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Aislamiento de Bacterias Del Suelo y Su Potencial Utilización en Sistemas de Tratamiento de Aguas Residuales
Aislamiento de Bacterias Del Suelo y Su Potencial Utilización en Sistemas de Tratamiento de Aguas Residuales
DOI: http://dx.doi.org/10.15359/rca.42-2.4
URL: www.revistas.una.ac.cr/ambientales
EMAIL: revista.ambientales@una.cr
Isolating soil bacteria and their potential use in systems for wastewater treatment
aLa autora, microbióloga, es investigadora y docente en la Universidad Nacional, Costa Rica. b y c Las autoras son
estudiantes de Biología en la Universidad Nacional, Costa Rica.
Director y Editor:
Dr. Eduardo Mora-Castellanos
Consejo Editorial:
Enrique Lahmann, UICN , Suiza
Enrique Leff, UNAM, México
Marielos Alfaro, Universidad Nacional, Costa Rica
Olman Segura, Universidad Nacional, Costa Rica
Rodrigo Zeledón, Universidad de Costa Rica
Gerardo Budowski, Universidad para la Paz, Costa Rica
Asistente:
Rebeca Bolaños-Cerdas
Mau, S., Vega, K. y Sánchez, M. “Aislamiento de bacterias del suelo y su
potencial utilización en sistemas de tratamiento de aguas residuales”
ISSN 1409-2158. Ambientales 42, Artículo 4 |Pp. 45-52|
[Fecha de recepción: noviembre, 2011. Fecha de aprobación: abril, 2012].
Resumen
El estudio de microor-
Abstract
The study of microor-
Introducción
ganismos provenientes de ganisms from natural en-
ambientes naturales puede vironments may be useful a contaminación del agua con el verti-
ser útil para la formulación for developing a microbial do directo de materia fecal y otros con-
de un compuesto microbiano consortium used for the taminantes pone en peligro su calidad
aplicable para el bioaumento bioaugmentation to a water higiénica, convirtiéndose así en un
a un sistema de tratamiento treatment system. We stu-
de aguas. Se estudió microor- died microorganisms from
potencial vehículo transmisor de enfermeda-
ganismos provenientes de soil samples taken in Tro- des y la causa de un gran impacto a nivel
muestras de suelo tomadas pical Biological Station and ambiental. Por esta razón, el tratamiento óp-
en Estación Biológica Tropi- Aquaculture “Rio Macho”, timo de los desechos es imprescindible para
cal y Acuicultura “Río Ma- Cartago, Costa Rica and evitar riesgos sanitarios, debido a que las
cho”, Cartago, Costa Rica, from these strains were se- FDSDVVXSHUÀFLDOHVGHDJXDVHXWLOL]DQFRPR
y se seleccionaron cepas de lected most representative
los morfotipos más repre- morphotypes. We perfor-
fuentes de captación para agua potable, por
sentativos. Se realizó cuatro med four treatments in the lo tanto es crucial mantener su calidad. Ante
tratamientos inoculando en wastewater by inoculating esta problemática, los sistemas diseñados
el agua residual una sus- a suspension of each selec- para la depuración de aguas residuales son
pensión de cada morfotipo ted morphotype and the una excelente alternativa para minimizar
seleccionado y posterior al BOD (Biochemical Oxygen este impacto (Reynolds, 2002). El propósito
WUDWDPLHQWR VH FXDQWLÀFy OD 'HPDQG ZDV TXDQWLÀHG DI-
DBO (demanda bioquímica ter these treatments. The
principal del tratamiento de aguas residua-
de oxígeno). Los morfotipos morphotypes of the isolates OHVHVHOLPLQDUHOHÁXHQWHWUDWDGRVLQSURYR-
de bacterias aisladas fue- were Gram negative bacilli car un impacto negativo sobre el ecosistema
ron bacilos Gram negativos (52,9%), Gram positive spo- de los cuerpos de agua receptores. Por esta
(52,9%), bacilos Gram positi- UXODWHG EDFLOOL ÀOD- razón, el tratamiento de aguas residuales se
vos esporulados (29,4%), bac- mentous bacteria (11,8%) enfoca en reducir la concentración de: sóli-
WHULDV ÀODPHQWRVDV and Gram positive non-spo-
y bacilos Gram positivos no rulated bacilli (5,9%). After
dos suspendidos, materia orgánica, nutrien-
esporulados (5,9%). Tras los the treatments there was tes (principalmente nitrógeno y fósforo) y de
tratamientos se obtuvo una a reduction from 94,7% to los microorganismos patógenos (Kuai et al.,
disminución entre un 94,7% 95,85% on the initial BOD 1999; Habit et al., 2005).
