Introducción

[AFO007847] MF0371_3 Análisis Bioquímicos en Muestras Biológicas Humanas
[MOD007722] MF0371_3 Análisis Bioquímicos en Muestras Biológicas Humanas

[UDI040847] Determinaciones para analizar el metabolismo básico de principios inmediatos, hidratos de carbo(...)
INTRODUCCIÓN
Toda materia viva está compuesta por un grupo reducido de moléculas combinadas entre sí: el agua
y las sales minerales, los hidratos de carbono (o carbohidratos), los lípidos, las proteínas, los ácidos
nucleicos, las enzimas, las vitaminas y las hormonas. Algunas de estas moléculas funcionan como
parte estructural de las células y los tejidos del cuerpo de los organismos.
Los compuestos químicos de la materia viva reciben el nombre de biomoléculas, anteriormente
m
llamados principios inmediatos, nombre que está cayendo en desuso.
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La determinación del metabolismo de los diferentes principios inmediatos hace posible diagnosticar
n.
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posibles alteraciones en los individuos, que se relacionan con diferentes patologías.
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campusvirtual.esnecaformacion.com
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OBJETIVOS
Realizar los métodos de determinación de analitos del metabolismo de los principios inmediatos
y de otros componentes metabólicos.
Realizar las determinaciones bioquímicas relacionadas con el metabolismo de los hidratos de
carbono, y los métodos empleados para su determinación.
Realizar las determinaciones bioquímicas relacionadas con el metabolismo de los lípidos y
m
lipoproteínas, y los métodos empleados para su determinación.
co
Realizar las determinaciones bioquímicas relacionadas con el metabolismo de las proteínas y
n.
productos finales del metabolismo y los métodos empleados para su determinación.
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MAPA CONCEPTUAL
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1. Metabolismo hidrocarbonado
Las sustancias que el organismo recibe del exterior o aquellas que necesita sintetizar para un
adecuado funcionamiento orgánico y que van a ser transformadas por las múltiples reacciones
metabólicas se conocen como principios inmediatos. Estos principios inmediatos son
principalmente tres: hidratos de carbono, lípidos y proteínas.
En este apartado nos centramos en los hidratos de carbono, también llamados “azúcares”. Son
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compuestos orgánicos en cuya formación entran a formar parte fundamentalmente el carbono, el
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oxígeno y el hidrógeno. En función del número de moléculas de azúcares sencillos que entran a
n.
formar parte de su estructura estos compuestos pueden ser clasificados en:
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Monosacáridos: formados por una molécula de azúcar.
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Aldosa y cetosas: en función del grupo funcional aldehído o cetona presentes en los
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carbono terminales de su estructura,
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Formas D y L: en funciones de la posición (derecha o izquierda) del grupo funcional

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–OH en su cadena carbonada.

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Formas a y b: en función de la posición del grupo –OH del carbono número 1 de su

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molécula.
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Disacáridos: formados por 2 moléculas de azúcar.

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Oligosacáridos: formados por 3-10 moléculas de azúcar.

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Polisacáridos: formados por más de 10 moléculas de azúcar.

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Los azúcares o hidratos de carbono tienen su origen en la dieta y también en la síntesis endógena.
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Se digieren en la dieta en forma de polisacáridos, disacáridos o monosacáridos; y una vez digeridos
son absorbidos por la flora intestinal en forma de monosacáridos. Cuando el monosacárido absorbido
no es glucosa se transforma en ella en el nivel hepático.
El sistema endógeno tiene lugar a nivel del hígado y riñón partiendo de aminoácido y ácido láctico
mediante el proceso denominado gluconeogénesis (producción de nueva glucosa).
Las tres funciones principales de los hidratos de carbono son:
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Fuentes de energía: es la función primordial.
Reserva energética.
Servir de base para la síntesis de otras estructuras como por ejemplo de los ácidos nucleicos.
La energía para consumo inmediato es obtenida de la degradación de moléculas de glucosa que
puede tener lugar por tres vías:
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Glucólisis o Embden-Meyerhof: es la más importante cuantitativamente y en condiciones de
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anaerobios finaliza en piruvato. Este en presencia de oxígeno ingresa en el ciclo de Krebs y con
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un gran rendimiento energético proporciona 36 moléculas de ATP (adenín trifosfato) por cada
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molécula de glucosa degradada.
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Pentosas fosfato: de las pentosas aldosas se obtiene ribosa (fundamentalmente en la síntesis
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de ácido nucleicos) y NADPH (nicotinamida-adenina-di-nucleótido fosfato reducido) es
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necesario en muchos procesos metabólicos de la célula.
af
Sorbitol: proporciona moléculas de fructosa.

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La función de reserva energética, la función de depósito es realizada por el glucógeno sintetizado a

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partir de la glucosa por el proceso de gluconeogénesis. El glucógeno se encuentra tanto

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En el hígado
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Donde puede ser degradado hasta glucosa y utilizado como fuente energética en todo el
organismo.
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En la masa muscular
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Este únicamente puede ser usado como fuente de energía para músculos.
Metabolismo de la glucosa
Los glúcidos constituyen la principal fuente de energía del organismo. El consumo calórico varía con
la edad, la estatura, el peso, el sexo y la actividad física.
Los glúcidos alimentarios están constituidos por monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.
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Después del proceso digestivo, los glúcidos son absorbidos en forma de glucosa, fructosa, manosa y
galactosa, los cuales, llegados al hígado se transforman en un polisacárido de reserva, el glucógeno.
El glucógeno hepático puede también formarse de fuente Endógenas. No toda la glucosa absorbida
es almacenada por el hígado; este retiene aproximadamente un tercio y el resto pasa a la sangre. La
glucosa y la fructosa son los únicos monosacáridos utilizados por los tejidos, mientras que otros
como la galactosa y los disacáridos cuando son introducidos por vía parental no son utilizados por el
organismo.
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El metabolismo intermedio de los glúcidos es el conjunto de reacciones que se producen en los
co
distintos tejidos para la utilización de esas sustancias nutritivas, sea para su depósito en forma de
n.
glucógeno, para su oxidación o para la formación de ácidos grasos y polisacáridos, siendo los lugares
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donde en que se almacena y consuma la mayor parte de los glúcidos los músculos, el hígado y el
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tejido adiposo.
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La liberación de glucosa se produce solamente en el hígado y, en mucho menos escala, en el riñón y
en el intestino. Por la acción de una enzima, la fosfatasa, la glucosa-6-fosfato deja en libertad ácido
fosfórico y glucosa.
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La glucolisis constituye el complejo proceso que, iniciándose con el glucógeno o con la glucosa-6-
fosfato termina en la formación de ácido pirúvico. Este constituye un punto clave en el cual
convergen los metabolismos intermedios de los glúcidos, lípidos y proteínas, por lo cual se le ha
llamado encrucijada metabólica.
1.1. Determinaciones
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Conocer el metabolismo de los hidratos de carbono (sobre todo la glucosa) permite valorar las
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alteraciones en la concentración plasmática de la glucosa, que pueden ser:
n.
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Primarias
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Reflejan alteraciones del metabolismo de los hidratos de carbono.
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Secundarios
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alteraciones en la concentración plasmática de glucosa derivadas de diferentes enfermedades.

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De todos los procesos de diagnóstico adecuados para valorar el funcionamiento del metabolismo de
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los hidratos de carbono, los más importantes son:

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Determinación de la glucemia basal

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A temperatura ambiente, la glucosa presente en una muestra de sangre sufre glucólisis (debido a la
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acción de los glóbulos rojos o eritrocitos). dela magnitud de dicha glucólisis presenta tal importancia
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que al cabo de 6 horas la glucosa puede desaparecer totalmente. Además, este proceso puede verse
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aumentado por la presencia de un elevado número de leucocitos y contaminación bacteriana. Por

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ello, debemos tener en cuenta:

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Siempre que la muestra sea sangre total debemos realizar el análisis de la glucosa durante la
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media hora después de la extracción.
Si no fuera posible realizar el análisis con inmediatez, debemos añadir un conservador que
inhiba la glucólisis, por ejemplo fluoruro sódico.
Se recomienda usar plasma o suero para evitar la glucólisis.
Los métodos de determinación de la glucosa basal son:
Métodos basados en el poder reductor de la glucosa
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Método de la orto-toluidina: es un método de colorimetría llevado a cabo mediante el
empleo de un espectrofotómetro. La cantidad de color es directamente proporcional a la
cantidad de glucosa que aparece en la muestra. Es un método poco empleado, ya que la orto-
toluidina es corrosiva y cancerígena, además de que la técnica, frecuentemente, presenta
interferencias.
Método de la reducción del cobre: Es uno de los métodos más antiguos. El más conocido es
el de Benedict que detecta glucosa e hidratos de carbono reductores totales. Se siguen usando
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para la determinación semi-cuantitativa de azúcares reductores totales en orina y
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determinación de efecto genéticos de los hidratos de carbono en niños.
n.
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Métodos enzimáticos
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Método de la glucosa oxidasa (GOD): es la enzima que cataliza la reacción de la glucosa

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presente en la muestra. La cuantificación de resultados se puede realizar por dos métodos que
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son: mediante polarografía y mediante determinación del peróxido de hidrógeno (H2O2)

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formado en la reacción.
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Para la polarografía realizamos la medida del consumo de oxígeno con un electrodo

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de oxígeno. La cantidad de glucosa de la muestra es directamente proporcional a la

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cantidad de oxígeno consumido.

