ENZIMAS DE RESTRICCION o ENDONUCLEASAS DE RESTRICCION

DEFINICION. -Las enzimas de restricción, también conocidas como endonucleasas, son enzimas
que cortan los enlaces fosfodiéster del material genético a partir de una secuencia que reconocen.
Las mismas permiten cortar ADN de hebra doble, donde reconocen secuencias palindrómicas
(secuencias que se leen igual en ambas direcciones).

CORTE ESPECÍFICO DEL ADN: Las enzimas de restricción al cortar DNA pueden producir dos tipos
de cortes:

 Abruptos: cortan en un sólo punto.

Cada enzima de restricción reconoce una

secuencia específica de nucleótidos y corta en
ese punto cada una de las cadenas de ADN.

 Cohesivos o pegajosos: cortan a manera

escalonada en dos puntos diferentes

Los extremos libres que

quedan se llaman extremos
pegajosos, porque pueden
unirse a otros fragmentos
de ADN que hayan sido
cortados por la misma
enzima de restricción.

ACTUACIÓN DE LAS
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN.

Son extraídas de organismos procarióticos (bacterias), donde actúan como un mecanismo de

defensa, para degradar material genético extraño que entre en la célula. Las bacterias tienen la
capacidad de metilar su ADN, lo cual sirve para distinguir entre el ADN extraño y el ADN propio

TIPOS:

 Tipo I: Una sola enzima (multimérica que posee 3 subunidades) reconoce la secuencia
específica de ADN, métila y restringe. Pero la restricción no ocurre en el sitio de
reconocimiento, sino que es al azar y en sitios distantes al de reconocimiento.
 Tipo II: La restricción ocurre en el sitio de reconocimiento. Estas enzimas tipo II son las
utilizadas en genética molecular puesto que permiten romper el ADN en sitios específicos,
y así, recuperar secuencias conocidas.
 Tipo III: Es similar al sistema tipo I,
utilizan una enzima oligomérica que
realiza todas las actividades
enzimáticas, y rompen el DNA 25-27
bp, más allá del sitio de
reconocimiento.
MAPA DE RESTRICCIÓN

Un patrón de ADN generado mediante

electroforesis que se produce después de
cortar con una enzima de restricción. La
representación de una molécula de ADN, ya
sea circular o lineal, donde se indiquen los
sitios de restricción que poseen, se denomina
mapa de restricción.

TAMAÑO DE LOS FRAGMENTOS DE

RESTRICCIÓN: Los fragmentos generados a
través de la digestión por enzimas de
restricción pueden ser analizados con la
técnica de electroforesis agarosa.

NOMENCLATURA

1º. Tres letras que corresponden al nombre científico del microorganismo (ej. Escherichia coli
(Eco); Haempphilus influenzae (Hin) )

2º. La cepa o estirpe si la hubiese (ej. EcoR, aislada de la cepa RY13 de E. coli )

3º. En números romanos, un número para distinguir si hay más de una endonucleasa aislada de
esa misma especie. No confundir con el tipo de enzima de restricción.

4º. Todas deberían llevar adelante una R de restricción o un M de metilasa según la función de la
enzima, pero generalmente se omite.