En este sentido, es importante resal-
tar que aunque existen muchos métodos
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protozoos, rotíferos y, en algunos casos, nematodos biomasa microbiana es el suelo. El suelo alberga
y microcrustáceos. Todos estos constituyen una ca- probablemente la comunidad biológica más com-
dena alimentaria muy dinámica que realiza la su- pleja. Los organismos del suelo son muy diversos
cesión ecológica durante el tratamiento (Graham y y contribuyen a una amplia gama de funciones
Smith, 2004). Los microorganismos utilizados para que son esenciales para el funcionamiento soste-
tales procesos pueden encontrarse dentro de la mis- nible de los ecosistemas naturales (Barrios, 2007).
ma materia orgánica contenida en el agua residual Entre estos, las bacterias poseen importantes po-
(Szymanski y Patterson, 2003). Sin embargo, en tencialidades biodegradadoras (Kuai et al., 1999;
algunas ocasiones la biomasa microbiana indígena Iranzo et al., 2001).
está presente en cantidades muy pequeñas y pue- Por lo anterior, el objetivo del presente es-
de no tener la capacidad de degradar los contami- tudio –preliminar- es determinar el potencial de
nantes. Como solución se puede inocular microor- cepas bacterianas provenientes del suelo para ser
ganismos seleccionados de otras áreas (concepto utilizadas como inóculos que puedan mejorar el
conocido como bioaumentación), o periódicamente proceso en un sistema de tratamiento de aguas
suplementar con nutrientes (o bioestimulación), si residuales.
los microorganismos indígenas son capaces de me-
tabolizar tales contaminantes, pero requieren de Métodos
suplementos especiales (Kuai et al., 1999).
En los casos en los que se tiene problemas en Área de estudio
la optimización de las condiciones de tratamien- El muestreo se realizó en la Estación Bioló-
to debido a que la biomasa microbiana indígena gica Tropical y Acuicultura “Río Macho”, Cartago,
no es capaz de realizar el proceso degradativo, se Costa Rica, que se encuentra ubicada en la cuen-
ha demostrado que la bioaumentación mejora el ca del Guarco, dentro de la zona protectora Río
rendimiento del sistema, mediante la adición de Macho, Cartago, Costa Rica, entre los 9º 45’ – 9º
microorganismos externos con alta capacidad de 47’ N y 83º 51’ – 83º 53’ O.
degradación de determinados compuestos conta-
minantes (Loperena et al., 2008; Ma et al., 2008). Muestreo
La mayoría de los inóculos producidos comercial- Se realizó durante la estación seca (abril
mente se componen de poblaciones microbianas 2008) en una parcela de 10 x 50 m. Se tomó mues-
mixtas y son generalmente costosos y diseñados WUDV GH OD SDUWH VXSHUÀFLDO GHO VXHOR D XQRV
para condiciones que no corresponden exactamen- centímetros de profundidad, en la capa de creci-
te con las que se encuentran a nivel local (Loperena miento aerobio, en diferentes puntos para formar
et al., 2008; Ma et al., 2008). Por lo que se requiere una muestra compuesta.