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Determinación de peróxido de hidrógeno: mediante la acción de una peroxidasa, un cromógeno
pasa de su forma reducida (que es incolora) a su forma oxidada (coloreada). El más usado es el
método de Trinder en el cual la intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad
de glucosa de la muestra.
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Hexoquinasa: este método proporciona el máximo grado de especificidad. La hexoquinasa
cataliza el paso de glucosa a glucosa-6-fosfato. En una segunda reacción se produce la
reducción de NADP a NADPH (sustancia que absorbe el ultravioleta próximo visible). La
reacción se mide en el espectrofotómetro a 340 nanómetros y el incremento de absorbancia es
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directamente proporcional a la concentración de glucosa.
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Interpretación de estos resultados
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Los valores normales de glucemia basal son en torno a los 80 mg/dl. Valores mayores de 140 mg/dl
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de glucosa en 2 muestras se corresponden con una persona diabética.

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Determinación de la glucosuria
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La glucosuria se define como la aparición de glucosa en orina. En glucosuria negativa, debemos

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recordar que la glucosa aparece en orina si se supera el umbral renal, es decir, la glucemia es mayor
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de 160-180 mg/dl.
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Determinación de cuerpos cetónicos

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La determinación se realiza en sangre (cetonemia) y en orina (cetonuria). Aunque derivan de los

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ácidos grasos, informan indirectamente sobre el metabolismo de los hidratos de carbono.
Prueba de sobrecarga oral de la glucosa o PTOG
Esta prueba permite diferenciar la intolerancia a la glucosa y la diabetes:
Intolerancia a la glucosa: cuando obtenemos en la curva un valor de 200 mg/dl y el obtenido
a las 2 horas está entre 140-200 mg/dl.
Diabetes: si en alguna de las dos mediciones realizadas (la segunda con un espacio de tiempo
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de dos horas desde la primera) la glucemia es mayor a 200 mg/dl.
Análisis de hormonas
Son análisis relacionados con el metabolismo de los hidratos de carbono, se determina
especialmente la insulinemia. Se suele emplear dos métodos:
RIA (Radio inmuno ensayo): se usa como marcadores isotópicos radiactivos.
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Enzimo-inmuno análisis: (el más usado es el test de Elisa) que utiliza marcadores
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enzimáticos.
n.
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A parte de determinar insulinemia también se puede determinar las hormonas contra-insulares como
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el glucagón y a veces se determina el péptido-C.
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Determinación de enzimas y sustratos hidrocarbonados en células y tejidos
af
Estos métodos determinan enzimas del metabolismo de los hidratos de carbono o sustratos. Se
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realizan en células y tejidos de biopsias de órganos. Son importantes para determinar ciertas
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metabolopatías.
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Método de la hemoglobina glicosilada: es una fracción de la Hemoglobina A unida por

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enlaces covalentes a la glucosa. Su aparición es directamente proporcional a la aparición de

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glucosa en sangre por lo tanto sirve para control de la diabetes en periodo prolongado. Pero en
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cambio no es útil para el diagnóstico de la diabetes. Es muy específico pero con sensibilidad
escasa.
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Método cromatográficos inmunológicos.

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Otras determinaciones
Determinación de micro-albuminuria: es la excreción de pequeñas cantidades de albúmina
(menos de 20 mg/dl). Si la cantidad de albúmina en orina es aproximadamente 20 mg/dl sería
detectada mediante tiras reactivas. Esta determinación sirve de control de personas diabéticas.
Se determina mediante métodos inmuno-químicos: tienen buena sensibilidad (detectan de 2-20
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mg/dl), buena especificidad y son automatizables. La cuantificación de resultados es mediante
tubidimetría y nefelometría.
Determinación inmunológica: consiste en la determinación de anticuerpos específicos frente
a la insulina o a las células pancreáticas productoras de insulina. Los métodos más usados son:
enzimo-inmuno-análisis e inmuno-fluorescencia indirecta.
Determinación de receptores: la cantidad de receptores de insulina determina la efectividad
y absorción como hormona hipoglucemiante.
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1.2. Patrones de alteración
n.
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Las alteraciones de los hidratos de carbono pueden ser producidos por dos factores:
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Disminución de la glucemia en sangre, es decir, hipoglucemia.
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Alteración de la tolerancia a los hidratos de carbono que conduce a un aumento del nivel de
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glucosa en sangre denominado hiperglucemia, dentro de las cuales la más importante es la

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diabetes.
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1.2.1. Hipoglucemia
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La hipoglucemia es el estado físico-patológico de etiología muy variada y que consiste en la

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existencia de glucosa plasmática menor a 45-50 mg/dl acompañada o no de signos clínicos (no
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siempre aparecen al alcanzarse una misma cifra límite de glucosa en sangre).

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Una hipoglucemia se produce a consecuencia de un desequilibrio entre la glucosa que llega al

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torrente sanguíneo (procedente de la absorción intestinal, gluconeogénesis y glucogenolisis) y la que
sale del mismo como consecuencia del consumo de Glucosa por los tejidos. Es una situación poco
frecuente ya que mientras varias hormonas contribuyen al aumento de la glucemia una sola tiene
efecto hipoglucemiante (insulina).
Los síntomas o manifestaciones clínicas de una hipoglucemia son inespecíficos y debidos a dos
causas:
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Aumento de la liberación de adrenalina
(por un aumento de la actividad del sistema nervioso simpático) cuya finalidad es

restablecer los niveles de glucemia normales. Provocan estos síntomas: temblores,
taquicardias, hipertensión, sudoración, sensación de ansiedad y de hambre, estos síntomas
son precoces.
Disfunción del sistema nervioso central
(en especial en la zona cortical cerebral) por un déficit de glucosa. Estos síntomas son
tardíos y son: mareos, confusión, alteraciones de percepción visual, cefaleas, convulsiones,
coma, y si la hipoglucemia es prolongada deterioro mental, con lesiones irreversibles del
m
sistema nervioso central.
co
n.
Según la causa desencadenante de la hipoglucemia hablaremos de dos tipos: por ayuno y por
io
postprandial.
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Por ayuno
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Ese tipo se produce porque se va consumiendo progresivamente toda la glucosa (e incluso el
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glucógeno) y se instaura por:

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Disminución de la producción de glucosa: esto puede ser debido a varias causas:

.e
A las hormonas hiperglucemiantes.

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A una insuficiencia hepática grave.

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A un elevado consumo de alcohol.

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Aumento del consumo de glucosa: este aumento puede ser debido a:

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Tumores pancreáticos: se segrega insulina en exceso y abundancia.

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Tumores con metabolismo hiperactivo.

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Postprandial
Son frecuentes en personas que han sufrido la extirpación parcial o total del estómago, ya que el
vaciamiento rápido del mismo provoca una absorción brusca de la glucosa (hiperglucemia) seguida
de un excesivo aumento de la secreción de insulina (hipoglucemia).
1.2.2. Hiperglucemia
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La hiperglucemia es una elevación anormal de la concentración de glucosa en sangre que conduce a
un síndrome clínico denominado diabetes cuyo signo clínico más destacado es el aumento de los
niveles plasmáticos de glucosa.
La diabetes o diabetes mellitus es una metabolopatía compleja crónica que se origina en
consecuencia de un déficit de insulina que puede ser absoluto o relativo.
Absoluto: la secreción de insulina es insuficiente para el metabolismo normal de los hidratos
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de carbono.
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Relativo: la secreción de insulina es normal o incluso está aumentado pero es insuficiente por
n.
estar aumentadas las necesidades.
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Este déficit de insulina altera el metabolismo de los hidratos de carbono, lípidos y proteínas. Las
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consecuencias del déficit de insulina son:
or
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Déficit de insulina en los hidratos de carbono: las dos primeras causas provoca
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hiperglucemia y glucosuria.
sn
Disminuye el consumo de glucosa en el músculo y tejido adiposos, como

.e
consecuencia aumenta la gluconeogénesis.

u al
Disminuye la síntesis de glucógeno.

rt
Aumenta la glucogenolisis.
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Déficit de insulina en los lípidos: aumenta la lipólisis lo que produce gran cantidad de
pu
ácidos grasos que se usan como fuente de energía y en el hígado se transforman en cuerpos
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cetónicos (cetogénesis) estimulado por el glucagón. Estos cuerpos cetónicos pasan a la sangre
ca
y como no se pueden usar al ritmo que se producen se acumulan dando hipercetonemia y se
eliminan vía urinaria dando cetonuria. Otra alteración es que se altera el metabolismo de las
lipoproteínas.
Déficit de insulina en las proteínas (alteración de su metabolismo): aumenta la
liberación al torrente sanguíneo de aminoácidos pertenecientes a proteínas musculares
(aumenta el catabolismo proteico) los cuales una vez en el hígado aumenta la gluconeogénesis.
Tipos de diabetes o de diabetes mellitus
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Si la causa es desconocida hablamos de diabetes primaria o esencial, la cual tiene un elevado
componente genético. Esta diabetes primaria a veces se relaciona con defectos en los receptores de
insulina y también se relaciona con reacciones autoinmunes (anticuerpos). Esta diabetes primaria se
clasifica en:
Diabetes insulino-dependiente, tipo I o juvenil.
Diabetes no insulino-dependiente, tipo II ó del adulto.
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Las diferencias entre ellas son:
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Si la causa del déficit de insulina es conocida hablamos de diabetes secundaria o sintomática.

