UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN

FACULTAD DE INGENIERÍA DE PROCESOS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA DE INDUSTRIAS

ALIMENTARIAS

PRACTICA N° 5:

“Alternativas a la experimentación animal en toxicología: situación actual”

TURNO:

Martes 5:40 – 7:20

CURSO:

Toxicología de los Alimentos

DOCENTE:

Msc. Juan Carlos Mamani Apaza

INTEGRANTES:
Turno

- Coaguila Alvarez Lusveni Jamiley A

- Huallpa Chsalla Shirley Yossie B
- Huamani Santos Flavio Cesar B

AQP-PERU

2021
 PRACTICA N° 5:

“Alternativas a la experimentación animal en toxicología: situación actual”

I. OBJETIVOS
- Conocer las alternativas a la experimentación animal en toxicología.
- Comprender la necesidad de desarrollar y aplicar dichas alternativas.

II. MARCO TEÓRICO (1)

La toxicología reguladora ha puesto cada vez mayor énfasis en la evaluación de los

riesgos que presentan las sustancia químicas sobre la salud pública y ambiental, paran
lo cual realiza ensayos con animales. Debido a la presión pública y a la de los mismos
científicos, existe una tendencia creciente a aplicar el principio de tres R en la
investigación con animales, hecho que se manifiesta en las propias legislaciones de
los países. Todo ello ha llevado a la investigación de métodos alternativos a los
tradicionales.

LAS 3R EN INVESTIGACIÓN ANIMAL

1. Reemplazo: métodos que evitan o reemplazan el uso de animales en la

investigación. Las estrategias de reemplazo incluyen:

- Cultivo de tejidos

- Órganos perfundidos

- Rodajas de tejido

- Fracciones celulares

- Fracciones subcelulares

2. Reducción: uso de métodos que permitan a los investigadores obtener niveles

comparables de información de menos animales, u obtener más información del
mismo número de animales.

3. Refinamiento: uso de métodos que alivian o minimizan el dolor, el sufrimiento o

la angustia potenciales y mejoran el bienestar animal de los animales utilizados. Las
técnicas de refinamiento o perfeccionamiento pueden incluir:

- Técnicas no invasivas

- Regímenes anestésicos y analgésicos apropiados para aliviar el dolor

III. MATERIALES
- Artículo repositorio scielo:

Alternativas a la experimentación animal en toxicología: situación actual.

 https://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-569X2007000
100005

- Artículo repositorio Redalyc:

Métodos alternativos en toxicología.

https://www.redalyc.org/pdf/1812/181230079003.pdf

- Videos de apoyo.

https://www.youtube.com/watch?v=yhUBbydC9G4

https://www.youtube.com/watch?v=aoSvrfNK0sM

IV. PROCEDIMIENTO
- Formar grupos de 3 alumnos como máximo, estudiar los artículos, resumir,
explicar a la clase.
- Desarrollar las actividades propuestas.
V. RESULTADOS

(Resumen)

Artículo 01: Evaluación de la toxicidad del extracto metanólico de hojas de

Passiflora edulis Sims (maracuyá), en ratas

El objetivo de este paper fue determinar la toxicidad oral a dosis repetidas del extracto
metanólico de las hojas de Passiflora edulis en ratas. Las hojas Passiflora edulis
recolectadas en Trujillo fueron desecadas a 38ºC, pulverizadas y maceradas con
metanol. Se filtró, concentró y liofilizó. Se conformó dos grupos experimentales de 10
ratas (5 de cada sexo). Un grupo fue control, al cual se le administró agua destilada, y
el otro fue grupo tratado, al cual se le administró extracto metanólico de las hojas de
Passiflora edulis, en dosis de 200 mg/kg, una vez/día, vía oral, durante 28 días. Se
hizo diariamente observaciones clínicas a los animales, se controló el peso cada
semana. Al final del experimento se realizaron las determinaciones hematológicas y
de bioquímica clínica y necropsia. Se extrajo los órganos para la determinación de su
peso y estudio histopatológico. Como resultados no se observó mortalidad ni
alteraciones clínicas o hematológicas. La alanina aminotransferasa se incrementó muy
ligeramente, se observó en un caso microvesículas focal de hepatocitos y dos casos de
focos de necrosis tubular, concluyendo que la administración oral a dosis repetidas
durante 28 días del extracto metanólico de las hojas de Passiflora edulis en ratas no es
tóxica.

Articulo 02:

Alternativas a la experimentación animal en toxicología: situación actual.

Según Meneau, (2014) una vez que un método ha sido científicamente validado, entra
en el proceso de aceptación regulatoria y adopción como directriz, lo que le confiere
validez para su aplicación en estudios de valoración de riesgo. En este sentido, un
conjunto de muestra métodos alternativos han sido aceptados internacionalmente.
(Imagen 01)
 Imagen 01: Métodos alternativos aceptados internacionalmente.