una selección de microorganismos óptimos para la Una porción de la muestra fue utilizada
degradación de desechos que no sean patógenos y para la determinación de las características fí-
se desarrollen bajo las condiciones establecidas en sico-químicas del suelo (Laboratorio de Suelos y
los sistemas de tratamiento. Bajo este concepto, el Foliares, Instituto de Investigación y Servicios
estudio de microorganismos provenientes de am- Forestales, Inisefor) donde se determinó la aci-
bientes naturales puede ser útil para la formula- dez, pH, concentración de calcio, magnesio, hie-
ción de un compuesto microbiano aplicable a un rro, potasio, fósforo, cobre, zinc, manganeso, por-
sistema de tratamiento. centaje de materia orgánica, carbono y nitrógeno.
Uno de los ambientes naturales que se ca- Por otro lado, el aislamiento de bacterias aerobias
racteriza por poseer una amplia diversidad de
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Ca Mg K P Cu Zn Mn Fe
%M %C
Muestra pH H2O Acidez cmol cmol cmol (+) %N
μg / ml μg / ml μg / ml μg / ml μg / ml Org Org
(+) / L (+) / L /L
Suelo 4,54 4,5 2,19 0,64 0,22 9 2 2 15 349 13,2 7,7 0,87
Nivel medio 5,6-6,5 0,5-1,5 4,0-20 1,0-5 0,2-0,6 1,0-20 3,0-20 2,0-10 6,0-50 11-100
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Se aisló una biomasa microbiana muy di- Figura 2. Flóculos de biomasa producidos en el
versa en cepas bacterianas; los diferentes morfo- agua tratada con uno de los aislamientos (4P).
tipos coloniales y su respectiva tinción de Gram
muestran que existen grupos de bacilos Gram ne-
gativos (BG-), bacilos Gram positivos esporulados
(BG+ esp), bacilos Gram positivos no esporulados
%* QR HVS \ EDFWHULDV ÀODPHQWRVDV HQWUH ODV
FHSDVEDFWHULDQDVSXULÀFDGDVÀJXUD
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miento de aguas residuales. En el tratamiento bio- minución presentado por el control sin inocular.
lógico de aguas residuales por medio de sistemas Además, con los demás tratamientos se nota dis-
de lodos activados la remoción de la DBO es posible minuciones de 94,77 % (tratamiento 3), 94,95%
por la acción de una variedad de microorganismos. (tratamiento 2) y 95,14% (tratamiento 4).
En este, bacterias constituyen la población mayori- En Costa Rica, la DBO permitida para elimi-
taria y más importante, debido a que sus distintas nar aguas residuales a un cuerpo de agua natural
actividades bioquímicas les permiten metabolizar VXSHUÀFLDOVHHVWDEOHFHHQHO'HFUHWRHMHFXWLYR1R
la mayor parte de los compuestos orgánicos que 26042-S-Minae Reglamento de reuso y vertido de
se encuentran en las aguas residuales. Ya que al aguas residuales, y es de 50 mg/L. Con respecto a
WHQHUXQPHWDEROLVPRKHWHURWUyÀFRXWLOL]DQODPD- este valor, se nota que el agua tratada con los aisla-
teria orgánica como fuente de carbono y con la for- mientos de origen ambiental tiene un DBO menor
PDFLyQGHÁyFXORVORVORGRVVHGLPHQWDUiQPHMRU\ a la norma (cuadro 2). Es importante resaltar que
SURGXFLUiQXQHÁXHQWHÀQDOPiVWUDQVSDUHQWH\GH este parámetro no representa todos los evaluados
mejor calidad (Vilaseca, 2001; Nodal, 2001). para determinar si el agua es segura y se requiere
En el presente trabajo se nota que el proce- un mayor número de tratamientos para establecer
VRGHÁRFXODFLyQHVPD\RUHQODVDJXDVLQRFXODGDV ODVLJQLÀFDQFLDGHHVWHSRUFHQWDMHGHGLVPLQXFLyQ
FRQODVEDFWHULDVDLVODGDVGHOVXHORÀJXUDORTXH Por lo que es necesario realizar la determinación
sugiere que se forma una mayor interacción célula- de más parámetros físico-químicos del agua y una
célula entre las bacterias y la materia orgánica. caracterización de las bacterias para complemen-
Esto puede ser importante para el aumento de la tar los resultados. Sin embargo, este estudio sirve
densidad de la población bacteriana durante el tra- para evidenciar que las cepas aisladas tienen un
tamiento y, con ello, para el proceso de degrada- buen potencial para ser utilizadas en este tipo de
ción. El objetivo de las técnicas de bioaumentación sistemas de depuración.