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Debemos nombrar que aparte de estos dos tipos de diabetes, otros dos más que existen:
m
Diabetes latente o química: la tolerancia anormal a la glucosa. Tiene hiperglucemia pero con
ca
cifras inferiores a las anteriores, no tiene síntomas de diabetes y son obesos.
Diabetes gestacional: que aparece por primera vez en el embarazo, da mayor riesgo de
morbi-mortalidad perinatal (en los recién nacidos) y se diagnostica por la prueba de tolerancia
oral a la glucosa (PTOG).
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2. Metabolismo lipídico y de lipoproteínas
A. Los lípidos
Reciben el nombre de lípidos aquellas sustancias de origen biológico, solubles en los llamados
solventes orgánicos. Dado que la definición de estos elementos tiene como base común la solubilidad
en una serie de sustancias, se incluyen en el grupo de los lípidos algunos compuestos de naturaleza
química diversa. El factor común estructural de este grupo de moléculas es la presencia de cadenas
m
relativamente largas de átomos de carbono, con una composición en la que predominan el C y el H.
co
Tal vez la función más importante de los lípidos se relaciona con el hecho de que un buen número de
n.
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ellos son moléculas anfifílicas que en presencia de agua se asocian formando bicapas. Estas
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constituyen la base sobre la cual se organiza la complicada estructura de las membranas celulares.
m
Los lípidos contienen en sus moléculas cadenas apolares más o menos largas de átomos de carbono;
or
en muchos de ellos estas cadenas están formadas por ácidos grasos. Aunque estas sustancias sólo
af
existen libremente en pequeñas cantidades, al participar como componentes de muchos de los

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lípidos, les confieren a éstos sus propiedades. Los ácidos grasos son moléculas del tipo:
sn
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En el cual R representa una cada de átomos de carbono e hidrógeno. Dado que los ácidos grasos
ca
tienen un grupo carboxilo, se distinguen unos de otros por esta cadena de átomos de carbono; de las
características de esta, la más importante es el número de carbonos.
Algunos de los ácidos grasos son insaturados, es decir, tienen doble enlaces en su cadena. El ácido
graso de 18 átomos de carbono es el esteárico; el oleico, por su parte, presenta también 18 átomos
de carbonos en su estructura pero presenta un doble enlace entre los carbonos 9 y 10 de su cadena.
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n.
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Además de los enlaces dobles, pueden existir otras modificaciones en las cadenas delos ácidos
m
or
grasos, los cual les confiere una gran diversidad.
af
Clasificación de los lípidos

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Existen numerosas clasificaciones de los lípidos y muchas de ellas son más o menos complicadas;
.e
quizá las más sencilla es aquella que considera en principio sólo dos grandes grupos: los complejos y
al
los simples. Los simples son aquellos que contienen ácidos grasos en su estructura, unidos a un
u
grupo –OH de otra molécula. Estos compuestos tienen en común la propiedad de ser saponificables,
rt
o sea que si se los calienta con una base fuerte, se rompe la unión, quedando este en libertad como
s vi
sal de sodio o potasio.

pu
El grupo de los lípidos simples comprende a aquellas moléculas que no pueden ser saponificadas;
m
ca
dentro de él se incluyen las sustancias con las propiedades más variadas, tales como componentes
membranales, vitaminas, Hormonas, etc.
En los organismos los ácidos grasos aparecen como moléculas libres en cantidades sumamente
pequeñas. Generalmente se encuentran unidos químicamente a otras moléculas; una de ellas es el
glicerol. Una grasa neutra o triglicérido se forma por la unión de tres moléculas de ácidos grasos
con una de glicerol.
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Los triglicéridos constituyen el grupo más abundante de las grasas neutras en los seres vivos. Los
monoglicéridos y los diglicéridos se encuentran en cantidades escasas, y sólo participan como pasos
en el metabolismo de los triglicéridos.
m
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Aunque un triglicérido puede estar integrado por tres moléculas idénticas de ácidos grasos, en
n.
realidad la mayor parte está formada por tres ácidos grasos diferentes, unidos a una misma
io
molécula de glicerol.
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Las sustancias conocidas como fosfolípidos o fosfoglicéridos aparecen casi exclusivamente en las
m
or
membranas celulares.; sólo una pequeña parte de ellos se encuentra en los depósitos de grasa.
af
Tienen cierto parecido estructural con las grasas neutras; están compuestos por una molécula de
ec
glicerol que tiene dos moléculas de ácidos grasos esterificadas y en el lugar del tercer ácido graso
sn
hay una molécula de ácido fosfórico.

.e
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La porción de la molécula formada por el glicerol, los ácidos grasos y el ácido fosfórico, recibe el
nombre de ácido fosfatídico.
El grupo de los esfingolípidos comprende aquellos compuestos en los que el eje de la estructura es
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la enfingosina. Un ácido graso se une por el grupo NH2 de la enfingosina, y otro se une al –OH
terminal. Son moléculas anfifílicas.
Terpenos:
Son lípidos simples, que se forman con moléculas de isopreno cuando éstas se unen entre sí y
producen cadenas y anillos de forma y tamaño variables.
m
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n.
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Las cadenas que resultan de la condensación de estas unidades, son estructuras hidrofóbicas, hecho
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que las incluye dentro del grupo de los lípidos. Son compuestos que tienen propiedades muy
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variables.
.e
Teóricamente, el colesterol puede considerarse como deriva de un núcleo formado por la fusión de
u al
tres anillas de seis átomos de carbono y uno de cinco átomos de carbono, que recibe el nombre de
rt
ciclopentano perhidrofenantreno. Se encuentra prácticamente en todas las células animales, en la

vi
sangre y en la bilis. Forma parte de las membranas externas de las células. En la sangre aparece en
s
pu
forma esterificada, por ácidos grasos que se unen al grupo OH del carbono número 3. La porción del
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colesterol sanguíneo que se encuentra esterificada corresponde a dos terceras partes del total. La
ca
tercera parte se encuentra en forma libre.
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Función metabólica de los lípidos
El metabolismo de los lípidos es un tema sumamente amplio porque existen muchas clases de lípidos
y cada una posee vías anabólicas y catabólicas únicas.
Los triglicéridos almacenados en los adipocitos se movilizan en caso de necesidad metabólica por la
acción de la lipasa sensible y hormonas. Los ácidos grasos se vuelvan en el torrente sanguíneo,
donde se unen a la albúmina, una proteína monomérica soluble. En ausencia de albúmina la
m
solubilidad de los ácidos grasos es menor.
co
Los ácidos grasos se catabolizan por un proceso oxidativo que libera energía libre.
n.
io
Antes de que los ácidos grasos puedan oxidarse, deben “cebarse” para la reacción de acilación
ac
dependiente de ATP para formar acil-CoA graso. El proceso de activación está catalizado por una
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familia de al menos tres acil-CoA sintetasas (tiocinasas) que difieren en sus especificidades de
or
longitud de cadena. Estas enzimas, asociadas tanto con el retículo endoplasmático como con la
af
membrana mitocondrial externa, catalizan la reacción.

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Aunque los ácidos grasos se activan para la oxidación en el citosol, se oxidan en la mitocondria. Por
vi
tanto debemos considerar de qué forma el acil-CoA graso se transporta a través de la membrana
s
mitocondrial interna. Un acil-CoA graso de cada larga no puede cruzar la membrana. En cambio se
pu
transfiere primero su porción acilo a la carnitina.

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B. Lipoproteínas
af
La relativa especialización de los diversos tejidos en el manejo de los lípidos hace necesaria la
ec
existencia de un transporte plasmático de los mismos de un lugar u otro. Para este transporte es
sn
necesaria su incorporación en unos complejos que permiten su solubilización y que posean además
.e
información necesaria para su correcta metabolización.

u al
Aunque existe una gran cantidad de proteínas transportadoras específicas de moléculas lipídicas
rt
vi
concretas cuantitativamente destacan aquellas partículas destinadas al transporte del colesterol,

s
triglicéridos y fosfolípidos que son los lípidos mayoritarios del organismo y estas partículas se
pu
conocen como lipoproteínas.

m
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Lipoproteínas:
Son macromoléculas que poseen una estructura interna compuesta por triglicéridos y ésteres de
alcohol.
En su superficie tiene colesterol y fosfolípidos además de proteínas (apoproteínas). La proporción en
que se encuentra cada uno de sus componentes determina las propiedades físico-químicas de las
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lipoproteínas, lo cual es de gran utilidad para proceder a su reparación y a su posterior estudio.
Las apoproteínas designadas (con letras desde A a F y algunas con varios subíndices por ejemplo
APO-BI). Desempeñan diversas funciones:
Son componentes estructurales de las lipoproteínas y, por tanto, contribuyen a la solubilización
de los lípidos.
Actúan como cofactores de diversas enzimas. Los cofactores son aquellas sustancias cuya
m
presencia en pequeñas cantidades es necesaria para la reacción enzimática.
co
Permite que las distintas lipoproteínas sean reconocidas por receptores de la superficie celular.
n.
io
Las lipoproteínas son sintetizadas en el hígado y en el intestino grueso y posteriormente sufren
ac
numerosas transformaciones, tanto en la sangre como en los tejidos. En general, en función de su
m
contenido lipídico y del tipo de APO presentes en su superficie, las lipoproteínas se pueden clasificar
or
en:
af
ec
Quilomicrones.
sn
Lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL).