Artículo 03: Métodos alternativos en toxicología.

El objetivo de este artículo fue realizar una revisión sobre las alternativas en la
experimentación animal enfocada en la validación de los métodos y su descripción. Se
enumeran ventajas y desventajas y se muestran los principales métodos aceptados
internacionalmente. Entre los cuales se encuentra las 3R 's del refinamiento,
reducción, reemplazo. Esta introducción de alternativas en ensayos estratégicos para
la evaluación de la seguridad de medicamentos, no progresa rápidamente y a pesar de
hacer un gran esfuerzo para armonizar sus requisitos en aras de impulsa su desarrollo.

VI. CONCLUSIONES (La persona que termina último)

 ❖ Se logró conocer las alternativas a la experimentación animal en toxicología y
comprender la necesidad de desarrollar y aplicar dichas alternativas,
comprender la necesidad de desarrollar y aplicar dichas alternativas.

VII. BIBLIOGRAFÍA

De la Fuente, J. (2015). ¿A qué llamamos pruebas in vivo y pruebas in vitro?.

Recuperado de:
https://alergiayasma.es/a-que-llamamos-pruebas-in-vivo-y-pruebas-in-vitro/

Hernández, R. I. M. (2014). Métodos alternativos en toxicología. Revista CENIC.

Ciencias Biológicas, 45(1), 11-21.

Huggins J. Alternatives to animal testing: research, trends, validation, regulatory

acceptance. Alternatives to Animal Experimentation 2003; 20:3-61.

Martíneza, F. F., Mestreb, M. J. G., & Prietoa, J. P. (2018). Modelos experimentales

en farmacodinamia.

Meneau, R. (2014). Métodos Alternativos en Toxicología. Revista CENIC. Ciencias

Biológicas, vol. 45, núm. 1, pp. 11-21.

Rojas, J., & Díaz, D. (2009, September). Evaluación de la toxicidad del extracto
metanólico de hojas de Passiflora edulis Sims (maracuyá), en ratas. In Anales
de la Facultad de Medicina (Vol. 70, No. 3, pp. 175-180). UNMSM. Facultad
de Medicina.

Rojas, J., Ronceros, S., Palomino, R., Tomás, G., & Chenguayen, J. (2006,
September). Efecto antihipertensivo y dosis letal 50 del jugo del fruto y del
extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá), en ratas. In
Anales de la Facultad de Medicina (Vol. 67, No. 3, pp. 206-213). UNMSM.
Facultad de Medicina.

VIII. ACTIVIDADES
1. Definir las 3R

Según Hernandez (2014) las 3Rs, cuyas siglas significan Replacement, Reduction
and Refinement, hacen referencia a las alternativas que derivan en el
refinamiento de las técnicas con el fin de disminuir el estrés y evitar el
sufrimiento infringido a los animales; reemplazo por sistemas que no requieren
seres vivos o emplean otras especies inferiores en la escala filogenética y la
reducción del número de animales empleado en cada ensayo. Este principio de las
 3R establece los estándares aceptados para investigar con animales, tales
principios han sido incorporados de manera responsable en las prácticas de todos
los científicos y forman parte de las leyes nacionales e internacionales que
regulan el uso de animales en procedimientos científicos.

2. Defina ensayos in vitro

Es aquel ensayo que se realiza fuera de un organismo vivo y normalmente en

tejidos, órganos o células aisladas. Este tipo de ensayos son monitoreados en
ambientes controlados. La referencia al vidrio se relaciona con el hecho de que,
habitualmente, en el laboratorio se trabaja sobre la mencionada muestra en un
tubo de ensayo o en una placa de cristal (De la Fuente, 2015).

3. Defina ensayos in vivo (1)

tiene lugar “dentro de un organismo”. En ciencia se refiere a experimentación

hecha dentro o en el tejido vivo de un organismo vivo, por oposición a uno
parcial o muerto. Pruebas con animales y ensayos clínicos son formas de
investigación in vivo.

4. Defina ensayos ex vivo

Los ensayos ex vivo son llamados así porque se emplean órganos o muestras de
tejidos de animales sacrificados con otros fines, también se usa tejido vivo que ha
sido creado de manera artificial en laboratorio o donado por organismos vivos.
Estos ensayos permiten, mediante el implante de dispositivos (cámaras de diálisis
o coágulos de fibrina) medir una serie de parámetros como la tasa de muerte, los
cambios en la morfología bacteriana o las concentraciones de antimicrobiano de
forma fácil y cómoda (Martineza, 2018).