utilizando cepas microbianas aisladas del medio La importancia de realizar este tipo de es-
ambiente es el de mejorar algunos de los procesos tudios va acorde con lo estipulado por el Decreto
TXH LQWHUYLHQHQ HQ HO WUDWDPLHQWR GH HÁXHQWHV R Ejecutivo Nº 32133-S, donde se declara de interés
en la biorremediación. Los microorganismos selec- \QHFHVLGDGVRFLDOHOGLVHxRÀQDQFLDPLHQWRHMHFX-
cionados se inoculan para aumentar el potencial ción, operación y mantenimiento de las obras re-
biodegradador, por lo que una de las aplicaciones queridas para la recolección, el tratamiento y dis-
de esta técnica se aboca a lograr un aumento en la SRVLFLyQÀQDOGHODVDJXDVUHVLGXDOHV3RUORTXH
disminución de la DBO en plantas de tratamiento estudios dirigidos al mejoramiento de los sistemas
de aguas residuales (Bitton, 2005). En este estudio, de tratamiento utilizando tecnologías limpias es
DGHPiVGHREVHUYDUHVWDPD\RUÁRFXODFLyQVHQRWD de vital importancia para disminuir el impacto del
TXH VH IRUPDQ ÁyFXORV PiV JUDQGHV \ FRPSDFWRV vertido de aguas residuales en los ecosistemas.
por lo que tienen una mayor sedimentabilidad ob-
servándose una turbidez menor en el agua tratada Conclusiones
FRQUHVSHFWRDODGHODJXDVLQLQRFXODUÀJXUD
La mayor disminución de la DBO del agua Los sistemas de tratamiento de aguas re-
residual se logró con el tratamiento 1, con la siduales utilizan microorganismos que se encar-
cepa P2, la cual muestra una disminución de gan de la degradación de la materia orgánica y
un 95,85% con respecto a la DBO de entrada del otros contaminantes. En algunos casos se utiliza
agua residual, en contraste con un 91% de dis- la población microbiana autóctona de las mismas
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aguas, sin embargo se ha visto que en algunas Kuai, L, Kerstens, W, PhuCuong, N, y Verstraete, W. (1999).
Treatment of domestic wastewater by enhanced pri-
RFDVLRQHVQRVRQWDQHÀFLHQWHV(VSRUHVWRTXHHO
mary decantation and subsequent naturally ventilat-
aislamiento de bacterias ambientales con una alta HGWULFNOLQJÀOWUDWLRQWater, Air, and Soil Pollution,
capacidad de biodegradación de contaminantes es 113, 43–62.
LPSRUWDQWHSDUDDXPHQWDUODHÀFLHQFLDGHORVVLV- Loperena, L, Ferrari, M. D., Díaz, A. L., Ingold, G, Pérez,
L. V, Carvallo, F, Travers, D, Menes, R. J, y Lareo,
temas de tratamiento de aguas residuales. En el C. (2008). Isolation and selection of native microor-
caso del presente estudio, se determinó el poten- ganisms for the aerobic treatment of simulated dairy
cial de varias cepas aisladas del suelo para lograr wastewaters. Bioresource Technology, 100, 1762–
una disminución importante de la DBO de aguas 1766.