.e
Lipoproteínas de baja densidad (LDL).

al
Lipoproteínas de alta densidad (HDL).

u
rt
Lipoproteínas “a”.
s vi
Quilomicrones
pu
m
Los quilomicrones son partículas grandes que aparecen en el plasma tras la ingestión de grasas y
ca
son sintetizadas en las células intestinales a partir de: triglicéridos colesterol y fosfolípidos.
Su vida en sangre es muy corta (menos de 30 minutos) y su principal función es transportar los
triglicéridos exógenos a los tejidos donde son hidrolizados por la lipoproteína lipasa para dar glicerol
y ácidos grasos. Estos ácidos grasos son utilizados o bien pueden ser almacenados en los adipositos.
Los residuos de los quilomicrones (tras perder los triglicéridos) son eliminados vía hepática.
Lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL)
22 / 55
Las lipoproteínas VLDL son sintetizadas en el hígado y en el intestino a partir de los lípidos exógenos
y endógenos fruto del catabolismo de los hidratos de carbono. Su función es la de transportar los
triglicéridos endógenos. Sus triglicéridos son también degradados por la lipoproteína lipasa y el
resultado son unos residuos muy ricos en colesterol, que bien pueden ser retirados de la circulación
o bien pueden ser utilizados para sintetizar LDL.
Lipoproteínas de baja densidad (LDL)
m
Las lipoproteínas de baja Densidad se originan como consecuencia de la degradación de las VLDL en
co
el torrente circulatorio. Su función principal es la de transportar el 80% del colesterol circulante
n.
hacia las células de los tejidos, las cuales tienen receptores específicos para las LDL. Aquí, el
io
colesterol es utilizado para la síntesis de las membranas celulares y los sintetizan de hormonas
ac
esteroideas.
m
Las partículas de LDL son metabolizadas en los lisosomas de las células de los tejidos periféricos
or
originando colesterol libre que una vez suelto en el citoplasma celular va a ejercer una triple acción:
af
ec
Inhibe la síntesis endógena del colesterol.

sn
Impide la entrada de colesterol a las células (por inhibición de la síntesis de receptores de

.e
LDL).
al
Estimula el proceso de esterificación de colesterol libre en el citoplasma.

u
rt
vi
Las lipoproteínas de LDL son sintetizadas por el hígado a partir del: colesterol libre, de los lípidos y
s
pu
de las apo-proteínas C y E.
m
Lipoproteínas de alta densidad (HDL)

ca
Las lipoproteínas de alta intensidad captan el colesterol libre de las células de los tejidos periféricos
y éste, por acción de la enzima CLAT (lecitina-colesterol-acetil-transferasa), es esterificado, dando
lugar a una molécula hidrofóbica que se sitúa en el interior de las HDL. El lugar periférico que ha
quedado libre es ocupado nuevamente por una nueva molécula de colesterol libre que también
procede de las células de los tejidos y así sucesivamente. De esta manera se va eliminando el
colesterol en exceso de los tejidos.
23 / 55
Lipoproteína “a”
Ésta se caracteriza por poseer en su estructura una apoproteína peculiar que se llama APO-B100. Su
concentración en el plasma es baja y su síntesis –a nivel hepático- está regulada genéticamente. Su
marcado interés reside en su carácter aterogénico (la aterogénesis) es el mecanismo por el cual se
origina la placa de ateroma en el organismo. Esta lipoproteína se la relaciona con la formación de
ateroma en los vasos sanguíneos.
m
La alteración de las distintas fracciones de lípidos circulantes en el torrente sanguíneo es un fiel
co
reflejo de una serie de alteraciones orgánicas de diversas etiologías y gravedad, cuya importancia
n.
clínica está relacionada fundamentalmente con la ateroesclerosis. En general dichas alteraciones
io
pueden estar relacionas con:
ac
m
Aumento de las fracciones lipídicas circulantes (hiperlipemias).
or
Disminución de las fracciones lipídicas circulantes (hipolipemias).
af
Aparición en la sangre de lipoproteínas de estructuras anormal que es una dislipoproteinemias.

ec
sn
.e
u al
Los métodos de laboratorio que se utilizan en el estudio de las lipoproteínas pueden clasificarse en
rt
dos grupos:
s vi
pu
Métodos generales: determinan alteraciones orgánicas generales de una dislipemia.
Métodos específicos: su objetivo es el diagnóstico genético de una dislipemia.

m
ca
En general las determinaciones más importantes a realizar para el estudio de los lípidos son los
siguientes:
24 / 55
m
co
n.
io
Métodos generales de diagnóstico
ac
Los métodos generales de diagnóstico pueden ser realizado en el laboratorio, general y
m
especializado.
or
af
Los resultados en el laboratorio general son:

ec
sn
Análisis de colesterol y triglicéridos totales: estas determinaciones se realizan por métodos

.e
enzimáticos.
al
Análisis del colesterol: se determina tras la precipitación del resto de las lipoproteínas
u
mediante reactivos. El colesterol HDL se determina en el sobrenadante por métodos

rt
vi
enzimáticos.
s
Detección de quilomicrones: puede sospecharse su presencia en el suero por el aspecto

pu
lechoso y opalescente del mismo. En estos casos se confirma su presencia dejando el suero
m
toda la noche a 4ºC de forma que formen una capa cremosa flotante.
ca
Análisis de colesterol-LDL: puede determinarse mediante la fórmula de friedlwald. Siempre
y cuando los triglicéridos sean inferior a 200 mg/dl. En caso de que los triglicéridos sean
mayores de 200 mg/dl puede dar errores. Ch-LDL = Ch-total – TG/5 – Ch-HDL.
Determinación de las apolipoproteínas AI y B: esta prueba se ha incluido recientemente
debido a que existe una fuerte relación entre la presencia entre las apolipoproteínas y las
enfermedades cardiovasculares. Se ha descubierto que un aumento de la APO-B aumenta el
riesgo de enfermedades cardiovasculares. Mientras que una APO-AI es un factor de riesgo en la
25 / 55
cardiopatía isquémica.
Los métodos generales de diagnóstico en el laboratorio especializado, en ellos, el estudio de los
lípidos se realiza mediante la separación de las diferentes fracciones de lipoproteínas. Las diferentes
fracciones obtenidas por cualquiera de los métodos se determinan Colesterol, triglicéridos,
fosfolípidos y proteínas. Existen tres métodos básicos de separación:
Método combinado: es el recomendado para la separación rutinaria. Tiene dos fases:
m
co
Ultra-centrifugación sin ajuste de densidad, en esta fase se separa la fracción VLDL
n.
en el sobrenadante.
io
Se precipitan las LDL del infranadante quedando las HDL en el sobrenadante.
ac
Centrifugación secuencial: se separan las distintas familias de lipoproteínas mediante ultra-
m
centrifugación sucesivas, ajustando en el infranadante la densidad de aquella que se quiere
or
separar. En las fracciones separadas se llevan a cabo las determinaciones que corresponden.
af
Ultra-centrifugación en gradiente de densidad: la separación de las lipoproteínas se lleva

ec
a cabo en un único ciclo de ultra-centrifugación gracias a un gradiente continuo de densidad a

sn
lo largo del tubo. Cada lipoproteína flota a la altura correspondiente a su densidad.

.e
al
Métodos específicos
u
rt
vi
Los métodos específicos son determinaciones muy específicas encaminadas al diagnóstico de una
s
dislipemia concreta.
pu
m
ca
2.2. Patrones de alteración
Las alteraciones más importantes son la que hacen referencia a un incremento de la concentración
plasmática de las diferentes fracciones lipídicas. Son las denominadas hiperlipemias. Cuando se
hace referencia a las lipoproteínas que las transportan se habla de hiperlipoproteínemias.
Las hiperlipemias se clasifican en:
Hipertrigliceridemia
26 / 55
El aumento del nivel de triglicéridos puede ser consecuencia del aumento de la síntesis o una
disminución de la degradación de los mismos. Puede estar causados por dietas inadecuadas,
trastornos hereditarios o ser una manifestación secundaria de otras enfermedades.
Cuando el problema es que hay un aumento en la síntesis de los triglicéridos, las causas que lo
provocan pueden ser:
Hay un aporte calórico excesivo: con lo cual los hidratos de carbono no son utilizados como
m
fuente de energía y en el hígado dan lugar a triglicéridos y ácidos grasos.
co
Alcoholismo: debido a que el alcohol estimula la síntesis hepática de ácidos grasos
n.
Diabetes: debido al déficit de insulina aumenta la lipólisis en tejido adiposo, liberándose
io
ácidos grasos que hacen que aumenten las VLDL.
ac
Trastornos hereditarios: son mecanismo de actuaciones complejos y en ocasiones no
m
totalmente precisados.
or
af
Cuando el problema es que hay una disminución de la degradación de los triglicéridos, las
ec
causas que lo provocan pueden ser:

sn
.e
Diabetes: la lipoproteína lipasa ve disminuida su acción por defecto de insulina.

al
Trastornos hereditarios: existe una alteración de los mecanismos de degradación de los

u
rt
triglicéridos.
s vi
Las consecuencias de ambas anomalías pueden ser:

pu
m
Dolor abdominal: el aumento de los órganos produce un aumento de liberación de enzimas

ca
del páncreas el cual puede sufrir inflamación dando lugar a pancreatitis.
Hepatoesplenomegalia: es debido al acumulo de macrófagos repletos de triglicéridos que
hacen aumentar de tamaño el hígado y el bazo.
Formación de xantomas: son pequeños nódulos amarillos o rosados que aparecen
bruscamente por acumulo de los triglicéridos en los macrófagos de la piel.
Retina blanquecina: debido al aspecto opalescente que presenta el plasma de las personas
afectadas. La retina aparece con aspecto blanquecino.
27 / 55
Hipercolesterolemia
El aumento de los niveles de colesterol puede deberse a:
Un aumento de la síntesis.
Una desviación de la degradación de las lipoproteínas que se ocupan de su transporte.
Por lo tanto, es mayoritariamente un aumento de colesterol de las LDL. Puede estar causado por
m
dietas poco equilibradas, herencia o ser una manifestación secundaria de otras enfermedades.
co
n.
Cuando el problema es un aumento en la síntesis las causas que lo provocan pueden ser:
io
ac
Síndrome nefrótico: al existir déficit de albúmina aumento la síntesis de LDL.
m
Ciertas enfermedades hereditarias.
or
af
Cuando el problema es una disminución de la degradación de las lipoproteínas las causas que las
ec
provocan pueden ser:

sn
Dietas ricas en ácidos grasos y colesterol: que van a provocar una disminución en la
.e
al
afinidad en los receptores de las LDL o bien inhiben la síntesis de los propios receptores.
u
Déficit de hormonas tiroideas: que hacen que disminuya el catabolismo de las LDL.
rt
Trastornos hereditarios: como al hipercolesterolemia familiar, las LDL se acumulan en el

vi
plasma debido a una deficiencia de los receptores para las LDL.