5. Mencione las ventajas y desventajas de los métodos alternativos.

Ventajas Desventajas

- La ventaja principal de los - No es apto para todo tipo de

métodos alternativos radica estudio.
en las consideraciones éticas - Falta de uniformidad de las
alrededor del uso de respuestas.
animales de - No se obtienen efectos no
experimentación. buscados, siempre es el
- Se puede ejercer un mejor investigador el que ha de
control de las variables y así anticiparse a prever si tal
modificarlas de modo efecto puede o no
secuencial. presentarse, y entonces
- Se puede utilizar muestra de diseñar el ensayo
pequeño tamaño. correspondiente. Por el
- Se pueden medir eventos contrario, en modelos
adversos causados por animales, el organismo ejerce
polimorfismo genético, lo mecanismos reguladores y
que se denomina compensatorios de las
 idiosincrasia metabólica, distintas funciones, lo que
incluso crear modelos de implica una mayor dificultad
simulación de situaciones no cuando se extrapolan
previstas. resultados a partir de
modelos como los in vitro

6. ¿Cuándo se dice que una sustancia no es tóxica? (1)

Ninguna sustancia química puede ser considerada no tóxica, puesto que

cualquier sustancia (Incluso el agua o el oxígeno) es capaz de producir un
efecto tóxico si se administra la dosis suficiente. Esto queda representado en la
famosa frase de Paracelso ¨sólo la dosis hace al veneno¨. Todas las sustancias
poseen toxicidad; sin embargo unas tienen mayor toxicidad que otras. La
intoxicación es el estado de un ser vivo en el que se encuentra bajo los efectos
perjudiciales de un tóxico.

7. Caso de estudio: Proyecto para envasar con fines de exportación extracto de

hojas de maracuyá de los valles de Arequipa. Los inversionistas requieren
saber si el producto es no tóxico.

¿Cuál sería su respuesta y cuál su fundamento?

Según el estudio realizado por Rojas et al. (2006) obtuvieron como resultado que
el extracto de hojas de maracuyá tienen un efecto positivo sobre la presión arterial
sistólica en ratas hipertensas. Además, presenta una dosis letal de 10 687 mg/kg,
la cual es menor a la dosis letal del jugo de maracuyá. Se podría decir que el
extracto de hojas es más tóxico que el jugo, pero no se encontraron evidencias de
alteraciones de los órganos, como hígado, bazo, riñones, corazón y pulmones por
lo que se puede afirmar que la planta medicinal no presenta toxicidad aguda oral.
Rojas et al. (2009) al evaluar la toxicidad aguda oral de la maracuyá (a través de
las hojas y jugo) estimaron la dosis letal media, obteniendo como resultado que
superó los 2000 mg/kg. El autor indica que según la normas de la Comunidad
Europea para la clasificación de toxicidad aguda oral se la debe considerar no
tóxico, pero la administración de dosis repetidas podría afectar al hígado y riñón.
Entonces, podríamos afirmar que el extracto de hojas de maracuyá no es un
producto tóxico pero para su administración no se debe exceder a la dosis letal
media y no recomendamos su consumo diario.

¿Sería necesario realizar pruebas de toxicidad? Si, no, ¿por qué?

Mediante revisión bibliográfica se demostró que el extracto de hojas de maracuyá

no es tóxico y que al contrario este ayuda a reducir la presión arterial, pero para el
proyecto que se está planteando si se debe hacer pruebas de toxicidad, con el fin
de asegurarse que el producto que están elaborando no es tóxico y que es seguro
para el consumidor. La realización de estas pruebas de toxicidad se deben a que
existen diferentes factores que afectan la formación de la planta (localización,
exposición a tóxicos externos, etc.), siendo favorables o no para su producción,
por el cual si se debe realizar pruebas de toxicidad.
 ¿Aplicaría usted métodos alternativos? ¿si, no, cuáles y por qué?

Con el modelo en 3D, que combina tres tipos de células, ahora es posible estudiar
algunas reacciones de los pulmones, como la inflamación aguda, y determinar la
tolerabilidad de una sustancia inhalada, por ejemplo, de potenciales
medicamentos contra el asma. “La investigación no puede renunciar por completo
a los animales. Con esta alternativa, sin embargo, se podría evitar el sacrificio de
miles de animales, sobre todo en los ensayos preclínicos”, explica la experta. Uno
de los métodos alternativos a los llamados ‘modelos animal’ son las herramientas
bioinformáticas y el uso de big data o datos masivos, sobre todo a la hora de
evaluar la toxicidad de un producto farmacológico.

Evaluación de toxicidad. maracuyá

http://www.scielo.org.pe/pdf/afm/v70n3/a04v70n3.pdf

Efecto antihipertensivo y dosis letal maracuyá

http://www.scielo.org.pe/pdf/afm/v67n3/a03v67n3