTAS DEL ARTÍCULO

http://science.sciencemag.org/content/363/6426/499

SUPLEMENTARIO http://science.sciencemag.org/content/suppl/2019/01/30/363.6426.499.DC1
MATERIALES

RELACIONADO
http://science.sciencemag.org/content/sci/363/6426/452.full
CONTENIDO

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http://science.sciencemag.org/content/363/6426/499#BIBL

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