s
pu
m
Las consecuencias son:

ca
Ateroesclerosis: es la consecuencia más importante del aumento del colesterol. La lesión más
característica es la formación de placas de ateroma (estas placas pueden estar formadas por
lípidos, monocitos, fibras musculares y tejido conjuntivo). Estas placas se forman debido a:
Adhesión al endotelio vascular de plaquetas por la acción de las LDL
Debido a una agresión hacia el endotelio de los vasos sanguíneos.
Monocitos y macrófagos presentes en las zona captan las LDL.
28 / 55
Alteraciones cornéales.
Formación de nódulos o placas: similares a los xantomas en los párpados y piel por el
aumento de macrófagos cargados de colesterol.
Aumento de las HDL
El aumento de las HDL puede ser como causa:
m
Hiper-alfa-hiperproteinemia familiar.
co
Personas que realizan ejercicio físico de forma regular.
n.
Personas que beben alcohol moderadamente.
io
Mujeres: debido a la mayor cantidad de estrógenos.
ac
m
Se ha demostrado que un aumento de HDL protege del desarrollo de la ateroesclerosis, ya que las
or
HDL retiran el colesterol de los tejidos y también de la pared arterial hasta el hígado para proceder
af
a su eliminación.
ec
sn
Aumento de los ácidos grasos libres

.e
Los ácidos grasos libres son transportados por la albúmina, aumentan cuando hay hipersecreción de
al
hormona que al igual que las catecolamina activan la lipólisis en el tejido adiposo. Las causas que la
u
rt
provocan son:
s vi
pu
Situaciones de estrés: aumenta la secreción de catecolamina.
Feocromocituma: es una neoplasia de la médula que debuta con secreción de catecolamina.

m
Ayuno y diabetes: que pueden provocar un aumento de los ácidos grasos también van a ser
ca
captados por hígado y se va a producir una aumento de los cuerpos cetónicos y de las VLDL.
Hipolipemias
Los trastornos o alteraciones por disminución de las fracciones lipídicas circulantes son las
hipolipemias. Son menos frecuentes y normalmente se producen a consecuencia de:
Una disminución en el aporte de nutrientes (personas mal nutridas que padecen síntomas de
29 / 55
malabsorción).
Por una síntesis insuficiente de apoproteínas.
Un aumento en la degradación de las lipoproteínas.
Abetalipoproteinemia
Es un trastorno hereditario poco frecuente que se caracteriza porque las personas que lo padecen no
pueden Sintetizar la APO-B. Debido a ello, tampoco pueden sintetizar las lipoproteínas que la
m
contienen, quilomicrones, LDL y VLDL. Esta enfermedad cursa con descenso plasmático de los
co
niveles de colesterol y triglicéridos.
n.
io
Cuando hay catabolismo de un tipo de lipoproteínas está aumentado la concentración de las
ac
fracciones lipídicas que transportan estas lipoproteínas en sangre disminuidas, así por ejemplo un
m
catabolismo acelerado de las LDL puede ser el responsable de una hipocolesterolemia.
or
af
ec
sn
.e
u al
rt
s vi
pu
m
ca
30 / 55
3. Metabolismo proteico
Los aminoácidos son moléculas orgánicas que contienen un grupo amino y un grupo ácido y que se
unen entre sí mediante enlaces peptídicos (tipo amida).
Dos aminoácidos unidos entre sí por un enlace peptídico forman un dipéptido, sin son tres serían un
tripéptido y así sucesivamente. Los compuestos así formados por menos de cien aminoácido se
denominan péptidos (o polipéptidos) cuando el número de aminoácidos es mayor de cien el
m
compuesto se denomina proteína.
co
Por tanto, los aminoácidos son compuestos químicos caracterizados por poseer un grupo funcional
n.
io
amino (-NH2) y otro ácido (-COOH) unidos a una cadena lateral (-R). Si el grupo –R es un hidrógeno
ac
se habla de glicocola –R = H.
m
De todos los aminoácidos conocidos solamente veinte son componentes naturales de las proteínas, el
or
resto son productos intermedios o finales del metabolismo. Los aminoácidos básicamente se
af
diferencian entre sí, por la naturaleza de la cadena lateral y es debido a ella que cada aminoácido
ec
tenga propiedades únicas y características. Las diferentes cadenas –R se diferencian entre sí en

sn
función de:
.e
al
Su forma y tamaño.
u
rt
La carga.
vi
Por la reactividad.
s
pu
Por la capacidad de formar enlaces puentes de hidrógeno (puentes de H).

m
De entre los veinte aminoácidos naturales algunos no pueden ser sintetizados por el propio
ca
organismo y se denomina aminoácidos esenciales. Los aminoácidos no esenciales pueden ser
sintetizados mediante una reacción de transaminación.
La eliminación renal de los aminoácidos es inapreciable porque aunque se filtre a través del
glomérulo (por su pequeño tamaño) son reabsorbidos en el túbulo proximal.
Su catabolismo (destrucción) sucede mediante transaminación o desaminación oxidativa y tiene
lugar en el hígado y en el músculo. El destino de la cadena hidrocarbona (-R), es la síntesis de
31 / 55
glucosa mediante gluconeogénesis o el ingreso en el ciclo de Krebs para la obtención de energía.
El grupo amino cuando no es utilizado para la transaminación es degradado hasta amoniaco (NH3)
que en el hígado se transforma en urea y glutamina.
Algunos aminoácidos son utilizados en la síntesis de gran interés biológico (por ejemplo hormona).
m
co
n.
io
ac
m
or
af
ec
sn
.e
u al
Proteínas
rt
vi
Los aminoácidos son moléculas orgánicas que contienen un grupo amino (.NH2) y un grupo
s
carboxilo (-COOH). Los aminoácidos proteicos son alfa-aminoácidos, es decir, que están formados
pu
por un carbono alfa único a un grupo amino, a otro carboxilo, a un hidrógeno y a una cada lateral R
m
con la que forma su cuarto enlace covalente.

ca
32 / 55
m
co
n.
Las proteínas naturales son polímeros lineales de α-L-aminoácidos. Desempeñan una gran cantidad
io
de funciones: estructurales, transportadoras, además de aquellas funciones catalíticas que ejecutan
ac
las enzimas y que resultan esenciales en la homeostasis del metabolismo.
m
or
En una proteína podemos distinguir varios niveles de organización. Una estructura primaria, que
af
hacer referencia a la secuencia de aminoácidos en la cadena polipeptídica y en que se incluyen todos

ec
los enlaces covalentes entre los diversos residuos: los enlaces peptídicos y los puentes disulfuro.
sn
.e
u al
rt
s vi
pu
m
Una estructura secundaria, que se refiere a las disposiciones regulares en el espacio de residuos
ca
adyacentes en la cadena polipeptídica. Ciertas secuencias de aminoácidos favorecen las hélices alfa
o las cadenas betas, así como giros que conectan unas estructuras regulares con otras. Algunos
elementos con estructura secundaria forman agregados regulares consecutivos que determinan un
nivel de organización superior, que denominamos estructura supersecundaria o motivos. Algunos de
estos se combinan, generalmente, para formar compactas estructuras globulares que llamamos
dominios. Dominios con secuencias de aminoácido homólogas en diferentes proteínas tienen casi
invariablemente la misma estructura terciaria. Un dominio se define, entonces, como un parte de
una cadena polipeptídica que puede plegarse independientemente en una estructura terciaria
33 / 55
estable. Los dominios pueden ser también unidades de función independientes dentro de la
estructura de las proteínas.
m
co
n.
io
ac
Durante mucho tiempo el dogma central del plegamiento de las proteínas se ha centrado en el
m
primer nivel de organización estructural, la estructura primeria, en la que se supone toda la
or
información necesaria para que la proteína adopte una y solo una estructura terciaria.
af
Recientemente, sin embargo, se han encontrado algunas proteínas que se requieren durante el
ec
plegamiento de muchas otras proteínas para que adopten la estructura tridimensional apropiada.
sn
.e
u al
rt
s vi
pu
m
Un nivel de estructuración superior a estos es la estructura terciaria, o disposición espacial de todos

ca
y cada uno de los átomos que componen la molécula. Una proteína con una determinada estructura
terciaria puede estar constituida por uno o varios dominios, que pueden llegar a tener funciones
específicas y separadas. La estructura terciaria constituye el último nivel de organización
estructural, es una proteína monomérica. Sin embargo, existen macromoléculas oligoméricas,
formadas por la asociación no covalente de varias cadenas polipeptídicas. Este nivel de
jerarquización superior se llama estructura cuaternaria. Representa, por tanto, la disposición
espacial de las diversas subunidades de una proteína oligomérica.
34 / 55
Las proteínas se pliegan en el espacio para adoptar una estructura tridimensional que depende
fundamentalmente de la secuencia; pero también de las propiedades fisicoquímicas del medio, de la
presencia de Cofactores, e incluso de la participación de otras proteínas. Existen métodos de
aproximación para conocer la estructura tridimensional de las mismas.
m
co
n.
io
ac
Función metabólica de las proteínas
m
Las proteínas ingeridas en la dieta constituyen para el organismo la fuente de la mayoría de los
or
aminoácidos. Estas proteínas son degradadas por el aparato digestivo mediante la acción de enzimas
af
hasta sus aminoácidos constituyentes, para que sean absorbidos en el intestino, y a través del
ec
torrente circulatorio lleguen a todas las células del organismo.

