DIARIO FILOSOFICO

N°01

N°02

N°03

CARACTERISTICAS LIMITACIONES
Desarrollado en 1985 Las muestras que contengan sustancias
Ensayo colorimétrico donde la absorbancia será que interaccionan con el cobre, como
proporcional a la concentración de proteína por ejemplo el amoniaco, al igual que el
presente en la muestra EDTA, los azucares reductores o los
REACCION1:Formación de complejos proteína- lípidos, pueden interferir con este
iones de cobre ensayo.
REACCION 2:Formación de un quelato Cu-BCA
que da lugar a una intensa coloración purpura
que obstante a 562
Es un método recomendado en el caso de
muestras que contengan >5% de detergentes y/o
agentes desnaturalizantes como urea o cloruro de
guanidinio.

CARACTERISTICAS
Este método, mediante la medición de la
absorción característica que presentan el
triptófano y la tirosina a 280Nm, estima la
cantidad de proteína presente en la
muestra.
LIMITACIONES
Es incompatible con los métodos de
extracción de proteínas que emplean
detergentes y/o agentes desnaturalizantes
No es un método específico para proteínas,
ya que otros compuestos que podría haber
en la muestra también absorben a
280nm(como alcoholes o ácidos nucleicos,
entre otros )

CARACTERISTICAS LIMITACIONES
Método descrito en 1976
Se caracteriza por ser un método rápido,
sencillo y compatible con los gentes
reductores utilizados para estabilizar las
proteínas en solución
La tinción azul Coomasie cargada
negativamente, se une a proteínas con carga
positiva
Se une principalmente a residuos de
arginina, triptófano, tirosina, histidina y
fenilalanina
La tinción en solución es de color rojo y
absorbe a 465nm, mientras que al unirse a
los aminoácidos básicos de una proteína se
vuelve azul y absorbe a 595nm.