Manual

Triladyl®
Verdünner für Bullensamen
Culture Medium for Bull Semen
Diluyente de Semen Bovino
Dileur de semence bovine

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13500/0250
Übersetzt aus dem Deutschen

Minitüb GmbH
Hauptstrasse 41
84184 Tiefenbach
Germany
Tel.: +49 (0) 8709 9229 0
Fax: +49 (0) 8709 9229 39
0312

E-Mail: minitube@minitube.de
Internet: www.minitube.com
31350/0025
Triladyl® es un concentrato esteril para la preparación de un diluyente con yema de huevo
para la congelación de semen bovino en un solo paso. Triladyl® se presta también para la
congelación de semen de otros rumiantes por ejemplo ovino, caprino, ciervo etc. Su
contenido en antibióticos corresponde al estándar de la UE: EC norma 88/407.

1. Composición
TRIS
Ácido cítrico
Azúcar
Tampones
Glicerina
Antibióticos
Agua de extrema pureza

100 ml del diluyente preparado contienen (unidades activas)

Tilosina 5,7 mg
Gentamicina 28,6 mg
Espectinomicina 34,3 mg
Lincomicina 17,2 mg

2. Forma de presentación
Cada frasco de Triladyl® contiene 250 g de concentrado para la preparación de 1250 g de
diluyente listo para su utilización.

3. Aplicación
3.1. Preparación del diluyente listo para su uso

Para la preparación del diluyente se requiere de

Triladyl® concentrado
agua pura estéril
yema de huevo fresca
probeta graduada estéril o matraz de Erlenmeyer
papel filtro estéril
filtro-embudos estériles

El diluyente listo se compone de una parte de concentrado de Triladyl®, tres partes de agua
pura esteríl y de una parte de yema de huevo, lo que equivale al 20% de su volumen final.
La solución madre se prepara vertiendo primero un frasco completo de concentrado de
Triladyl® (250 g) en un matraz graduado, y agregando en varios pasos 750 ml de agua pura
estéril. Esta solución madre es estable y puede mantenerse a +5°C por alrededor de una
semana.
Para completar el diluyente, deben agregarse a la solución madre 250 ml de yema de huevo
fresca. Es posible pesar 250 g de yema de huevo, por cuánto el volumen y peso son
equivalentes. Se puede esterilizar la cáscara del huevo pasándolo por una llama. En
seguida se parten los huevos cuidadosamente, tratando de separar yema y clara, vertiendo
la yema, sin romperla, de una a otra mitad de la cáscara. Para liberar completamente la
yema de la clara y las membranas, se colocan una por una sobre papel de filtro, haciéndolas
rodar sobre el papel, que retiene los restos. Finalmente, la yema de huevo se posiciona en

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el borde del papel filtro, se envuelve en el papel y se pesiona para abrir la membrana de tal
forma, que la yema escurra libremente, dejando adherida la membrana al papel.
Enseguida, se le agrega a la yema lentamente la solución madre, mezclándola con un
agitador magnético ó una varilla de vidrio estéril. La observación estricta de este orden es de
importancia para permitir el total desarrollo de las cualidades de conservación del Triladyl®
(agregar la solución madre a la yema, no al revés).
Para terminar, el diluyente preparado debe filtrarse a través de un filtro-embudo estéril o una
gasa estéril, con lo que queda listo para su utilización.

3.2. Calidad del agua

La calidad del agua utilizada es de gran importancia. Es posible preparar el agua mediante
destilación, deionización, osmosis inversa, o mediante una combinación de los métodos
mencionados, y eventualmente esterilizarla adicionalmente. El agua purificada debe tener
las siguientes características:
Conductibilidad bajo 1 µS/cm
Contenido de gérmenes bajo 1 CFU (unidades que forman colonias) por 10 ml
Especial atención requiere el posible ingreso de gérmenes en agua previamente preparada,
p. Ej. por mangueras no estériles, conductos o envases de almacenamiento.
Si no se dispone de un equipo de preparación de agua, debe recurrirse a la adquisición de
agua bidestilada estéril de un fabricante confiable. El agua desalinizada para baterías o de
uso doméstico no es adecuada.