sn
.e
El pH contribuye a la desnaturalización proteica y a la activación del pepsinógeno para producir la

al
proteasa activa: la pepsina.

u
rt
Las rutas degradativas de los aminoácidos conllevan la separación del grupo amino, y la oxidación
vi
total del resto de la molécula (esqueleto carbonado) hasta CO2 y H2O. Este camino catabólico sólo
s
pu
se realiza cuando lo aminoácidos no son necesarios para la síntesis, cuando hay un exceso o bien
m
cuando por ayuno o por alteraciones en el metabolismo se convierten en el único material

ca
combustible accesible.
La transaminación es el sistema de cesión de los grupos amino a moléculas aceptoras. Las
reacciones tienen lugar en el citoplasma de las células y están catalizadas por un grupo de enzimas
denominadas transaminasas. Las moléculas aceptoras son en términos generales cetoácidos que al
recibir el grupo amino se convierten en aminoácidos y el aminoácido original pasa a ser un
cetoácido. Se producen en cualquier tejido del organismo, en particular en hígado, riñón y encéfalo.
35 / 55
La ruta de síntesis de la urea, es cíclica y consta de cinco reacciones secuenciales; las dos primeras
reacciones tienen lugar en la mitocondria, mientras que las tres restantes en el citosol, en ambos
m
casos casi exclusivamente en las células hepáticas.
co
Las cuatro primeras reacciones están catalizadas por enzimas que se encuentra en el hígado, riñón y
n.
la mucosa intestinal, sin embargo, la arginasa, enzima que cataliza la quinta reacción, es
io
ac
exclusivamente hepática.
m
or
af
ec
sn
.e
u al
rt
s vi
pu
m
ca
Para la degradación del esqueleto carbonado de los aminoácidos existen 20 rutas, que se
corresponden con los 20 aminoácidos proteicos, sin embargo, el aporte energético de estas cadenas
carbonadas es muy pequeño, por tanto la actividad de cada una de estas rutas solo depende de las
necesidades o de los excendentes de cada aminoácido.
36 / 55
Estas 20 rutas catabólicas convergen en metabolitos, del ciclo del ácido cítrico o bien del
metabolismo intermedio, como piruvato, acetil-CoA t acetoacetil-CoA. A los aminoácidos que se
degradan a piruvato o a algún metabolito del ciclo de Krebs se les denomina glucogénicos, mientras
que lo hacen a acetil-CoA y a acetoacetil-CoA son los cetogénicos.
La síntesis de aminoácidos, por su parte, se desarrolla a un ritmo variable, dependiente de las
necesidades que existan en la célula.
m
co
n.
Aparte de la determinación de proteínas totales es importante clínicamente la determinación
io
cualitativa y cuantitativa de los diferentes tipos proteicos de plasma, es decir, la cuantificación de
ac
las fracciones proteicas.
m
or
Se usan los siguientes métodos:
af
ec
sn
.e
u al
rt
s vi
pu
m
Electroforesis
ca
La electroforesis es una técnica físico-química relativamente sencilla que va a permitir separar y
posteriormente cuantificar las fracciones más importantes de proteínas presentes en el plasma.
Obteniendo así lo que se conoce como patrón electroforético o proteinograma.
Mediante una electroforesis normal es posible separar aquellas fracciones de proteínas plasmáticas
cuyo peso molecular oscila entre 66.000-700.000. Cuando el soporte usado para llevar a cabo el
desarrollo electroforético es acetato de celulosa las principales fracciones proteicas son: la fracción
37 / 55
albúmina y las fracciones a1, a2, bglobulinas y cglobulinas.
Cada fracción está formada por un conjunto de proteínas con un movimiento electroforético
semejante aunque muy diferente en cuanto a estructuras y funciones.
El fibrinógeno puede aparecer cuando la muestra usada es plasma. En cambio no aparecerá en el
suero, porque se consume en el proceso de coagulación.
Inmuno-electroforesis
m
co
La inmuno-electroforesis tiene mayores niveles de sensibilidad y especificidad, consiste en combinar
n.
la separación electroforética con la provocación de reacciones inmunológicas entre las proteínas y
io
anticuerpos específicos frente a ellas. Las diferentes fracciones proteicas se detectan mediante la
ac
aparición de arcos de precipitación.
m
or
Tiene gran utilidad ya que permite detectar gran número de fracciones proteicas y, además,
af
permiten detectar inmunoglobulinas anormales.
ec
Inmuno-difusión radial
sn
.e
La inmuno-difusión radial es una técnica únicamente de tipo inmunológico. Consiste en colocar el

al
suero a analizar en un orificio (pocillo) practicado en una palca de agar impregnado de anticuerpos
u
dirigidos específicamente contra la proteína que se desea valorar.

rt
vi
La reacción proteína-anticuerpo forma un anillo de precipitación cuyo diámetro es proporcional a la

s
pu
cantidad de proteína presente en la muestra que se pretende valorar.

m
La técnica se puede cuantificar mediante el uso de patrones.

ca
3.2. Patrones de alteración proteica
Por la gran diversidad de funciones de las proteínas plasmáticas son muchas las alteraciones que
pueden aparecer. Se clasifican en:
Disproteinemias
38 / 55
Las disproteineminas son alteraciones en las fracciones obtenidas tras una electroforesis. Existen
diferentes tipos:
Hipo-albuminemia: es la disminución de la concentración de la albúmina. Puede ser debido a:
Una síntesis insuficiente, por ejemplo mal nutrición, insuficiencia hepática.
Una eliminación y degradación excesivas. Por ejemplo: síndrome nefrótico,
alteraciones intestinales, quemaduras extensas,...
m
Hipogammaglobulinemia: es una disminución de las cglobulinas pro déficit en el sistema
co
inmunitario.
n.
Hiper-globulinemia:
io
ac
Un aumento de las aglobulinas. Por ejemplo: inflamaciones aguda, tumores,...
m
Un aumento de las a y b globulinas. Por ejemplo: síndrome nefrótico
or
Aumento de las cglobulinas. Por ejemplo: inflamaciones y enfermedades del
af
colágeno.
ec
sn
Paraproteinemias
.e
al
Las paraproteinemias consisten en la presencia en el plasma de alguna inmunoglobulina anormal y/o

u
alguno de sus fragmentos.

rt
vi
Se consideran inmunoglobulinas anormales. Son productos de una actividad espontánea (sin

s
estímulo antigénico previo) y excesiva de un clon proliferante d linfocitos B. Se observaría en:

pu
m
Mieloma múltiple.
ca
Leucemias y linfomas.
Lesiones renales.
Síndrome de hiper-viscosidad de la sangre.
Crioglobulinemias
Las crioglobulinemias son la circulación en el plasma de inmunoglobulinas que precipitan al
descender la temperatura. Son un grupo de inmunoglobulinas que precipitan al disminuir la
39 / 55
temperatura pueden dar lugar a trastornos circulatorios en las regiones distales de las extremidades
cuando se exponen al frío o también inflamaciones de los vasos (vasculitis).
Alteraciones de alguna banda
Las alteraciones de alguna banda son defectos aislados de alguna fracción. Reflejan defectos de los
protoplasmáticos. Son debidas a trastornos de la síntesis proteico, tanto de tipo hereditario como
adquirido.
m
Alteraciones de la proteinemia total
co
n.
Las alteraciones de la proteinemia total son alteraciones en la cantidad total de las proteínas totales.
io
Pueden ser:
ac
m
Hiper-proteinemia auténtica: no a consecuencia de la hemo concentración) es siempre
or
debida a un aumento de las inmunoglobulinas.
af
Hipo-proteinemia: es debida a la disminución de las 2 fracciones electroforéticas más

ec
importantes y son la albúmina y las cglobulinas.

sn
.e
u al
rt
s vi
pu
m
ca
40 / 55
4. Metabolismo intermediario
El metabolismo es la suma de todas las transformaciones químicas que se producen en una célula u
organismo. Tiene lugar en una serie de reacciones catalizadas enzimáticamente, que constituyen las
rutas metabólicas.
La mayor parte de las células y los organismos tienen en común una serie de vías metabólicas
centrales que sirven para la síntesis, la degradación y conversión de metabolitos importantes así
m
como para la conversión de energía, todo lo cual se denomina metabolismo intermedio.
co
Descripción de las vías para el catabolismo de los carbohidratos, proteínas y grasas de dieta. Todas
n.
io
las vías producen acetil-CoA, que al oxidarse en el ciclo del ácido cítrico genera en última instancia
ac
ATP en el proceso de la fosforilación oxidativa.
m
or
af
ec
sn
.e
u al
rt
s vi
pu
m
ca
La naturaleza de la dieta determina el patrón básico del metabolismo. Es necesario procesar los
productos de la digestión de carbohidratos, lípidos y proteínas de la dieta. Se trata sobre todo de
glucosa, ácidos grasos y glicerol y aminoácidos, respectivamente. Todos los productos de la
digestión se metabolizan a un producto común, acetil-CoA, que después se oxida en el ciclo de ácido
cítrico.
41 / 55
Rutas metabólicas
Los centenares de reacciones químicas que integran el metabolismo no tienen lugar de manera
independiente unas de otras, sino que están articuladas en largas secuencias de reacciones
consecutivas ligadas entre sí por intermediarios comunes, de manera que el producto de cada
reacción resulta ser el sustrato o reactivo de la siguiente. Estas secuencias de reacciones reciben el
nombre de rutas metabólicas.
m
La existencia de un intermediario común entre dos reacciones consecutivas hace posible la
co
transferencia de energía química entre ellas. Por ejemplo en dos reacciones consecutivas tales
n.
como:
io
ac
m
or
Parte de la energía química que reside en los enlaces de la sustancia A puede transferirse hasta la
af
sustancia C a través del intermediario común B. Así, sobre la base de este principio del
ec
intermediario común, las rutas metabólicas constituyen eficaces medios para transferir la energía
sn
química desde aquellas reacciones exergónicas que la liberan hasta aquellas, endergónicas, que la
.e
requieren.
u al
Las rutas metabólicas a su vez están organizadas en un complejo entramado en el que unas están
rt
conectadas con otras a través de encrucijadas metabólicas, en las cuales hay un metabolito común a
s vi
dos o más rutas.