Ma, F, Guo, J, Zhao, L, Chang, C, y Cui, D. (2008). Appli-
residuales. cation of bioaugmentation to improve the activated
sludge system into the contact oxidation system
Referencias bibliográ cas treating petrochemical wastewater. Bioresource Te-
chnology, 100, 597–602.
Alef, K. (1995). Nutrients, sterilization, aerobic and anaero- Nodal, E. (2001). Procesos biológicos aplicados al tratamien-
bic cultura techniques. En Alef, K, y Nannipieri, P. to de agua residual. Ingeniería Hidráulica y Ambien-
(Eds.), Methods in applied soil microbiology and bio- tal, 22(4), 52-56.
chemistry (pp. 124-125). Londres: Acad. Press. Reyes, I, y Valery, A. (2007). Efecto de la fertilidad del sue-
Asamblea Legislativa de Costa Rica. (1997, junio 19). Decre- lo sobre la microbiota y la promoción del crecimiento
to ejecutivo No. 26042-S-MINAE. La Gaceta, N° 117. del maíz (Zea mays L.) con Azotobacter spp. Biagro,
Asamblea Legislativa de Costa Rica. (2004, diciembre 7). De- 19(3), 117-126.
creto ejecutivo Nº 32133-S. La Gaceta, N° 239. Reynolds, K. (2002). Tratamiento de Aguas Residuales en
Barrios, E. (2007). Soil biota, ecosystem services and land /DWLQRDPpULFD ,GHQWLÀFDFLyQ GHO 3UREOHPD $JXD
productivity. Ecological Economic, 64, 269-285. Latinoamérica. Disponible en http://www.agualati-
Bitton, G. (2005). Wastewater microbiology. USA: John Wi- noamerica.com/docs/pdf/DeLaLaveSepOct02.pdf.
ley & Sons, Inc. Szymanski, N, y Patterson, R. (2003). Effective Microorgan-
Graham, D, y Smith, V. H. (2004). Designed Ecosystem Ser- isms (EM) and Wastewater Systems. En Patterson,
vices: Application of Ecological Principles in Waste- R.A., y Jones, M.J. (Eds). Future Directions for On-
water Treatment Engineering. Frontiers in Ecology site Systems: Best Management Practice. Proceedings
and the Environment, 2(4), 199-206. of On-site ’03 Conference (pp. 348-355). Disponible
Habit, E, Parra, O, y Valdovinos, C. (2005). Ictiofauna de un en http://www.lanfaxlabs.com.au/papers/P53-03-Szy-
VLVWHPDÁXYLDOUHFHSWRUGHDJXDVVHUYLGDV5HVSXHV- manski-Patterson.PDF.
tas a una nueva planta de tratamiento (Rio Quilque, 9iVTXH] $ 6DQWLDJR * \ (VWUDGD $ ,QÁXHQFLD
Chile central). Gayana, 69(1), 94-103. del pH en el crecimiento de quince cepas de hongos
Hakami, T, Suzuki, M, Fudou, R, Jojima, Y, Kajiura, T, Ta- ectomicorrizógenos. Anales del Instituto de Biología,
buchi, A, Sen, K, y Shibai, H. (2005). Isolation of nov- Serie Botánica, 73(1), 1-15.
el bacteria and actinomycetes using soil-extract agar Vilaseca, M. M. (2001). Observación microscópica de fangos
medium. J. Biosci. Bioeng., 99(5), 485-492. activados en los tratamientos de depuración biológi-
Iranzo, M, Sainz-Pardo, I, Boluda, R, Sánchez, J, y Mormene, ca. Boletín INTEXTER (U.P.C.), 119, 67-72.
S. (2001). The use of microorganisms in environmen-
tal remediation. Annals of Microbiology, 51, 135-143.
Kavanagh, L, y Keller, J. (2007). Engineered ecosystem for
sustainable on-site wastewater treatment. Water Re-
search, 41, 1823 – 1831.
52 6LOYLD0DX.DUHQ9HJD\0yQLFD6iQFKH]
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