3.3. Recomendaciones técnicas

Después de colectar el semen, el eyaculado es mantenido en un baño maría a +28°C a

+30°C. Una vez evaluado mediante examen macroscópico y microscópico, se prediluye el
semen 1:1 en el mismo vaso colector, dejando escurrir lentamente el diluyente a lo largo de
la pared del vaso. Una vez calculada la dilución final, el semen prediluido es vertido
cuidadosamente, a lo largo de su pared, a un envase temperado de mayor tamaño,
agregando a continuación el volumen de diluyente aún requerido. Es conveniente agitar el
envase durante la dilución, para lograr una adecuada mezcla del semen con el diluyente.
Recomendamos el uso de una balanza electrónica o del sistema SmartDispenser en vez de
utilizar envases graduados para medir volumen, por ganar precisión en el proceso.

Importante: El semen, el diluyente y los envases de vidrio deben tener siempre igual
temperatura, para evitar shock térmico del semen.

Después de la predilución, el semen puede ser retirado del baño maría, continuando el
procesamiento a temperatura ambiente de laboratorio. El envasado en pajuelas se hace a
temperatura ambiente.

Congelación de las pajuelas: La congelación de las pajuelas se efectúa sobre rampas

posicionadas horizontalmente a 4 cm sobre el nivel del Nitrógeno líquido (N2L), o en un
equipo congelador profesional con una temperatura de inicio de -120ºC. El tiempo de
congelación debe extenderse para mini-pajuelas (0,25 ml) a un mínimo de 7 minutos, para
pajuelas medianas (0,5 ml) a un mínimo de 10 minutos. A continuación, las pajuelas son
inmediatamente sumergidas en N2L.

3.4. Aplicaciones especiales

La preparación del diluyente de congelación de semen caprino, requiere de una cantidad

menor de yema de huevo, en comparación con el diluyente descrito para semen bovino y
ovino. Se usa sólo un 5% de yema de huevo, lo que equivale a 60 ml de yema.

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Las cantidades de concentrado de Triladyl® y de agua bidestilada permanecen iguales: 250
g y 750 ml respectivamente. El grado de dilución recomendado para semen caprino es de 5
a 7:1 (diluyente : semen).

4. Almacenamiento, estabilidad e indicaciones

4.1. Almacenamiento, estabilidad

El concentrado debe ser almacenado en refrigerador a +5ºC. La etiqueta tiene la fecha

mínima de utilización recomendada impreso. Restos de diluyente preparado y calentado
pueden guardarse hasta 2 días en refrigerador.
La solución madre no calentada puede mantenerse a +5°C por alrededor de una semana.

4.2. Indicaciones importantes

No utilizar para el consumo de personas o animales.

No utilizar para el tratamiento de personas o animales.
Almacenar fuera del alcance de niños.

4.3. Asesoría y entrenamiento

Triladyl® se presta para diversos protocolos de congelación. Los expertos de Minitüb están
a su disposición para resolver consultas relacionadas con producción de semen e
inseminación. Minitüb ofrece entrenamientos individuales. Usted puede informarse de los
entrenamientos actualmente ofrecidos a través de nuestra página web.

5. Estándares de producción y control de calidad

5.1. Calidad de materias primas

Todas las materias primas utilizadas son elaboradas de acuerdo a normas GMP, y DIN ISO
9001, y certificadas según estándares Ph Eur, BP o USP. Han sido testadas cumpliendo
normas de calidad internacionales para el control de fármacos y corresponden a dichas
normas. Los componentes individuales de cada partida son probados bajo supervisión de
veterinarios especialistas en cuánto a sus cualidades físico-químicas y su adecuación para
la conservación de semen. Los certificados de análisis y de control aseguran un seguimiento
completo.

5.2. Estándar de elaboración

La mezcla y envasado del concentrado se realizan bajo condiciones GMP en ambiente

aséptico, documentando los protocolos de pesaje. Las mezclas terminadas son nuevamente
controladas bajo supervisión de veterinarios especialistas en cuanto a sus cualidades físico-
químicas y por organizaciones independientes en cuanto a su aptitud para la conservación
de semen.

5.3. Certificados

A solicitud puede accederse a un certificado general, como también a un certificado

individual de la partida.

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