pu
m
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En general las determinaciones más importantes a realizar para el estudio del metabolismo
intermediario son:
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Determinación de urea
n.
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Es la principal forma de excreción del grupo amino de los aminoácidos. La misma se filtra
ac
libremente por el glomérulo y es parcialmente secretada y reabsorbida a nivel de los túbulos. Su
m
excreción urinaria depende de las proteínas de la dieta, por tal motivo el aclaramiento renal de la
or
misma no es una expresión fidedigna del funcionamiento renal. Por ello, el clearance de urea no se
af
usa para evaluar el funcionamiento renal. Cabe acotar que la concentración plasmática de urea se
ec
elevará recién cuando el deterioro renal afecte a más del 50% del parénquima.
sn
La excreción de urea se incrementa fisiológicamente por ejercicio y dietas ricas en proteínas y

.e
patológicamente en estados febriles y catabólicos.

u al
Durante el crecimiento, embarazo y bajo consumo de proteínas en la dieta disminuye la

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concentración de urea urinaria. Estados patológicos hepáticos y renales tienen la misma

s
consecuencia.
pu
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Determinación de creatinina
ca
El resultado de la transformación espontánea de la fosfocreatina muscular.
Este compuesto filtra libremente en glomérulo y prácticamente no es secretada o reabsorbida a nivel
de los túbulos. A diferencia de la urea, la excreción de creatinina no depende de la proteína dietaria,
encontrándose sujeta únicamente a la masa muscular.
Estas circunstancias hacen que el aclaramiento renal de creatinina (clearance) sea un recurso
clínico para el diagnóstico y control evolutivo de la insuficiencia renal. Sumado a esta característica
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se asocia la buena relación entre la disminución del clearance de creatinina y la elevación de su
concentración en plasma.
Pacientes obesos, asténicos, hipertiroideos, insuficientes renales o con distrofias musculares tienen
una baja excreción urinaria de creatinina. Por el contrario, este parámetro aumenta en el
hipotiroidismo, diabetes y en individuos musculosos.
Determinación del ácido úrico
m
El ácido úrico es el producto final del catabolismo de las bases púricas, excretado por orina.
co
n.
Debido a que el pKa del N9 es 5.5 y el del N1 es 10.3, a pH plasmático fisiológico se encuentra en
io
forma de urato monosódico. En orina, el estado iónico dependerá del pH: si el pH urinario es menor
ac
que 5.75, se encontrará predominantemente como ácido úrico y si es mayor en forma de urato. El
m
ácido es soluble hasta concentraciones de 6-7 mg%, precipitando en concentraciones mayores. En
or
esa situación se puede precipitar en el parénquima renal o en las vías urinarias, llevando a cambios
af
histológicos que conducen a nefropatías o a urolitiasis, respectivamente.

ec
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Fisiológicamente, la uricosuria aumenta con la ingesta de proteínas y disminuye con dietas ricas en
glúcidos y grasas o pobres en proteínas. En patologías hepáticas y leucemia aumentan los valores de
.e
al
concentración urinaria de úrico. Durante el ataque agudo de gota, la uricosuria está disminuida, al
u
igual que en casos de insuficiencia renal.

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4.2. Patrones de alteración de estos metabolitos

pu
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Los principales errores del metabolismo intermediario son:

ca
Aminoacidopatías: son enfermedades del metabolismo de los aminoácidos.
Acidemias orgánicas: son errores del metabolismo de los ácidos orgánicos.
Errores congénitos de metabolismo de los carbohidratos.
Errores congénitos de metabolismo de los neurotransmisores y pterinas. Los
neurotransmisores son sustancias químicas que liberan, amplifican y modulan señales entre las
neuronas para que se comuniquen entre ellas. Las pterinas son moléculas orgánicas que actúan
como cofactores en reacciones enzimáticas.
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Defectos cerebrales de la creatina, entendiendo por creatina al ácido orgánico nitrogenado
que se encuentra en el músculo y cerebro y sirve para almacenar energía en forma de creatina-
fosfato.
Errores congénitos de metabolismo de las purinas y pirimidinas. Las purinas son bases
nitrogenadas, dos de las cuales (adenina y guanina) forman parte de los ácidos nucleicos. Y las
pirimidinas son compuestos orgánicos cuyos derivados son muy importantes para la vida, ya
que forman parte de los ácidos nucleicos: la timina, la citosina y el uracilo.
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5. Vitaminas. Tipos y aplicaciones
Las vitaminas son compuestos orgánicos de estructura muy heterogénea, biológicamente muy
activos e imprescindibles para el mantenimiento de las funciones metabólicas normales y del
crecimiento, que el organismo humano es incapaz de producir o lo hace en cantidades insuficientes,
por lo que deben ser aportadas desde el exterior, generalmente a través de la dieta. Son esenciales
para la salud y la vida.
m
A diferencia de otros compuestos esenciales para el organismo, no participan en la formación de
co
estructuras, ni son desintegradas para la obtención de energía. Son esenciales en pequeñas
n.
cantidades para la formación, en los distintos tejidos, de otras sustancias necesarias para las
io
diferentes reacciones metabólicas. Es suficiente con que su aporte sea mínimo, pero su déficit
ac
determina un fracaso en los procesos básicos y primordiales del metabolismo celular ocasionando
m
muchas veces enfermedades importantes.
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A diferencia de los macronutrientes (proteínas, lípidos y carbohidratos) las vitaminas no aportan

ec
energía al organismo, pero su presencia es indispensable dentro del organismo para el metabolismo
sn
energético.
.e
A. Aplicaciones
u al
Todas las vitaminas tienen funciones muy específicas sobre el organismo y deben estar contenidas
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en la alimentación diaria para evitar deficiencias. No hay alimento mágico que contenga todas las
s
vitaminas, solo la combinación adecuada de los grupos de alimentos hacen cubrir los requerimientos
pu
de todos los nutrimentos esenciales para la vida.

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Son sustancias que el organismo necesita para asimilar otros nutrientes, ayudar a la formación del
material genético y de las proteínas, los glóbulos rojos y las hormonas, así como regular el sistema
nervioso.
Algunas vitaminas contenidas en los alimentos se destruyen al guardar los mismos y por efecto de la
luz natural: son sensibles al calor, la humedad y la luz, por lo tanto debemos consumir los alimentos
tan frescos como podamos, no recalentarlos ni cocinarlos en exceso y una vez preparados
consumirlos lo antes posible. En el caso de frutas y verduras frescas, debemos pelarlas, cortarlas y
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lavarlas justo antes de consumirlas. Trascurridos unos minutos, algunas de ellas pueden llegar a
perder hasta el 50% de sus vitaminas.
m
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n.
B. Tipos y clasificación
io
La clasificación de las vitaminas se basa es sus características de solubilidad. Se pueden distinguir
ac
dos grandes grupos:
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1. Vitaminas hidrosolubles
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Se disuelven en agua y están presentes en las partes acuosas de los alimentos. A este grupo
sn
pertenecen la vitamina C y las del complejo B (B1, B2, niacina, ácido fólico, B6, B12, ácido
pantoténico y biotina).
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Se absorben mediante la difusión simple o transporte activo. Son transportadas en la sangre unidas
u
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a proteínas (folatos, B12, biotina), circulan libres (Vitamina C) o en el interior de los eritrocitos (B1,
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B2, B6, niacina, pantoténico. Se excretan por la orina, bien intactas (B2, ácido pantoténico) o como
s
metabolito hidrosoluble (vitamina C, B1, niacina, B6, biotina, folatos y B12).

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Los tipos de este tipo de vitaminas son:

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2. Vitaminas liposolubles
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Se disuelven en aceites y en grasas no en agua; y están presentes en las partes liposolubles de los
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alimentos.
Se absorben y transportan con los lípidos de la dieta en forma de micelas y pueden almacenarse
durante meses e incluso años en la grasa del cuerpo o en el hígado. Son de más difícil eliminación,
aunque en determinados períodos deben consumirse en cantidades suficientes. Se excretan a través
de las heces y gran cantidad, se reabsorbe junto con los ácidos biliares realizando el ciclo
enterohepático.
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Las podemos obtener de los aceites de primera presión en frío (de pescado y vegetales), del hígado,
mantequilla, frutas y verduras verdes y amarillas, yemas de huevo, leche, y algunos frutos secos.
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Glosario
Endógenas: 1. Que se forma o nace en el interior 2. Que se origina por causas internas.
Hemoglobina: Pigmento respiratorio que se halla en la sangre de los vertebrados y algunos
invertebrados.
m
Glucosa: Glúcido monosacárido incoloro, cristalino y soluble. Su p. f. es 146 oC. Se halla en el
co
zumo de la uva y en la sangre. Es la principal fuente de energía de todos los seres vivos.
n.
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Hormonas: Sustancia elaborada, generalmente por las glándulas endocrinas y vertida al
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torrente circulatorio, que actúa inhibiendo o activando la funcionalidad de otros órganos,
or
tejidos o células.
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Densidad: 1. Acumulación de gran cantidad de elementos o individuos en un espacio

sn
determinado 2. Relación entre la masa de un cuerpo y su volumen.

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Colesterol: Colesterina.
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Sintetizar: 1. Hacer una síntesis o resumen en que se recogen las principales ideas de un
pu
asunto o materia 2. Formar un elemento o sustancia compuesta mediante la combinación de

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elementos o sustancias simples.

ca
Cofactores: Elemento que junto con otros interviene en la producción de un efecto.
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Recuerda
Las sustancias que el organismo recibe del exterior o aquellas que necesita sintetizar para un
adecuado funcionamiento orgánico y que van a ser transformadas por las múltiples reacciones
metabólicas se conocen como principios inmediatos.
Conocer el metabolismo de los hidratos de carbono (sobre todo la glucosa) permite valorar las
alteraciones en la concentración plasmática de la glucosa, que pueden ser primaria o
m
secundaria.
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Las alteraciones de los hidratos de carbono pueden ser producidos por dos factores:
n.
disminución de la glucemia en sangre, es decir, hipoglucemia y la alteración de la tolerancia a
io
los hidratos de carbono que conduce a un aumento del nivel de glucosa en sangre denominado
ac
hiperglucemia, dentro de las cuales la más importante es la diabetes.
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El factor común estructural de este grupo de moléculas, lípidos, es la presencia de cadenas
or
relativamente largas de átomos de carbono, con una composición en la que predominan el C y
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el H.
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Las lipoproteínas son macromoléculas que poseen una estructura interna compuesta por
sn
triglicéridos y ésteres de alcohol. En su superficie tiene colesterol y fosfolípidos además de

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proteínas (apoproteínas). La proporción en que se encuentra cada uno de sus componentes

al
determina las propiedades físico-químicas de las lipoproteínas, lo cual es de gran utilidad para
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proceder a su reparación y a su posterior estudio.

vi
Los métodos de laboratorio que se utilizan en el estudio de las lipoproteínas pueden clasificarse
s
en dos grupos: generales y específicos. Encontrándose el análisis del colesterol y la

pu
determinación de triglicéridos, fosfolípidos y lipoproteínas.

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Las alteraciones más importantes del metabolismo lipídico son la que hacen referencia a un
ca
incremento de la concentración plasmática de las diferentes fracciones lipídicas.
Las proteínas naturales son polímeros lineales de á-L-aminoácidos. Desempeñan una gran
cantidad de funciones: estructurales, transportadoras, además de aquellas funciones catalíticas
que ejecutan las enzimas y que resultan esenciales en la homeostasis del metabolismo.
Los procesos de determinación del metabolismo de proteínas son el electroforesis, inmuno-
electroforesis y inmuno difusión radial.
Por la gran diversidad de funciones de las proteínas plasmáticas son muchas las alteraciones
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que pueden aparecer.
La mayor parte de las células y los organismos tienen en común una serie de vías metabólicas
centrales que sirven para la síntesis, la degradación y conversión de metabolitos importantes
así como para la conversión de energía, todo lo cual se denomina metabolismo intermedio.
En general, las determinaciones más importantes a realizar para el estudio del metabolismo
intermedio son la urea, creatinina y el ácido úrico.
Las vitaminas son compuestos orgánicos de estructura muy heterogénea, biológicamente muy
m
activos e imprescindibles para el mantenimiento de las funciones metabólicas normales y del
co
crecimiento, que el organismo humano es incapaz de producir o lo hace en cantidades
n.
insuficientes, por lo que deben ser aportadas desde el exterior, generalmente a través de la
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dieta. Son esenciales para la salud y la vida.
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Autoevaluación
1. ¿Cuál de las siguientes funciones NO es de los hidratos de carbono?
Fuente de energía.
Servir de base para la síntesis de otras estructuras.
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n.
Solventes orgánicos.
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2. Completa el espacio en blanco del siguiente enunciado: “Se produce
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____________ si en 2 valores uno de los cuales es obtenido a las 2 horas la glucemia
or
es mayor a 200 mg/dl”.
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Diabetes.
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Intolerancia a la glucosa.
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Alergia a la glucosa.
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3. ¿Qué tipo de diabetes se da en un adulto o madurez?

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Tipo 1
Tipo 2
Insulino-dependiente.
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4. El aumento de los niveles de colesterol puede deberse a (respuesta múltiple):
Un aumento de la síntesis.
Una desviación de la degradación de las lipoproteínas que se ocupan de su transporte.
Diabetes.
m
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n.
5. Completa el espacio en blanco del siguiente enunciado: “Las _____________ son
io
compuestos orgánicos de estructura muy heterogénea, biológicamente muy
activos e imprescindibles para el mantenimiento de las funciones metabólicas
ac
normales y del crecimiento, que el organismo humano es incapaz de producir”.
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Vitaminas.
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Lípidos.
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Proteínas.
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Introducción

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[AFO007847] MF0371_3 Análisis Bioquímicos en Muestras Biológicas Humanas

[MOD007722] MF0371_3 Análisis Bioquímicos en Muestras Biológicas Humanas

Los compuestos químicos de la materia viva reciben el nombre de biomoléculas, anteriormente

y de otros componentes metabólicos.

Realizar las determinaciones bioquímicas relacionadas con el metabolismo de los hidratos de

carbono, y los métodos empleados para su determinación.

Realizar las determinaciones bioquímicas relacionadas con el metabolismo de los lípidos y

metabólicas se conocen como principios inmediatos. Estos principios inmediatos son

principalmente tres: hidratos de carbono, lípidos y proteínas.

Formas D y L: en funciones de la posición (derecha o izquierda) del grupo funcional

–OH en su cadena carbonada.

Formas a y b: en función de la posición del grupo –OH del carbono número 1 de su

Disacáridos: formados por 2 moléculas de azúcar.

Oligosacáridos: formados por 3-10 moléculas de azúcar.

Polisacáridos: formados por más de 10 moléculas de azúcar.

Se digieren en la dieta en forma de polisacáridos, disacáridos o monosacáridos; y una vez digeridos

no es glucosa se transforma en ella en el nivel hepático.

mediante el proceso denominado gluconeogénesis (producción de nueva glucosa).

Las tres funciones principales de los hidratos de carbono son:

Fuentes de energía: es la función primordial.

La energía para consumo inmediato es obtenida de la degradación de moléculas de glucosa que

puede tener lugar por tres vías:

Sorbitol: proporciona moléculas de fructosa.

La función de reserva energética, la función de depósito es realizada por el glucógeno sintetizado a

partir de la glucosa por el proceso de gluconeogénesis. El glucógeno se encuentra tanto

la edad, la estatura, el peso, el sexo y la actividad física.

Los glúcidos alimentarios están constituidos por monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.

galactosa, los cuales, llegados al hígado se transforman en un polisacárido de reserva, el glucógeno.

La liberación de glucosa se produce solamente en el hígado y, en mucho menos escala, en el riñón y

llamado encrucijada metabólica.

alteraciones en la concentración plasmática de glucosa derivadas de diferentes enfermedades.

los hidratos de carbono, los más importantes son:

Determinación de la glucemia basal

aumentado por la presencia de un elevado número de leucocitos y contaminación bacteriana. Por

ello, debemos tener en cuenta:

media hora después de la extracción.

inhiba la glucólisis, por ejemplo fluoruro sódico.

Se recomienda usar plasma o suero para evitar la glucólisis.

Los métodos de determinación de la glucosa basal son:

Métodos basados en el poder reductor de la glucosa

Método de la orto-toluidina: es un método de colorimetría llevado a cabo mediante el

empleo de un espectrofotómetro. La cantidad de color es directamente proporcional a la

toluidina es corrosiva y cancerígena, además de que la técnica, frecuentemente, presenta

Método de la glucosa oxidasa (GOD): es la enzima que cataliza la reacción de la glucosa

son: mediante polarografía y mediante determinación del peróxido de hidrógeno (H2O2)

Para la polarografía realizamos la medida del consumo de oxígeno con un electrodo

de oxígeno. La cantidad de glucosa de la muestra es directamente proporcional a la

cantidad de oxígeno consumido.

Determinación de peróxido de hidrógeno: mediante la acción de una peroxidasa, un cromógeno

método de Trinder en el cual la intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad

Hexoquinasa: este método proporciona el máximo grado de especificidad. La hexoquinasa

cataliza el paso de glucosa a glucosa-6-fosfato. En una segunda reacción se produce la

reducción de NADP a NADPH (sustancia que absorbe el ultravioleta próximo visible). La

reacción se mide en el espectrofotómetro a 340 nanómetros y el incremento de absorbancia es

de glucosa en 2 muestras se corresponden con una persona diabética.

La glucosuria se define como la aparición de glucosa en orina. En glucosuria negativa, debemos

Determinación de cuerpos cetónicos

La determinación se realiza en sangre (cetonemia) y en orina (cetonuria). Aunque derivan de los

ácidos grasos, informan indirectamente sobre el metabolismo de los hidratos de carbono.

Prueba de sobrecarga oral de la glucosa o PTOG

Esta prueba permite diferenciar la intolerancia a la glucosa y la diabetes:

Intolerancia a la glucosa: cuando obtenemos en la curva un valor de 200 mg/dl y el obtenido

a las 2 horas está entre 140-200 mg/dl.